第五章 酶
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第五章酶一、单项选择题1.关于酶的叙述哪项是正确的?A.体内所有具有催化活性的物质都是酶B.所有的酶都含有辅基或辅酶C.大多数酶的化学本质是蛋白质D.都具有立体异构特异性E.能改变化学反应的平衡点并加速反应的进行2.有关酶的辅酶叙述正确的是A.是与酶蛋白结合紧密的金属离子B.分子结构中不含维生素的小分子有机化合物C.在催化反应中不与酶的活性中心结合D.在反应中参与传递氢原子、电子或其他基团E.是与酶蛋白紧密结合的小分子有机化合物3.酶和一般化学催化剂相比具有下列特点,例外的是A.具有更强的催化效能B.具有更强的专一性C.催化的反应无副反应D.可在高温下进行E.其活性可以受调控的4. 酶能使反应速度加快,主要在于A. 大大降低反应的活化能B. 增加反应的活化能C. 减少了活化分子D. 增加了碰撞频率E. 减少反应中产物与底物分子自由能的差值5. 在酶促反应中,决定反应特异性的是A. 无机离子B. 溶液pHC. 酶蛋白D. 辅酶E. 辅助因子6.酶的特异性是指A.酶与辅酶特异的结合B.酶对其所催化的底物有特异的选择性C.酶在细胞中的定位是特异性的D.酶催化反应的机制各不相同E.在酶的分类中各属不同的类别7.酶促反应动力学研究的是A.酶分子的空间构象B.酶的电泳行为C.酶的活性中心D.酶的基因来源E.影响酶促反应速度的因素8. 在心肌组织中,哪一种乳酸脱氢酶同工酶的含量最高A. LDH1B. LDH2C. LDH3D. LDH4E. LDH59. 酶与一般催化剂的区别是A. 只能加速热力学上可以进行的反应B. 不改变化学反应的平衡点C. 缩短达到化学平衡的时间D. 具有高度特异性E. 能降低活化能10.关于活化能的描述哪一项是正确的A. 初态底物分子转变为活化分子所需的能量B. 是底物和产物能量水平的差值C. 酶降低反应活化能的程度与一般催化剂相同D. 活化能越大,反应越容易进行E. 是底物分子从初态转变到过渡态时所需要的能量11.酶与一般催化剂具有下列共性,例外的是A.同时加快正、逆反应速度 B. 不能改变反应平衡点C.降低反应活化能 D. 反应前后自身没有质与量的改变E.由特定构象的活性中心发挥作用12.金属离子作为辅助因子具有下列作用,例外的是A.稳定酶蛋白活性构象B.中和阳离子C.参与构成酶的活性中心D.连接酶和底物的桥梁E.中和阴离子13. 在形成酶-底物复合物时A. 只有酶的构象发生变化B. 只有底物的构象发生变化C. 只有辅酶的构象发生变化D. 酶和底物的构象都发生变化E. 底物的构象首先发生变化14.有关酶蛋白或辅助因子的叙述正确的是A.酶蛋白或辅助因子单独存在时均有催化作用B.一种酶蛋白可与多种辅助因子结合成全酶C.一种酶蛋白只能与一种辅助因子结合成特异性的全酶D.酶蛋白参与传递氢原子或电子的作用E.辅助因子决定反应特异性15.结合酶形式被称为A.单纯酶B.全酶C.寡聚酶D.多酶体系E.串联酶16. 对于酶蛋白与辅助因子的论述不正确的是A.酶蛋白与辅助因子单独存在时均无催化活性B.一种酶蛋白只能与一种辅助因子结合形成全酶C.一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成全酶D.酶蛋白决定酶促反应的特异性E.辅助因子参与酶促反应17. 对于结合酶来说,决定反应特异性的是A. 金属离子B. 全酶C. 酶蛋白D. 辅酶E. 辅基18. 下列有关辅酶与辅基的论述,错误的是A.辅酶与辅基都是酶的辅助因子B.辅酶以非共价键与酶蛋白疏松结合C.辅基常以共价键与酶蛋白牢固结合D.不论辅酶或辅基都可以用透析或超滤的方法除去E.辅酶和辅基的主要差别在于它们与酶蛋白结合的紧密程度不同19.下列关于酶的活性中心的论述,错误的是A. 酶分子中的各种化学基团不一定都与酶活性有关B. 活性中心以外的必需基团与维持酶的特定空间构象有关C.活性中心的结合基团与底物结合形成酶-底物复合物D.活性中心的催化基团可以催化底物发生反应转变为产物E. 与酶活性有关的必需基团在一级结构上彼此靠近,形成活性中心20. 酶原没有活性是因为:A.缺乏辅酶或辅基B.活性中心未形成或未暴露C.酶原是普通的蛋白质D.是已经变性的蛋白质E.酶蛋白亚基不全21. 关于酶的辅基的正确叙述是A. 是一种结合蛋白质B. 与酶蛋白的结合比较疏松C. 由活性中心的若干氨基酸残基组成D. 决定酶的专一性,不参与基团传递E. 一般不能用透析或超滤的方法与酶蛋白分开22. 全酶是指A. 酶-底物复合物B. 酶-抑制剂复合物C. 酶蛋白-辅助因子复合物D. 酶-别构剂复合物E. 酶的无活性前体23. 符合辅酶的叙述是A. 是一种高分子化合物B. 不能用透析法与酶蛋白分开C. 不参与活性部位的组成D. 决定酶的特异性E. 参与氢原子、电子或化学基团的传递24. 关于酶的激活剂正确的是A.激活剂即辅酶B. 有非必需激活剂和非竞争性激活剂两类C. 能改变酶一级结构的物质D. 使酶活性增加的物质E. 有机化合物不能作为激活剂25. 根据抑制剂与酶结合的紧密程度不同,抑制作用可以分为以下两大类A. 竞争性抑制和非竞争性抑制B. 混合性抑制和反竞争性抑制C. 可逆性抑制和不可逆性抑制D. 竞争性抑制和反竞争性抑制E. 可逆性抑制和非竞争性抑制26. 反竞争性抑制作用的描述正确的是A. 抑制剂既与酶相结合又与酶-底物复合物相结合B. 抑制剂使酶促反应的Km值升高,Vmax降低C. 抑制剂使酶促反应的Km值降低,Vmax增高D. 抑制剂只与酶-底物复合物相结合E. 抑制剂使酶促反应的Km值不变,Vmax降低27. 酶原激活一般是使酶原蛋白中哪种化学键断裂A.盐键 B. 范德华力C. 二硫键D. 氢键E. 肽键28. 影响酶促反应速度的因素不包括A. 底物浓度B. 酶的浓度C. 反应环境的pHD. 反应温度E. 酶原的浓度29 温度对酶促反应速度影响的叙述,正确的是A. 低温可使大多数酶发生变性而使酶活性降低B. 温度升高反应速度加快,与一般催化剂完全相同C. 最适温度是酶的特性常数,与反应进行的时间无关D. 最适温度不是酶的特性常数,延长反应时间,其最适温度降低E. 最适温度对于所有的酶均相同30. 关于pH对酶促反应速度影响的论述,错误的是A. pH影响酶、底物或辅助因子的解离度,从而影响酶促反应速度B. 最适pH是酶的特性常数C. 最适pH不是酶的特性常数D. pH过高或过低可使酶发生变性E. 最适pH是酶促反应速度最大时的环境pH31.关于酶活性中心的叙述,错误的是A.酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域B.必需基团可位于活性中心区域之内,也可位于活性中心之外C.当底物分子与酶分子相接触时,可引起酶活性中心的构象改变D.酶原激活实际上就是活性中心的形成过程E.一般来说,形成酶活性中心的必需基团总是在多肽链的一级结构上相对集中的相邻的几个氨基酸的残基上32.关于酶的活性中心的错误说法是A. 酶的必需基团就是酶的活性中心B. 活性中心可跨越在两条多肽链上C. 活性中心就是酶的催化基团和结合基团集中形成的具有一定空间构象的区域D. 活性中心可处在一条多肽链上E. 酶的活性中心与酶的空间结构有密切关系33. 酶的活性中心是指A. 整个酶分子的中心部位B. 酶蛋白与辅酶结合的部位C. 酶发挥催化作用的部位D. 酶分子表面具有解离基团的部位E. 酶的必需基团在空间结构上集中形成的一个区域,能与特定的底物结合并使之转化成产物的部位34. 竞争性抑制剂对酶促反应速度影响是A. Km↑,Vmax不变B. Km↓,Vmax↓C. Km不变,Vmax↓D. Km↓,Vmax↑E. Km↓,Vmax不变35. 有关竞争性抑制剂的论述,错误的是A. 在结构上与底物相似B. 与酶的活性中心相结合C. 与酶的结合是可逆的D. 抑制程度只与抑制剂的浓度有关E. 与酶非共价结合36.有关非竞争性抑制作用的论述,正确的是A. 不改变酶促反应的最大程度B. 改变Km值C. 酶与底物、抑制剂可同时结合,但不影响其释放出产物D. 抑制剂与酶结合后,不影响酶与底物的结合E.抑制剂与酶的活性中心结合37. 非竞争性抑制剂对酶促反应速度的影响是A. Km↑,Vmax不变B. Km↓,Vmax↓C. Km不变,Vmax↓D. Km↓,Vmax↑E. Km↓,Vmax不变38. 国际酶学委员会将酶分为六类的依据是A.酶的物理性质B.酶促反应的性质C.酶的来源D.酶的结构E.酶所催化的底物二、填空题1.结合酶类必须由__________和___________相结合后才具有活性,前者的作用是_________,后者的作用仅在反应中参与传递__________的作用。
第五章酶的分离和提纯•第一节纯化方案设计•第二节纯化方法•第三节酶的纯度和产量•第四节酶的剂型与保存第一节纯化方案设计一.分离纯化酶的原则:第一,要注意防止酶变性失活,这一点在纯化的后期更为突出。
第二,从理论上说,凡是用于蛋白质分离纯化的一切方法都同样适用于酶。
第三,酶具有催化活性,检测酶活性可以为酶的抽提、纯化以及制备过程中选择适当的方法与条件提供直接的依据。
二.防止酶变性失活的方法:(1)除了少数例外,所有操作都应在低温条件下进行,尤其是在有机溶剂存在的情况下更应特别小心。
(2)必须控制整个系统不要过酸过碱;同时要避免在调整p H时产生局部酸碱过量的现象。
(3)酶和其它蛋白一样,常易在溶液表面或界面处形成薄膜而变性,故操作中应尽量减少泡沫形成。
(4)重金属等能引起酶失活,微生物污染以及蛋白水解酶的存在能使酶分解破坏。
一.酶的抽提二.浓缩三.酶的纯化四.结晶•一.酶的抽提•抽提的要求是将尽可能多的酶、尽量少的杂质从原料引入溶液。
1.预处理过去多用动物或植物的器官组织作为酶的来源,近年来则主要采用微生物作材料。
例如,动物材料要剔除结缔组织、脂肪组织;油质种子最好先用乙醚等脱脂;种子研磨前应去壳,以免丹宁等物质着色污染;微生物材料则应将菌体和发酵介质分离。
经过这些处理后,材料须尽可能以非常新鲜的状态直接应用,否则就应将完整材料立即冰冻起来。
2. 破细胞酶根据它的分布可分为胞内酶和胞外酶,根据它的存在状态,即是否与细胞内的颗粒体或膜结合,细胞内酶又可分为结酶与溶酶。
2.1 丙酮干粉法:◆往组织匀浆中加入-15~-20℃的冷丙酮,抽滤,再加几次丙酮并抽滤,沉淀部分在室温下放臵1小时左右至无丙酮味,然后转移到盛有五氧化二磷的真空干燥器中干燥,干燥后的丙酮粉臵于低温冰箱中保存备用。
从丙酮粉中提取酶可往丙酮粉中加抽提液搅拌,过滤或离心即可。
优点:丙酮处理一方面能有效地破坏细胞壁(膜);另一方面由于丙酮是脂溶剂,这种处理有利于除去大量脂类物质,有时这种处理还能使某些结酶易于溶解;此外,丙酮干粉含水量低,易于保存.缺点:丙酮可能引起某些酶变性失效,有些酶则根本不能采用此法。
第五章酶化学一、填空题1.全酶由酶蛋白和辅助因子组成。
辅助因子包括辅酶和辅基等。
其中辅基与酶蛋白结合紧密,辅酶与酶蛋白结合疏松。
2.根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可以分为六大类氧化还原酶类,转移酶类,水解酶类,裂合酶类,异构酶类和连接酶类。
3.根据酶的专一性程度不同,酶的专一性可以分为绝对专一性、相对专一性和立体专一性。
4.关于酶作用专一性提出的假说有锁钥学说和诱导契合假说等几种。
5.酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中结合部位直接与底物结合,决定酶的专一性,催化部位直接参加催化,决定催化反应的性质。
6.酶活力是指酶所催化的化学反应的速率。
酶活力的大小用酶活力单位来表示。
7.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴上的截距为 -1/km ,纵轴上的截距为 1/Vmax 。
8.糖原磷酸化酶是通过磷酸化与脱磷酸化进行共价修饰调节酶活性。
9.酶的活性部位通常位于酶分子表面的疏水裂隙中,即位于疏水的微环境中,从而使酶与底物之间的作用加强。
10.酶反应速度受许多因素的影响。
以反应速度对底物浓度作图,得到的是一条双曲线。
11.有的酶在分泌时是无活性的酶原,需要经某种酶或酸将其分子作适当的改变或切去一部分才能呈现活性,这种激活过程称酶原激活作用。
12.有些酶分子除具有与底物结合的活性部位外,还具有与非底物的化学物质结合的部位,这种部位有别于活性部位,而且与之结合的物质都对其反应速率有调节作用,故称别构部位,具有该部位的酶称别构酶。
13.根据酶蛋白分子的特点将酶分为三类,即单体酶、寡聚酶和多酶复合物。
二、选择题:1.下列有关酶的描述正确的是?( A )(A)组成酶活性中心的各个基团可能来自同一条多肽链,也可能来自不同多肽链。
(B)酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。
(C)酶活力随反应温度升高而不断地加大。
(D)酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,则最适温度低。