新生儿溶血病

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Coombs试验阴性与Coombs试验阳性自身免疫性溶

血性贫血的对比分析

卢晟晔

吉林大学

导出/参考文献关注分享收藏打印摘要:本文选择2000年1月1日-2007年12月31日期间于我院确诊为AIHA

遵医嘱规律治疗的初发患者100例为研究对象,根据Coombs试验的结果将其分

为Coombs试验阴性组(22例)与Coombs试验阳性组(78例),两组患者在发

病年龄、性别构成比例上无显著差异。对两组之间相关情况(病因、临床表

现、实验室检查、疾病疗效及其转归)进行回顾性对比研究。统计学方法:两组

之间率及构成比的比较采用卡方检验,均值的比较采用方差齐性检查与t检验。

结论:(1)Coombs试验阴性AIHA在发病年龄方面与Coombs试验阳性AIHA

无明显差别,但在性别方面阴性组较阳性组男性患者比例高

(Χ2=4.89,P<0.05)。(2)阴性组平均红细胞数为(1.98±0.77)×1012/L,平均血

红蛋白浓度为(72.50±20.15)g/L;较阳性组RBC(1.64±0.74)×1012/L,Hb

(60.00±21.37)g/L明显增高;阴性组临床显性黄疸率及间接胆红素升高值均较

阳性组低;两组骨髓代偿增生的能力相同,阳性组较阴性组溶血及贫血程度重。

(3)Coombs试验阴性AIHA中继发性AIHA占50%,排在前三位的病因依次为

感染、药物及自身免疫性疾病;Coombs试验阳性AIHA中,继发性AIHA占

43.50%,排在前三位的病因依次为感染、自身免疫性疾病及药物。药物引起的

AIHA阴性组更为多见,而自身免疫性疾病继发的AIHA阳性组较多见,阳性组与

阴性组间两者构成比的比较具有显著统计学差异。(4)对于Coombs试验阴性

AIHA糖皮质激素治疗的平均起效时间为1天,而阳性组为3天,CR率阴性组明

显高于阳性组,初次应用冲击量激素比率及复发率明显低于阳性组,阴性组疗效及

预后较阳性组好。(5)综合上述结论知:与Coombs试验阳性AIHA比较, Coombs试验阴性AIHA临床症状较轻,多继发于感染、药物所致的一过性机体免疫紊乱,该类型AIHA免疫紊乱时间短,程度轻,对于糖皮质激素治疗反应佳,预后较好。(6)Coombs试验阴性原因为检测手段不够敏感,检测方法有待改进。(7)结合综述,提出Coombs试验阴性AIHA的诊治流程图,见图6。

498例新生儿溶血病血清学检测结果分析

韩斌杜占慧安润冯智慧焦淑贤

新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDN)是指母婴血型不合引起的新生儿同种免疫性溶血,引起胎儿在宫内或出生后大量红细胞破坏,出现溶血性贫血、黄疸及其他多种临床表现的疾病。临床主要表现为胎儿水肿、黄疸、贫血、肝、脾肿大、胆红素脑病等。ABO血型不合的溶血病情较轻,可发生在第一胎婴儿,而Rh血型不合的溶血病情较重,一般不发生在第一胎婴儿。在我国,ABO血型不合者占多数,Rh血型不合者较少,其他MN、Kell血型系统等不合罕见。ABO—HDN约占HDN发病率的 85%,其诊断依据主要借助于实验室检查,通过检测新生儿血液中有无来自于母体的针对性抗A或抗B免疫抗体来确诊[1]。Rh—HDN约占HDN发病率的 14%,其诊断主要通过检测新生儿血液中有无来自母体的针对性的抗D、抗E等免疫抗体来确诊口]。

本研究对2010年5月至2013年12月来自青岛地区多家医院送检的HDN患儿全血标本进行血清学实验分析,旨在为临床早期诊断、治疗HDN提供实验依据。现将研究结果报道如下。

1资料与方法 1.1研究对象选择2010年5月至2013年12月送本血站待检的498份HDN患儿全血样本作为研究对象。样本来源于青岛地区4家三甲医院、3家二甲医院及2家民营医院的HDN患儿。患儿HDN诊断标准符合:足月儿的血清胆红

素>220.6 ttmol/I,,早产儿> 255>mol/I.[3]。患儿全血样本为3~5 mI。,经乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝后,4℃保存,送本血站待检。

1.2方法

1.2.1 主要仪器与试剂离心机(型号:KA2200,日本KUBOTA公司),恒温水浴箱(型号:BM402,德国 NUVE公司)。单克隆抗A、抗B(荷兰Sanquin公司),AB0细胞(上海血液生物医药有限责任公司),抗体筛选细胞(荷兰Sanquin公司),多克隆抗人球蛋白 DOI:10.3760/cma.j.issn.1673—419X.2014.05.01 5 作者单位:266071山东省青岛市中心血站输血医学研究所通信作者:韩斌,Email:

qdhanb@163.com ·短篇论著· (荷兰Sanquin公司),酸放散试剂盒(长春博德生物技术有限责任公司)。所有试剂均在有效期内使用。

1.2.2检测方法取患儿血样3 mI。,于1 000×g离心3 min,分离血浆和红细胞。用生理盐水配制3%~ 5%的患儿红细胞悬液。取1 mI。患儿压积红细胞用生理盐水洗涤3遍,弃去上清液,加入等量生理盐水,置于56℃恒温水浴箱振摇孵育10 rain后,1 000×g 离心1 rain,收集上清液,即得放散液。根据《全国临床检验操作规程》[43采用试管法对患儿红细胞进行 ABO、Rh血型鉴定及直接抗球蛋白试验(direct antiglobulin test,DAT),对患儿血清进行不规则抗体检测及游离试验,对患儿放散液进行释放试验。

1.2.3结果判读试管法以红细胞出现肉眼可见凝集或镜下凝集为阳性,无凝集为阴性。通过DAT、游离试验和释放试验三项试验来判断ABO—HDN,根据《全国l临床检验操作规程》[4]规定,只要释放试验为阳性即可确诊ABO—HDN,具体判定方法如表1所示。通过患儿DAT阳性,患儿血清及放散液中检出Rh系统特异性抗体,即可确诊Rh—HDN。表I DAT、游离试验及释放试验结果判断ABO-HDN 注:+:检测结果为l辋性;一:检测结果呈|5fj性

1.3统计学处理方法本研究数据采用SPSS 11.0统计学软件进行统计学处理。计数资料之间比较采用Y2检验。以P< 0.05示差异有统计学意义。

2 结果

2.1血型鉴定结果本组498例HDN患儿中,471例为ABO—HDN,其中A型患儿为220例,占46.71%;B型患儿为 251例,占53.29%;27例为Rh—HDN。2.2 ABO—HDN新生儿血液标本血型血清学检测结果 471例ABO—HDN送检标本中,最终实验室结果确证ABO—HDN为284例,其中O/A母婴血型为万方数据国际输血及血液学杂志2014年9月第37卷第5期 138例,占48.59%;O/B母婴血型为146例,占 51.41%。具体血清学检测结果,如表2所示。284例确证ABO—HDN患儿中,A型和B型血型例数比较,差异无统计学意义(X2—1.018,

P>O.05)。表2 471例ABO-HDN新生儿血液标本血型血清学检测结果(例)

2.3 284例ABO-HDN确证患儿血型血清学检测结果分布 284例ABO—HDN确证患儿中,DAT、游离试验和释放试验3项试验结果均呈阳性为158例,占 55.63%;DAT和释放试验2项试验结果呈阳性为 15例,占5.28%;游离试验和释放试验2项试验结果呈阳性为69例,占24.30%;仅释放试验一项试验结果呈阳性为42例,占14.79%。 2.4 27例Rh-HDN患儿血型血清学检测结果 27例Rh—HDN患儿的血型血清学检测结果显示,检出抗D为18例,抗D、E为2例,抗E为4例,抗 c2为例,抗E、C为1例。

3讨论母婴血型不合的HDN是由于母体血液中存在针对胎儿红细胞的IgG抗体,通过胎盘进入胎儿血液循环,使红细胞被致敏,产生同种免疫而引发溶血,进而出现黄