应用气相色谱测定瘤胃挥发性脂肪酸方法的研究改进

脂肪酸的检测方法
脂肪酸的检测方法主要有以下几种：
1. 毛细管气相色谱法（Capillary gas chromatography，CGC）：通过气相色谱仪分离和定量脂肪酸。

首先脂肪酸样品被甲醇和硫酸甲酯化，生成甲酯化产物。

然后将甲酯化产物通过气相色谱柱分离，并通过检测器进行定量测量。

2. 高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography，HPLC）：先将脂肪酸样品经过酯化反应，生成酯化产物。

然后将酯化产物通过高效液相色谱柱进行分离，并通过紫外检测器或荧光检测器进行定量。

3. 核磁共振（Nuclear magnetic resonance，NMR）：利用核磁共振技术对脂肪酸样品进行分析。

通过分析样品中的脂肪酸的质谱图谱、化学位移和峰面积等信息，可以定量和鉴定脂肪酸。

4. 质谱法（mass spectrometry，MS）：将脂肪酸样品经过适当的前处理后，通过质谱仪进行分析。

质谱仪可以测定样品中脂肪酸的分子量、分子结构和相对丰度等信息。

以上列举的方法只是脂肪酸检测的常见方法，实际上还有其他一些方法，如红外光谱法、荧光光谱法等。

在实际应用中，选择合适的检测方法取决于需要分析的
样品类型、所需的分析精度和设备条件等因素。

气相色谱法测定食品中反式脂肪酸含量的研究摘要：目的：研究利用气相色谱法测定食品中反式脂肪酸含量的效果。

方法：随机选取市场中几种不同食用油进行气相色谱法试验，测定其中反式脂肪酸含量。

结果：在规定的色谱条件下，检测的反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯的线性回归范围相同，均在0~2.0mg/mL之间，且两者的相关系数和检出限也相同，分别为0.999和10μg/mL，回收率为90.21~98.01。

结论：利用气相色谱法测定食品中反式脂肪酸含量能得到准确有效的试验数据，且检测简便易行，值得临床上广泛应用。

关键词：气相色谱法测定；油脂食品；反式脂肪酸含量脂肪酸是食品中重要的组成成分之一，根据其空间结构的不同，可将其分为顺式脂肪酸和反式脂肪酸[1]，食品中含量过多会对人体造成严重伤害。

本研究利用气相色谱法对市场上几种不同食用油进行检测，测定其中反式脂肪酸含量，现报道如下：1 材料和方法1.1 准备所需的仪器设备准备PerkinElmer气相色谱仪（由美国PE公司生产）、FA2004分析天平（由上海精科天平仪器公司生产）、DK-8D电热水浴锅（由上海精密设备公司生产）、Milli-Q水处理系统（由美国Millipore公司生产）。

1.2 准备所需的试剂样品试剂主要有：市场上现购的几种不同食用油，分析纯的正己烷溶剂、氢氧化钾溶液、甲醇钠及甲醇、浓硫酸溶液，由武汉美泰公司生产的反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯标准品。

1.3 操作方法1.3.1 对样品进行甲酯化处理取100毫克样品放入试管中并向其中加入正己烷溶剂2毫升，进行震荡使其充分溶解，再向其中加入氢氧化钾-甲醇溶液2毫升，浓度为2摩尔/毫升，继续震荡至少5分钟后静置。

半小时后取上清液并用气相色谱仪对其进行分析。

1.3.2 规定的色谱条件色谱柱型号为DB-23（30m×0.25mm×0.25μm）。

进样口和检测器温度均为250℃。

色谱柱需程序升温，初始温度为140℃并保持2分钟后，以每分钟2℃的速度升温至220℃并保持3分钟。

图1 37种脂肪酸甲酯混标气相色谱图图2 15种反式脂肪酸甲酯混标气相色谱图
Feb. 2019 CHINA FOOD SAFETY
图3 花生油样品反式脂肪酸检测结果
图4 芝士蛋糕样品反式脂肪酸检测结果
3　结论
气相色谱法在实际的食品反式脂
肪酸的检验中应用效果较强，有关检测人员应不断加强样品的制备及检测后
的结果分析能力，逐步提升检测质量及
水平，为人民的食品安全提供保障。

参考文献
[1]臧成远.气相色谱检测食品中反式脂肪酸的方法分析[J].食品安全导刊,2018(21):68,70.
作者简介：余建华（1982—），男，广东佛山人，硕士研究生，研究方向：食品检测。

瘤胃体外发酵方法绞股蓝皂甙对山羊瘤胃菌群及微生物发酵特性和甲烷产量的影响_王新峰1.2瘤胃液的采集和培养基制备瘤胃液来自4头装有永久性瘤胃屡管的波尔山羊与本地山羊的杂交成年公山羊,日粮以羊草为主,每日补饲1509精料(精料组成,玉米:豆粕=2:1),自由饮用清洁水。

于晨饲前采集瘤胃液,用4层纱布过滤,与培养基按1:2混合,在39℃培养箱中培养30分钟,并充分通入CO2,进行厌氧分装,每瓶60mL。

每升培养基中含有15.71mg CaCl2·2H2O,11.90mg MnCl2·4H2O, 1.19mg CoCl2·6H2O, 9.52mg Fe Cl3·6H2O, 0.143g MgSO4·7H2O, 76.2mgNaOH, 0.95gNH4HCO3, 8.33g NaHCO3, l.36g Na2HPO4, 1.48g KH2PO4, 2.98g Na2S·9H2O和0.298g盐酸半肌胺(Menke等,1979)1.3试验设计试验根据绞股蓝皂试添加量(0、5、10、20和40 mL /60mL)分为5组,对照组不加皂试,实验组分别加入5,10,20和40mg皂试。

取60mL瘤胃液与培养基混合液(瘤胃液:培养基二1:2)分装于160mL的发酵瓶中,每瓶含0.69底物"底物由精料和粗饲料组成(3:7),精料为玉米和豆粕,分别为0.126和0.054g,粗饲料为0.42g羊草草粉(过1mm筛)。

发酵瓶封盖!气压平衡后置于39℃培养箱中培养,并定时摇匀,培养24h。

第二次发酵培养120h,分别在0,1,2,4,6,8,12,24, 48,72,96,120h, 计算出累积产气量;测定120h后干物质消失率。

1.4指标测定1.4.1产气量的测定根据Theodorou等(1994)的方法,使用气压转换器(IGER,UK)定时测定厌氧瘤胃微生物发酵产气量。

毛细管气相色谱法测试瘤胃液ＶＦＡ可行性的研究刘立成曹秀青刘大森摘要以羊瘤胃液为样品，选择极性FFAP 毛细管柱，利用气相色谱外标法测定瘤胃液中VFA的含量。

结果表明，程序升温初始柱温110℃，升温速率为10℃/min 至150℃保持5min ，可以有效的分离乙酸、丙酸和正丁酸，重复性好，平行样间偏差低于3%，测试快速准确，是测定反刍动物瘤胃VFA 较为理想的方法。

关键词瘤胃液；VFA ；气相色谱；毛细管柱中图分类号S816.17刘立成，东北农业大学动物科技学院，博士，150030，黑龙江哈尔滨。

曹秀青、刘大森(通讯作者)，单位及通讯地址同第一作者。

收稿日期：2008-08-11挥发性脂肪酸（VFA ）是碳水化合物在瘤胃内经多种微生物发酵的主要产物，它提供的能量几乎占反刍动物所吸收利用的营养物质总能的2/3[1]，因此,VFA 的测定对研究反刍动物瘤胃发酵具有重要意义。

目前对瘤胃VFA 的测定主要采用气相色谱法[2-3]，色谱柱大多选择经济耐用的填充柱。

而对于毛细管柱测试VFA 的说法不一，马蕙等[4]认为，用毛细管柱不能将发酵液中的乙酸和丙酸分离开，且毛细管色谱柱不能进含水样品；而曹庆云等[5]认为，毛细管气相色谱法测试瘤胃液中VFA 是可行有效的方法。

因此，笔者利用气相色谱仪结合程序升温条件来探讨毛细管柱测试瘤胃液中VFA 含量的可行性。

1材料与方法1.1试剂乙酸、丙酸和正丁酸（色谱纯）均为购于Sigma 公司，偏磷酸为分析纯。

1.2试验仪器日本岛津GC-2010气相色谱仪;AT.FFAP 毛细管柱(30m ×0.32mm ×0.5m);氢火焰离子化检测器(FID),并配有空气压缩机；氢气和氮气（高纯氮99.999%）；低温高速离心机；0.22μm 水系滤膜；10μl 微量进样器。

1.3试验方法1.3.1标准品的制备准确量取330μl 乙酸、400μl 丙酸和160μl 正丁酸置于100ml 容量瓶中,蒸馏水定容至刻度,即乙酸浓度为57.65mmol/l (3.46g/l)、丙酸浓度为53.63mmol/l(3.97g/l)和正丁酸浓度为17.45mmol/l （1.53g/l ）的混合标准溶液。

食品中脂肪酸的测定
食品中脂肪酸的测定通常采用气相色谱法。

以下是详细的测定步骤：
1.样品前处理：将食品粉碎，称取一定量的样品置于碘量瓶中，加入适量
的石油醚，加塞振摇几秒钟，打开塞子放气。

盖紧瓶塞，将碘量瓶置于
振荡器上震荡10分钟。

取下锥形瓶，倾斜静置1-2分钟，注意不要打开塞子。

然后过滤，收集滤液备用。

2.测定条件：使用气相色谱仪进行测定，色谱柱一般选择极性柱，如聚乙
二醇20M等。

检测器一般选择氢火焰离子化检测器（FID）。

载气选择氮气或氦气，流速一般控制在1-2ml/min。

进样口温度和检测器温度根据
具体的脂肪酸种类和仪器性能来设置。

3.标样准备：选择合适的脂肪酸标样，用正己烷或氯仿配制成适当浓度的
标样溶液。

4.样品测定：将样品滤液和标样溶液分别进样，通过气相色谱仪进行分
析。

记录各脂肪酸的保留时间和峰面积。

5.计算：根据样品峰面积和标样峰面积的比值，计算样品中各脂肪酸的含
量。

需要注意的是，食品中脂肪酸的测定受到多种因素的影响，如样品前处理的效率、色谱柱的选择、检测器的灵敏度等。

因此，在进行测定时，需要选择合适的实验条件和方法，以保证结果的准确性和可靠性。

同时，还需要注意实验操作的安全性，如避免石油醚等有机溶剂的挥发和泄漏等。

油和脂肪中的〔挥发性〕酸化学分析方法挥发性酸（volatile fatty acids, VFAs）是一类在油和脂肪中常见的有机酸，由于其具有较强的气味和对产品品质的影响，因此在食品和化妆品行业中，对挥发性酸的含量进行分析具有重要的意义。

下面将介绍两种常用的化学分析方法：蒸馏法和气相色谱法。

一、蒸馏法蒸馏法是一种常用的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品加入适量的蒸馏水，并用酸或碱调整样品的pH值，以确保挥发性酸被完全释放。

2.将样品放入蒸馏器中，并通过加热使样品蒸发。

3.蒸发的挥发性酸进入冷凝管，在凝结器中冷却成液体。

4.收集液体样品，并用适当的溶剂稀释和调整pH值。

5.采用酸碱滴定或色谱等方法对挥发性酸进行定量分析。

蒸馏法的优点是简单、容易操作，但存在一定的局限性，如需要大量的试剂和设备，无法同时分析多种酸，对挥发性酸的分析结果具有一定的误差。

二、气相色谱法气相色谱法是目前应用较广泛的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品溶解在适当的溶剂中。

2.通过冷冻离心分离样品中的固体和杂质。

3.将清澈的样品溶液注入气相色谱仪中。

4.在气相色谱仪中，样品被注入进入进样口，进入色谱柱进行分离。

5.经过分离的挥发性酸进入检测器进行检测，并根据检测结果进行定量分析。

气相色谱法具有高灵敏度、高分辨率和高精确度的特点，能够同时分析多种酸，且分析结果可靠。

但气相色谱法的设备和试剂成本较高，对操作人员的技术要求也较高。

总之，通过蒸馏法和气相色谱法可以对油和脂肪中的挥发性酸进行分析。

选择何种方法需要考虑实际需求、分析目的和实验条件等。

食品中37种脂肪酸的快速分析方法研究王 迪，张添菊，余恒琳，祝晨辰，朱毛毛，徐 宁（南京市产品质量监督检验院（南京市质量发展与先进技术应用研究院），江苏南京 210019）摘 要：目的：为提高食品中脂肪酸的分析效率，建立了一种采用气相色谱法测定食品中37种脂肪酸含量的快速分析方法。

方法：采用Agilent J&W DB-FastFAME毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm），进样器温度250 ℃，检测器温度260 ℃，程序升温（初始温度80 ℃，持续0.5 min，40 ℃·min-1升至165 ℃，保持1 min；4 ℃·min-1升至230 ℃，保持4 min），分流比100∶1，进样体积1.0 μL。

通过面积归一化法计算食品中37种脂肪酸甲酯的含量。

结果：37种脂肪酸甲酯在23 min内均可有效分离，加标回收率为85.0%～106.2%，精密度和稳定性均良好。

与GB 5009.6—2016第三法无明显差异，且分析时间较GB 5009.6—2016第三法（82.5 min）缩短了约71%，大大提高了脂肪酸的分析效率。

结论：该方法精密度高、快速、准确，能满足食品中多种脂肪酸含量的测定。

关键词：气相色谱；脂肪酸；快速分析；食品Research on Rapid Analysis Methods for 37 Fatty Acids inFoodWANG Di, ZHANG Tianju, YU Henglin, ZHU Chenchen, ZHU Maomao, XU Ning(Nanjing Institute of Product Quality Inspection (Nanjing Institute of Quality Development and Advanced TechnologyApplication), Nanjing 210019, China)Abstract: Objective: To improve the analysis eff iciency of fatty acids in food, a rapid analysis method using gas chromatography was established to determine the content of 37 fatty acids in food. Method: Agilent J&W DB- FastFAME capillary column (30 m×0.25 mm, 0.25 μm) was used. Sample injector temperature of 250 ℃, detector temperature of 260 ℃, programmed heating (initial temperature of 80 ℃ for 0.5 min, 40 ℃·min-1 to 165 ℃ for 1 min, 4 ℃·min-1 to 230 ℃ for 4 min), split ratio of 100∶1, injection volume of 1.0 μL. Calculate the content of 37 fatty acid methyl esters in food using area normalization method. Result: 37 types of fatty acid methyl esters can be effectively separated within 23 minutes, with a recovery rate of 85.0% to 106.2%, and good precision and stability. There is no significant difference compared to the third method of GB 5009.6—2016, and the analysis time is shortened by 71% compared to the third method of GB 5009.6—2016 (82.5 min), greatly improving the efficiency of fatty acid analysis. Conclusion: This method has high precision, speed, and accuracy, and can meet the determination of various fatty acid contents in food.Keywords: gas chromatography; fatty acids; rapid determination; food脂肪酸是由碳、氢、氧3种元素组成的一类有机化合物，一端含有一个羧基结构。

气相色谱及质谱联用法测定挥发性有机酸1范围本标准规定了烟草及烟草制品中挥发性有机酸[包括甲酸(Formic acid)、乙酸(Acetic acid)、丙酸(Propanoic acid)、异丁酸(Isobutyric acid)、丁酸(Butyric acid)、异戊酸(Isovaleric acid)、戊酸(Valeric acid)、3-甲基戊酸(3-Methylvaleric acid)、4-甲基戊酸(4-Methylvaleric acid)、己酸(Hexanoic acid)、庚酸(Heptanoic acid)、辛酸(Octanoic acid)、壬酸(Nonanoic acid)、癸酸(Decatoic acid)]的气相色谱－质谱联用测定方法。

本标准适用于烟草及烟草制品中挥发性有机酸（甲酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、3-甲基戊酸、4-甲基戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸）的测定。

本标准测定烟草及烟草制品中挥发性有机酸的检出限和定量限见附录A中表A.1。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

YC/T 31 烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3原理用丙酮萃取试样中的挥发性有机酸，气相色谱/质谱联用-选择离子监测法测定，内标法定量。

4试剂与材料除特别要求以外，均应使用色谱纯级试剂。

4.1 丙酮。

4.2 甲酸，纯度应不低于98%。

4.3 乙酸，纯度应不低于98%。

4.4 丙酸，纯度应不低于98%。

4.5 异丁酸，纯度应不低于98%。

4.6 丁酸，纯度应不低于98%。

4.7 异戊酸，纯度应不低于98%。

4.8 戊酸，纯度应不低于98%。

4.9 3-甲基戊酸，纯度应不低于98%。

4.104-甲基戊酸，纯度应不低于98%。

4.11 己酸，纯度应不低于98%。