血清骨型碱性磷酸酶质量的测定

竭诚为您提供优质文档/双击可除碱性磷酸酶km值测定实验报告篇一：酶促反应动力学实验报告酶促反应动力学实验报告14301050154杨恩原实验目的：1.观察底物浓度对酶促反应速度的影响2.观察抑制剂对酶促反应速度的影响3.掌握用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值实验原理：一、底物浓度对酶促反应速度的影响在温度、ph及酶浓度恒定的条件下，底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。

在一般情况下，当底物浓度很低时，酶促反应的速度(v)随底物浓度[s]的增加而迅速增加，但当底物浓度继续增加时，反应速度的增加率就比较小，当底物浓度增加到某种程度时反应速度达到一个极限值(即最大速度Vmax)。

底物浓度和反应速度的这种关系可用米氏方程式来表示(michaelis-menten方程)即：式中Vmax为最大反应速度，Km为米氏常数，[s]为底物浓度当v=Vmax/2时，则Km=[s]，Km是酶的特征性常数，测定Km是研究酶的一种重要方法。

但是在一般情况下，根据实验结果绘制成的是直角双曲线，难以准确求得Km和Vmax。

若将米氏方程变形为双倒数方程(Lineweaver-burk方程)，则此方程为直角方程，即:以1/V和1/[s]分别为横坐标和纵坐标。

将各点连线，在横轴截距为-1/Km，据此可算出Km值。

本实验以碱性磷酸酶为例，测定不同浓度底物时的酶活性，再根据1/v和1/[s]的倒数作图，计算出其Km值。

二、抑制剂对酶促反映的影响凡能降低酶的活性，甚至使酶完全丧失活性的物质，成为酶的抑制剂。

酶的特异性抑制剂大致上分为可逆性和不可逆性两类。

可逆性抑制又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制等。

竞争性抑制剂的作用特点是使该酶的Km值增大，但对酶促反映的最大速度Vmax值无影响。

非竞争性抑制剂的作用特点是不影响[s]与酶的结合，故其Km值不变，然而却能降低其最大速度Vmax。

本实验选取na2hpo4作为碱性磷酸酶的抑制物，确定其抑制作用属于哪种类型。

骨源性碱性磷酸酶测定在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中的意义赵黎;金娟;龚建光;何强【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2016(32)18【摘要】目的：探讨血清骨源性碱性磷酸酶（BALP）在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中的意义。

方法：选择慢性肾脏病3～5期患者111例，均抽取空腹静脉血，分别测定 BALP、ALP 及 iPTH、β－CTx、P1NP、N－MID osteocalcin、Vitamin D （25－OH），进行相关性分析和比较透析患者与保守治疗患者的差异。

结果：BALP与ALP、iPTH、β－CTx、P1NP、N－MID osteocalcin 呈正相关，差异有统计学意义（r ＝0．686、0．443、0．405、0．399、0．309，P ＜0．05）；BALP与Vitamin D （25－OH）无相关性（P ＞0．05）。

透析患者血清BALP、ALP、iPTH、β－CTx、P1NP、N－MID osteocalcin 均高于保守治疗患者，差异有统计学意义（P ＜0．05）；透析患者血清Vitamin D （25－OH）与保守治疗患者比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。

结论：BALP测定在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中有意义，是评估透析患者肾性骨病的非创伤性指标，指导临床治疗。

【总页数】3页(P3070-3072)【作者】赵黎;金娟;龚建光;何强【作者单位】310014 杭州市，浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市，浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市，浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市，浙江省人民医院肾脏病科【正文语种】中文【相关文献】1.骨源性碱性磷酸酶测定在儿童维生素D缺乏亚临床状态诊断中的意义 [J], 付晓玲2.甲状旁腺素及骨转运指标的测定在维持性血液透析患者肾性骨病诊断中的意义[J], 贾艳丽;刘惠兰3.骨源性碱性磷酸酶测定在家兔骨折修复过程中的意义 [J], 刘建鹏;杨红志;沙永顺;范红旗;刘海金;桑敏4.探讨骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿体检中的临床意义 [J], 陆春霞;陈琼5.探讨骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿体检中的临床意义 [J], 陆春霞;陈琼因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶（ALP）存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。

测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力，做临床辅助诊断用。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶（ALP）的活力。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶（ALP）活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶（ALP）试剂盒采用的是AMP缓冲液法。

5.原理在AMP的缓冲环境下，磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下，可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。

在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升，其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。

−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：AMP缓冲液（PH10.50）、乙酸镁；R2：AMP缓冲液（PH8.85）、磷酸对硝基苯、乙酸镁。

AMP：2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性：试剂在2-8℃避光保存，有效期1年。

试剂工作液在2-8℃避光保存，可稳定4周，15-25℃可保存稳定4天。

7.4试剂准备：试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿早期佝偻病应用的探讨【摘要】目的：分析婴幼儿骨碱性磷酸酶（banp）的检测意义，探讨其与儿童佝偻病发病的关系。

方法：采用全血干化学和免疫浓缩技术方法，对1776例婴幼儿进行骨碱性磷酸酶检测，分析血nbap 与佝偻病发病早期的关系。

结果：各年龄组男女之间比较差异无统计学意义（p>0.05），各年龄组之间差异有统计学意义（p300 u/l 提示佝偻病激期[2]。

balp值≤200 u/l 为正常水平，balp值200～250 u/l为预防水平，balp值≥300 u/l为治疗水平。

1.4 统计学处理应用spss 11.0统计学软件对数据进行处理分析，计数资料采用字2检验，p<0.05为差异有统计学意义。

2 结果本研究结果显示不同年龄婴幼儿全血balp预防水平结果比较差异有统计学意义（字2=62976.96，p<0.05）；以及不同年龄婴幼儿全血balp结果比较，差异有统计学意义（字2=6.91，p<0.05）。

年龄越小、骨碱性磷酸酶的阳性率越高，随着年龄的增长，佝偻病发病率呈逐渐降低趋势。

本研究数据显示正常体检婴幼儿中有70.95%为正常水平，26.07%为预防水平，2.76%为治疗水平，见表1、表2。

3 讨论佝偻病很少直接危及生命，但因发病缓慢，易被忽视，一旦发生明显症状时，机体的抵抗力低下，易并发肺炎、腹泻、贫血等其他疾病典型的佝偻病诊断不难[3]，但佝偻病早期症状、体征缺乏特异性，表现不明显，单纯依靠临床表现不易早发现，从而延误治疗，影响儿童的生长发育。

婴幼儿佝偻病是因体内血钙降低，刺激甲状旁腺分泌增加，加速旧骨溶解，释放骨钙入血，以维持血钙接近正常水平。

但因甲状旁腺素抑制，肾小管对磷的重吸收、尿磷排出增加，使血磷降低，导致ca、p乘积降低，骨组织钙化不良，成骨细胞代偿性增生，骨钙化的主要活性物质nbap生成增多，从而形成骨骼病变和一系列症状、体征及血液生化改变。

碱性磷酸酶是检查什么很多人都不是专业的医疗人员，很难明白一些治疗的意义，或是一些医生的做法。

有时候自己由于自己不明白自己的情况，就会呆滞一些问题的产生，容易导致和医生发生冲突。

所以大家还是要增长一些医生的知识。

下面小编带大家去关注一个问题，碱性磷酸酶是检查什么？碱性磷酸酶是检查什么碱性磷酸酶（ALP或AKP）是一种磷酸单酯酶，血清中ALP来源于不同的组织（肝、骨、肾、小肠、胎盘等），主要以游离形式存在，极少量与脂蛋白和免疫球蛋白结合。

正常情况下，体内ALP是来源于肝（肝ALP）和骨（骨ALP）各半。

某些病理原因（如各种肝、骨等疾病）和生理性原因（如儿童生长发育期、妊娠2个月后等）均可引起血清ALP水平改变，临床主要为肝胆和骨骼疾病所引起。

碱性磷酸酶检查偏高怎么回事1、代谢异常原因主要用于阻塞性黄疸、肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查，阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎都会使碱性磷酸酶偏高。

胆道排泄异常碱性磷酸酶是需要经过肝脏，然后由胆汁排出，当排泄过程中出现异常，那就会引起碱性磷酸酶偏高。

2、骨骼组织原因由于骨组织中此酶亦很活跃。

因此，孕妇、骨折愈合期、骨软化症。

佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。

3、肝胆疾病：血清总ALP病理性升高，机会60%是由肝脏和胆道疾病引起的。

ALP是胆汁淤积性疾病的敏感指标。

其他肿瘤如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、骨细胞瘤、骨肉瘤等，碱性磷酸酶增高时，提示可能有肝脏转移。

以上就是小编对于碱性磷酸酶是检查什么这一问题的有关资料整理。

一些定期的体检也是可以体现这样的一个问题，在体检中也可以发现一些小的问题，检查就是为了发现问题，也可以起到一个预防的作用，所以大家一定要多多注意。

小编祝大家身体健康！。

孩子患上骨源性碱性磷酸酶偏高，家长该怎么做？近些年有一些年轻妈妈对于儿童补钙的问题常常报以随意的态度，认为给孩子吃的食物都是好的，肯定不会缺钙，但正是因为这样就会有很多孩子患上骨源性碱性磷酸酶偏高，家长该怎么做？骨源性碱性磷酸酶偏高怎么办骨源性碱性磷酸酶(NBAP)是成骨细胞的表型标志物之一，它可直接反映成骨细胞的活性或功能状况，是近年来主要用于小儿佝偻病早期诊断和亚临床鉴别的特异性参考指标，也是目前用于评价人体骨矿化障碍的最佳指标。

骨源性碱性磷酸酶是由骨质中分泌出来，当骨头中钙盐沉淀不足时，该酶分泌增多，骨中钙盐充足时就分泌减少，所以用来帮助检查有无钙吸收不足。

正常值范围：小于或等于200U/L。

分度：骨碱性磷酸酶越高，说明“缺钙”越严重。

骨碱性磷酸酶(U/L)预防或治疗的方法：正常：于或等于200，一天一粒鱼肝油预防;轻度：00～250(不包括250)，每天一粒鱼肝油治疗;中度：50～300(不包括300)，用大剂量的维生素D3治疗; 重度：大于或等于300 用大剂量的维生素D3治疗。

骨碱性磷酸酶是什么骨型碱性磷酸酶是成骨细胞的一种细胞外酶，为糖蛋白，分子量约为12000道尔顿。

该酶在细胞内合成时新生的酶蛋白先在内质网糖基化，再通过高尔基体转运到细胞膜表面，通过多糖链与磷酯酰肌醇相连嵌合到细胞膜的外浆膜。

在多糖-肌醇磷酸特异水解酶的作用下，骨型碱性磷酸酶能被释放到血循环中。

骨型碱性磷酸酶在机体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯，为羟磷灰石的沉积提供必须的磷酸;同时，水解焦磷酸盐，解除其对骨盐形成的抑制作用，有利于成骨过程。

随着骨型碱性磷酸酶检测方法的灵敏度、特异性提高，骨型碱性磷酸酶作为骨代谢异常的标志物越来越受到临床重视。

临床研究表明，血清骨型碱性磷酸酶活力的定量测定可作为监测骨形成变化的有效参数。

与大多数代谢性骨骼疾病相似，骨质疏松症是一种骨容量不足的疾病，常见于绝经期妇女。

骨容量的生成不足发生于溶骨速率大于成骨速率，有效的治疗需要纠正或者骨密度的测量，但骨密度的改变太慢(在多数情况下，能被测出改变需要一年或更多的时间)以致不能作为临床监测治疗效果的早期反应。

碱性磷酸酶km测定实验报告碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，简称ALP）是一种存在于人体组织和体液中的酶类，其活性的测定对于临床诊断和疾病监测具有重要意义。

本文将对碱性磷酸酶的KM测定实验进行详细介绍和分析。

一、实验目的本实验旨在测定碱性磷酸酶的KM值，以了解其底物浓度对酶活性的影响，并探讨酶底物的亲和力。

二、实验原理碱性磷酸酶是一种催化磷酸酯水解的酶，其底物为磷酸酯类物质。

当底物浓度较低时，酶活性会受到限制，因此，通过测定不同底物浓度下的酶活性，可以得到碱性磷酸酶的KM值。

KM值是酶与底物结合的亲和力指标，数值越小表示酶对底物的结合越紧密。

三、实验步骤1. 准备实验所需材料和试剂，包括碱性磷酸酶酶液、磷酸酯底物、缓冲液等。

2. 制备一系列不同浓度的磷酸酯底物溶液，如0.1 mM、0.2 mM、0.3 mM等。

3. 将不同浓度的磷酸酯底物溶液分别与碱性磷酸酶酶液混合，使其反应一定时间。

4. 停止反应，并加入一定量的酶抑制剂，以停止碱性磷酸酶的活性。

5. 使用特定的检测方法，如比色法或荧光法，测定反应液中产生的产物浓度。

6. 根据不同底物浓度下产物浓度的变化，绘制酶活性与底物浓度的曲线。

7. 通过曲线拟合，计算出碱性磷酸酶的KM值。

四、实验结果与分析根据实验数据绘制的酶活性与底物浓度曲线，可以观察到酶活性随着底物浓度的增加而逐渐增加，但增加速率逐渐减缓。

这是因为底物浓度增加，酶与底物的结合也增加，但当底物浓度达到一定程度时，酶的活性已经接近饱和状态，进一步增加底物浓度对酶活性的影响较小。

通过对曲线的拟合，可以计算出碱性磷酸酶的KM值。

KM值表示酶与底物结合的亲和力，数值越小表示酶对底物的结合越紧密。

在实验中，我们可以通过计算得到不同底物浓度下的KM值，从而了解碱性磷酸酶与底物之间的亲和力变化情况。

五、实验误差与改进在实验过程中，可能存在一些误差，如底物溶液的制备误差、酶活性的测定误差等。