生物技术制药重点
名词解释：
生物技术也称生物工程。是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
生物药物：是指运用微生物学、生物学、医学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法，从生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断疾病的制品。
生物技术药物：采用DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白或核酸类药物。
生物技术制药：就是通过基因工程、发酵工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程等生物技术，来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。
细胞融合：在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。(外力如诱导剂，促融剂作用下，两个或两个以上异源细胞或源生质体相互接触，从而发生膜融合，细胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象。）
生物反应器：就是为适应生物反应的特点而设计的反应设备。包括微生物反应器（发酵罐）、动植物细胞培养用反应器和酶反应器。
转基因动物：指采用基因工程技术把外源基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体动物的染色体上稳定整合，且能将目的基因稳定遗传给后代的动物。
疫苗：是指将病原微生物及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防、控制传染病的发生、流行的免疫制剂。
联合疫苗：由两种或两种以上疫苗混合而制成的疫苗。
基因工程亚单位疫苗：主要是指将基因工程表达的蛋白抗原纯化后制成的疫苗。（指在分离出病原体特异抗原编码基因的基础上，将外源基因转入另外一个通常是非致病性的微生物内表达基因产物，然后分离和纯化而获得特异性的蛋白。）
酶工程：是利用酶或含酶的细胞的特异性催化功能，或对酶进行修饰改造，并通过工程化将相应原料转化成人类所需产品的一种技术,是生物工程的重要组成部分。
固定化酶∕固定化细胞：指将具有一定生理功能的酶或生物细胞，用物理或化学方法将其固定，作为固体生物催化剂而加以利用的技术。
酶的化学修饰：在体外对酶分子通过人工方法使一些化学基团引入或除去，从而使酶的共价结构发生改变的技术。
发酵：工业上泛指利用微生物制造或生产某些产品的过程（用生物催化剂使培养物质变成产物的生物化学反应。）
代谢工程：运用多基因重组技术，有目的的改变某一代谢途径中的几个关键酶的活性，从而改变代谢途径，产生目的产物。（利用基因重组技术有目的的对细胞代谢途径进行修饰、改造，改变细胞特性，并与细胞基因调控、代谢调控及生化工程相结合，为实现构建新的代谢途径生产特定目的产物。）
微生物转化：是指微生物通过酶催化将一种物质（底物）转化成为另一种物质（产物）的化学反应。
组合生物合成：指在了解微生物生物合成途径以及克隆有关生物合成、调节等基因的基础上,在体外对这些不同来源（种内或种外）的基因进行删除、添加、取代以及重组，然后导入一个适当的微生物宿主中并定向合成所需的一系列化合物。（通过生物信息学和微生物遗传学手段可确定基因簇中的各模块或结构域的功能，将这些结构域或模块进行组合，就能产生母核，支链以及分子量各异的新型“非天然的天然产物”。）
蛋白质化学修饰: 在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造的，通过对主链的切割、剪接及化学基团的引入或除去，实现对蛋白质药物物理化学性质和生物活性的改变。
噬菌体抗体库：B细胞受体基因重排所形成的抗体分子多样性或抗体基因多样性的总称。
（用体外基因克隆技术将B细胞全部可变区基因克隆出来，插入噬菌体表达载体，转化工程细菌进行表达，在噬菌体表面形成噬菌体抗体的群体。）
简答题：
概述生物技术制药的研究内容与任务。
１.生物制药技术的研究、开发与应用；
２.利用生物技术研究、开发和生产药物：
a)应用基因工程技术大量生产天然存在量极微或难以获得的药物；
b)应用蛋白质工程技术设计新的药物；
c)应用酶工程改变药用酶的性质；
d)应用生物技术改造传统制药工艺。
生物技术药物的特性有哪些？
１.理化性质特性：相对分子质量大；结构复杂；稳定性差。
２.药理学作用特性：活性与作用机制明确；作用针对性强；毒性低；体内半衰期短；有种属特异性和可产生免疫原性。
３.生产制备特性：药物分子在原料中的含量低；原料液中常存在降解目标产物的杂质；制备工艺条件温和；分离纯化困难，产品易受有害物质污染。
４.质量控制特性：质量标准内容的特殊性；制造项下的特殊规定；检定项下的特殊规定。
基因工程制药的基本环节有哪些？
获得目的基因—组建DNA重组体—构建基因工程菌活细胞—培养工程菌—产物的分离纯化—除菌过滤—半成品检定—成品检定—包装。
（基因工程菌构建与筛选, 目的基因的制备, 载体DNA与目的基因的连接, 重组DNA导入宿主细胞重组子的筛选与鉴定, 细胞表达及选择。）
获得目的基因的基本方法有哪些？
①化学合成法；②PCR法；③基因文库法；④cDNA文库法
如何筛选含有重组体的阳性菌落？
1）载体遗传标记法：抗生素抗性筛选法、互补筛选法、营养缺陷型筛选法、噬菌斑筛选法。2）核酸分子杂交法：菌落原位杂交；DNA印迹分析；RNA印迹分析。
3）限制性内切酶图谱法：从初步筛选的转化子中提取重组DNA，选择合适的限制性内切酶。通过琼脂糖凝胶电泳鉴定Mr大小，含有目的基因DNA片段酶切产物的为阳性菌落。
4）DNA序列测定法；
5）目的基因表达产物测定法。
基因工程药物分离纯化的主要技术？
分离技术：1.离心：固液分离的重要手段。
2.沉淀：利用蛋白质在不同条件下的溶解度不同的原理。
1）等电点沉淀法；2）盐析法。
3.膜分离：
1）渗透和透析；2）反渗透、超滤和微滤；3）电渗析。
4.双水相萃取。
纯化技术：离子交换层析（IEC）、亲和层析(AC)、凝胶过滤层析、反相色谱(RPC)和疏水色谱(HIC)。
（分离依据：产物表达形式；分离单元之间的衔接；分离纯化工艺的要求。）
基因工程药物质量控制的项目有哪些？
1.蛋白质含量的测定：紫外吸收光谱、BCA法（双缩脲法）、福林-酚试剂法（Lowry法）、考马
斯亮蓝法、ELISA法、SDS-凝胶染色与扫描分析法等。
2.蛋白质纯度检测：电泳法、色谱法、质谱法、末端氨基酸分析法、SDS-PAGE法、非变性PAGE
法、层析法等。
3.蛋白质Mr测：凝胶色谱法、SDS-PAGE法、质谱法、层析法等。
4.蛋白质等电点测定：等电聚焦凝胶电泳。
5.蛋白质序列分析：Edman降解法与质谱分析。
