【新闻速递】中南大学与湖南江湾生殖签署战略合作框架协议

延边大学医学学报　２０２２年３月　第４５卷　第１期与疾病报告２０２０概要［Ｊ］．中国循环杂志，２０２１，３６（６）：５２１－５４５．［２］　ＭＥＤＩＮＡ－ＬＥＹＴＥ　ＤＪ，ＺＥＰＥＤＡ－ＧＡＲＣíＡ　Ｏ，ＤＯＭíＮＧ－ＵＥＺＰéＲＥＺ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．．Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｉｎｆｌａｍ－ｍａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｂｉｏｍａｒｋ－ｅｒｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌ　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　ＪＭｏｌ　Ｓｃｉ，２０２１，２２（８）：３８５０．［３］　ＨＵＡＮＧ　Ｃ，ＨＵＡＮＧ　ＷＨ，ＷＡＮＧ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．．Ｕｌｉｎａｓｔａｔｉｎｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｓｗｉｔｃｈｉｎｇ　ｏｆ　ＰＤＧＦ－ＢＢ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ＶＳＭＣｓ　ｖｉａ　Ａｋｔ／ｅＮＯＳ／ＮＯ／ｃＧＭＰ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｄｒｕｇ　Ｄｅｓ　Ｄｅｖｅｌ　Ｔｈｅｒ，２０２０，１４：５５０５－５５１４．［４］　赵高峰．延边地区朝鲜族ＳＭＡＲＣＡ４基因ＳＮＰｒｓ１１２２６０８与冠心病相关性研究［Ｄ］．延吉：延边大学，２０２０．［５］　ＩＭ　ＰＫ，ＭＩＬＬＷＯＯＤ　ＩＹ，ＫＡＲＴＳＯＮＡＫＩ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．．Ａｌ－ｃｏｈｏｌ　ｄｒｉｎｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｒｉｓｋｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ａｎｄ　ｓｉｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｃａｎｃ－ｅｒｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ：Ａ　１０－ｙｅａｒ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　０．５ｍｉｌｌｉｏｎａｄｕｌｔｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２０２１，１４９（３）：５２２－５３４．［６］　ＲＯＳＣＨ　ＰＪ．Ｃｏｕｌｄ　ｔｈｅ　ｂｅｎｅｆｉｔｓ　ｏｆ　ｄｒｉｎｋｉｎｇ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｏｕｔ－ｗｅｉｇｈ　ａｌｌ　ｉｔｓ　ｒｉｓｋｓ［Ｊ］．Ｓｔｒｅｓｓ　Ｈｅａｌｔｈ，２０１３．［７］　ＷＡＬＬＥＲＡＴＨ　Ｔ，ＰＯＬＥＯ　Ｄ，ＬＩ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．．Ｒｅｄ　ｗｉｎｅ　ｉｎ－ｃｒｅａｓｅｓ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ：ａ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｔｈａｔ　ｍａｙ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ　ｔｏ　ｉｔｓ　ｂｅｎｅ－ｆｉｃｉａｌ　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｆｆｅｃｔｓ［Ｊ］．ＪＡＣＣ，２００３，４１（３）：４７１－４７８．［８］　ＺＨＡＯ　Ｆ，ＪＩ　Ｚ，ＣＨＩ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｙｅｌｌｏｗｗｉｎｅ　ｏｎ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ　ａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｉｎ　ｒａｔ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｉｃａ，２０１６，７１（１）：２７－３４．［９］　金春花，刘文博，关宏锏，等．一氧化氮合酶各种亚型的信号通路对心力衰竭的作用机制与治疗的研究进展［Ｊ］．中国循环杂志，２０１７，３２（８）：８３０－８３２．［１０］ＷＡＧＮＥＲ　ＭＣ，ＹＥＬＩＧＡＲ　ＳＭ，ＬＯＵ　ＡＢ，ｅｔ　ａｌ．．ＰＰＡＲγｌｉｇａｎｄｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　ＮＡＤＰＨ　ｏｘｉｄａｓｅ，ｅＮＯＳ，ａｎｄ　ｂａｒｒｉｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｉｎｇｅｓｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｌｃｏｈｏｌ　Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ｒｅｓ，２０１２，３６（２）：１９７－２０６．［１１］ＴＩＲＡＰＥＬＬＩ　ＣＲ，ＬＥＯＮＥ　ＡＦ，ＹＯＧＩ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．．Ｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ａｎｄ　ａｌｔｅｒｓ　ｔｈｅ　ｒｅ－ｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃ　ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ　ｉｎ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｐｈａｒｍ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８，６０（３）：３３１－３４１．［１２］ＣＨＥＮ　ＳＳ，ＷＡＮＧ　ＺＹ，ＺＨＯＵ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．．Ｉｃａｒｉｉｎ　ｒｅ－ｄｕｃｅｓ　ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅｌｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｖｉａ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐ３８／ＣＲＥＢ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　Ａｋｔ／ｅＮＯＳ／ＮＯ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｅｘｐ　ＴｈｅｒＭｅｄ，２０１９，１８（６）：４７７４－４７８０．■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■［基金项目］　国家自然科学基金项目（编号：８１５６０１７９）．［收稿日期］　２０２２－０１－０３［作者简介］　黄银珠（１９９５—），女，硕士，研究方向为口腔颌面外科．［通信作者］　金成日，Ｅｍａｉｌ：ｊｃｒ１１０５＠１６３．ｃｏｍ．初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ通过Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路影响口腔鳞状细胞癌增殖研究黄银珠，李京旭，金成日（延边大学附属医院口腔科，吉林延吉１３３０００）［摘要］　［目的］探讨初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ通过Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路对口腔鳞状细胞癌增殖能力产生的影响．［方法］选择人舌鳞癌Ｔｃａ８１１３细胞株作为研究对象，分为ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组和对照组．采用蛋白印迹实验和实时荧光定量实验检测各组ＫＩＦ３Ａ、Ｓｈｈ、Ｇｌｉ１蛋白及ｍＲＮＡ的相对表达水平；利用ＭＴＴ细胞增殖实验观察Ｔｃａ８１１３细胞增殖能力的变化．［结果］蛋白印迹实验结果显示，与对照组比较，ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组ＫＩＦ３Ａ、Ｓｈｈ、Ｇｌｉ１蛋白表达水平均明显下调（Ｐ＜０．０５）；实时荧光定量实验结果显示，与对照组比较，ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组ＫＩＦ３Ａ、Ｓｈｈ、Ｇｌｉ１ｍＲＮＡ表达水平均明显下调（Ｐ＜０．０１）；ＭＴＴ细胞增殖实验结果显示，细胞培养２４ｈ时两组细胞增殖间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），细胞培养４８、７２ｈ时ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组增殖率较对照组明显降低（Ｐ＜０．０１）．［结论］沉默初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ可能通过调控Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路抑制口腔鳞癌的增殖能力．［关键词］　口腔鳞状细胞癌；初级纤毛；ＫＩＦ３Ａ；Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路ＤＯＩ：１０．１６０６８／ｊ．１０００－１８２４．２０２２．０１．００２［中图分类号］　Ｒ　７３９．８ ［文献标志码］　Ａ ［文章编号］　１０００－１８２４（２０２２）０１－０００７－０４·７·■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｍａｒ．２０２２　Ｖｏｌ．４５　Ｎｏ．１Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉｕｍ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　ＫＩＦ３Ａｏｎ　ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｂｙ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙＨＵＡＮＧ　Ｙｉｎｚｈｕ，ＬＩ　Ｊｉｎｇｘｕ，ＪＩＮ　Ｃｈｅｎｇｒｉ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｊｉ　１３３０００，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉｕｍ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　ＫＩＦ３Ａｏｎ　ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｈｕｍａｎ　ｔｏｎｇｕｅ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ　Ｔｃａ８１１３ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ｗａｓ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　ａｎｄ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｑＰＣＲ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａ，Ｓｈｈａｎｄ　Ｇｌｉ１ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　ｍＲＮＡ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ．ＭＴＴ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｃａ８１１３ｃｅｌｌｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａ，Ｓｈｈ　ａｎｄ　Ｇｌｉ１ｉｎ　ｔｈｅ　ＫＩＦ３Ａ－ＳｉＲＮＡ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｑＰＣＲ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｍＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａ，Ｓｈｈ　ａｎｄ　Ｇｌｉ１ｉｎ　ｔｈｅ　ＫＩＦ３Ａ－ＳｉＲＮＡ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０１）．ＭＴＴ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｆｔｅｒ　２４ｈｃｅｌｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＫＩＦ３Ａ－ＳｉＲＮＡ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｆｔｅｒ　ｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅ　ｆｏｒ　４８ａｎｄ　７２ｈ（Ｐ＜０．０１）．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＳｉｌｅｎｃｉｎｇ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉｕｍ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　ＫＩＦ３Ａｍａｙｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｂｙ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ；ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉａ；ＫＩＦ３Ａ；Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ 口腔癌人数约占全世界罹患恶性肿瘤人数的３％，其中鳞状细胞癌比例超过９０％．２００５年，ＷＨＯ将口腔鳞状细胞癌（ＯＳＣＣ）定义为一种具有不同分化程度和侵袭性的肿瘤，早期可出现广泛的淋巴结转移，好发于４０～７０岁的烟酒爱好者［１］．口腔癌患者５年生存率约为５０％［２］，患者术后预后差和５年生存率低的主要原因为患者未及时就诊、淋巴结转移及复发［３］．控制ＯＳＣＣ的侵袭转移能力对预后至关重要，认为可偿试从分子水平出发找出更好的治疗方法［４］．初生纤毛属于一种细胞表面的细胞器，在脊椎动物发育和人类遗传疾病中发挥着重要作用．纤毛对发育信号的响应是必需的，而越来越多的证据表明初级纤毛是专属于Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号传导的［５］，而Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号传导对肿瘤的发生发展起着重要作用．研究［６］结果显示，多种肿瘤组织中均存在Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号的异常激活，如肺小细胞癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、恶性胶质瘤、髓母细胞瘤及多发性骨髓瘤等．ＫＩＦ３Ａ属于初级纤毛内运输系统，具有维持和发挥初级纤毛正常功能的作用［７］．本研究探讨了初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ通过Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路对ＯＳＣＣ增殖能力产生的影响．１　材料与方法１．１　细胞　人舌鳞癌细胞株Ｔｃａ８１１３购自美国菌种保藏中心（ＡＴＣＣ），置于延边大学附属医院中心实验室封存．１．２细胞培养与转染　取Ｔｃａ８１１３细胞置于温度３７℃、二氧化碳体积分数５％、饱和湿度９５％的恒温孵育箱中，用含１０％（质量分数）ＦＢＳ、青链霉素的ＤＭＥＭ高糖型培养基传代培养．在转染前１ｄ，将Ｔｃａ８１１３细胞分为对照组和ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组后接种至６孔板中，待生长至８０％时进行细胞转染．ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组转染ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ，对照组未进行转染．转染操作按照ＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅＴＭ２０００Ｒｅ－ａｇｅｎ转染说明书进行．ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ序列（５′－３′）：ＵＡＡ　ＧＧＡ　ＡＵＧ　ＣＵＧ　ＡＡＧ　ＡＡＧ　ＡＣＧ　ＡＧＵ　Ｃ．１．３　蛋白印迹实验　转染２４ｈ后分别收集两组细胞，并加入ＲＩＰＡ与ＰＭＳＦ混合（１００:１）冰上裂解细胞，提取细胞总蛋白，采用ＢＣＡ试剂盒测定总蛋白水平．取各组标本行８％（质量分数）十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）电泳，转膜，室温下用５％（质量分数）脱脂奶粉封闭２ｈ．ＴＢＳＴ洗涤３·８·■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■延边大学医学学报　２０２２年３月　第４５卷　第１期次，每次１０ｍｉｎ，加入兔抗人Ｋｉｆ３ａ一抗（１:１　０００）、兔抗人Ｓｈｈ一抗（１:２　０００）、兔抗人Ｇｌｉ１（１:１　０００）及兔抗人ＧＡＰＤＨ（１:１　０００）后置于湿盒中，于４℃冰箱中孵育过夜；次日ＴＢＳＴ洗涤３次，每次１０ｍｉｎ，分别加入山羊抗兔ＩｇＧ二抗（１:１０　０００）后置于湿盒中室温孵育２ｈ；ＴＢＳＴ洗涤３次，每次１０ｍｉｎ，加入增强型化学发光剂ＥＣＬ显影．以ＧＡＰＤＨ为内参，采用Ｉｍａｇｉｎｅ　Ｊ软件分析蛋白条带灰度值．１．４　实时荧光定量实验　转染２４ｈ后分别收集两组细胞，采用ＴＲＮｚｏｌ法提取细胞中的总ＲＮＡ，反转录为ｃＤＮＡ，按照ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒说明书以ｃＤＮＡ为模板进行扩增．测定循环阈值（Ｃｔ），采用２－△△Ｃｔ法进行统计．实验重复３次．引物序列，ＫＩＦ３Ａ－正向：５′－ＡＧＡ　ＧＣＧ　ＴＣＡ　ＡＣＧ　ＡＧＧ　ＴＧＴ　ＴＴ－３′；ＫＩＦ３Ａ－反向：５′－ＴＡＴ　ＴＧＡ　ＴＣＧ　ＧＣＡ　ＴＣＴ　ＴＧＧ　ＣＣＣ－３′；Ｓｈｈ－正向：５′－ＣＴＣ　ＧＣＴ　ＧＣＴ　ＧＧＴ　ＡＴＧ　ＣＴＣ　Ｇ－３′；Ｓｈｈ－反向：５′－ＡＴＣ　ＧＣＴ　ＣＧＧ　ＡＧＴ　ＴＴＣ　ＴＧＧＡＧＡ－３′；Ｇｌｉ１－正向：５′－ＡＧＣ　ＧＴＧ　ＡＧＣ　ＣＴＧ　ＡＡＴＣＴＧ　ＴＧ－３′；Ｇｌｉ１－反向：５′－ＣＡＧ　ＣＡＴ　ＧＴＡ　ＣＴＧＧＧＣ　ＴＴＴ　ＧＡＡ－３′；ＧＡＰＤＨ－正向：５′－ＧＧＡ　ＧＣＧＡＧＡ　ＴＣＣ　ＣＴＣ　ＣＡＡ　ＡＡＴ－３′；ＧＡＰＤＨ－反向：５′－ＧＧＣ　ＴＧＴ　ＴＧＴＣＡＴＡＣＴ　ＴＣＴＣＡＴＧＧ－３′．１．５　ＭＴＴ细胞增殖实验　转染２４ｈ后分别收集两组细胞，以５　０００个／孔接种于９６孔板中，每组设置５个复孔．培养２４、４８、７２ｈ后弃去旧培养液，每孔加入１００μＬ　ＭＴＴ（５　ｇ／Ｌ），于３７℃、５％（体积分数）二氧化碳、９５％饱和湿度的恒温孵育箱中培养４　ｈ，弃去上清液终止反应，每孔加入１００μＬ　ＤＭＳＯ，置于振荡器３　ｍｉｎ溶解结晶后在酶标仪波长４９０　ｎｍ处测定各孔的光密度（ＯＤ）值，计算相对细胞增殖率．相对细胞增殖率（％）＝（实验组ＯＤ值／对照组ＯＤ值）×１００％．１．６　统计学分析　采用Ｇｒａｐｈｐａｄ　Ｐｒｉｓｍ　７．０软件进行数据分析．计量数据以均数±标准偏差（ ｘ±ｓ）表示，进行两个样本均数的ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义．２　结果２．１　沉默ＫＩＦ３Ａ基因后对Ｔｃａ８１１３细胞Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路中Ｓｈｈ、Ｇｌｉ１蛋白表达水平的影响　与对照组比较，ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组２４ｈ时ＫＩＦ３Ａ、Ｓｈｈ及Ｇｌｉ１蛋白表达水平均明显降低，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），见Ｆｉｇｕｒｅ　１．ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ，＊Ｐ＜０．０５．Ｆｉｇｕｒｅ　１　Ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａ，Ｓｈｈａｎｄ　Ｇｌｉ１ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｃａ８１１３ｃｅｌｌｓ２．２　沉默ＫＩＦ３Ａ基因后对Ｔｃａ８１１３细胞中Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路Ｓｈｈ、Ｇｌｉ１ｍＲＮＡ表达水平的影响　与对照组比较，ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染２４ｈ组ＫＩＦ３Ａ、Ｓｈｈ及Ｇｌｉ１ｍＲＮＡ表达水平均显著降低，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０１），见Ｆｉｇｕｒｅ　２．ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ，＊＊Ｐ＜０．０１．Ｆｉｇｕｒｅ　２　Ｔｈｅ　ｍＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａ，Ｓｈｈａｎｄ　Ｇｌｉ１ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｃａ８１１３ｃｅｌｌｓ２．３　沉默ＫＩＦ３Ａ基因后对Ｔｃａ８１１３细胞增殖能力的影响　ＭＴＴ检测结果显示，细胞培养２４ｈ时ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组与对照组细胞增殖间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；细胞培养４８、７２ｈ时，ＫＩＦ３Ａ－ｓｉＲＮＡ转染组与对照组比较增殖显著受到抑制（Ｐ＜０．０１），见Ｆｉｇｕｒｅ　３．·９·■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｍａｒ．２０２２　Ｖｏｌ．４５　Ｎｏ．１ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ，＊＊Ｐ＜０．０１．Ｆｉｇｕｒｅ　３　Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　Ｔｃａ８１１３ｃｅｌｌｓ　ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ３　讨论初级纤毛为多数分化型细胞表面上的感觉附属物，具有化学感觉和机械感觉功能，在细胞周期控制中具有重要的作用．以往的研究认为初级纤毛在快速增殖的细胞上是找不到的，如癌症细胞，但ＫＯＷＡＬ等［８］通过一种初级纤毛标志物Ａｒｌ１３ｂ在ＨｅＬａ和ＭＧ６３细胞中发现了初级纤毛．未在ＯＳＣＣ中查看是否存在初级纤毛是本研究的不足之处．ＫＩＦ３Ａ属于初级纤毛内运输系统，在维持和发挥初级纤毛功能中起重要作用．ＨＯＡＮＧ－ＭＩＮＨ等［９］的研究结果显示，沉默ＫＩＦ３Ａ基因表达后可降低胶质母细胞瘤中初级纤毛的数量，最终促进肿瘤的发生．玄云泽等［１０］首次在ＯＳＣＣ中发现有初级纤毛，后来有学者亦在口腔白斑与ＯＳＣＣ组织中发现了初级纤毛，ＥＧＦＲ－Ａｕｒｏｒａ　Ａ异常信号被激活后，口腔黏膜癌变过程中原发性纤毛逐渐减少［１１］．本研究结果显示，利用ｓｉＲＮＡ技术沉默ＫＩＦ３Ａ基因后ｍＲＮＡ和蛋白表达水平明显降低，提示初级纤毛的检出率降低．Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路对胚胎发育及肿瘤的发生发展具有重要意义．研究［１２－１３］结果显示，Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路的异常激活与皮肤、乳腺、肺及消化道等多种恶性肿瘤的发生、增殖密切相关．程志芬等［１２］利用Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路特异性抑制剂环巴胺处理Ｔｃａ８１１３细胞株后，Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ的ｍＲＮＡ和蛋白表达明显减少，且细胞增殖受到抑制．ＫＵＲＯＤＡ等［１４］的研究结果显示，给予Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路抑制剂可抑制肿瘤前沿血管内皮细胞的增殖、迁移，进而抑制肿瘤的增殖和迁移．在小细胞肺癌中，沉默ＫＩＦ３Ａ后初级纤毛明显减少，且Ｓｈｈ信号通路介导的Ｇｌｉ１ｍＲＮＡ表达水平明显降低［１５］，此结果与本研究结果相符．研究［１６］结果显示，Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路转录因子Ｇｌｉ１的激活是恶性肿瘤的一个不良预后因素，利用环巴胺阻断Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路可抑制Ｇｌｉ１激活，并增强头颈部鳞癌对放疗的敏感性，提示Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路影响头颈部鳞癌的放疗预后．总之，本研究揭示了初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ在人舌鳞癌Ｔｃａ８１１３细胞Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路中的作用，初步解释了沉默ＫＩＦ３Ａ后可能通过抑制Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路影响ＯＳＣＣ细胞的增殖能力，为ＯＳＣＣ患者的靶向治疗提供了理论依据．［参　考　文　献］［１］　ＤＩ　ＰＡＲＤＯ　ＢＪ，ＢＲＯＮＳＯＮ　ＮＷ，ＤＩＧＧＳ　ＢＳ，ｅｔ　ａｌ．．Ｔｈｅｇｌｏｂａｌ　ｂｕｒｄｅｎ　ｏｆ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｃａｎｃｅｒ：ａ　ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ－ａｄｊｕｓｔｅｄｌｉｆｅ－ｙｅａｒ　ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｓｕｒｇ，２０１６，４０（２）：３９５－４０１．［２］　ＢＲＯＣＫＬＥＨＵＲＳＴ　ＰＲ，ＢＡＫＥＲ　ＳＲ，ＳＰＥＩＧＨＴ　ＰＭ．Ｏｒａｌｃａｎｃｅｒ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：ｗｈａｔ　ｈａｖｅ　ｗｅ　ｌｅａｒｎｔ　ａｎｄ　ｗｈａｔ　ｉｓ　ｔｈｅｒｅｓｔｉｌｌ　ｔｏ　ａｃｈｉｅｖｅ［Ｊ］．Ｆｕｔｕｒｅ　Ｏｎｃｏｌ，２０１０，６（２）：２９９－３０４．［３］　ＢＡＶＬＥ　ＲＭ，ＶＥＮＵＧＯＰＡＬ　Ｒ，ＫＯＮＤＡ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ．．Ｍｏ－ｌｅｃｕｌａｒ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＪＣＤＲ，２０１６，１０（９）：Ｚ１８－Ｚ２１．［４］　陈新，徐文华，周健，等．口腔鳞状细胞癌现状［Ｊ］．口腔医学，２０１７，３７（５）：４６２－４６５．［５］　ＧＯＥＴＺ　ＳＣ，ＡＮＤＥＲＳＯＮ　ＫＶ．Ｔｈｅ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉｕｍ：ａ　ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ　ｃｅｎｔｒｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｇｅｎｅ，２０１０，１１（５）：３３１－３４４．［６］　那玉岩，刘万林．纤毛相关疾病：细胞学机制及转化应用进展［Ｊ］．中国组织工程研究，２０１６，２０（２４）：３６４２－３６４８．［７］　ＮＩＥＷＩＡＤＯＭＳＫＩ　Ｐ，ＮＩＥＤＺＩółＫＡ　ＳＭ，ＭＡＲＫＩＥＷＩＣＺŁ，ｅｔ　ａｌ．．Ｇｌｉ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｅｌｌｓ，２０１９，８（２）：１４７．［８］　ＫＯＷＡＬ　ＴＪ，ＦＡＬＫ　ＭＭ．Ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉａ　ｆｏｕｎｄ　ｏｎ　ＨｅＬａａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ　Ｉｎｔ，２０１５，３９（１１）：１３４１－１３４７．［９］　ＨＯＡＮＧ－ＭＩＮＨ　ＬＢ，ＤＥＬＥＹＲＯＬＬＥ　ＬＰ，ＳＩＥＢＺＥＨ－ＮＲＵＢＬ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．．Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ＫＩＦ３Ａｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔ－ｄｅ－ｒｉｖｅｄ　ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ　ｃｅｌｌｓ：ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｃｉｌｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｈｅｄｇｅ－ｈｏｇ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ　ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１６，７（６）：７０２９－７０４３．［１０］玄云泽，李书进，金成日，等．初级纤毛相关基因ＫＩＦ３Ａ通过调控ＥＭＴ过程在口腔鳞状细胞癌中的作用机制研究［Ｊ］．重庆医学，２０２０，４９（１）：７－１２．［１１］ＹＩＮ　Ｆ，ＣＨＥＮ　Ｑ，ＳＨＩ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．．Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＥＧＦＲ－Ａｕ－ｒｏｒａ　Ａ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｌｏｓｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｉｌｉａ　ｉｎ　ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｏｒａｌ　Ｄｉｓ，２０２２，２８（３）：６２１－６３０．［１２］程志芬，崔演，玄延花．Ｐｔｃｈ和Ｓｍｏ在舌鳞状细胞癌Ｔｃａ８１１３细胞中的表达及其意义［Ｊ］．口腔医学研究，２０１５，３１（５）：４３３－４３６．［１３］ＫＯＮＳＴＡＮＴＩＮＯＵ　Ｄ，ＢＥＲＴＡＵＸ－ＳＫＥＩＲＩＫ　Ｎ，ＺＡＶＲＯＳＹ．Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｏｍａｃｈ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　ＯｐｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌ，２０１６，３１：７６－８２．［１４］ＫＵＲＯＤＡ　Ｈ，ＫＵＲＩＯ　Ｎ，ＳＨＩＭＯ　Ｔ，ｅｔ　ａｌ．．Ｏｒａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅ－ｓｉｓ［Ｊ］．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２０１７，３７（１２）：６７３１－６７３７．［１５］ＣＯＣＨＲＡＮＥ　ＣＲ，ＶＡＧＨＪＩＡＮＩ　Ｖ，ＳＺＣＺＥＰＮＹ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．．Ｔｒｐ５３ａｎｄ　Ｒｂ１ｒｅｇｕｌａｔｅ　ａｕｔｏｐｈａｇｙ　ａｎｄ　ｌｉｇａｎｄ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＨｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔ，２０２０，１３０（８）：４００６－４０１８．［１６］ＧＡＮ　ＧＮ，ＥＡＧＬＥＳ　Ｊ，ＫＥＹＳＡＲ　ＳＢ，ｅｔ　ａｌ．．Ｈｅｄｇｅｈｏｇｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｄｒｉｖｅｓ　ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｍａ－ｄｒｉｖｅｎｔｕｍｏｒ　ｒｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｅａｄ　ａｎｄ　ｎｅｃｋ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃａｎｃｅｒｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２０１４，７４（２３）：７０２４－７０３６．■·０１·■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■。

附件： 出席中国共产党中南大学第三次代表大会代表候选人预备人选名单

选举单位： 中南大学湘雅二医院 序号 姓名 性 别 民 族 籍贯 文化 程度 出生 年月 入党 时间 工作 时间 现任职务 技术职称 备注 1 周智广 男 汉 云南陆良 博士 1961.01 1993.12 1977.08 党委书记 主任医师

2 周胜华 男 汉 湖南衡阳 博士 1963.05 1994.07 1984.08 院长 主任医师

3 黎志宏 男 汉 湖南宁乡 博士 1973.09 1993.10 1996.07 副院长 主任医师

4 薛志敏 男 回 湖南桃源 博士 1958.03 1986.06 1974.03 党委副书记 主任医师

5 陈晋东 男 汉 湖南东安 博士 1962.09 1998.07 1984.08 副院长 主任医师

6 徐军美 男 汉 湖南安乡 博士 1963.01 1989.05 1981.12 副院长 主任医师

7 杨一峰 男 汉 湖南长沙 博士 1963.06 2004.06 1987.07 党委副书记/ 纪委书记 主任医师

8 李乐之 女 汉 湖南桃江 博士 1965.11 1988.01 1980.10 护理部主任 主任护师

9 肖涛 男 汉 湖南湘潭 博士 1965.11 2003.12 1989.06 院长助理 主任医师

10 倪江东 男 汉 湖南衡南 博士 1962.09 2004.07 1984.08 外科主任 主任医师

11 柴湘平 男 汉 湖南平江 博士 1969.04 1996.12 1993.07 院办主任 主任医师

12 夏良伟 男 汉 湖南衡阳 硕士 1976.06 1997.06 1998.07 党委办公室 主任 副研究员

13 黄江生 男 汉 湖南祁阳 博士 1964.01 1998.04 1986.07 党委副书记 主任医师

14 张劲强 男 汉 湖南浏阳 博士 1970.01 1993.06 1990.06 纪委副书记 副研究员

2014年度湖南省科技进步奖获奖项目名册科技进步奖二等奖获奖项目1、20144006 植物营养剂的研制与应用完成单位：长沙学院完成人员：张志元，罗永兰，郭清泉，唐建洲，邹朝晖，游勇，刘兴海，彭亮，徐峰2、20144008 废旧锂离子电池资源化制备高性能电池材料关键技术及产业化完成单位：湖南邦普循环科技有限公司，广东邦普循环科技有限公司完成人员：李长东，唐红辉，李和敏，周汉章，王皓，余海军，谭群英3、20144027 注射用哌拉西林钠舒巴坦钠完成单位：湘北威尔曼制药股份有限公司完成人员：孙明杰，陈维，王霆，马宏强，邓桂兴4、20144028 高效多功能粉末冶金制品制备关键装备研制及应用完成单位：湖南顶立科技有限公司完成人员：戴煜，谭兴龙，邓军旺，胡祥龙，羊建高5、20144056 城市轨道交通供电系统再生能量回馈装置开发完成单位：株洲南车时代电气股份有限公司完成人员：刘可安，张铁军，张志学，何多昌，陈雪，陈广赞，陈涛，尚敬，施蔚加6、20144063 80km/h速度等级B型地铁ZMC080型转向架完成单位：南车株洲电力机车有限公司完成人员：陶功安，丁长权，罗彦云，廖志伟，张建全，贺世忠，卜旦霞，吴才香，侯耐7、20144064 大功率交流传动电力机车技术创新平台建设完成单位：南车株洲电力机车有限公司8、20144072 大面积连续磁控溅射真空镀膜成套装备关键技术与产业化完成单位：湘潭宏大真空技术股份有限公司完成人员：郭爱云，朱选敏，孙桂红，祝海生，黄国兴，黄乐，凌云9、20144076 糖尿病血管并发症的基础与临床研究完成单位：南华大学附属第一医院，南华大学完成人员：刘江华，文格波，尹卫东，肖新华，祖旭宇，伍莹，张青海10、20144094 生态酿酒综合技术的研发及产业化完成单位：湖南湘窖酒业有限公司，邵阳学院完成人员：余有贵，杨志龙，汪小鱼，熊翔，吴向东，刘安然，雷安亮，马利群，岳小青11、20144101 电磁感应化工磁稳定成套设备完成单位：岳阳鸿升电磁科技有限公司完成人员：梁志军，黄烨华，皮敦仁，江雨生，梁欢，曾谷成，王辉，张志强12、20144107 纸质包装品卷筒凹版印刷高速高精度自动化生产关键技术及装置完成单位：常德金鹏印务有限公司完成人员：孔繁辉，徐军，钟泽辉，邓强，赵志敏，周迪，欧立国，熊成林，龙冬平13、20144125 高选择性负载型钯催化剂制备及清洁高效回收技术完成单位：郴州高鑫铂业有限公司，湖南师范大学完成人员：雷涤尘，杨拥军，尹笃林，毛丽秋，冯志杰，杨静，邓春玲，叶咏祥，雷海波14、20144141 湘村黑猪新品种选育及推广完成单位：湘村高科农业股份有限公司，湖南省畜牧兽医研究所（湖南省家畜育种工作站）完成人员：杨文莲，彭英林，李静如，刘建，朱吉，谭建坤，谢菊兰，杨仕柳，孙宗炎15、20144180 山区高陡边坡段桩柱式桥梁修建关键技术及其工程应用完成单位：湖南省交通科学研究院，湖南大学，湖南省高速公路建设开发总公司，湖北工业大学完成人员：杨明辉，宁夏元，赵明华，赵清华，王黛，赵衡，刘齐建，邓友生，尹平保16、20144181 极端洪旱事件对洞庭湖水安全影响机制研究完成单位：湖南省水利水电勘测设计研究总院，河海大学完成人员：黎昔春，廖小红，张振全，薛联青，宋平，王加虎，刘晓群，谢育健，李杰友17、20144193 强优势转基因品种湘杂棉7号、17号的选育与推广应用完成单位：湖南省棉花科学研究所完成人员：张雪林，张兴平，彭凡嘉，巩养仓，龚辉，龚京明，何叔军，李玉芳，肖红18、20144200 湖南油茶良种组合区划和标准化栽培完成单位：湖南省林业科学院，南京林业大学，湖南林之神生物科技有限公司，岳阳市林业科学研究所，湖南省湘潭市林业科学研究所（湘潭市金鸡岭林场）完成人员：陈永忠，彭邵锋，彭方仁，马力，胡孔飞，王瑞，皮兵，潘新军，廖德志19、20144202 金银花新品种“花瑶晚熟”选育及组培快繁技术完成单位：湖南省林业科学院，隆回县特色产业开发办公室，湖南未名创林生物能源有限公司完成人员：王晓明，蔡能，陈建军，曾慧杰，李永欣，马社军，杨硕知，乔中全，王惠20、20144204 非食用复合原料油清洁转化油脂基能源产品新技术与示范完成单位：湖南省林业科学院，湖南省生物柴油工程技术研究中心，中国科学院广州能源研究所，江苏大学完成人员：李昌珠，袁振宏，林琳，李培旺，刘汝宽，张爱华，吕鹏梅，肖志红，张良波21、20144219 XXX防暴自动榴弹发射器完成单位：湖南兵器轻武器研究所有限责任公司完成人员：金银国，刘世君，郭丽君，孙晓棕，肖东强，刘涛22、20144224 某型子母战斗部完成单位：湖南云箭集团有限公司，湖南神斧集团向红机械化工有限责任公司，中国航天科技集团公司川南机械厂，四川华川工业有限公司完成人员：赵继飞，喻翅翔，袁谋纯，袁云华，邢恩峰，彭渊，曾德和，彭逊夫，朱琳23、20144231 湖南适应气候变化关键技术及其应用完成单位：湖南省气候中心，湖南大学，湖南省气象科学研究所完成人员：廖玉芳，潘志祥，彭嘉栋，沈军，马亿旿，罗伯良，黄菊梅，杜东升，段丽洁24、20144236 刘祖贻学术临证精华暨效验方转化应用之系列研究完成单位：湖南省中医药研究院完成人员：刘芳，刘祖贻，杨维华，朱璐，尹天雷，宁泽璞，刘春华，伍大华，赵瑞成25、20144250 160km/h大功率交流传动客运机车用牵引电机及变压器的研制完成单位：南车株洲电机有限公司完成人员：吴顺海，成熹，曹飞，龙谷宗，邓日江，梁湘湘，孙兵，唐子谋，谭文俊26、20144254 多级调度协调的湖南电网在线综合调控体系研究与建设完成单位：国网湖南省电力公司，华北电力大学，国网湖南省电力公司长沙供电分公司完成人员：刘志刚，姜新凡，陈浩，张思远，潘飞来，刘敦楠，曾鸣，李京，刘力27、20144288 抗热裂预应力结构组合轧辊的技术及应用完成单位：株洲硬质合金集团有限公司完成人员：唐志军，彭文，徐涛，舒军，管玉明，涂建刚，李重渐，范明，卢少武28、20144291 水下超浅埋大断面立交隧道修建技术研究完成单位：中南大学，中铁隧道勘测设计院有限公司，中铁隧道集团有限公司，长沙市环线建设开发有限公司完成人员：彭立敏，施成华，雷明锋，宋仪，陈海军，贺维国，钟可，朱世友，于勇29、20144293 复杂型面构件超声自动检测技术与应用完成单位：中南大学，长沙理工大学，中国兵器工业集团第五二研究所，湖南省科学技术信息研究所完成人员：李雄兵，胡宏伟，刘希玲，倪培君，杨岳，梁佳佳，罗意平，谢静波，王向红30、20144299 分娩相关差异基因的筛选及其临床应用的研究完成单位：中南大学湘雅医院，中南大学湘雅三医院完成人员：张卫社，吴新华，周昌菊，梁清华，谢庆生，伍招娣，陈其能，刘蓉，刘巧姝31、20144300 头颈鳞癌高转移性动物模型的建立及转移相关分子标志物的筛选鉴定完成单位：中南大学湘雅医院完成人员：张欣，田勇泉，刘勇，黄东海，邱元正，余长云，蔡耿明32、20144301 单纯一期后路手术治疗脊柱结核的关键技术及相关基础研究完成单位：中南大学湘雅医院完成人员：张宏其，唐明星，王昱翔，吴建煌，刘金洋，郭超峰，王锡阳，胡建中，葛磊33、20144321 急性冠脉综合征炎症机制及治疗策略优化的系列研究完成单位：中南大学湘雅二医院完成人员：周胜华，胡信群，方臻飞，唐建军，唐亮，沈向前，赵延恕，刘启明，李旭平34、20144323 细胞凋亡在慢性阻塞性肺疾病发病机制及防治中的研究完成单位：中南大学湘雅二医院完成人员：陈燕，陈平，蔡珊，张艳，杨敏，刘绍坤，刘彩虹，曾慧卉35、20144338 北斗RDSS用户机检定测试系统完成单位：中国人民解放军国防科学技术大学完成人员：庞晶，牟卫华，李柏渝，李彩华，王勇，黄龙，雍玲，吴鹏，彭竞36、20144340 制造业信息化装备设计与制造融合平台完成单位：中国人民解放军国防科学技术大学，湖南师范大学，长沙凯士达信息技术开发有限公司完成人员：李国喜，龚京忠，许第洪，吴宝中，李小龙，张萌，尹欣，颜建强，康辉梅37、20144344 节能降耗低排放人造板生产技术集成与创新完成单位：中南林业科技大学，广西新凯骅实业集团股份有限公司，湖南湖湘木业有限公司完成人员：吴义强，李贤军，李新功，谢力生，卿彦，洪东方，胡云楚，张新荔，夏燎原38、20144347 桤木人工林生态系统结构功能及高效培育关键技术研究与应用完成单位：中南林业科技大学，湖南省林业科学院完成人员：文仕知，周小玲，何功秀，李铁华，杨丽丽，龚玉子，杨模华，陈艺，朱光玉39、20144349 EX-SF系列分散染料的关键中间体成套合成技术研发及产业化完成单位：中南林业科技大学，湘潭陈氏精密化学有限公司，浙江迪邦化工有限公司完成人员：赵莹，唐智勇，谭晓燕，徐万福，曹福祥，赵芳，刘伟，周志军，傅伟松40、20144350 畜禽养殖废弃物资源化综合利用处理技术完成单位：中南林业科技大学，湖南海尚环境生物科技有限公司完成人员：谭益民，李新平，罗勇，王文芳，张雯娟，艾牡龙，左锋，张赛军，周稳涛41、20144360 环洞庭湖区水产高效生产的营养与水质调控关键技术完成单位：湖南农业大学，湖南正园饲料有限公司，益阳益华水产品有限公司，大通湖天泓渔业股份有限公司，长沙学院完成人员：肖调义，胡毅，王红权，兰时乐，李德亮，陈开健，成嘉，毛小伟，许宝红42、20144361 油菜联合收获技术及装备开发与推广完成单位：湖南农业大学，现代农装株洲联合收割机有限公司完成人员：吴明亮，谢方平，官春云，罗海峰，汤楚宙，谭太龙，向阳，任述光，刘兴国43、20144365 大跨径长翼宽箱桥梁结构关键技术研究完成单位：长沙理工大学，湖南大学，湖南省长湘高速公路建设开发有限公司完成人员：张建仁，杨美良，雷正保，方志，陆尚武，夏桂云，刘扬，陈义祥，欧碧峰44、20144371 工程灾害智能化监控成套技术完成单位：中国有色金属长沙勘察设计研究院有限公司，长沙理工大学完成人员：贺跃光，杜年春，徐卓揆，金俊，徐鹏，向海波，邓兴升，曹凌云，邢学敏45、20144372 低功耗高速公路车道控制系统关键技术完成单位：长沙理工大学，湖南意丰汇智科技有限公司完成人员：宋云，李峰，高峰，龙际珍，朱晋，向永生，周天，郭军46、20144385 局限性慢性湿疹涂喷治疗技术的研究与应用完成单位：湖南中医药大学完成人员：杨志波，唐雪勇，曾碧君，汪海珍，何群，向丽萍47、20144387 艾灸的温补效应规律及其原理研究完成单位：湖南中医药大学完成人员：常小荣，严洁，刘密，易受乡，岳增辉，王小娟，林亚平，郁保生，彭亮48、20144393 动态中药提取的溶出稳态性规律研究与科研产业化应用完成单位：湖南中医药大学，九芝堂股份有限公司完成人员：贺福元，刘文龙，谷陟欣，石继连，黄胜，杨岩涛，周晋，邓凯文，卢捷49、20144398 供用电系统电能质量治理关键技术与装备研制及工程应用完成单位：湖南工业大学，株洲变流技术国家工程研究中心有限公司，长沙理工大学完成人员：李圣清，黄燕艳，王小华，吴强，罗仁俊，欧伟明，谭胜武，徐文祥，蓝德劭50、20144402 深部茅口灰岩井下注浆改性提升矿井水位及防突水关键技术完成单位：湖南科技大学，湖南黑金时代长沙矿业有限公司完成人员：王卫军，赵延林，李青锋，彭文庆，叶洲元，邓建长，丁治军，杨跃军，郭志伟51、20144410 湖南武陵山区特色农业产业发展战略完成单位：湖南省农业科学院完成人员：刘芳清，周克艳，谭强林，刘晗，刘英，胡任远，刘宇，陈俊宇52、20144416 有机废弃物育苗营养基质的研究与应用完成单位：湖南省农业科学院，长沙浩博生物技术有限公司，益阳市赫山区宏兴蔬菜种植专业合作社完成人员：彭福元，刘朝晖，崔新卫，鲁耀雄，龙世平，边文亮，易宁，罗连光，肖苏林53、20144417 杂交油菜“沣油5103”等品种选育及配套技术研究与应用完成单位：湖南省农业科学院，湖南隆平高科亚华棉油种业有限公司完成人员：李莓，曲亮，王同华，范连益，惠荣奎，陈卫江，彭铁玖，黄虎兰，李志清54、20144424 特大型矿床深部开采综合技术研究完成单位：长沙矿山研究院有限责任公司，金川集团股份有限公司，北京科技大学完成人员：周爱民，李向东，姚中亮，陈得信，姚维信，郭慧高，周益龙，王虎，李永辉55、20144425 烟花爆竹安全环保关键指标及检测技术完成单位：湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，广西出入境检验检疫局危险品检测技术中心完成人员：谭爱喜，张光辉，江资成，江放明，肖家勇，商杰，欧杨，肖焕新56、20144436 湘菜产业标准化技术研究与应用完成单位：湖南省食品质量监督检验研究院，湖南省餐饮行业协会完成人员：杨代明，孙桂芳，许菊云，罗继湘，唐小兰，杨滔，王墨泉，谭添三，常国强57、20144033 依托装配式剪力墙结构体系的住宅产业化完成单位：长沙远大住宅工业有限公司完成人员：张剑，俞大有58、20144155 全国两型社会建设综合配套改革试验区体制机制创新完成单位：湖南商学院，湖南省社会科学院，湖南省人民政府经济研究信息中心（湖南省软科学研究中心）（湖南省电子政务中心）完成人员：欧阳峣，尹向东，唐宇文，张建民，孙红玲，聂国卿，李定珍，彭炳忠，生延超。