淀粉样物质染色液(Puchtler碱性刚果红法)

【疾病名】淀粉样变性
淀粉样变性是由多种原因造成的淀粉样物在体内各脏器细胞间的沉积，致使受累脏器功能逐渐衰竭的一种临床综合征。

淀粉样变性，也称淀粉样物质沉着症。

淀粉样物质是蛋白样物质，由于遇碘时，可被染成棕褐色，再加硫酸后呈蓝色，与淀粉遇碘时的反应相似，故称之为淀粉样变性。

淀粉样变的症状和体征是非特异性的，由所受累的器官和系统决定，常被原发疾病所掩盖，肾脏系统是表现最强烈的。

只有依靠活检才能确诊，皮下腹脂肪垫抽吸术和直肠黏膜活检是最常用的筛查方法，其他有用的活检部位是牙龈、皮肤、神经、肾和肝脏。

用刚果红染色的组织在可极化显微镜下可观察到淀粉样变性的绿色双折射特征。

用同位素标记血清AP的闪烁试验可以确诊淀粉样变性。

继发性淀粉样变性的预后取决于原发疾病的治疗是否成功，所有类型的肾淀粉样变性预后皆较差。

和多发性骨髓瘤相关的淀粉样变性预后最差，常在1岁内死亡。

局限性淀粉样肿块可被切除不再复发，心肌淀粉样变性是死亡的最常见原因，主要因心律失常或难治性心衰而死亡。

家族性淀粉样变性的预后因家系而异。

应及时就医，由医生诊断之后，根据具体情况积极治疗。

SP老年斑一般用刚果红染色，也可以用硝酸银染色。

NFT一般用硝酸银染色。

老年斑的染色方法是：Highman甲醇刚果红染色法1.甲醇刚果红染液: 刚果红0.5 g 甲醇80 ml 甘油20 ml2.碱性乙醇分化液: 氢氧化钾0.2 g 80%乙醇100 ml染色步骤:1. 切片脱蜡至水2. 甲醇刚果红染液染10～20分钟3. 用碱性乙醇分化液分化数秒4. 水洗5. 苏木素复染2分钟6. 水洗7. 脱水,透明,封固结果：淀粉样物呈桔红色。

Bielschowsky method(modified)既可显示SP又可显示NFT试剂配制：1、氨银乙醇液20%硝酸银水溶液30ml中加入20ml无水乙醇，混合；加氨水，出现沉淀后继续加氨水直至沉淀完全溶解；继续加氨水1－2ml；过滤三次（器材必须非常清洁）；置于棕色瓶中避光保存。

2、5%硫代硫酸钠固定液5g硫代硫酸钠，溶于100ml双蒸水中，避光保存。

实验步骤1、将已在37度恒温箱中的切片，二甲苯－70%脱蜡及脱水。

2、双蒸水清洗三次。

3、2－4%硝酸银水溶液中37度避光浸银30min。

4、倾去硝酸银水溶液，双蒸水清洗三次。

5、10%甲醛水溶液还原5min至切片呈微黄色。

6、双蒸水清洗三次。

7、擦干切片背面及组织周围水分，一次5片置于湿盒中。

8、滴加氨银乙醇液5分钟，每片200ul。

9、擦去组织周围及背面氨银液。

10、8%甲醛水溶液中浸泡，注意转动切片，到黄色不再加深。

11、蒸馏水清洗三次。

12、重复7、8、9、10步骤2－3次，直到显微镜下可清晰观察到斑块为止。

如染色过浅可继续重复；染色过重可用冰醋酸褪色。

13、蒸馏水清洗5min。

14、脱水及透明,封片。

供应病理性幽门螺旋杆菌水溶性伊红Masson革兰氏刚果红网状纤维染色液病理染色技术是病理学重要组成部分，应用于各种病理诊断，临床教学科研工作。

病理常规检查bai就是切片du的HE染色即苏木素伊红zhi染色。

特殊检查包括特殊染色dao(银染色、zhuanMASSON 染色、抗酸染色等)、免疫组织化学染色、基因检测（PCR、原位杂交、FISH等）。

幽门螺旋杆菌染色液Helicobacter pylori Stain Kit【产品介绍】幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori HP）人类慢性胃炎、消化性溃疡的病因之一，而且还与十二指肠溃疡的发生以及胃腺癌、胃粘膜相关淋巴样组织源性淋巴瘤有关。

【染色结果】镜检结果：细胞核呈深蓝色，腺体为淡蓝紫色，幽门螺旋杆菌染色深蓝紫色，形态为细短棒状，并略有弯曲，主要存在于胃组织的腺体凹槽部位和腺体浅表层上。

而且分布清晰可见易于辨认。

【成份】由幽门螺杆菌染色液组成。

其主要成分为硼酸、亚甲蓝和蒸馏水【产品优点】本染色液无毒、环保，对人体无伤害。

操作简捷，性能稳定，显色清晰。

所染切片保存时间长且不见褪色。

本染色液均使用进口原料，质量保证，价格低廉，为国内独家生产，物美价廉。

【适应症】本产品主要用于幽门螺杆菌的染色。

【所需仪器】光学显微镜、玻片、染缸、滴管、秒表、记号笔等。

伊红染液（水溶性）/苏木素-伊红染液/水溶伊红/四溴荧光素Eosin Stain Kit产品介绍：细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

一般与苏木素或者美兰等其他染料配套使用。

微生物学实验中，用于鉴别产酸性细菌的一种培养基添加剂。

水溶性伊红是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

淀粉样变原理淀粉样变是一种常用的分析方法，可用于检测食品中的淀粉含量。

其原理是基于淀粉与碘溶液之间的化学反应。

本文将详细介绍淀粉样变的原理和实验步骤。

一、淀粉样变的原理淀粉是一种多糖类化合物，由许多葡萄糖分子组成。

当淀粉与碘溶液接触时，淀粉分子链中的氢键会与碘形成复合物，产生蓝色或紫色的颜色。

这是由于碘与淀粉形成的复合物具有特定的吸收光谱，其吸收峰位于550-600纳米。

二、实验步骤1. 准备样品：将待测样品（如食品、植物组织等）研磨成细粉，并称取适量的样品。

2. 提取淀粉：将称取的样品加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀后放置一段时间，使淀粉充分溶解。

3. 过滤溶液：将溶解后的样品溶液通过滤纸过滤，去除杂质。

4. 取样：取适量的过滤后的样品溶液，放入试管中。

5. 加入碘溶液：向试管中加入适量的碘溶液，注意要滴加均匀。

6. 观察颜色变化：等待几分钟后，观察试管中溶液的颜色变化。

如出现蓝色或紫色，则说明样品中含有淀粉。

三、注意事项1. 实验过程中要注意避免碘溶液接触皮肤和眼睛，以免引起刺激或伤害。

2. 碘溶液需新鲜制备，避免长时间暴露于空气中，以免失去活性。

3. 样品要充分溶解，以保证反应的准确性。

4. 实验操作时要注意实验室的卫生和安全，避免交叉污染。

四、应用范围淀粉样变法广泛应用于食品行业，用于检测食品中的淀粉含量。

例如，可以用于检测面粉、大米、面条等食品中的淀粉含量，从而判断其质量和纯度。

此外，淀粉样变法还可用于检测其他领域中的淀粉含量，如植物学研究中对植物组织的分析。

淀粉样变是一种简单、快速且可靠的分析方法，可用于检测食品中的淀粉含量。

通过淀粉与碘溶液之间的化学反应，我们可以观察到溶液的颜色变化，从而判断样品中是否含有淀粉。

这种方法在食品行业和其他领域中有着广泛的应用价值，对于保护消费者权益和提高产品质量具有重要意义。

广州市外显子生物技术有限公司 www.focobio.com 甲醇刚果红染色液说明书

货号：S-1505 试剂盒组成：

组分 规格 规格

试剂 A 甲醇刚果红染色液 10 mL 50 mL

试剂 B 碱性酒精分化液 10 mL 50 mL 试剂 C Mayer 苏木素 10mL 50mL 说明书 1 份 1 份

储存条件：本试剂盒应贮存于相对湿度不大于 80%，无腐蚀 性气体和通风良好的室温环境。 保质期：原包装未开封试剂有效期为 12 个月，在有效期内 的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完。每次用完应及时 拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 检验原理：淀粉样物质对刚果红有选择性的亲和力，因此容 易着色。刚果红是一种分子为长线状的偶氮染料，它以胺基 和淀粉样物质的羟基结合，平行地附着在淀粉样物质的纤维 上而显红色。 适用范围：甲醇刚果红染色液适用于切片上淀粉样蛋白（又 称淀粉样物质）染色。 使用方法： 1、 石蜡切片常规脱蜡至水。

2、 用甲醇刚果红染液染 30 分钟。

3、 直接用碱性酒精分化液分化数秒。

4、 水洗 3-5 分钟。

5、 Mayer 苏木素染细胞核 5 分钟，PBS 洗 10 分钟。 6、 常规脱水透明，中性树脂封固。显微镜观察。

注意事项： 1、用碱性酒精分化时要掌握恰当，若分化不足，胶原纤维 也可着染，分化过夜时，淀粉样蛋白也可脱色。 2、淀粉样物质未染色的蜡片，在存放一年后，将逐渐减弱 与刚果红结合能力。

染色结果： 肠组织×100 结果判定： 淀粉样物质、弹力纤维染红色，细胞核呈蓝紫色。

基于质谱蛋白质组学的淀粉样变分型方法李剑北京协和医院血液内科lijian@淀粉样变是一种机制尚不明的系统性疾病●致淀粉样蛋白: 具有反向平行的折叠二级结构●伴侣蛋白共沉积SAP蛋白ApoE蛋白Apo A-IV蛋白●靶器官损害沉积效应直接细胞毒作用疑诊淀粉样变的可能●非糖尿病性肾病综合征●非缺血性的向心性肥厚的心肌病●不明原因肝大或者胆管酶增高●周围或自主神经病变●不可解释的面部或颈部瘀斑或出血●巨舌如何诊断?●病理学诊断●组织活检中发现均质粉染物质●刚果红染色阳性活检部位阳性率骨髓60%腹壁皮下脂肪70%唇腺50%舌体>80%受累器官(肾-肝-心> 90%识别刚果红:荧光vs 偏振光淀粉样变的类型多样:刚果红染色阳性不够类型前体物来源治疗AL轻链克隆性浆细胞化疗/ASCT AA血清致淀粉样变蛋白A肝脏原发病治疗SSA野生型甲状腺转运球蛋白肝脏对症处理ATTR突变型甲状腺转运球蛋白肝脏肝移植AFib纤维蛋白原α链肝脏肝移植AApoA1载脂蛋白A1肝脏/小肠肝移植透析相关β2微球蛋白-间断血滤非AL型并不少见英国注册登记研究Mayo诊所的肾脏淀粉样变亚型分布情况, %AL型vs. M蛋白●有M蛋白+是否就是AL型淀粉样变?●AL型淀粉样变是否都要有M蛋白+?AL型淀粉样变绝大部分都有M 蛋白●血免疫固定电泳(S-IFE●尿免疫固定电泳(U-IFE●血清游离轻链比(FLCR●至少1个阳性N=133例AL型淀粉样变M蛋白+ AL 型心脏淀粉样变性n=143ATTR (57%AL (43%SPEP/IFE/U-IFE+n=76AL n=56ATTRn=20FLCR+n=61ALn=53ATTRn=8组织内淀粉样变蛋白的鉴定方法●免疫组化法/免疫荧光法(IHC●免疫电镜荧光法●已知突变基因的DNA测序●质谱法新鲜组织全蛋白质谱激光显微切割+质谱●假阴性率高✓316例AL型中只有121例有阳性组化结果✓商品化抗体种类少✓抗体质量影响✓蛋白构象变化导致抗体结合位点丧失●假阳性率高-缺乏主导蛋白✓组织泛染,κ-λ均阳性✓标本处理过程中蛋白杂质污染免疫组化法不再推荐用于AL淀粉样变分型高通量分析直接显示全部蛋白构成,无需逐一检测各种致病性蛋白蛋白鉴定不受构象变化影响鉴定突变型蛋白不依赖于基因检测利于发现新的致病蛋白种类激光显微切割联合质谱蛋白质组学(LMD/MS微量蛋白提取LMD/MS 鉴定亚型有着高特异性和敏感性N部位敏感性特异性备注113神经100%100%部分为IHC 分型失败病例241心脏98%100%IHC 分型成功率为42%321神经100%NA 均为IHC 失败病例。

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。