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ASG-SOP-ZL-012-01人参根提取物检测操作规程

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芜湖艾森格生物技术有限公司cGMP管理文件

第 1 页 共 2 页

目的： 规定了人参根提取物的检验操作规程，以保证物料质量。

范围： 适用于人参根提取物的检验。

责任人：质量管理部有关QA、QC人员

正文：

1. 检验方法：

1.1 性状鉴别：取5g被检样品，将其平铺于洁净白色瓷盘中，于自然光或相当于自然光的白色灯光下，视线与样品表面呈约60度，观察是否具有该产品应有的色泽、性状和杂质情况。将盛有样品粉末的白色瓷盘靠近鼻腔，用力中等，嗅闻1～2s，判断是否具有该产品应有的气味。后将此样品倒入烧杯中，加50～65℃温开水100mL，边加水边搅拌，吸取适量上述溶液（建议5～10mL），使其布满口腔及舌面，在口中持留3～5s，仔细品尝，判断其是否具有该产品应有的滋味。

1.2 鉴别：

1.2.1 薄层鉴别：取本品0.1g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参根对照药材1g，加水100ml煎煮2小时，滤过，滤过通过D101型大孔吸附树脂（内径为1cm，柱高为15cm），用水洗至无色，弃去水液，再用60%乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re对照品，加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别至日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

1.2.2 HPLC鉴别：检视在1.8.2中的色谱图中人参皂苷Rf 的色谱峰与对照品的色谱峰的保留时间一致。

1.3 检查：

1.3.1干燥失重：照中国药典2015版四部通则干燥失重测定法第一法检测。

1.3.2粒度： 照中国药典2015版四部通则粒度测定法第二法检测：

单筛分法：称取经充分混匀的样品10g，置80目药筛中，均匀摇动分样筛，直至筛分不下为止。称取筛下物，精确至0.1g，计算通过80目筛的比例。

题 目 人参根提取物检验操作规程 编 码 ASG-SOP-ZL-012-01

制 定 人 审 核 人 批 准 人

制定日期 年 月 日 审核日期 年 月 日 批准日期 年 月 日

颁发部门 质量管理部 生效日期 年 月 日

分发部门 质量管理部、研发部 艾森格生物

—ACEGEM BIOLOGY—

芜湖艾森格生物技术有限公司cGMP管理文件

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1.3.4重金属：照中国药典2015版四部通则重金属检查法检测。

1.3.5灰分：照中国药典2015版四部通则灰分测定法测定。

1.4重金属：铅、镉、汞：照中国药典2015版四部通则铅、镉、砷、汞、铜测定法检测。

1.5微生物限度：按照中国药典2015版四部通则微生物限度检查法进行检测。

1.6农药残留：

1.6.1腐霉利：照美国药典34<561>检测。

1.7含量测定：

1.7.1人参皂苷Rg1、Re、Rf`、Rb1、Rc、Rb2、Rd总量 照高效液相色谱法测定。

1.7.1.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂(柱长250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。

时间（分钟） 流动相A(%) 流动相B(%)

0~30 19 81

30~35 19→24 81→76

35~60 24→40 76→60

1.7.1.2对照品溶液的制备 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf

对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rc 对照品、人参皂苷Rb2 对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg1对照品 250μg、人参皂苷Re对照品250μg、人参皂苷Rf 对照品50μg、人参皂苷Rb1对照品50μg、人参皂苷Rc 对照品60μg、人参皂苷Rb2 对照品70μg和人参皂苷Rd对照品150μg的混合溶

液。

1.7.1.3供试品溶液的制备 取本品20mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇超声使溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，即得。

1.7.1.4测定法 分别精密吸取供试品溶液10~20μl与对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，按下式计算人参皂苷Rg1、Re、Rf`、Rb1、Rc、Rb2、Rd的含量。

1.7.1.5计算结果 本品按干燥品计算，含人参苷皂Rg1、Re、Rf`、Rb1、Rc、Rb2、Rd的总和应不得小于15.0%。

2. 文件变更历史

版本号 变更原因及内容摘要 变更日期 生效日期

题 目 人参根提取物检验操作规程 编 码 ASG-SOP-ZL-012-01 艾森格生物

—ACEGEM BIOLOGY—

人参根提取物总皂苷液相色谱图（数据1--标准品，数据2--样品）

0.05.010.015.020.025.030.035.040.045.050.055.060.065.070.0min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.3uV(x100,000)数据2:低农残人参根提取物20161225-1-1.lcd 检测器A:203nm数据1:人参茎叶总皂苷-std--4.lcd 检测器A:203nm

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人参提取分离实验报告(3篇)

人参提取分离实验报告(3篇)

第1篇

一、实验目的

1. 掌握人参中有效成分的提取方法；

2. 学习并运用微波辅助萃取、超声波辅助提取等现代提取技术；

3. 掌握人参皂苷的分离纯化方法；

4. 了解高效液相色谱法在人参有效成分检测中的应用。

二、实验原理

人参为五加科植物，具有补气、养阴、生津、安神等功效。人参皂苷是人参的主要有效成分，具有增强免疫、抗衰老、抗疲劳、治疗心血管疾病等作用。本实验采用微波辅助萃取和超声波辅助提取方法提取人参皂苷，再利用大孔树脂、硅胶柱层析、反相高效液相色谱等手段进行分离纯化。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：人参粉末、乙醇、水、正丁醇、甲醇、三氯甲烷、硅胶、D101大孔树脂、ODS反相柱等。

2. 实验仪器：微波炉、超声波清洗器、索氏提取器、高效液相色谱仪、紫外检测器、分析天平、离心机等。

四、实验步骤

1. 微波辅助萃取法提取人参皂苷：

（1）取人参粉末10g，加入100ml 55%乙醇溶液，微波处理4分钟；

（2）冷却后，离心分离，取上清液；

（3）重复步骤（1）和（2）两次，合并上清液；

（4）将上清液浓缩至一定体积，待分离纯化。

2. 超声波辅助提取法提取人参皂苷：

（1）取人参粉末10g，加入100ml水，超声处理30分钟；

（2）冷却后，离心分离，取上清液； （3）重复步骤（1）和（2）两次，合并上清液；

（4）将上清液浓缩至一定体积，待分离纯化。

3. 分离纯化：

（1）将微波辅助萃取和超声波辅助提取得到的浓缩液，通过D101大孔树脂柱层析，以正丁醇-水为洗脱剂，收集人参皂苷洗脱液；

（2）将人参皂苷洗脱液通过硅胶柱层析，以甲醇-水为洗脱剂，收集人参皂苷洗脱液；

（3）将人参皂苷洗脱液通过ODS反相柱层析，以甲醇-水为洗脱剂，收集人参皂苷洗脱液；

（4）将人参皂苷洗脱液浓缩干燥，得到人参皂苷粗品。

4. 高效液相色谱法检测：

（1）将人参皂苷粗品溶解于甲醇中，制成样品溶液；

（2）使用高效液相色谱仪，以甲醇-水为流动相，检测人参皂苷含量。

012明胶检验操作规程(2015年版)

012明胶检验操作规程(2015年版)

文件标题 明胶检验操作规程 文件编码 FL-JY/AK-SOP-012

版本号 05

起草人 起草日期 2015 年 月 日

审核人 审核日期 2015 年 月 日

批准人 批准日期 2015 年 月 日

生效日期 2015 年 月 日 页 数 共 12页

1. 主题内容与适用范围

本规程规定了明胶检验操作方法的管理要求。通过实施本规程，确保公司产品质量的规范化。

本规程适用于辅料明胶的进厂检验，该辅料用于固体制剂生产。

2. 引用标准

《药品生产质量管理规范》2010年修订

《中国药典》2015年版二部

企业内控标准。

3. 职责

3.1质量保证部负责对明胶检验操作规程的制定与实施的监督。

3.2质量控制部负责对明胶检验操作规程的实施。

4. 操作标准

4.1 性状：

本品为微黄色至黄色、透明或半透明、微带光泽的薄片或粉粒；无臭；在水中久浸即吸水膨胀并软化，重量可增加5～10倍。

本品在热水或甘油与水的热混合液中溶解，在乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶，在醋酸中溶解。

4.2 鉴别：

4.2.1 取本品约0.5g，加水50ml，加热使溶解后，取溶液5ml，加重铬酸钾试液-稀盐酸（4：1）数滴，即产生橘黄色絮状沉淀。

济宁市安康制药有限责任公司 明胶检验操作规程 第 2 页 共 12 页

起草人

2015年 月 日 审核人

2015年 月 日 批准人

2015年 月 日 生效日期

2015年 月 日

4.2.2 取鉴别（4.2.1）项下剩余的溶液1ml，加水100ml，摇匀，加鞣酸试液数滴，即发生浑浊。

4.2.3 取本品，加钠石灰，加热，即发生氨臭。

4.3 检查

4.3.1 凝冻浓度：

取本品1.10g，置称定重量的锥形瓶中，加水80 ml，在15～18℃放置2小时，使完全膨胀后，置60℃水浴中加热溶解，取出，称重，加水适量使内容物成100g，取10ml，置内径13mm的试管中，在0℃冰浴中冷冻6小时，取出，倒置10秒钟，应不流下。

提取人参皂苷而且检验和在进程的一些注意事项

提取人参皂苷而且检验和在进程的一些注意事项

1.人参皂苷提取

人参为五加科植物人参(Panax ginseng )的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的医治。

人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可取得三种皂甙元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能取得原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解进程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可取得三种单体皂甙元，经重结晶取得纯品，别离与已知皂甙的红外光谱相一致。

2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程

①人参皂甙提取工艺：

人参茎叶粗粉20g

热水提取1小时，粗滤，（棉花）

提取液 药渣

加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤

沉淀物 滤液

浓硫酸调PH7，放置10分钟。

中性提取液

回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用

70％氨性醇洗至绿色。 乙醇洗脱液

回收乙醇

人参总皂甙（黄白色）

a) 人参皂甙元的水解和甙元的分离流程

人参总皂甙

加含5％HCl的50％乙醇液，

加热回流2小时

沉淀 水解液

（酸性皂甙元部份） 加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取

3次（10，5，5ml）

水层 氯仿层

无水NaSO4干燥，

回收氯仿

总皂甙元

少量苯溶解，硅胶柱

层析，用苯－乙酸乙脂

（8：2）洗脱

组分Ⅰ 组分Ⅱ 组分Ⅲ

人参总皂苷

人参总皂苷

人参总皂苷

Renshen Zongzaogan

TOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT

本品为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。

【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60,乙醇洗脱，收集60,乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06,1.08(80?)的清膏，干燥，粉碎，即得。

【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末;微臭，味苦;具吸湿性。

本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚或石油醚中几乎不溶。

【鉴别】(1)取本品0.1g，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。

(2)取本品0.1g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液;另取人参对照药材1g，加水100ml煎煮2小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm，柱高为15cm)，用水洗至无色，弃去水液，再用60,乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rb对照品、人参皂苷Rg对照品与人参皂苷Re11

对照品，加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10?以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10,硫酸乙醇溶液，在105?加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

【检查】 粒度 依法检查(附录? B第二法)，能通过120目筛的粉末不少于95,。

干燥失重 取本品，在105?干燥至恒重，减失重量不得过5.0,(附录?G)。