显微镜观察微生物的实验原理

制作临时装片

步骤：擦--滴--取--展--盖--染--吸

1． 擦拭载玻片、盖玻片

2、在载玻片的中央滴一滴清水

3．在洋葱内表皮用刀片划出一个约1cm2的正方形（在使用刀片时注意安全），用镊子撕取洋葱内表皮

4．将内表皮置于载玻片的清水中，并使之铺开

5．从一侧开始慢慢盖上盖玻片，不能有气泡产生

6．在盖玻片的一侧滴一滴染液

7．然后用吸水纸从另一侧吸取多余的染液，使洋葱表皮细胞均匀染色

8．显微镜下观察.

显微镜观察细胞

实验步骤

1， 取镜和安放

1．右手握住镜臂，左手托住镜座。

2．把显微镜放在实验台略偏左

２、对 光

转换低倍镜对准通光孔，看到明亮的视野。

3，固定装片

1、將载物台下降至最低。

2、将要观察标本放在载物台上并用玻片夹固定,移动装片使要观察的物体对准通光孔

3、将载物台升至最高。

4，低倍镜观察

放置玻片标本。

调焦：转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止。

左眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

5、高倍镜观察 在低倍镜下使要放大的部分移到视野中央。

转动转换器，移走低倍物镜，换上高倍物镜。

缓缓调节细准焦螺旋，使物象清晰。

换上高倍物镜后禁止转动粗准焦螺旋。

例；1、当显微镜的目镜为10х，物镜为10х时，在视野直径范围内看到一行相连的64个细胞。若目镜不变，物镜换成40х，则在视野中可看到这行细胞中的

A．2个 B．4个 C．16个 D．32个

2、当显微镜的目镜为10х，物镜为10х时，视野中被相连的64个细胞所充满，若目镜不变，物镜换成40х，则在视野中可看到这行细胞中的

A．2个 B．4个 C．16个 D．32个

显微镜成像特点：

1 显微镜成倒立放大的虚像。

2 物像移动的方向和实际移动玻片的方向。

3 物像在何方，就将载玻片向何处移。

显微镜头污点判断：

实验一光学显微镜的使用及微生物个体形态的观察

一、实验目的和要求

1）了解显微镜的构造及成像原理。

2）掌握显微镜的使用方法和保养方法。

二、显微镜的构造

（一）机械裝置部分：

1）镜座：是显微镜的支架，由底座和镜臂组成。

2）载物台：又称镜台，用于安放载玻片，其上安有玻片夹和玻片移动器，调节移动器上的螺旋可使载玻片前后左右移动。镜台中央有一孔，称通光孔，可使反光镜上的光反射到物镜中来。

3）镜筒：其上端连接目镜，下端连接转换器。

4）转换器：其上安装三个物镜，镜检时旋转转换器即可换物镜头。注意转换物镜时。必须用手按住园盘旋转，勿用手指直接推动物镜，以免使物镜与转换器之间的螺纹松脱而损坏显微镜。

5）调焦裝置：包括粗细调焦旋钮，是调节镜筒上下移动的裝置。 （二）光学系统部分：

1）物镜：又称为镜头。有三个物镜头，二个干燥系物镜，一个油系物镜。物镜上标有主要参数，其含意是：例如：上排100/1.25是放大倍数为100，数值口径为1.25，下排160/0.17是指镜筒长为160毫米，盖玻片的厚度小于0.17毫米。它是显微镜的最重要的部分。

普通显微镜接物镜的工作原理

2）目镜：供眼睛观察物像用的，它将物镜放大的物像再放大，配有三个目镜，其上标有放大倍数。显微镜的总放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积.

3）聚光器：起聚集光线的作用，它可上下移动以调节最适光度。其下方安装有可变光圈,用以调节光的强度。

4）反光镜：安装在镜座上。它是一个有平凹两个面的双面镜。其作用是采集外来光线，并且送入聚光器，一般采集自然光时用平面镜，采集人工光源时用凹面镜。

三、实验材料和器材

双目显微镜、二甲苯、苯酚、擦镜纸、固定片等

四、实验操作步骤

（一）显微镜的使用方法：

1.准备工作：取出显微镜时，应一手握镜臂,一手托镜座，轻拿轻放，切忌碰撞和猛震。显微镜应放在离桌边60毫米左右的位置。再将登子的高低调节好，不得将显微镜倾斜。

一、实验目的

1. 掌握显微镜的使用方法，特别是油镜的使用技巧。

2. 学习观察细菌的基本形态和结构。

3. 了解细菌染色技术及其在微生物学中的应用。

二、实验原理

细菌是单细胞微生物，个体微小，通常需要借助显微镜才能观察到。通过观察细菌的形态和结构，可以了解其生物学特性，为微生物学研究和相关领域提供基础。

三、实验材料与仪器

1. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、酒精灯、染色液等。

2. 材料：细菌样本、无菌水、香柏油、乙醇乙醚或二甲苯等。

四、实验步骤

1. 油镜的使用与保养

（1）打开显微镜，调整光源，使视野明亮。

（2）将载玻片放在载物台上，用滴管滴加香柏油。

（3）将盖玻片轻轻放置在细菌样本上，注意避免产生气泡。

（4）旋转油镜，直至观察到清晰的细菌图像。

（5）观察完毕后，用乙醇乙醚或二甲苯将香柏油清洗干净，擦拭显微镜镜头。

2. 细菌染色

（1）将细菌样本涂在载玻片上，用盖玻片覆盖。

（2）将染色液滴在盖玻片边缘，让染色液自行渗透。

（3）观察染色后的细菌形态，记录观察结果。

3. 细菌形态观察

（1）观察细菌的形状，如球形、杆形、螺旋形等。

（2）观察细菌的大小，估计其直径。 （3）观察细菌的排列方式，如成对、成链、成簇等。

（4）观察细菌的鞭毛、芽孢等特殊结构。

五、实验结果与分析

1. 油镜的使用与保养

实验过程中，成功掌握了油镜的使用方法，并学会了保养显微镜。

2. 细菌染色

通过染色，成功观察到细菌的形态和结构，提高了观察效果。

3. 细菌形态观察

（1）观察到细菌的形状：实验中观察到的主要为球形和杆形细菌。

（2）观察到细菌的大小：通过目测估计，细菌直径约为0.5-1.0微米。

（3）观察到细菌的排列方式：实验中观察到的细菌排列方式主要为成对和成链。

（4）观察到细菌的特殊结构：部分细菌具有鞭毛，少数细菌具有芽孢。

六、实验总结

本次实验成功掌握了显微镜的使用方法，观察到了细菌的基本形态和结构。通过实验，加深了对微生物学基本知识的理解，提高了实验操作技能。在今后的学习和工作中，将不断积累经验，提高实验水平。

1 实验一 显微镜的使用和微生物形态的观察

一、目的要求

1、熟悉普通光学显微镜的构造及其使用方法。

2、了解油镜的原理，并掌握其使用方法。

3、观察各种染色标本，认识微生物的基本形态和特殊结构。

二、基本原理

显微镜包括普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。

微生物个体微小，难于用肉眼观察形态结构，只有借助显微镜，才能对其进行研究和利用。

普通光学显微镜是一种精密的光学仪器，是观察微生物最常用的工具。

细菌等原核细胞型微生物个体微小，一般需要使用油镜观察其形态结构。而油镜头晶片

极小，投入光线少，从载玻片透过光线，又被空气折射（空气折光广率1.00、玻璃折光率为

1.52），更不易射入镜头内，致使光线较弱物像不清。当在镜头和载玻片之间滴加香柏油后，

由于香柏油折光率为1.515，与玻璃相近，可消除光线通过玻璃与物镜间空气时发生折射现

象，避免光线损失，使亮度和清晰度都得到了提高，几乎可以看清所有细菌。

三、实验材料及仪器

（1）标本及试剂：微生物标本片、香柏油、二甲苯。

（2）仪器及其他用具：普通光学显微镜、擦镜纸等。

四、实验步骤

1. 普通光学显微镜的构造及使用方法。

1）普通光学显微镜的构造。普通光学显微镜有机械部分和光学部分组成。

A．显微镜的机械部分。包括镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、推动器、粗调节器（粗

调螺旋）和细调节器（微调螺旋）等部件（图1-1）

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图1-1 普通光学显微镜的构造

普通光学显微镜机械部分各部件的构造与功能见表1-1 表1-1 普通光学显微镜机械部分的构造与功能

NO. 部件 构造和功能

1 镜座 显微镜的基本支架，在显微镜的底部，呈马蹄形、长方形、三角形等。

2 镜臂 连接镜座和镜筒之间的部分，呈圆弧形，作为移动显微镜时的握持部分

3 镜筒 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜间的暗室。从镜筒的上缘到物

镜转换器螺旋口之间的距离称为机械筒长。因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言