氧化酶法肌酐测定的检测方法改良
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血清肌酐CREA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理肌酸酶肌酐+ H2 O 肌酸肌酸酶肌酐+ H2 O 肌氨酸+尿素肌氨酸氧化酶肌氨酸+O2+ H2 O 甘氨酸+甲醛+H2 O2过氧化物酶4-AAP+TOOS+ H2 O2 醌亚胺色素注:TOOS:为N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺;4-AAP:为4-氨基安替比林在上述反应中,醌亚胺色素的生成量与样本中的肌酐浓度成正比,通过在波长550nm处测定吸光度的变化值,即可测得样本中肌酐的浓度。
3 标本采集3.1 病人准备:早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
3.2 类型:血清,肝素血浆,尿液。
3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存至少可稳定3个月。
尿液的稳定性:20~25℃保存可稳定2天;4~8℃保存可稳定6天;-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测,结果乘50后报告。
3.4 标本运输常温条件下运输3.5 标本拒收的标准:细菌污染的标本不能作测定。
4 实验材料4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司CREA试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成:肌酸酶≥40KU/L 试剂1(R1)TOOS0.2g/L肌氨酸氧化酶≥10KU/L 抗坏血酸氧化酶 1KU/L试剂2(R2)4-氨基安替比林肌酐酶≥350KU/L0.2g/L过氧化物酶 2KU/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
试剂1与试剂2启用后,在2~10℃避光的条件下可稳定30天。
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.1.5 注意事项:试剂中含有防腐剂叠氮化钠,可能存在一定的刺激作用,请勿直接接触皮肤、眼睛。
℃肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)综述资料******生物医疗科技有限公司目录1 产品预期用途 (3)1.1预期用途 (3)1.2临床适应症背景情况 (3)1.2.1 相关的临床或实验室诊断方法及产品现状等 (3)1.2.2 国内外已批准上市的同品种试剂盒情况 (4)2 产品描述 (4)2.1试剂盒测定原理 (4)2.2试剂盒产品的组成 (5)2.3主要参数与试验方法 (6)2.3.1 主要参数 (6)2.3.2 测试过程 (6)2.4主要原材料的来源及制备方法 (6)2.4.1 主要成分 (6)2.4.2 主要原材料的来源 (7)2.5主要生产工艺过程 (7)3 有关生物安全性的说明: (7)4 产品主要研究结果的总结和评价 (7)4.1主要研究结果的总结 (7)4.2分析性能评价 (8)4.3稳定性评价 (9)4.3.1 稳定性验证分为实时稳定性(效期稳定性)、运输稳定性、机载稳定性。
(9)4.3.2 合格标准见下表 (9)4.4参考区间 (10)4.4.1 血清肌酐样本参考区间 (10)4.4.2 尿液肌酐样本参考区间 (10)4.5临床评价 (10)4.5.1 原理、组成对比结果见下表 (10)4.5.2 储存条件及有效期对比结果见下表 (11)4.5.3 预期用途、适用样本对比结果见下表 (11)4.5.4 性能指标对比见下表 (11)4.5.5 离群值的剔除 (11)4.5.6 线性回归分析与相关性 (11)4.5.7 Bland-Altman 图分析 (12)4.5.7.1 血清样本Bland-Altman分析结果 (12)4.5.7.2 尿液样本Bland-Altman分析结果 (12)4.5.8 检测结果一致性分析 (12)4.5.9 医学决定水平处偏倚 (12)4.6校准品的量值溯源与性能评价 (12)附录1 (14)肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)综述资料1 产品预期用途1.1 预期用途用于定量检测人血清或尿液中肌酐的浓度。
肌酐酶法测定的两点法摘要】建立了实用的肌酐酶法测定方法,通过实验将比色测定终点法改为两点法,使其适合自动分析,并节省工具酶。
本法的线性为0~2749 Μmmol/L,精密度:手工操作,批内CV<3%,总CV<5%。
三种分析仪的批内CV在0.34%~1.44%间,回收率99.66%~100.9%。
本法(Y)和BM的试剂(X)比较:Y=0.973X+10.33Μmol/L,r=0.9995。
【关键词】肌酐酶法两点法【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752(2013)35-0355-02酶法测定肌酐目前已报告的有四条途径[1~5],其中三种为紫外测定,一种为比色测定。
相比之下比色测定具有更多优越性,商品试剂盒多采用此法。
但Fossati原法[1,2]的反应时间较长,且要做一血清空白以除去血清中肌酸的干扰,因此不适合自动分析。
自动分析一般总反应时间为10分钟,为了除去肌酸的干扰必须采用两步法,反应要求5分钟内达到终点。
据我们实验,必须将几种工具酶的用量增加到Fossati原法的5~10倍。
在实验过程中我们还发现几种工具酶的水解速率均较缓慢,反应的线性时间较长,因此将其改成两点法或速率法测定,取得很好的结果。
1 原理第一步反应:排除肌酸干扰;第二步反应:测定肌酐;肌酸反应同第一步。
2 材料和方法2.1仪器自动分析仪HITACHI 7170,Beckman Synchron △CX5和Ciba Coring Express Plus。
分光光度计Beckman DU-640。
2.2原料试剂肌酐酰氨基水解酶(Cretininase,CRNase);肌酸脒基水解酶(Creatininase,CRTase);肌氨酸氧化酶(SO);棘根过氧化物酶(POD),抗坏血酸氧化酶(ASO),均为Boehringer Mannheim公司产品。
3,5-二氯-2-羟-苯磺酸(DHBA),4-氨基安替比林(4-AAP)和肌酐为Sigma公司产品。
羟苯磺酸钙对干化学和湿化学酶法检测肌酐的干扰分析摘要】目的:分析羟苯磺酸钙对BECKMAN AU5800生化分析仪和强生VITROS 5600干化学分析仪酶法检测肌酐的干扰及干扰程度。
方法:参照CLSIEP7-A2文件进行体外干扰试验,分别对使用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐的两个不同仪器系统的不同肌酐浓度血清进行配对差异干扰试验、剂量效应试验,来确定羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法检测肌酐的干扰。
结果:BECKMAN AU5800低浓度样本(70.3μmol/L)受干扰严重。
高浓度样本(大于305.1μmol/L)在低剂量下(2.5μg/ml)干扰不明显。
结论:数据表明,羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法存在负干扰,但不同仪器系统对药物的抗干扰性能不尽相同,传统湿化学受药物干扰明显,干化学受干扰的程度相对较低。
【关键词】羟苯磺酸钙;肌酐;干化学法【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2019)31-0244-021.资料与方法1.1 标本来源收集无溶血、黄疸和脂血的病人及健康体检者的新鲜血清制作成5种不同肌酐浓度的混合血清样本。
1.2 干扰物羟苯磺酸钙胶囊厂家为上海朝晖药业有限公司,包装规格为10粒/板/盒,每粒含羟苯磺酸钙0.5g(按C12H10CaO10S2计)。
1.3 仪器试剂仪器使用Beckman Coulter的AU5831生化分析仪,试剂为配套的Beckman Coulter公司肌氨酸氧化酶法试剂,货号OSR61204,规格为4×45mL R1,4×15mL R2。
干化学使用仪器为强生Ortho-Clinica Diagnostics VITROS 5600生化分析仪(以下简称强生V5600),试剂使用配套的试剂(300测试/盒)。
校准品使用配套校准品,Beckman Coulter质控是原厂质控,强生V5600使用第三方朗道质控。
待测样本配制:根据羟苯磺酸钙药物特性,峰值浓度一般为8~15μg/ml[2],因此配制时应包含该浓度范围。
肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中肌酐(CRE)的含量。
1.1包装规格序号规格1 试剂1:1×45ml;试剂2:1×15ml;校准品:1×3ml。
2 试剂1:2×60ml;试剂2:2×20ml;校准品:1×3ml。
3 试剂1:4×60ml;试剂2:4×20ml;校准品:1×3ml。
4 试剂1:5×60ml;试剂2:5×20ml;校准品:1×3ml。
5 试剂1:6×60ml;试剂2:6×20ml;校准品:1×3ml。
6 试剂1:5×18ml;试剂2:5×6ml;校准品:1×3ml。
7 试剂1:15L;试剂2:5L。
1.2主要组成成分本试剂由试剂1(R1)、试剂2(R2)和校准品(STD)组成试剂1(R1):N, N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐(TODB) 2.49g/L、肌酸酶0.3ku/L、肌氨酸氧化酶 0.1ku/L试剂2(R2): 4-氨基安替比林 0.46g/L、叠氮钠 1.0g/L、肌酐酶 0.5ku/L、过氧化物酶 0.16ku/L校准品:肌酐(基质:水溶液:浓度:176.8umol/L)2.1 外观试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;R1为淡黄色透明液体,R2为无色至淡黄色液体,校准品为无色透明液体。
液体试剂不得有沉淀和絮状物。
2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。
2.3 空白吸光度以生理盐水为样品,在37℃、546nm波长、1cm光径条件下,吸光度≤0.25。
2.4 分析灵敏度浓度为100μmol/L的样本,吸光度差值△A>0.01。
2.5 准确性相对偏差应不大于10%。
2.6 重复性用不同浓度的两个样本进行检测,各重复检测10次,其批内变异系数(CV)应不超过5%。
肌酐酶促动力干化学法肌酐酶促动力干化学法是一种新型的生物化学检测方法,主要用于测定血液或尿液中肌酐的浓度。
以下是该方法的主要步骤:1.样本采集采集血液或尿液样本时,需要注意以下几点:首先,血液样本一般采用静脉采血,采集足够量的血液,以保证样本的质量和代表性;其次,尿液样本应取中段尿,避免前段尿和后段尿的干扰;最后,采集的样本应尽快进行预处理或保存,以防止样本变质或污染。
2.离心分离离心分离是一种常用的生物化学分离技术,通过将血液中的不同成分进行离心分离,可以得到更纯的样本。
在肌酐酶促动力干化学法中,血液样本需要进行离心分离以去除红细胞、白细胞、血小板等成分,从而获得更为纯净的血清或血浆样本。
3.移液测定移液测定是肌酐酶促动力干化学法的核心步骤之一,通过使用移液器准确取出一定量的液体,然后加入特定的试剂进行反应。
在此过程中,需要掌握正确的移液方法,避免污染和挥发等问题。
4.混匀反应混匀反应是将样本中的各种成分进行充分混匀,以确保反应的准确性和均一性。
在肌酐酶促动力干化学法中,需要将血清或血浆样本与特定的试剂混合均匀,以保证反应的完全性。
5.静置等待静置等待是让液体中的各种成分充分反应而析出特定物质的过程。
在肌酐酶促动力干化学法中,需要将反应液静置一定时间,让肌酐与特定酶充分反应而产生颜色变化或沉淀物。
6.分析结果分析结果是根据观察反应液的颜色、沉淀物、透明度等情况,从而判断反应是否成功以及相关物质是否析出。
在肌酐酶促动力干化学法中,可以通过观察反应液的颜色变化或是否有沉淀物来判断肌酐的浓度。
7.数据处理数据处理是利用数学公式和图表等方式对实验数据进行处理、分析和解释,从而得出可靠的结论。
在肌酐酶促动力干化学法中,可以通过计算反应液的颜色变化或沉淀物的量来计算肌酐的浓度,从而得出相关结论。
评价胆红素对肌氨酸氧化酶法测定肌酐的干扰张淑华;王华新;李云凤;赵宝鹤;张吉奎;杨亚轩;高文育;徐福海;郑福和;于水江【摘要】目的评价胆红素对肌氨酸氧化酶法测定肌酐(Cr)的干扰.方法随机选择国内威高、长征、九强、生之源、基蛋、利德曼6种肌氨酸氧化酶法Cr试剂盒,按照美国临床实验室标准化协会EP 7-A2文件中“配对差异”和“剂量效应”方案,在正常和高值Cr血清中添加不同浓度结合胆红素(CBIL)和游离胆红素(FBIL)干扰物,进行干扰评价试验.结果 CBIL和FBIL对肌氨酸氧化酶法测定Cr存在不同程度的干扰.Cr正常水平,CBIL和FBIL≥120 μmol/L时对威高、基蛋Cr试剂产生明显干扰,CBIL≥621 μmol/L或FBIL≥481 μmol/L时对九强、生之源、长征Cr试剂产生干扰;Cr高值水平,CBIL或FBIL≥120μmol/L时对威高Cr试剂产生干扰,CBIL≥962μmol/L或FBIL≥1083 μmol/L时对长征Cr试剂产生干扰.干扰所产生的相对偏倚差异显著,CBIL较比FBIL干扰作用更加明显.“剂量效应”结果显示,胆红素对Cr测定产生负干扰并呈线性关系.结论国内肌氨酸氧化酶法测定Cr试剂抗胆红素干扰能力不同,胆红素对Cr测定产生负干扰并呈线性关系.临床实验室在应用肌氨酸氧化酶法测定Cr时应进行胆红素干扰试验验证.%Objective To investigate the interference and result bias of bilirubin by Sarcosine oxidase method in determination of creatinine.Methods To evaluate the anti-interference ability,we randomly selected 6 kinds of Sarcosine oxidase method for the determination of creatinine(WEIGAO,CHANGZHENG,SHENGZHIYUAN,JIUQIANG,JIDAN,LIDEMAN).Acc ording to the "paired difference" and "doseresponse" documents from Clinical and Laboratory Standards Institute NCCLS EP7-A2,the interference tests were conducted by adding different concentrations of conjugatedbilirubin (CBIL) and freed bilirubin (FBIL) to normal and high levels creatinine in serum.Results The CBIL and FBIL had different degrees of interference to the determination of creatinine,but the anti-interference ability of the reagents was different.At normal creatinine level,WEIGAO or JIDAN revealed interference when CBIL and FBIL ≥ 120μmol/L.When CBIL ≥621 μmol/L or FBIL≥481 μmol/L,JIUQIANG,SHENGZHIYUAN and CHANGZHENG revealed interference.At high creatinine levels,WEIGAO also demonstrated interference with CBIL or FBIL ≥ 120μ mol/L,CHANGZHENG with ≥962 μmol/L CBIL and CHANGZHENG with ≥ 1083 μmol/L FBIL respectively.The relative bias caused by interference was significantly different.The CBIL interference effect was more obvious than the FBIL.The results of "dose-response" showed that there was a negative interference in the determination of serum creatinine with bilirubin,and there was a linear function relationship.Conclusion The interference ability of anti bilirubin interference in the determination of creatinine reagent was different,and there was a negative interference in the determination of serum creatinine with bilirubin and there was a linear function with them.Clinical laboratories should always conduct validation of bilirubin interference for the determination of creatinine by sarcosine oxidase method.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2016(023)012【总页数】5页(P1473-1477)【关键词】肌氨酸氧化酶法;肌酐;胆红素干扰;干扰试验【作者】张淑华;王华新;李云凤;赵宝鹤;张吉奎;杨亚轩;高文育;徐福海;郑福和;于水江【作者单位】黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;唐山市丰润区疾控中心,河北唐山063000;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100;黄骅开发区博爱医院,河北黄骅061100【正文语种】中文肌酐(creatinine,Cr)是人体肌肉组织中肌酸及磷酸肌酸代谢终产物,血液中Cr水平受饮食中摄取的外源性 Cr及人体内产生的内源性 Cr的影响,正常成人Cr 生成速率基本稳定,血 Cr及尿 Cr测定广泛应用于评估肾小球滤过功能。
医疗器械生产企业许可证编号:沪药管械生产许20030955号医疗器械注册证注册号:沪食药监械(准)字2005第2400962号产品标准号:YZB/沪0761-40-2005肌酐测定试剂盒(酶法)使用说明书【用途】本试剂用于人血清、血浆或尿中肌酐含量的测定。
【原理】肌酐+H2O肌酐胺基水解酶肌酸;肌酸+H2O+O2肌酸脒基水解酶肌氨酸+尿素肌氨酸+ H2O+O2肌氨酸氧化酶甘氨酸+HCHO+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+2.4-DCP过氧化物酶醌亚胺+4H2O【试剂规格】规格1 规格2R1 3×60ml 2×60mlR2 3×20ml 2×20ml【试剂成份】R1:肌酸脒基水解酶 80KU/L;肌氨酸氧化酶 25KU/L;抗坏血酸氧化酶10KU/L;过氧化氢酶10KU/L;2,4-DCP 2.2mmol/L。
R2:肌酐胺基水解酶280KU/L;4-AAP 5mmol/l;过氧化物酶40KU/L。
【样本】无溶血的血清,肝素抗凝的血浆。
样本于2-8℃保存可稳定7天。
试验前将新鲜尿液用蒸馏水作1/21稀释,测定结果乘以21。
【实验参数】反应温度 37℃比色杯光径1cm主波长546nm 副波长660nm测定方法两点法样本量6µlR1 180µl R2 60µl 延迟时间 300秒测定时间 300秒【测试程序】A1A2主波长546nm37℃样本6ul 5分钟10分钟R1:180µl R2:60µl【计算】测定吸光度(A2-A1)× 校准液浓度肌酐(µmol/L) =校准吸光度(A2-A1)【参考范围】男性:70-115µmol/L;女性:44-80μmol/L,上值仅供参考,各实验室须建立本室.的参考值。
【注意事项】1. 样品请使用血清、血浆或尿(尿液作21倍稀释,测定结果须乘以稀释倍数);2. 高球蛋白标本在加入第一试剂后,产生浑浊可影响测定结果;3. 试剂与样本量根据生化分析仪要求可以按比例改变。
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不同的检测方法对测定血清肌酐结果的比较作者:阎正才张成山
来源:《中外医学研究》2012年第05期
【摘要】目的了解两种方法检测结果的差异性及性能指标。
方法用碱性苦味酸动力学法(Jaffe法)和肌氨酸氧化酶法(酶联法)对相同的人群测定血清肌酐。
结果对用不同的检测
方法测定血清肌酐结果的偏倚评估。
结论两种检测方法具有相关性,但存在一定的偏倚。
酶联法较Jaffe法在线性范围、抗干扰能力等性能方面具有显著优势。
【关键词】肌氨酸氧化酶法;苦味酸动力学法;偏倚。
1 性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37℃±1℃,510 nm 波长条件下,吸光度应小于0.4 A。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂以水为空白在37℃±1℃,510 nm 波长条件下,吸光度变化率应小于0.007 A/min。
2.4分析灵敏度
当样本浓度为150 µmol/L 时,吸光度变化率应不小于0.016 A/min。
2.5线性范围
试剂盒在(9.0~2420)µmol/L 范围内:
a)线性相关系数r 应不小于0.9900;
b)当样本浓度不大于450 µmol/L 时,线性绝对偏差应不大于±45.0 µmol/L;当样本浓度大于450 µmol/L 时,线性相对偏差应不大于±10.0%。
2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数:CV 应不大于 3.0%。
2.6.2批间差
相对偏差:R 应不大于 4.0%。
2.7准确度
测定校准品,测定结果与靶值的相对偏差应不大于±10.0%。
2.8分析特异性
血红蛋白浓度在500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在500 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内,对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。
2.9校准品均一性
试剂盒校准品的均一性:CV 应不大于 3.0%。
1。
肌氨酸氧化酶法测定健康成人血清肌酐参考值的建立
武强;王龙武;申春梅
【期刊名称】《检验医学》
【年(卷),期】2009(024)001
【摘要】目的建立肌氨酸氧化酶法测定健康成人血清肌酐的参考值范围.方法采用肌氯酸氧化酶法测定4 950名健康成人血清中的肌酐浓度,并按年龄、性别进行分组统计.结果血清肌酐参考值男性为52.9~112.1μmol/L;女性<印岁组为38.3~79.1μmoL/L,≥60岁组为39.9~93.5μmol/L.男女之间差异有统计学意义(P <0.01),男性组各年龄段之间差异无统计学意义(P>0.05),女性组除≥60岁组(P<0.01)外,其他各组之间差异亦无统计学意义.结论参考范围是临床诊断、疾病预后等的重要依据,实验室应根据各自的检测系统和检测方法,制定合理的参考值范围.【总页数】2页(P69-70)
【作者】武强;王龙武;申春梅
【作者单位】复旦大学附属上海市第五人民医院检验科,上海,200240;复旦大学附属上海市第五人民医院检验科,上海,200240;复旦大学附属上海市第五人民医院检验科,上海,200240
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.肌氨酸氧化酶法、碱性苦味酸法、干化学法测定血清肌酐结果的分析 [J], 张守柱
2.肌氨酸氧化酶法与碱性苦昧酸法测定血清肌酐的实验比对 [J], 冯乔健
3.儿童与成年人血清肌酐(肌氨酸氧化酶法)参考值比对 [J], 赵芬
4.肌氨酸氧化酶法测定绍兴地区儿童及成人血清肌酐参考值的建立 [J], 梁美春
5.肌酐酶-肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐 [J], 华永川;金斐;吕国才;娄域峰;徐根云因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
肌酐(CRE)测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)说明书【产品名称】肌酐(CRE)测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)【包装规格】a)试剂1:2×45mL试剂2:2×15mLb)试剂1:4×60mL试剂2:4×20mLc)试剂1:2×60mL试剂2:2×20mL【预期用途】用于体外定量测定人血清中肌酐的含量。
肌酐经肾小球过滤后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄。
在肾脏疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至肾脏实质性损害,血清肌酐值才升高。
在正常肾脏血流量的条件下,肌酐值如升高至176~353μmol/L,提示为中度至严重的肾损害。
测定肌酐常用于晚期肾脏病的辅助诊断[1]。
【检验原理】肌酐经肌酐酶水解成肌酸,肌酸经过肌酸酶水解成肌氨酸,肌氨酸被肌氨酸氧化酶氧化生成过氧化氢。
过氧化氢与过氧化物酶、4-氨基安替比林、N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐反应,生成有色染料。
该染料在546nm 波长下的吸光度增加量与血清中的肌酐的含量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分缓冲液100mmol/L ESPAS(N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐) 1.5mmol/L抗坏血酸氧化酶>2KU/L肌氨酸氧化酶>8KU/L肌酸脒基水解酶>40KU/L试剂2主要组分缓冲液100mmol/L肌酐胺基水解酶≥450KU/L POD(过氧化物酶)≥55KU/L4-AA(4-氨基安替比林) 2.5mmol/L 注:不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2~8℃储存,有效期为18个月,生产日期、有效期见标签。
2.开口后的试剂在仪器仓中(2~8℃)可稳定30天。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200;日立HITACHI7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT008AS型;贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/ AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821;佳能TBA-FX8/TBA-120FR/ TBA-2000FR;罗氏cobas8000c702/cobas8000c701/cobas8000c502;西门子SIEMENS ADVIA1800/ADVIA2400;雅培ABBOTT ARCHITECTc8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200;西森美康SYSMEX BM6010/C;科华KHB卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280;迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/ CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400;迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/ BS-800/BS-2000M;颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480;赛诺迈德SUNMATIK-9050型;雷杜Chemray420;英诺华D280;特康TC6010L;锦瑞GS400;普康6066。
肌酐氨基酸氧化酶法咱说这肌酐氨基酸氧化酶法啊,这可不是个简单事儿。
我就见过好些个实验室,那实验技术啊,参差不齐的。
就像我们那实验室,有个小张,看着精精神神一小伙儿,白大褂总是穿得一丝不苟,眼睛亮晶晶的,透着股机灵劲儿。
可一开始啊,他实验操作真不咋行,做事毛毛躁躁的。
我就寻思着,得想个法子提升提升大家的实验技术。
首先呢,培训是必不可少的。
我就把大家都召集起来,说:“咱都得学习啊,就像那鸟,想要飞得高,还得练练翅膀不是?”我站在前面,看着他们或疑惑或期待的眼神。
这培训内容可得丰富,不能光讲那些干巴巴的理论。
我就找了那些有实战经验的人来分享,讲他们是怎么一步一步克服困难的。
我记得有一回,请来的老李,那满脸的皱纹都像是岁月的故事书。
老李站在那儿,操着一口带着乡音的普通话就开始讲:“咱这实验啊,就跟种地似的,你得细心,每一个环节都不能马虎。
我刚参加工作的时候,比你们还傻呢,啥都不懂,看着那些仪器就像看外星玩意儿。
”大家听着都笑了起来,这一笑啊,气氛就轻松多了。
除了培训,实践也重要啊。
我就跟领导说:“咱得给员工机会去试错,就像孩子学走路,哪有不摔跤就学会的?”领导一开始还不太乐意,皱着眉头说:“这要是出了错,损失可不小。
”我就笑着跟他说:“领导啊,你看那下棋的,哪有光看不练就能成高手的?咱得有点长远眼光。
”领导被我这么一说,也觉得有点道理。
于是我们就开始给员工安排一些有挑战性的实验任务。
这过程中啊,有的员工就犯愁了。
像小王,平时话不多,一遇到难题就更沉默了,低着头,脸憋得通红。
我就走到他身边,拍拍他的肩膀说:“小王啊,别怕,这就跟爬山似的,看着高,一步一步来总能到顶的。
”然后我就跟他一起分析问题,给他出主意。
这实验技术提升啊,还得有点激励措施。
光让人家干活,没点好处谁乐意啊?我就跟财务那边商量,设了个奖励机制。
每个月要是谁在实验技术提升方面有明显进步,就给他发个小奖金。
这奖金虽不多,但是个心意。
大家一听有奖金,那积极性一下子就上来了。
利用酶法检测肌酐的方法学评价朱鸿;孙国华;孙树馨;乔维洲【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2002(024)001【摘要】目的: 通过对动力学Jaffe's法和酶法测定血清肌酐的方法学比较,建立实用的肌酐酶法测定方法.方法:肌氨酸氧化酶法(以下简称酶法)测定血清肌酐.结果:重复性实验,酶法和动力学Jaffe's法批内变异系数分别为1.0%和1.39%,批间变异系数分别为1.17%和2.51%.相关性实验结果显示两种方法有良好的相关性,且无显著性差异(P>0.05),相关系数γ=0.9 940.回收实验、动力学Jaffe's法的回收率分别为113.2%和98.1%,平均回收率为105.7%;酶法的回收率分别为94.0%和97.4%,平均回收率为95.7%.干扰实验结果显示,溶血及黄疸标本对酶法几乎无干扰,动力学Jaffe's法出现负干扰.结论: 酶法在重复性和抗干扰能力方面优于动力学Jaffe's 法.【总页数】2页(P50-51)【作者】朱鸿;孙国华;孙树馨;乔维洲【作者单位】大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连市中心医院检验科,116033【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.酶法与Jaffe's速率法测定血清肌酐的方法学评价 [J], 薛邦禄;徐维家;林韶华2.尿干化学分析法、散射比浊法、酶法检测尿清蛋白与尿肌酐及比值结果的一致性分析 [J], 鲁作华;刘倩倩;赵晓静;陈聚盛;孙力;刘兴晖3.肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法检测血清肌酐结果比较和偏倚评估 [J], 黄霞梅;伍惠玲;钟慧芝;李海炜;秦雪;李山4.肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价 [J], 张宏斌;邓敬仪5.苦味酸法和酶法检测血清肌酐方法学评价 [J], 常晓松;董菲;席金瓯因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
肌氨酸氧化酶法测定绍兴地区儿童及成人血清肌酐参考值的建立梁美春【摘要】目的建立肌氨酸氧化酶法测定绍兴地区儿童及成人血清肌酐参考范围.方法选择2011年5~9月在笔者医院健康体检儿童和住院患儿(男性2269例,女性1542例),按年龄分组:出生3~12个月(组1),1~3岁(组2),4~6岁(组3),7~11岁(组4),12~ 18岁(组5).成人组选择在笔者医院健康体检者(男、女性各500例,组6),年龄25~48岁.以上各组研究对象均排除肾脏系统、泌尿系统、贫血、甲亢、尿崩症等疾病和营养不良.结果组1 ~组6各组血清肌酐测定值皆呈正态分布.随年龄的增长(组1~组6)血清肌酐呈趋势性增加,并且男女之间的差异也有增加趋势.结论不同年龄阶段应采用不同的血清肌酐参考范围.不同实验室应建立自己实验室的血清肌酐参考范围.%Objective To determine the reference intervals of serum creatinine for the children and the adults in shaoxing area by sarcosine oxidase assay. Methods We selected the healthy children and the children in hospital(2269 males and 1542 females) from May 2011 to September 2011 in our hospital. They were divided into several groups according to the different age: born 3-12 months (groupl) ,1-3 year olds(group2) ,4-6 years old(group3) ,7-11 years old(group4) ,12-18 years old(group5). And we selected the healthy adults (500 cases of males and 300 cases of females) as control, whose age were 25 -48 years old. All the research objects were excluded kidney disease, urinary disease, anemia, hyperthyroidism, diabetes insipidus and malnutrition. Results All serum creatinine levels distribution was approximate normal distribution. Theserum creatinine was increased with the increase of age. The difference between male and female was also increased with the increase of age. Conclusion We should set up the different reference intervals of serum creatinine for different age stages and different laboratory.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2012(041)006【总页数】3页(P117-119)【关键词】肌酐;肌氨酸氧化酶;参考值【作者】梁美春【作者单位】312000 浙江省绍兴市人民医院/浙江大学绍兴医院检验科【正文语种】中文血清肌酐(creatinine,Cr)浓度的测定,可作为反映肾小球滤过功能的指标之一,颇受临床医生重视[1]。
氧化酶法肌酐测定的检测方法改良 目的 通过调整方法学参数改进现用肌酐试剂在日立7600-020生化分析仪上的测试性能。方法 在日立7600-020生化分析仪上,将豪迈公司氧化酶法肌酐试剂进行方法改良,然后参照CLSI方法学评价相关文件进行评估,具体指标有准确度、精密度、干扰试验、线性范围和参考区间。结果 通过方法改良的肌酐测试系统性能指标为:偏倚(bias)是2.51%;批内不精密度(CVw)为2.43%;批间不精密度(CVb)为3.05%;线性范围为33~9 105 umol/L;干扰试验,改良法优于原法;参考区间两种方法相符合。结论 通过改良的肌酐测试系统优于原方法学系统。
标签: 肌酐;检测系统;性能评价 [Abstract] Objective To improve the test by adjusting the methodological parameters of the creatinine reagent in Hitachi 7600-020 biochemical analyzer. Methods To adjust the methodological parameters of the creatinine reagent and evaluate the oparation performance (including:accuracy,precision, interference test, linear range and reference interval)according to the method of CLSI. Results Improved oparation performance: The bias was 2.51%; Within (CVw) was 2.43% and between-batch precision(CVb) was 3.05%;the linear range was 33~9 105 umol/L; Interference test: the improved method is better than the original method; the reference interval is consistent with the original method. Conclusion The improved method is better than the original method.
[Key words] Creatinine; Detection system;Oparation performance evaluation 血清肌酐测定作为经典的肾功检查项目在临床得到广泛应用,是最常见的生化检测指标之一,因此肌酐测试结果的准确与否对相关疾病的诊疗具有重要意义。我室的7600生化分析仪由于参数设置的局限,使得在测试一些溶血和乳糜标本的肌酐时结果不尽如人意。为此我们对氧化酶法肌酐测定的方法学进行了研究,并对反应曲线的数据进行反复测算,发现该反应在反应初期符合动力学法的要求,于是将传统的两点终点法改为动力学法,相关参数依据动力学法设定,并进行了相关评估。全部实验在2015年9月份完成。
1 材料与方法 1.1 材料 国家卫生计生委临检中心2015年第2次常规化学室间质评物质、混合人血清、正常对照血清。
1.2 仪器和试剂 豪迈酶法肌酐测定试剂盒(批号:20160211)、伯乐复合校准品(批号:201705)及自配血红蛋白、脂肪乳、胆红素干扰物,仪器为日立7600-020生化分析仪。
1.3 方法 1.3.1 测定参数调整 将两点终点法改为双试剂动力学法,读点时间为16~20点,反应时间为10 min,样本:试剂1:试剂2比例为10:200:50,校准方式为线性2点校准,其它参数依据试剂说明书设定。然后进行校准,测试伯乐质控水平2和水平3,结果无失控。
1.3.2 不精密度评价 用调整前后的两种方法在一个操作批次内分别测定1份病人混合血清各20次,计算批内不精密度(CVw%);再制备1份病人混合血清,用两种方法每天各测1次共测20次,计算批间不精密度(CVb%)[1]。
1.3.3 准确度评价 用调整前后的两种方法分别测定卫计委临检中心2015年第2次常规化学室间质评物,各个水平重复2次,各取均值,与相应靶值计算偏倚(bias%)[2]。
1.3.4 干扰实验 干扰物为浓度为425 umol/L的胆红素校准液、浓度为12 g/L的红细胞溶解液、10%脂肪乳,将混合血清与以上干扰物分别按10:0、8:2、6:4、4:6、2:8、0:10的比例混均,各得到6份标本,每份测定3次,计算每份标本的平均值并与基础结果比较,评价抗干扰能力[3]。
1.3.5 线性范围评价 将一份肌酐值为32 umol/L的混合血清和肌酐值8 909 umol/L尿液标本按不同比例混合,测定各浓度肌酐值,与各理论计算值作相关分析[4]。
1.3.6 参考区间验证 取正常体检人群标本20份,最多只允许一份标本结果不在现用参考区间,符合率≥95%[5]。
2 结果 2.1 不精密度评价 动力学法的批内(CVw)为2.43%,批间不精密度(CVb)为3.09%,动力学法的不精密度明显好于两点终点法。见表1。
2.2 准确度评价 准确度方面,动力学法的偏倚的绝对值均小于两点终点法,也就是说动力学法要比两点终点法准确。见表2。2.3 干扰试验
与两点终点法相比,更高浓度的干扰物才能对动力学法的结果产生干扰,动力学法抗干扰能力好于两点终点法。见表3。 2.4 线性范围 两点终点法线性范围见图1,动力学法线性范围见图2。两点终点法范围不及动力学法,而且动力学法低值结果更准确。
2.5 参考区间 20人份正常体检标本结果全部在现用参考区间44~97 ummol/L范围内,全部符合。
3 讨论 血清肌酐测定是最常见的生化急诊检测指标之一,因此肌酐测试的速度与结果的准确性对相关疾病诊疗具有重要意义。肌酐目前主要检测方法是氧化酶法。如果按厂家说明的参数测定,测试速度和抗干扰能力并不太理想。通过对氧化酶法肌酐测定的方法参数进行研究,并对相关数据进行拟合计算,发现该反应在反应初期的一段时间符合动力学法测定要求,于是对参数做出相应调整,把两点终点法改为动力学法,并进行验证评估。结果如下:不精密度,两点终点法CVw为3.05%,CVb为3.77%;动力学法的CVw为2.43%,CVb为3.09%,动力学法比两点终点法好。准确度,动力学法5个水平偏倚绝对值均高于两点终点法。抗干扰能力,无论是抗溶血、抗高脂血还是抗黄疸的干扰,动力学法还是更好一些;线性范围的比较,动力学法线性范围为33~9 150 ummol/L,较两点终点法的35~8 810 ummol/L要好,而且两点终点法的截距较大,也就是说在测定低值时结果较差。此外动力学法的参考区间与现用范围一致,也符合要求。从方法学角度讲[6],动力学法的性能指标本身就强于终点法,我们的一系列方法学评价也证实了这一点。
综上所述,日常工作中通过细心观察,对一些细节进行思考,并不断实践,我们是能够对现有方法进行有效改进的。如该试验通过方法学改进,肌酐测定的性能指标更加理想,测定速度也更快,也使我们能更好地满足临床,服务患者。
[参考文献] [1] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP5-A2 Evaluation of PrecisionPerformance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline[Z].Wayne,PA,UAS:CLSI,2004.
[2] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy;Approved Guideline[Z].Wayne,PA,UAS:CLSI,2005.
[3] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP7-A2 Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guid5.7eline-Second Edition[Z].Wayne,PA,UAS: CLSI,2005. [4] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP6-AEvaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline[Z].Wayne,PA,UAS:CLSI,2003.
[5] Clinical and Laboratory Standards Institute.C28-A2 How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline—Second Edition[Z].Wayne,PA,UAS:CLSI,2003.
[6] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].3版.北京:人民卫生出版社,2006:124-127.
(收稿日期:2015-10-18)