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(TP+ALB测定)课件

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生物化学与分子生物学课件：实验五、TP、Alb测定

生物化学与分子生物学课件：实验五、TP、Alb测定
进行定量测定。
由于生物样品中常混有核酸，核酸对紫外光也有吸收，但其峰值在 260nm附近，因此可用下列经验公式计算蛋白质浓度。
Lowry-Kalckar公式：蛋白质浓度(g/L)=1.45A280－0.74A260 Warburg-Christian公式：蛋白质浓度(g/L)=1.55A280－0.76A260 A280 、A260分别代表光径为1cm ，波长为280nm和260nm时样品 的吸光度。
(4)血浆稀释：如静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水钠潴留。
2．血清总蛋白浓度增高 (1)蛋白质合成增加：大多见于多发性骨髓瘤患者，此时主要是异常球蛋白 增加，使血清总蛋白增加。
(2)血浆浓缩：如急性脱水(如呕吐、腹泻、高烧等)，外伤性休克(毛细血管 通透性增大)，慢性肾上腺皮质功能减退（尿排钠增多引起继发性失水）。
【操作步骤】
混匀，室温10min，630nm处用B管调零，读取As、 Au （30min内比色）。
【结果计算】
标准血清 TP含量：70g/L Alb含量：40g/L
球蛋白： G= TP- Alb A/G比值： Alb/ Glb
【参考值】
TP：65~85 g/L Alb：40~55 g/L Glb：20~30 g/L A/G：1.5~2.5/1
一、分光光度计的使用
【仪器原理】 分光光度法是利用物质特有的吸收光谱，进行物质鉴定及测定其含量
的一种技术。 光线是一种电磁波，其中可见光波长范围约由760nm的红光到400nm
的紫光，波长短于400nm的光线叫紫外光，长于760nm的叫红外光。
当光线通过透明溶液介质时，其中一部分光可透过，另一部分光被吸 收，这种光被溶液吸收的现象可用于某些物质的定性及定量分析。

TP抗体的测定及临床意义教材教学课件

TP抗体的测定及临床意义教材教学课件

利用生物传感器对TP抗体进行快速、实时 检测，具有操作简便、高通量等优点。
TP抗体研究的最新成果
新型TP抗体检测试剂盒的研发
01
针对TP抗体的特异性检测，开发出灵敏度高、特异性强、操作
简便的试剂盒，为临床诊断提供有力支持。
TP抗体与疾病关联性的研究
02
深入探讨TP抗体与疾病发病机制、病程进展及预后的关系，为
03
TP抗体的治疗与预防
TP抗体的治疗方法
药物治疗
使用抗生素、抗炎药等药 物进行治疗，以降低TP抗 体滴度，缓解症状。
免疫抑制疗法
通过抑制免疫系统反应， 减少TP抗体的产生，缓解 病情。
血浆置换疗法
通过置换血浆，去除体内 TP抗体，达到治疗目的。
TP抗体的预防措施
避免接触感染源
避免与感染TP抗体的人接触，以 降低感染风险。
提高免疫力
保持健康的生活方式，加强锻炼， 提高自身免疫力，预防感染。
定期检测
对于高危人群，定期进行TP抗体 检测，以便早期发现和治疗。
TP抗体的治疗效果评估
临床评估
随访观察
根据患者的症状和体征，评估治疗效 果。
定期随访观察患者情况，评估病情稳 定性和复发风险。
实验室检测
通过实验室检测TP抗体滴度，评估治 疗效果。
TP抗体的检测方法
1 2
酶联免疫法（ELISA） 利用酶标记的抗原或抗体与待测样本中的抗原或 抗体结合，通过显色反应来检测梅毒螺旋体抗体 的方法。
化学发光法
利用化学发光技术来检测梅毒螺旋体抗体的方法， 具有高灵敏度和高特异性的特点。
3
快速血浆反应素试验（RPR）
一种快速、简便的检测方法，通过观察血清在一 定条件下与活性炭颗粒的反应来判断是否存在梅 毒螺旋体抗体。

生化检测项目与临床意义ppt课件

生化检测项目与临床意义ppt课件
7
肝功（ AST ）
AST即门冬氨酸基转移酶，主要分布在肝、 心细胞质内。检测方法：酶速率法。正常值： 45土20U/L。
临床意义：当肝脏严重受损时，此酶会释放 入血，引起酶的活性浓度增加，⑴用于急性 心梗死。⑵用于肝炎患者的观察。
8
肝功（ ALP ）
ALP即碱性磷酸酶，主要分布在肝脏，其次 是肾，胎盘，小肠，骨。检测方法：酶速率 法。正常值：160土120 U/L。
肾脏功能检测的项目包括：CRE、BUN、 UA，TP。
12
肾功（ CRE ）
CRE即肌肝，肌肝是肌酸代谢的终产物，当 肾脏受损是血中的肌肝就会升高。检测方法： 碱性苦味酸法。正常值：165土20 umol/L。
临床意义：⑴血液中升高时，表示肾脏受损。 ⑵进食会对结果有影响，⑶剧烈运动也会使 血液里的肌肝升高。
13
肾功（ BUN ）
BUN即尿素，血中BUN的浓度是反映肾脏功 能的一个指标，肝内生成的尿素进入血液循 环后主要经过肾脏排泄，当肾脏受损时，血 中的尿素就会升高。检测方法：尿素酶法。 正常值：7.0土1.0mmol/L。
临床意义：⑴血液中升高时，表示肾脏受损。 ⑵尿路结石,肿瘤等也会引起尿素的升高.⑶蛋 白质分解亢进也会升高。⑷生理性升高,如高 蛋白饮食,妊娠期．
胆红素、胆酸、药物等的排泄功能，ⅲ解毒功能： 参与药物、毒物等的氧化、还原、水解和结合等。 ⅳ凝血因子和纤溶因子，纤溶抑制因子的生成及 对活性凝血因子的清除等 肝功能检测的项目包括：TP，ALB，ALT，AST， GGT，ALP，BIT。
3
肝功（TP）
TP即总蛋白，是血浆含量最多，成分极为复 杂，功能广泛,肝脏合成的一类化合物，其中 主要含白蛋白，球蛋白。检测方法：双缩脲 比色法。正常值：100土10g/L。

实验六 血清白蛋白测定(精美课件)

实验六 血清白蛋白测定(精美课件)

甲胎蛋白
血浆蛋白质概述
血浆蛋白质的分类：
按分离方法分类 盐析法 ：可将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。
清蛋白
血浆蛋白质概述
清蛋白(Alb)是血浆中含量最多的蛋白质，约占血
浆蛋白总量的57％～68％。在pH7.4的环境中，每分子
可带200个以上的负电荷，可作为许多物质的运输载体。
Alb由肝细胞合成，合成速度受蛋白质摄入量及血
实验六 血清白蛋白测定
学习要求
1 掌握溴甲酚绿法测定血清白蛋白的基 本原理和方法
2 了解血清白蛋白的测定方法
3 掌握血清白蛋白的参考区间和临床意义
血浆蛋白质概述
血浆中几种主要的蛋白质：
前清蛋白
清蛋白
铜蓝蛋白
转铁蛋白
结合珠蛋白
α1-酸性糖蛋白 C-反应蛋白 癌胚抗原
蛋白质
α1-抗胰蛋白酶
α2 -巨球蛋白 纤维蛋白原
BCP结合法
优点 灵敏度高，与人及动物 与Alb以外的血浆蛋白质结合少， 标本中的Alb结合力差异 干扰小 不大
缺点
除了与Alb结合外，还可 灵敏度较低，与动物标本中的
与血清中其他多种蛋白 Alb结合力相当弱，质控血清多
质也可结合
采用动物血清制备，因此应用
ห้องสมุดไป่ตู้
受限
试剂与器材
试剂与标本 1、0.5 mol/L 琥铂酸缓冲贮存液（PH4.1） 2、BCG贮存液（10mmol/L）（溴甲酚绿、NaOH 溶液） 3、叠氮钠贮存液 4、BCG试剂 5、白蛋白标准液（40g/L） 主要器材 分光光度计
第二节 体液蛋白质检验
血清清蛋白测定：
测定Alb的方法中，目前实验室应用最广的是染料结合法 与Alb结合的染料有多种，其中溴甲酚绿(BCG)和溴甲酚

检 验 科_PPT课件

检 验 科_PPT课件

•
〔检查项目〕
•
⑴ 肝炎病毒系列：抗-HAV、HBc-IgM、抗-HCV、丁肝抗体、
戊肝抗体。
•
⑵ 抗-HIV
•
⑶ 优生优育系列：TORCH
•
⑷ EB病毒抗体
•
〔检查目的〕不同病毒感染的病原学诊断。
•
〔适应症〕 相关病毒感染性疾病。
• ⒊肿瘤标志物检查
•
〔检查项目〕
•
⑴ 癌胚抗原：AFP、CEA
•
•
〔检查目的〕协助诊断PNH病。
•
• ⒑ 自体溶血性疾病
•
〔检查项目〕Coomb’s
•
〔检查目的〕协助诊断自身抗体溶血性疾病。
• ⒒ 血液病形态学检查
•
〔检查项目〕骨髓血细胞的光镜形态学检查。
•
〔检查目的〕诊断白血病及协助相关疾病诊
断。
• ⒓ 新生儿疾病筛查
•
〔检查项目〕PKU、GAL、TSH、G-6-PD。
度。
•
⑵ 血液高凝状态检查：血浆纤维蛋白原含量、凝血
酶原活动度、血浆D -二聚体测定。
•
⑶ DIC检查：血小板计数、凝血酶原时间测定、活化
部分凝血酶时间测定、血浆纤维蛋白原含量、3P试 验、
D－二聚体测定。
•
⑷ 抗凝治疗效果监测：国际标准化比值（INR）监测
口服抗凝药物剂量
•
〔检查目的〕中老年人定期健康体检，协助诊断血栓
•
12. 肺炎支原体抗体测定
• 13. 幽门螺杆菌检查：C14－呼气试验
临检检查项目
• ⒈ 血液一般检查
•
〔检查项目〕全血细胞分析（23、26、31项指标）、白细胞显微镜分类、

【PPT】犬猫血液生化分析

【PPT】犬猫血液生化分析
2. 在小动物，GGT升高反映了胆汁郁积，通常 ALP并行升高。在猫GGT比ALP显得更为敏 感，在一些肝脏疾病，GGT相关性增加可能 比ALP更高，如：胆管堵塞或肝硬化。猫特 异性肝脂沉积症是特例，ALP增长与GGT不 相称。
血清γ－谷氨酰转肽酶（GGT）：
3. 用糖皮质激素、抗惊厥药治疗犬时，可引起 GGT升高；
脂肪酶Lipase
1.脂肪酶是消化酶，由胰腺和胃粘膜产生； 2. 半衰期短，2小时； 3. 脂肪酶增高的原因有： A.急性胰腺炎，导致增高3－4倍； 1）诊断胰腺炎时脂肪酶比淀粉酶在更具有意义；
脂肪酶活性持续时间可能比其它酶更长； 2）慢性胰腺纤维病变，淀粉酶指标可能正常； 3）猫胰腺炎无法使用此酶来诊断；
1. 碱性磷酸酶几乎存在于机体的各个组织，但以 骨骼、牙齿、肝脏、肾脏含量较多。
2. 正常血清中的ALP主要来自骨骼，由成骨细胞 产生。
3. ALP经肝胆系统进行排泄。 4. 当ALP产生过多或排泄受阻时，均可使血中
ALP发生变化。
磷酸肌酸激酶（Creatine Kinase,CK）：
1. 磷酸肌酸激酶，主要存在于骨骼肌和心肌， 在脑组织中也存在，是参与体内能量代谢的 一种酶。
（六）肌酸激酶（CK-NAC)
参考值：
8-60 50-100
临床意义： 增高：心肌梗塞、皮肌炎、营养不良、肌肉损伤、甲状腺机能减弱
（七）乳酸脱氢酶（LDH)
参考值：
100 63-273
临床意义： 增高：心肌梗塞、白血病、癌舯、肌营养不良、胰腺炎、肺梗死、巨幼细胞性
贫血、肝细胞损伤、肝癌
（八）淀粉酶（AMY)
4. 测定此酶无特异性诊断意义，常用于对心梗 、 肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。

ALB测定


血清(浆)清蛋白(Alb)测定
清蛋白主要功能是调节血液的胶体渗透压，血浆胶体渗 透压的75～80％靠清蛋白维持，血浆清蛋白浓度过低时， 其胶体渗透压下降，可导致组织间隙潴留水分过多，呈现 水肿甚至腹水，此症多见于长期营养不良及肝癌、肝硬化 等清蛋白生成障碍的患者。
临床上主要用于治疗失血创伤和烧伤等引起的休克、脑 水肿，以及肝硬化、肾病引起的水肿或腹水等危重病症， 以及低蛋白血症病人，俗称“生命制品”、“救命药”。
妊娠，尤其是妊娠晚期，由于体内对蛋白质需要量增加，又 同时伴有血浆容量增高，血清清蛋白可明显下降，但分娩后可迅 速恢复正常。
血清(浆)清蛋白(Alb)测定
血清ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ蛋白临床意义
（1）球蛋白浓度增高：临床上常以γ-球蛋白增高为主，多见于 炎症、免疫系统疾病和肿瘤：
①细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性感染：结核病、麻风病、 疟疾、黑热病、血吸虫病、病毒性肝炎。
血清清蛋白临床意义
1. 清蛋白浓度增高：除严重脱水，血浆浓缩而使清蛋白增高外， 尚未发现单纯清蛋白浓度增高的疾病。
2. 清蛋白浓度降低：同总蛋白浓度降低。
急性清蛋白浓度降低，主要由于急性大量出血或严重烫伤时 血浆大量丢失。
慢性清蛋白浓度降低主要由于肝脏合成清蛋白功能障碍、腹 水形成时清蛋白的丢失和肾病时尿液中的丢失，严重时清蛋白浓 度可低于10g/L。清蛋白浓度低于20g/L时，由于胶体渗透压的下 降，常可见到水肿等现象。
②自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热、类 风湿性关节炎等。
③多发性骨髓瘤和淋巴瘤：多发性骨髓瘤是一种单克隆疾病， 它是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig血症。淋巴瘤也属 单克隆疾病。此时γ-球蛋白可增至20~50g/L。 （2）球蛋白浓度降低：主要是合成减少，也可见于血液稀释、 严重的营养不良、胃肠道疾病等。

(TP+ALB测定)课件

实验二
双缩脲法测定血清或血浆总蛋白（TP）
溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白（ALB）
临床生化教研室 刘素兰 雷燕
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（一）双缩脲法测定血清或血浆总蛋白
【目的】
掌握：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的基本原理
及操作
熟悉：血清或血浆总蛋白测定的临床意义
了解：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的特点及注
意事项
【原理】---血清或血浆总蛋白测定
【注意事项】
1.黄疸血清或血浆、严重脂血、溶血；葡萄糖、酚酞及溴
磺酞钠对本法有明显干扰。 2.蛋白质的浓度单位用“g/L”。 3.吸光度的大小与试剂的组分、pH、反应温度有关。 4.双缩脲试剂中各成分的作用： 碱性酒石酸钾钠：与铜离
子(Cu2+) 形成络合物并维持铜离子在碱性溶液中的 稳定
性 ；碘化钾：抗氧化剂（KI--防止碱性酒石酸铜自动还原 并防止Cu20的沉淀)。
2.血清或血浆总蛋白浓度增高
(1)蛋白合成增加 ：如多发性骨髓瘤。
(2)血浆浓缩：凡体内水分的排出大于水分的摄入
时，均可引起血浆浓缩。
（二）溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白
【目的】
掌握：溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白的原理及 操作 熟悉：血清或血浆白蛋白测定的临床意义 了解：溴甲酚绿法测定清白蛋白的特点及注意事项
【临床意义】
1.血清或血浆总蛋白浓度降低
(1)蛋白质合成障碍：主要是肝功疾病。
(2)蛋白质丢失增加：严重烧伤、大出血、肾病综合征。
(3)营养不良或消耗增加：长期食物中蛋白质含量不足或 慢性肠道疾病引起的吸收不良；长期消耗性疾病，严 重结核病、甲亢、恶性肿瘤等。 (4)血浆稀释：各种原因引起的水钠潴留。

肝肾功能检查课件


肝细胞损伤
表现为ALT、AST升 高，可能与病毒性肝 炎、药物性肝损伤等 有关。
胆汁排泄障碍
表现为TBil、DBil升 高，可能与胆道梗阻、 胆汁淤积等有关。
蛋白质代谢异常
表现为TP、ALB降低， 可能与肝硬化、营养 不良等有关。
凝血功能障碍
表现为PT、APTT延 长，可能与肝衰竭、 维生素K缺乏等有关。
肝肾功能检查常采用生化分析方法，包括 比色法、酶法等。
结果记录
将检测结果记录在检查报告单上，并核对 相关信息。
样本前处理
对血液样本进行离心处理，分离出血清或 血浆。
加样与检测
将处理后的样本加入试剂中，利用生化分 析仪进行检测。
试剂准备
根据检查项目选择相应的试剂，并按照说 明书要求进行配制。
结果判读与报告
不同类型的肝炎在肝功能检查中表现不同， 如病毒性肝炎常有ALT、AST升高，而自身 免疫性肝炎则可能出现抗核抗体等免疫指标 异常。
肾病的诊断与鉴别诊断
不同类型的肾病在肾功能检查中表现不同， 如肾小球肾炎常有尿蛋白、血尿等表现，而 肾盂肾炎则可能出现白细胞尿等感染征象。
治疗监测与预后评估
治疗效果评估
早期发现潜在问题
肝肾功能检查可以在早期 发现潜在的肝肾问题，避 免病情恶化。
指导临床治疗
根据检查结果，医生可以 制定相应的治疗方案，调 整药物使用等。
常见检查项目
肝功能检查项目
包括谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨 酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白 （ALB）、球蛋白（GLB）、总胆红 素（TBIL）等。
剧烈运动可能会影响检 查结果，因此在检查前
应避免剧烈运动。
02 肝脏功能检查
CHAPTER

卫生检验蛋白质ppt课件

(2).本法线性范围10-60g/L，RCV﹤4%。与溴甲酚紫法(BCP)比较,对 ALB特异性较差. 。
15
6.溴甲酚紫法测定ALB 原理 ALB在PH5.2的缓冲液中带正电荷,在有Brij-35存在，可与带
负电荷的染料溴甲酚紫(BCP)结合形成绿色复合物，在波长603nm 处的吸光度与ALB浓度成正比，与同样处理的ALB标准比较，可求 出血清中的ALB含量。
①凯氏定氮法:是经典的蛋白质测定方法,准确性好、精密度和 灵敏度高、是公认的参考方法。但操作复杂、费时,主要 用于标准蛋白质的定值和对其他方法的校正。
②双缩脲法：特异性高、准确度和精密度好，方法简便、显 色稳定。虽然灵敏度不高，但能满足临床对血清TP定量 测定要求，是临床测定血清TP的常规方法。
4
1. TP测定方法简介:
0.154mol/LNaCl BCP试剂
B — — 0.025 5.0
S — 0.025 — 5.0
U 0.025 — — 5.0
混匀，1min后603nm比色，空白管调零，读取吸光度。 计算
17
8.溴甲酚紫法测定ALB 参考值：36-46g/L
注意事项： (1).BCP溶液PH必须控制在5.20 ±0.03范围内。 (2).严重脂血对测定有干扰，应加做标本空白予以校正。 评价: BCP反应最适PH为5.20,接近-和-球蛋白的等电点,抑制了 这两种球蛋白与BCP的非特异性反应,对测定ALB有较高的特异性.进 口试剂多为此法。BCP与ALB的反应为即时完全反应,不受时间和温度 变化的影响,呈色后稳定1h以上。本法兼有BCG法的所有优点,克服了 BCG的多数缺点,成为测定血清ALB染料结合法中较好的一种方法。 BCP法优点:受球蛋白和其他血浆蛋白干扰较小,对测定ALB有较高的特异性. 与BCG法相比,灵敏度较低.此外,溴甲酚紫与非人源性的白蛋白结合力相 当弱,与牛、猪等动物血清反应性仅为BCG的1/3，不适用于测定动物标本
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【报告方式】
血清或血浆(浆) 白蛋白： △ △. △ g/L
【注意事项】
1.控制反应液的pH是本法测定的关键。试剂混浊，pH范围超 过4.1-4.3，试剂不能用。
2.BCG与白蛋白的反应强度和环境温度有关。 3.由于在30s内呈色对白蛋白特异（快反应），BCG与血清或
血浆混合后，在30s读取吸光度，可明显减少非特异性呈色 反应。 4.叠氮钠有防腐的作用；聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35） 可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度，提高呈色的稳定 性，也可用其他表面活性剂，灵敏度和线性范围不变。
【原理】---血清或血浆总蛋白测定
所有蛋白质都含有肽键（-CO-NH-)。在碱性溶 液中，肽键与铜离子结合，生成稳定的紫红色络合 物。根据紫红色络合物在540nm的吸光度在一定范 围内与蛋白质的含量呈正比关系，经与同样处理的 蛋白标准液比较，即可以求得蛋白质含量。
碱性
肽键+Cu2+
紫红色络合物（A540nm）
【结果计算】
血清或血浆总蛋白（ｇ/L）
测定管吸光度-空白管吸光度
=
×总蛋白标准液浓度
校准管吸光度-空白管吸光度
【报告方式】
血清或血浆(浆)总蛋白： △ △. △ g/L
【注意事项】
1.黄疸血清或血浆、严重脂血、溶血；葡萄糖、酚酞及溴 磺酞钠对本法有明显干扰。 2.蛋白质的浓度单位用“g/L”。 3.吸光度的大小与试剂的组分、pH、反应温度有关。 4.双缩脲试剂中各成分的作用： 碱性酒石酸钾钠：与铜离 子(Cu2+) 形成络合物并维持铜离子在碱性溶液中的 稳定 性 ；碘化钾：抗氧化剂（KI--防止碱性酒石酸铜自动还原 并防止Cu20的沉淀)。
实验二
双缩脲法测定血清或血浆总蛋白（TP） 溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白（ALB）
临床生化教研室 刘素兰 雷燕
（一）双缩脲法测定血清或血浆总蛋白
【目的】
掌握：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的基本原理 及操作 熟悉：血清或血浆总蛋白测定的临床意义 了解：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的特点及注 意事项
3.A／G比值：某些病人可同时出现白蛋白减 少和球蛋白升高的现象，严重者A／G比值 <1.0，这种情况称为A／G比值倒置。
【操作歩骤】
双缩脲法测定血清或血浆总蛋白操作歩骤
加入物(ml)
U1-2
S1
B1
待检血清或血浆 0.025 总蛋白标准液 纯水 双缩脲试剂 1.5
0.025 1.5
0.025 1.5
混匀，置25℃30分钟或37℃10分钟，用半自动生化分析 仪在波长540nm处比色，用蒸馏水调零，读取校准管和 测定管的吸光度值并记录。
Hale Waihona Puke BCG法优点：① 操作简便、快速、试剂单一。 ② 白蛋白具有与阴离子染料BCG（或BCP）结合而球蛋 白基本不结合的特性。 ③ 干扰物质少(溶血、胆红素、中度脂血无干扰)。 ④ 特异性、准确性较好、精密度好（RCV＜4％） 是目前临床测定血清或血浆白蛋白最用的常规方法。
【材料】
器材 半自动生化分析仪、水浴箱、 试管架、洗耳球、 5ml刻度吸管、15*100mm试管、微量加样器
●试剂
BCG试剂
pH4.2琥珀酸缓冲液 溴甲酚绿 叠氮钠 Brij-35（聚氧化乙烯月桂醚）
10mmol/L 16umol/L 0.50mmol/L 0.125g/L
【标本】
白蛋白标准液 52.5
g/L
样品号（样品1和样品2）
【操作歩骤】
BCG法测定血清或血浆白蛋白操作歩骤
加入物(ml)
U1-2
【原理】
白蛋白在pH 4.2的缓冲液中带正电荷，在有非 离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴 甲酚绿（BCG）结合形成蓝绿色复合物，在波长 630nm处有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正 比例，与同样处理的白蛋白标准比较，可求得白蛋 白含量。
溴甲酚绿+白蛋白 pH 4.2 蓝绿色复合物（A630nm）
【材料】
● 器材
半自动生化分析仪、水浴箱、 试管架、洗耳球、 5ml刻度吸管、15*100mm试管、微量加样器
●试剂
双缩脲试剂 硫酸铜 酒石酸钾钠 碘化钾 氢氧化钠
12.0 mmol/L 64.0 mmol/L 6.0 mmol/L 200 mmol/L
【标本】
总蛋白标准液 56.5
g/L
混合血清或血浆样本（样品1和样品2）
【临床意义】
1.血清或血浆总蛋白浓度降低
(1)蛋白质合成障碍：主要是肝功疾病。 (2)蛋白质丢失增加：严重烧伤、大出血、肾病综合征。 (3)营养不良或消耗增加：长期食物中蛋白质含量不足或
慢性肠道疾病引起的吸收不良；长期消耗性疾病，严 重结核病、甲亢、恶性肿瘤等。 (4)血浆稀释：各种原因引起的水钠潴留。
S2
B2
待检血清或血浆 0.01
白蛋白标准液
0.01
纯水
0.01
BCG试剂
2.0
2.0
2.0
混匀，用半自动生化分析仪立即在波长630nm处比色，用蒸馏 水调零，读取校准管和测定管的吸光度值并记录。
【结果计算】
血清或血浆白蛋白（ｇ/L）
测定管吸光度-空白管吸光度
=
×白蛋白标准液浓度
校准管吸光度-空白管吸光度
【临床意义】
1.血清或血浆白蛋白浓度增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。
2.白蛋白浓度降低 在临床上比较重要和常见，通常与总蛋白降低的原因
大致相同。急性降低主要见于大出血和严重烧伤；慢性 降低见于肾病蛋白尿、肝功能受损、肠道肿瘤及结核病 伴慢性出血、营养不良和恶性肿瘤等。血清或血浆白蛋 白低于20g／L，临床上出现水肿。
2.血清或血浆总蛋白浓度增高 (1)蛋白合成增加 ：如多发性骨髓瘤。 (2)血浆浓缩：凡体内水分的排出大于水分的摄入
时，均可引起血浆浓缩。
（二）溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白
【目的】
掌握：溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白的原理及 操作 熟悉：血清或血浆白蛋白测定的临床意义 了解：溴甲酚绿法测定清白蛋白的特点及注意事项
双缩脲法
优点： ① 操作简便、快速 、试剂单一、显色稳定。 ② 不同的蛋白质产生颜色的深浅相近。 ③ 干扰物质少。 ④ 特异性、准确性较好、精密度好(RCV为4％ CCV3.9 ％)。
缺点：
灵敏度较低(检出限为0.2～1.7g/L)。 灵敏度虽不高，但已能满足临床生化检验 的需要，是临床测定血清或血浆总蛋白的 首选常规方法