SD大鼠和ICR小鼠血液学及血清生化参考范围的建立及比较
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新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之一--采血部位对血液生化值的影响齐云;蔡润兰;宋杨;刘彬;王敏;孙虹;赵德明【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2006(16)2【摘要】目的探讨从大鼠不同部位采血对其血液生化值的影响.方法采用全自动生化仪对不同部位采血动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定.结果(大鼠)腹主动脉及颈外静脉均与后腔静脉血液生化值在总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)上存在明显差异,表现为前者血清中总蛋白、白蛋白明显高于后者;大鼠眶静脉与股静脉血液生化值在多项指标上亦存在明显区别.结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对采血部位应进行规范与统一.【总页数】4页(P65-68)【作者】齐云;蔡润兰;宋杨;刘彬;王敏;孙虹;赵德明【作者单位】中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;中国农业大学实验动物研究所【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之二--样品制备方法对血液生化值的影响 [J], 齐云;蔡润兰;宋杨;刘彬;孙虹;高南南;赵德明2.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之四--血样存放温度对生化值的影响 [J], 齐云;蔡润兰;宋杨;刘彬;王敏;孙虹;赵德明3.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之六--SPF级Wistar大鼠血液生化参考值的建立 [J], 齐云;蔡润兰;王敏;宋杨;刘彬;李永超;赵德明4.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之五--SPF级SD大鼠血液生化参考值的建立 [J],5.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之七--Beagle犬血液生化参考值的建立 [J], 齐云;蔡润兰;刘彬;宋杨;王敏;李永超;赵德明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
·论著·N I H 小鼠血常规指标的测定与比较 基金项目:广东省科学技术厅科技基础条件建设项目(2008A 060202016)作者单位:510010广州,广州军区广州总医院动物实验中心詹纯列,肖育华,许 达,唐咸国,邢 超,莫子艺[摘要] 目的 测定无特异病原N I H 小鼠血常规值,为科研应用提供参考。
方法 心脏穿刺采血,C o u l t e r -J T 全自动血常规检测仪,阻抗法检测。
结果 无特异病原N I H 雌、雄小鼠间15项血常规指标差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。
结论 性别因素对无特异病原N I H 小鼠血常规值有显著影响。
[关键词] 无特异病原;N I H 小鼠;血常规;测定中图分类号 R 446.11 文献标识码 A文章编号 1004-0188(2010)08-0813-02 d o i :10.3969/j .i s s n .1004-0188.2010.08.001D e t e r m i n a t i o na n dc o mp a r i s o no f b l o o dr o u t i n e p a r a me t e r s i nS P FN I H m i c eZ h a nC h u n l i e ,X i a o Y u h u a ,X uD a ,T a n g X i a n g u o ,X i n g C h a o ,M o Z i y i C e n t e r o f E x p e r i m e n t a l A n i m a l ,G u a n g z h o uG e n e r a l H o s p i t a l o f G u a n g z h o uM i l i t a r y C o m m a n d ,G u a n g z h o u ,G u a n g d o n g ,510010,C h i n a[A b s t r a c t ] O b j e c t i v e T o d e t e r m i n et h ep a r a m e t e r s o f b l o o dr o u t i n ee x p e r i m e n t s o f s p e c i f i e d-p a t h o g e n s f r e e(S P F )N I H m i c e ,a n d t op r o v i d ear e f e r e n c ef o r s c i e n t i f i cr e s e a r c h .Me t h o d s T h eb l o o ds a m p l e s f r o m t h e s em i c ew e r ec o l l e c t e dv i ac a r d i a c p u n c t u r e ,a n d t h e nt h e i r p a r a m e t e r s o f b l o o dr o u t i n e e x p e r i m e n t s w e r ed e t e r m i n e db yC o u l t e r -J TA u t o m a t i cH e m a t o l o g yA n a l y z e r .R e s u l t s 15i n d e x e s o f b l o o d r o u t i n e e x p e r i m e n t s w e r e o f s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e n m a l e a n d f e m a l e S P FN I H m i c e (P<0.05o r P<0.01).C o n c l u s i o n G e n d e r m a y h a v e a no b v i o u s i n f l u e n c e o nt h e p a r a m e t e r s o f b l o o d r o u t i n e e x p e r i m e n t s i nS P FN I Hm i c e .[K e yw o r d s ] s p e c i f i e d -p a t h o g e n s f r e e ;N I H m o u s e ;b l o o d r o u t i n e ;d e t e r m i n a t i o n 血常规测定值是医学临床诊断和科研工作中经常应用的重要基础数据,其准确性直接影响临床医师的诊断和科技工作者的信息收集。
SD大鼠常见血液学检测指标参考范围的建立孙劲;徐元宏【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2008(10)3【摘要】目的对30只雌雄各半的SD大鼠进行血液常规、血液生化和凝血检查.方法血液常规检查使用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪,血液生化检查使用瑞士Roche公司Roche-Hiachi Modular全自动生化分析仪,凝血检查使用Stago-STA血凝仪.结果 WBC、RBC、Hb、Ret、PLT分别为(2.28~31.58)×109/L、(6.46~9.37)X 1012/L、(119.13~173.73)g/L、(0.114 ~0.377)×1012/L、(276.13~1 102.73)×109/L;TP、ALB,ALT、AST、ALP、CH、TG、GLU、BUN、CRE分别(67.2~85.7)g/L、(31.7~43.7)g/L、(33.7~98.7)U/L、(69.7~322.9)U/L、(1.3~211.0)U/L、(0.76~2.22)mmol/L、(1.30~1.62)mmol/L、(2.65~7.62)mmol/L、(2.08~7.75)mmol/L、(19.43~64.97)mmol/L;PT、APlvr、FIB分别为(13.32~17.37)s、(10.54~29.90)s、(1.80~5.04)g/L.结论 SD 大鼠的大部分检测指标和现有报道一致,WBC,ALT、AST、ALP、BUN等检测指标有一定差别.【总页数】3页(P253-255)【作者】孙劲;徐元宏【作者单位】238300,安徽省无为县人民医院;安徽医科大学第一附属医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.甘肃省正常新生儿干血斑氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标医学参考范围的调查 [J], 刘芙蓉;王兴;孙小红;郑雷;周秉博;郝胜菊2.SD大鼠30天喂养试验血液学指标和血清生化指标参考值探讨 [J], 赵安莎;孙于兰;周蓉;张立实3.成都地区SD大鼠参考值范围的探讨(一)——体重和主要脏器正常参考值 [J], 徐培渝;刘晓刚;王正书;庞定国;石艺4.SD大鼠血液学指标和血清生化学指标参考值探讨 [J], 马新群;陆丹;陈志莲;吴军;杨秀鸿;李军;熊志军5.SD大鼠30 d喂养试验血液学生化和脏器系数指标参考值探讨 [J], 王亚东;王海玉;张聪恪;张桂霞;李立;张焱;刘翠娥因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
Wistar大鼠血液、生化指标及ICR小鼠免疫学指标正常参考值的研究高珉之;柴玮杰;王玉燕;王瑞翀;张洪洋【期刊名称】《医学动物防制》【年(卷),期】2008(24)9【摘要】目的建立清洁级Wistar大鼠血液、生化正常参考值及ICR小鼠免疫学指标正常参考值。
方法采用全自动生化分析仪及血细胞分析仪分别对8周龄雌、雄的大鼠的常用血液学指标及生化指标值进行检测;对ICR小鼠进行免疫学试验,以确定平均值及正常参考范围。
结果雄性大鼠的血常规指标白细胞总数、谷草转氨酶均明显高于雌性大鼠;血清总蛋白、白蛋白及肌酐指标则是雌性大鼠高于雄性者;小鼠免疫学指标经分析,脾脏/体重比值、淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性均偏低。
结论本文为Wistar大鼠血常规、血清生化指标和ICR小鼠免疫学指标的测定数据,将为从事生物医药研究的科研人员提供基础对照参考值,同时为标准化鉴定和质量控制提供依据。
【总页数】3页(P675-677)【关键词】Wistar大鼠;ICR小鼠;正常参考值【作者】高珉之;柴玮杰;王玉燕;王瑞翀;张洪洋【作者单位】黑龙江省疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R332【相关文献】1.Wistar大鼠血液生化指标、体重及主要脏器系数参考值的研究 [J], 王燕;厉彦翔2.无菌大鼠血液学及血液生化指标正常参考值的测定 [J], 仉慧敏;孙淑华;胡晓燕;王艳蓉;孟金萍;刘云波3.Wistar大鼠血液生化指标正常参考值范围的研究 [J], 郭建生;胡还甫;郭璇4.Wistar大鼠血象、生化指标正常参考值范围的探讨 [J], 解国梁;尹幸念;王莉;刘敏捷5.SPF级Wistar种8周龄大鼠血液学指标及生化指标正常参考值的探讨 [J], 齐娜;郭建强;苏忆兰;蒋致诚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
SD大鼠血液学指标、血生化指标及脏体比正常值范围探讨探讨SD大鼠30d喂养试验中的血液学指标、血生化指标及脏体比的正常值范围。
方法收集10个批次雌雄各100只SD大鼠的血液学指标、血生化指标及脏体比进行统计分析。
结果肝重、肾重、脾重及脾体比有明显的性别差异,除嗜碱性细胞、血糖和谷草转氨酶无明显的性别差异外,其余的血液学指标和血生化指标均存在性别差异。
结论各项指标的正常值范围大致在文献报道范围内,且存在性别差异。
国家标准方法和技术规范[1,2]把大鼠30d喂养试验作为第二阶段毒性试验的常规方法,血液学、血生化及脏体比是其常用观察指标,这些观察指标的正常参考值范围近几年均有报道,由于这些指标受多种因素的作用而影响结果的判定。
为此,从2009年开始收集10个批次雌雄各100只SD大鼠的血液学指标、血生化指标及脏体比进行统计分析,为制定正常参考值范围提供科学依据。
1材料与方法1.1材料动物主要由四川省中医药科学院实验动物中心和成都达硕生物科技有限公司提供,SPF级初断乳SD大鼠,体重60-100g,适应喂养3d后开始试验。
用XT-2000i型全自动血细胞分析仪检测血液学指标,用美国贝克曼库尔特有限公司生产的CX4型全自动生化分析仪和广州标佳科技有限公司生产的试剂盒测定血生化指标。
1.2方法10个批次的30d喂养试验,每个批次20只大鼠,雌雄各半。
用四川省医学科学院实验动物研究所提供的辐照饲料喂养各批次动物,同批动物用同批号饲料喂养。
所有试验动物均在室温20℃~25℃,相对湿度在40%~70%的条件下喂养30d,试验期间让动物自由进食和饮水。
试验结束时禁食16h后称重,股动脉放血处死动物取血测定血液学指标和血生化指标,取肝、肾、脾称重并计算脏体比(脏体比=脏器重*100/禁食后体重)。
1.3统计方法用SPSS11.0forWindowS进行统计分析。
2 结果2.1 SD大鼠脏器湿重和脏体比SD大鼠的肝、肾、脾绝对重量和脏体比见表1、表2。
2004年4月第14卷 第2期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINE April ,2004V ol.14 N o.2研究报告普通级、SPF 级SD 、Wistar 大鼠血液生化常值的测定与比较詹纯列,肖育华,李新春,杨传红,赖晃文,王 捷(广州军区总医院医学实验科,广州 510010) 【摘要】 目的 测定普通级、SPF 级S D 大鼠,Wistar 大鼠血液生化常值并进行比较。
方法 日立7150全自动生化分析仪自动检测。
结果 SPF 级与普通级S D 大鼠丙氨酸转氨酶、白蛋白、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、铁、磷、镁、尿酸、低密度脂蛋白、胆汁酸差异有非常显著性(P <0101);SPF 级与普通级Wistar 大鼠总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶、总胆固醇、甘油三脂、尿素氮、乳酸脱氢酶、磷、镁、尿酸、高密度脂蛋白、胆汁酸(P <0101),低密度脂蛋白(P <0105)差异有非常显著性。
结论 不同微生物学环境对S D 、Wistar 大鼠血液生化常值有较大影响。
【关键词】 大鼠;血液;生物化学【中图分类号】954165 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2004)022*******Comparison of N ormal V alues of B lood Examination inConventional ,SPF SD and Wistar R atsZH AN Chun 2lie ,XI AO Y u 2hua ,LI X ing 2chun ,Y ANG Chuan 2hong ,LAI Huang 2wen ,W AN Jie (Department of Medical Research ,G eneral H ospital of G uangxhou C ommand of P LA ,G uangzhou 510010,China )【Abstract 】 Objective T o measure and compare the normal values of blood routine examination in conventional ,SPF S Dand Wistar rats.Methods Hitachi 27150was used in this experiment.R esults The A LT ,A LB ,A LP ,BUN ,CRE ,Fe ,P ,Mg ,UA ,LD L ,P BA in conventional and SPF S D rats had very significant difference (P <0101).The TP ,A LB ,A LP ,CH O ,TG,BUN ,LDH ,P ,Mg ,UA ,H D L ,P BA in conventional and SPF Wistar rats had very significant difference (P <0101),the LD L had significant dif 2ference (P <0105),the A LT ,ABG,CRE ,Fe ,G LU ,G OT had little difference (P >0105).Conclusion Different microbiological background significantly affects the biochemical values of rats.【K ey w ords 】 Rats ;Blood ;Biochemistry[作者简介]詹纯列(1963-),男,副主任医师,研究方向:实验动物科研与管理。
4~5周龄D2BF1小鼠的血液学参考值、主要脏器重量及脏器系数的测定徐龙建;唐贤丽【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2007(17)3【摘要】目的测定4~5周龄D2BF1小鼠血液学参考值,且与同龄DBA/2、C57BL小鼠比较,并提供D2BF1小鼠主要脏器重量、脏器系数的参考值.方法随机选取4~5周龄D2BF1小鼠雌雄各10只,分别称重,摘除眼球采血后,颈椎脱臼处死,摘除主要脏器称重,并将测定的血液学值与同龄的C57BL和DBA/2小鼠进行比较分析.结果 D2BF1小鼠雌雄之间血液值MCV有显著性差异(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05).与同龄的C57BL小鼠相比,血液值WBC、Lymph %、Gran%有极显著性差异(P<0.01).其余无显著性差异(P>0.05).与同龄的DBA/2小鼠相比,WBC、Mid%、RBC、MCH有极显著性差异(P<0.01),Mid有显著性差异(P<0.05).其余无显著性差异(P>0.05).结论 D2BF1代小鼠白细胞及分类明显低于C57BL和DBA/2小鼠,值得进一步研究.【总页数】3页(P151-153)【作者】徐龙建;唐贤丽【作者单位】山东弘立医学动物实验研究有限公司,济南,250101;山东弘立医学动物实验研究有限公司,济南,250101【正文语种】中文【中图分类】Q95-331【相关文献】1.绿色荧光裸小鼠主要脏器重量及脏器系数测定与比较 [J], 尤金炜;张立波;方天;田小芸;刘彪;梁磊;恽时锋2.基因工程ROSA小鼠主要脏器重量及脏器系数的测定 [J], 田小芸;恽时锋;胡玉红;周森妹3.转基因EGFP小鼠的主要脏器重量及脏器系数 [J], 田小芸;恽时锋;胡玉红;周森妹4.C57BL/KsJ-db/db、+/db小鼠主要脏器重量及脏器系数的测定 [J], 田小芸;恽时锋;周森妹;胡玉红5.BALB/c-HSF_1 Knockout小鼠的主要脏器重量、脏器系数及主要血液生化指标的测定 [J], 汤百争;刘惺;马亚东因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
新生SD大鼠血常规各项与发育时间的相关性分析及其与血清铁浓度变化的机制徐开宇;杜兴华;王伟舟;崔鑫;李俊宏;周发勇;谭龙;王辉;李凡【摘要】目的:探讨经心脏穿刺和剪尾2种采血方式对新生SD大鼠血常规的影响;建立其血常规正常参考值范围;研究发育过程中血常规各项、血细胞形态和血清铁(SI)的消长变化及其相互关系,揭示SI变化的可能机理.方法:新生鼠出生后1、2、3、7和14 d,经全自动血液分析仪检测心脏血和鼠尾血中红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数和白细胞(WBC)计数的改变;通过瑞氏-姬姆萨染色观察2种血液中血细胞形态的差别,及其在不同发育阶段的变化情况;选择心脏穿刺采血建立血常规正常值参考范围;经血液生化分析仪检测各时点心脏血SI含量变化;统计学分析发育时间、血常规各项及SI含量三者间的动态关系.结果:鼠尾血中RBC计数、HGB含量和WBC计数均高于心脏血,且RBC碎片较多;RBC形态随发育逐渐成熟稳定,其碎片亦明显减少;发育时间与心脏血中RBC和PLT计数呈正相关(P<0.01),与HGB含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、WBC计数和SI含量呈负相关(P<0.01).SI含量与RBC计数呈负相关(P<0.05),与MCV(P<0.01)和MCH(P<0.05)则呈显著正相关.结论:经心脏采血能建立相对完善的正常新生SD大鼠血常规参考值范围;新生鼠血常规各项与发育时间存在显著相关性;发育早期RBC 的不稳定性可能是导致SI含量在发育早期较高的原因.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2013(029)012【总页数】7页(P2256-2262)【关键词】新生SD大鼠;血清铁;心脏【作者】徐开宇;杜兴华;王伟舟;崔鑫;李俊宏;周发勇;谭龙;王辉;李凡【作者单位】昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;云南省中西医结合医院检验科,云南,昆明,650224;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,临床医学专业,云南,昆明,650500;昆明医科大学,基础医学院病理学与病理生理学系,云南,昆明,650500【正文语种】中文【中图分类】R363新生儿疾病严重威胁着社会的发展与进步,建立模拟临床新生儿疾病的动物模型,对研究新生儿疾病的发病机制具有较强的现实意义。
SD大鼠和ICR小鼠血液学及血清生化参考范围的建立及比较摘要:目的:建立SD大鼠和ICR小鼠常用血液学及血清生化指标正常值参考范围,并比较不同性别,周龄,及供应商动物结果之间的差异。
方法:血液常规分析使用迈瑞BC5300-vet动物专用五分类全自动血液细胞分析仪,血清生化使用迈瑞BS-380全自动生化分析仪。
使用SPSS 17.0统计学软件对检测结果进行t检验。
结果:获得4~5周龄和8~9周龄不同性别和供应商SD大鼠和ICR小鼠血液学和血清生化平均值及正常参考范围;应用SPSS软件T检验分析表明性别、周龄及供应商不同时,同一品系动物的部分血液学和血清生化结果有显著性差异。
结论:在动物实验中,对血液学和血清学检测结果进行评价时应考虑不同性别、周龄及来源对数据的影响。
关键词:SD大鼠;ICR小鼠;血液学;血清生化;正常值参考范围SD大鼠和ICR小鼠作为药物的药代动力学,药效学及毒理学实验中最常用的啮齿类动物,其血液学及血清生化指标是评价动物健康状况和实验结果的重要指标。
通过正常值参考范围的建立,可以为药物的药效学和毒理学安全等评价提供依据,在后续的相关实验中起到重要的指导作用。
为了满足药物研发临床前实验的需求,本实验对4~5周龄和8~9周龄SD大鼠和ICR小鼠的常用的23项血液学和23项血清生化指标进行了测定,实验动物分别购自上海的两家啮齿类实验动物供应商。
1.材料与方法:1.1实验动物实验用动物为SPF级ICR小鼠和SD大鼠,164只动物购自上海上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号SCXK(沪)2012-0002;158只动物购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,许可证号SCXK(沪)2013-0016。
雌雄动物分笼饲养于PVC笼盒中,食物购自北京科澳协力饲料有限公司,自由饮水和进食,室温20~29oC,湿度30%~70%,每天12小时光照。
动物于约4周龄和约8周龄时购买,在上海睿智化学研究有限公司适应环境约1周后进行实验。
进行动物饲养、采血和样品处理的实验室已通过国际实验动物评估和认可委员会认证,实验方案已通过动物管理及使用委员会的批准。
1.2仪器和试剂血常规使用迈瑞BC5300-vet动物专用五分类全自动血液细胞分析仪和配套试剂与质控;血清生化采用迈瑞BS380全自动生化分析仪和配套试剂与质控。
实验之前仪器经过校准,仪器本底计数和批内精密度均符合要求。
测定时按照仪器标准操作规程和试剂使用说明书操作。
1.3样品采集所有样品于上午10:00~12:00进行,乙氟烷麻醉后使用眼眶静脉采血的方法。
所得的全血样品中用于血常规检测的部分用EDTA-K2抗凝;用于血清生化检测的部分不添加抗凝剂,静置约半小时后离心取上清。
采样后动物使用二氧化碳安乐死,尸体冷冻保存并集中无害化处理。
1.4测定方法1.4.1血液学检测血液学检测指标包括白细胞总数(WBC),嗜中性粒细胞计数(Neut#),淋巴细胞计数(Lym#),单核细胞计数(Mono#),嗜酸性粒细胞计数(Eos#),嗜碱性粒细胞计数(Baso#),红细胞总数(RBC),血红蛋白浓度(HGB),平均红细胞体积(MCV),平均红细胞血红蛋白(MCH),平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC),血红细胞分布宽度(RDW),红细胞压积(HCT),血小板总数(PLT),平均血小板体积(MPV),血小板分布宽度(PDW),血小板压积(PCT)。
1.4.2血清生化检测谷丙转氨酶(ALT)采用紫外-乳酸脱氢酶法,谷草转氨酶(AST)采用紫外-苹果酸脱氢酶法,碱性磷酸酶(ALP)采用AMP缓冲液法,γ-谷氨酰转移酶(g-GT)采用IFCC法,总胆红素(T-bil)采用重氮盐法,直接胆红素(D-bil)采用VOX法,总蛋白(TP)采用双缩脲法,白蛋白(ALB)采用溴甲酚绿法,尿素氮(BUN)采用紫外-谷氨酸脱氢酶法,葡萄糖(Glu)采用己糖激酶法,总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)采用氧化酶法,钙(Ca)采用偶氮胂III 法,镁(Mg)采用二甲苯胺蓝法,无机磷(P)采用磷钼酸法,肌酸激酶(CK)和a-淀粉酶(a-AMY)采用连续监测法,乳酸脱氢酶(LDH)采用IFCC/DGKC法,脂肪酶(LIP)采用酶显色法,球蛋白(GLB)和ALB/GLB比值(A/G)由TP和ALB的值计算所得,肌酐(CREA)采用改良JAFF法,总胆汁酸(TBA)采用第5代循环酶法。
1.5血液学和血清生化测定值以平均值(M)标准差(s)表示;统计学分析应用SPSS 17.0软件,进行数据正态分布t检验,参考范围推荐采用M±1.96SD方法。
2.结果2.1血液学检测结果见表 1,血清生化检测结果见表 2,表中仅列出了购自上海斯莱克实验动物有限责任公司的SD大鼠的数据,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司的SD大鼠及所有ICR小鼠的检测结果未列出;数值在表格中的表示方法为平均值±标准差(M±s)。
3.讨论在本次实验中,血常规结果中的MCHC、RBC和HGB在SD大鼠和ICR小鼠中均随着周龄的增加而增加,而MCV和RDW值随着周龄的增加而降低。
血清生化结果中TP和ALB随着周龄的增加而升高,ALP、γ-GT和P的值随着周龄的增加而降低。
RBC、HGB和ALP随周龄变化的趋势与胡建武[2]文献中的报道一致;另有个别参数随周龄变化的趋势在SD大鼠和ICR小鼠中相反,如AST和CK值在ICR小鼠中随周龄增加而升高,在SD大鼠中却随着周龄增加而降低,这也与胡建武[2]文献中报道的结果一致。
其余血常规和血清生化参数没有与周龄增加相应的变化趋势。
相当一部分参数的测得值与文献报道有一定的差异[2-3],这些差异可能与动物来源,环境,不同仪器的偏差等因素有关。
在人的临床检测中,通常有广泛适用的血液学和血清学检测的正常值参考范围,但是在实验动物中,动物的种类、品系、年龄和来源等因素往往使结果千差万别,所以需要建立不同的参考体系,以提供评价实验的结果的依据。
本实验的结果也证明,不同周龄、性别和供应商的SD大鼠和ICR小鼠的相当一部分参数之间具有明显差异。
因此在建立参考范围的时候有必要进行比较详细的分类,各实验室若有条件也应建立自己的参考范围,以排除由不同仪器和试剂导致的误差。
临床前药动、药效和毒理实验多使用6至8周龄的啮齿类动物,所以本实验选用了4~5周龄和8~9周龄的动物。
但是一些药效和毒理实验往往持续1~2个月或者更长的时间,还有的实验在一开始就会使用周龄较大的动物;若有的血常规和血清生化参数随着周龄的增加而继续变化,本实验在这些实验中的适用性将大打折扣。
另外本实验中每组的样本量为15至21例不等,若增大样本量也可以提升参考范围的代表性。
有的企业或单位,例如美国Charles River公司,作为实验动物供应商和CRO公司,收集整理了其实验室数年甚至更长时间段里的血常规和血清生化数据,针对不同品系如SD大鼠[4]和wista han[5]大鼠等,建立了从低至3周龄,高至150周龄不等的数个周龄段动物的参考范围,每个周龄段的动物数量从数个至数百个不等。
这样建立的参考范围由于样本量大,持续时间长,可以弥补短期集中检测和较少样本量下建立范围的不足,但是这需要企业及临检工作员工的长期坚持,以及保证历史数据保存的完整性和相关信息的准确性。
致谢:感谢本部门动物实验组的同事在动物样品准备工作当中提供的帮助,同事李增刚在统计学分析数据质控方面提供的帮助。
参考文献:[1]Malcolm J. York. Clinical Pathology [M]// Ali S. Faqi,A Comprehensive Guide to Toxicology in Preclinical Drug Development. London. Academic Press,2013:167–211[2]胡建武,卢胜明,车路平,贺争鸣,王洪,刘双环,等. 10种常见SPF级实验大、小鼠血液及生化指标正常参考值的探讨[J]. 实验动物科学,2007,24(2):5~10.[3]孙劲,徐元宏. SD大鼠常见血液学检测指标参考范围的建立[J]. 输血与检验. 2008,10(3):253~255[4]Clinical Laboratory Parameters for Crl:CD(SD)Rats March,2006 Information Prepared by Mary L.A. Giknis,Ph.D. Charles B. Clifford,D.V.M.,Ph.D. CHARLES RIVER LABORATORIES [http:///files/pdfs/rms/ cd/rm_rm_r_clinical_parameters_cd_rat_06.aspx][5]Clinical Laboratory Parameters for Crl:WI(ha)Rats March,2008 Information Prepared by Mary L.A. Giknis,Ph.D. Charles B. Clifford,D.V.M.,Ph.D. CHARLES RIVER LABORATORIES [http:///files/pdfs/rms/wistarhan/rm_rm_r_wistar_han_clin_lab_parameters_08.aspx]。