临床微生物标本采集规范

所以采血量一定要足够！
5.血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配 要求：一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养， 作为常规血培养的组合。 说明：采用一对需氧瓶+厌氧瓶组合，比采用 二个需氧瓶的组合可检出能更多的葡萄球菌、 肠杆菌科细菌和厌氧菌。而且，采两瓶可以 保证足够的采血量。当被用来做培养的采血 量少于推荐值时，血必须首先接种需氧瓶， 然后将剩余的血液接种入厌氧瓶。因为多数 菌血症是由需氧和兼性需氧细菌造成的，而 这些细菌从需氧瓶中更好的被分离。




低免疫人群急剧上升：艾滋病、移植医学国际间 交通的快速便捷使得当今疾病传播无国界的概念。 气候变暖，人口快速增长，都市化进程加快，伴 随人口密度和人口流动增加，清洁水源不足和卫 生设施的不完善，以及生态破坏造成人与媒介生 物接触机会增多（动物微生物向人类的袭击）等。 人类还没有足够的能力战胜病原体。 病原生物的抗药性产生的速度已超过新型抗生素 发明的速度（细菌耐药性的快速发展)。
你认为对吗？ 为了提高病人血培养的阳性率，最好 的抽血时间是：

A.发热开始时 B.寒战开始时 C.发热最高峰时 D.寒战结束时 E.预计寒战发热前
体温 细菌量 上升幅度
时间
2.采集部位 要求：从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血 培养。至少做到“双侧双瓶”。必要时从下肢静 脉采血做第三套血培养。 说明：不建议采集 （1）动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大； （2）静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果 必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采 集另外一个血培养标本，以帮助阳性结果的判读。
（二）血培养检测消毒程序
1.皮肤消毒程序：严格执行三步法（防止皮肤寄生菌污染） （1）用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上； （2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒， 从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上； （3）最后用75%酒精脱碘，待酒精挥发干燥后采血。 新生儿及对碘过敏的患者，只能用75%酒精消毒60s， 待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 2.培养瓶消毒程序： （1）用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60秒。 （2）用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒 精，然后注入血液。
（三）血培养标本采集和运送
1.采集时间 要求：对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用 抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时 或间隔短时间内采集2套（每套包括1只普通血培养 瓶及1只厌氧血培养瓶）以上血培养标本。 说明：实验数据表明细菌入血后约1小时，寒战和发 烧开始出现2小时内，此时为采集血培养标本进行 病原菌培养的最佳时机。在不同的时间点采血只有 在以下情况才有必要：疑似感染性心内膜炎或其他 血管内（如导管相关性感染）感染患者的连续性菌 血症。
所谓“双瓶双侧”，是指从一个部位采血 接种一套培养瓶，再从另一部位采血接种另 一套培养瓶。（通常是双臂） 所谓“双侧双瓶”，是指从一个部位采血 接种一个需氧瓶，再从另一部位采血接种另 一个厌氧瓶。 一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为 单个血培养。

3.采集次数 要求：对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者，推荐 同时采集2~3套（不同部位）血培养标本。（即 双瓶双臂同时采集血培养标本。） 婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位）血培 养标本。 说明：除特殊情况之外，在采取血培养后的2至5天 内，无需重复采取血培养。因为抗菌治疗的2至5 天内，血液中的细菌不会立即消失。研究证明， 血培养只做1套的检出率为65%，做2套和3套的 检出率分别为80%和96%。单瓶的血培养检出率 不高，而且结果很难做出临床解释。
临床微生物标本 采集规范
世界人口死因 感染性疾病：25％
抗生素时代，感染仍是人 类健康的主要“杀手”
高死亡率原因
新现传染病：近30年，已有近30种新的病原 生物，其中包括HIV、 SARS、禽流感和各种 新型肝炎病毒等引起的各种疾病。 再现传染病：以往已被认为得到很好控制的 传染病，如结核、登革热等的流行和传播又 重新抬头。
提高感染样本送检率 加强细菌耐药监测
关注细菌性疾病的病原学诊断，已成为
临床工作者、临床微生物与微生态工作者、
药学家和从事感染控制的工作者共同关注的
热门焦点。
成功治疗感染症的因素
‧成功分离病原菌 –标本收集、运送、保存 –标本处理方法 –检验医师专业知识 ‧医师判读病原菌培养结果 ‧选择适当治疗方法
血培养假阳性的危害 1、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担
防止皮肤寄生菌或环境微 生物污染
二 、 下呼吸道（痰培养） 标本采集规范
病原体种类繁多而复杂 使下呼吸道感染病原诊断成为难题

细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌） 真菌（包括肺孢子菌）
标本收集部位
非无菌部位 眼 耳 呼吸道 肠胃道 泌尿道 皮肤 毛发 无菌部位 血液 脊髓液 胸膜液 腹膜液 关节液
一、血培养标本采集规范
相似规模医院的血培养数
• • • • • 国内多数三甲综合医院2～10 瓶/天 复旦大学中山医院20～50瓶/天 香港玛丽医院200瓶/天 台湾大学医院300瓶/天 我院约10～20瓶/天
合格痰液标本
需检查是否为合格的痰标本。白细
胞＞25个/低倍镜视野、鳞状上皮细 胞＜10个/低倍镜视野为合格标本。 采集合格标本对细菌的诊断极为重 要。
不合格痰液标本
（一）采集指征

凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。 对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺 鼠疫等）患者采集检验标本时必须注意生物安全 防护。
由于婴幼儿患者厌氧菌所致菌血症比较罕见， 婴幼儿血培养可以仅用需氧瓶，为提高检出 率、区分污染菌，应采用两只需氧瓶为一组 血培养。仍然采用双侧双瓶的采血方式。 真菌血培养采用需氧血培养瓶采集标本。采 用中和/灭活抗菌药物的血培养瓶可提高真菌 的检出率。自动化血培养系统不能用于双相 真菌的检测。
国内微生物标本的采集目前存在的问题 ： 标本送检率低 从全国来看，抗感染治疗 前，送检相关标本可能只占应送标本的一半 左右，与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反 差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本， 此时已失去阳性培养的机会。 标本有缺陷 正确收集各种临床标本， 关注特检标本采样与送检的方法和条件，是 完成病原学诊断的先决条件。
4.采血量 要求： 成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每 瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。 说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 成人血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与 采血量成正比例增长。每增加1ml的血液，病原菌 的检出率增加3.2%。儿童患者因为血液中病原菌浓 度较高，血培养量无需等同于成人。对血液病患者 或者血容量相对较低的患者建议使用儿童瓶来减少 血液的采集量增加病原菌的检出率。
临床医生要合理用好两种数据
1. 本地区、本单位病原流行病学资料，指导 经验用药。（微生物室、院感科、临床科室） 2.药敏试验报告，纠正经验用药。 重视病原学检查,尽可能在应用抗菌药物之 前留取标本送检。以提高病原学诊断率,为选 药和调整药物提供依据。

“正确的微生物学检验始自正确的 标本采取。临床医师、护师及检 验技师都必须通晓其要领。”
著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray
标本采集和运送是细菌培养成 功的最最重要的关键
但由于标本的采集和运送常由护士或医生 或病人自己完成，所以也是最不容易做好的 事情，而且不知道问题所在之处，造成的后 果是: 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
微生物让人类步步为营， 我们应该追求： “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗” 正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提！
标本规范化采集的重要性



正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系到 致病菌培养的正确性与阳性率的高低，是临床细菌 检验成功的关键。 标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当的 标本可导致假阴性、假阳性结果的出现，因此标本 采集与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重 要的临床感染信息的基础。 好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患 照顾质量，降低医疗成本。


病毒
支原体、衣原体与立克次体 原虫 寄生虫
我国痰培养现状
标本送检率低
苛养菌检出率极低
结果重复性差
报告速度慢
感染菌与污染菌不易区分
药敏结果与治疗反应存在差距

标本采集方法
医师或护士直视下采集标本
咳痰标本
病人先漱口，去除表面的菌群
教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液

临床上约半数咳痰标本不合格！
咳痰途经口咽部 不可避免地受到污染
唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。


合格标本的判断标准
外观：观察颜色、粘度、有无血丝
或脓。若标本为水状且很明显是唾 液，则应拒收。
为了判定是否来自下呼吸道的痰，
菌血症病人血中细菌浓度
成年病人: 链球菌心内膜炎 葡萄球菌心内膜炎 革兰氏阴性菌血症 革兰氏阳性菌血症

1 to 30 organisms/ml 1 to 20 organisms/ml 少于1 to 10 organisms/ml 1 to 300 organisms/ml
幼儿病人: 革兰氏阴性菌血症 5 to 1000 organisms/ml 75%幼儿菌血症病人血液有＞100 organisms/ml