生化实验课程设计题目-2013[1]

成绩教师签名生化实验课程设计题目茶叶蛋白质含量的测定姓名黄舟舸学号3110519027学院生物与化学工程学院专业班级制药111一、实验目的：1、测定茶叶中的蛋白质。

2、探究PH对提取率的影响。

3、探究温度对提取率的影响。

4、探究提取时间对提取率的影响。

二、实验原理：蛋白质是生物最重要的基本组成成分之一,是与营养、免疫、新陈代谢、生命的起源和进化等都息息相关的。

由于蛋白质在体液中的含量可作为人体营养健康、疾病诊断的重要指标,因此蛋白质的定量测定在生命科学、临床医学和化学研究中占有十分重要的地位。

茶叶蛋白质由于主要为谷蛋白等难以直接被人体消化吸收的蛋白质，因此研究开发茶蛋白的工作尤其是工业化生产茶蛋白的工作进展很慢。

但是茶蛋白中氨基酸组成是丰富合理的，含有16~18种氨基酸，且必需氨基酸是齐全的。

因此，将茶蛋白提取纯化后适当改性，可以变为消化吸收性较好的食用、饲用蛋白资源，甚至加工成食用乳化剂、起泡剂和胶凝剂等产品。

本实验以制取茶多酚之后的茶渣为原料,通过优化提取条件用pH3.0,NaCl浓度0.20mol/L的水溶液,料液比1∶5于25℃下搅拌提取,离心、过滤后用紫外吸收法测定产品中的蛋白质含量。

蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收，这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的，所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。

另外核蛋白或提取过程中杂有的核酸对测定结果引起极大误差，其最大吸收在260nm。

所以同时测定280及260nm两种波长的吸光度，通过计算可得较为正确的蛋白质含量。

三、实验器材1、仪器设备数字计流仪、台式离心机、自动部分收集器、色谱柱、精密PH计、组织捣碎机、电动搅拌器、水循环真空泵、紫外分光光度计、温度控制器等。

2、试剂耗材生产茶多酚后的茶渣、酒石酸亚铁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、盐酸、硫酸二胺等（试剂药品均为分析纯）。

四、实验步骤：1、茶叶蛋白质的提取称取一定量的茶渣,浸泡0.5h,用中性水加热回流提取3次,提取液4层纱布滤过,滤液离心(2000r/min,20min),取上清液并定容至500ml,即得样品液W e。

课程设计说明书课程名称：生物分离工程设计题目：牛血清白蛋白的分离提纯工艺院系：环境与化学工程学院学生姓名：***学号：41004020111专业班级：10级生物工程01班指导教师：***2013年6月20日目录1.设计任务书 (1)2.设计背景 (1)2.1 牛血清白蛋白分离提纯的简介 (1)2.2 牛血清白蛋白分离提纯的意义 (1)3.设计原理 (2)4.设计工艺流程及设计方案说明 (2)4.1对原材料的粗分级分离 (3)4.2对粗分离成分进行细分级分离 (3)4.3 蛋白的结晶与重结晶 (3)4.4 对分离出的蛋白质进行纯度鉴定 (3)4.5 牛血清白蛋白质分离提纯的整个工艺流程 (3)5.操作过程 (4)5.1蛋白质分离的准备阶段 (4)5.2细分级分离设备的设计 (4)5.3蛋白质的纯度鉴定 (8)6.参考文献 (8)7.课程设计心得 (9)1.设计任务书现有一混合物料液中含有酪蛋白（分子量：57000Da，pI 4.5）、β-乳球蛋白（分子量：35000Da，pI 5.1）、α-乳白蛋白（分子量：14000Da，pI 4.2）和牛血清白蛋白（分子量：66200Da，pI 4.7），设计一个分离纯化工艺纯化其中的牛血清白蛋白。

2.设计背景2.1 牛血清白蛋白分离提纯的简介蛋白质是（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。

因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。

机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。

蛋白质占人体重量的16%~20%，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。

人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。

蛋白质具有很多生物化学共性，运用相关性质进行蛋白质的分离制备多种不同的单一蛋白质，更好的为人们所有。

蛋白质的分离提纯技术已经很成熟，相关的工艺流程包含各种不同的分离提纯设备，这些设备运用蛋白质的不同原理对其进行分离纯化，单一蛋白质的分离提纯在现实生活中具有重要意义！2.2 牛血清白蛋白分离提纯的意义牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。

《生化实验技术与应用》实验设计方案实验项目：水果基因组DNA 的提取与转基因成分分析 专业：生物技术 班级：101 日期：3月1日 一、实验目的：1、掌握提取植物组织基因组DNA 的基本方法。

2、掌握二苯胺法和紫外分光光度法测定DNA 含量的原理和方法。

3、学会转基因植物转基因成分的分析4、学习DNA 的水平式琼脂糖凝胶电泳并学会操作。

5、掌握高速冷冻离心机、微量移液枪、水平电泳仪等仪器设备的使用。

二、实验原理：核酸是生物有机物体重的重要组成成分，在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起。

核酸分为DNA 和RNA 两大类，前者主要存在于细胞核内，后者主要存在于细胞质及核仁里。

在制备核酸时，通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，使核蛋白被释放出来。

苯酚可使蛋白质变性，蛋白质溶于酚相，DNA 则溶于上层水相。

将氯仿与苯酚混合使用，可减少酚相中因水的存在而造成DNA 的少量溶解。

95%乙醇可使核酸从水相中沉淀出来，用70%的乙醇洗涤可以除一些盐分，经Rnase 降解RNA ，可得较纯的DNA 。

DNA 含量与纯度测定，目前常用紫外吸收法，利用核酸在260nm 有吸收峰，根据公式[DNA(μg /mL)=A260*50*稀释倍数]可计算出核酸DNA 的浓度。

由于蛋白质在280nm 有吸收峰，可根据比值判断DNA 纯度：A260／A280＜1.8时，表明蛋白质含量偏高；1.8＜A260／A280＜1.9时，表明样品较纯；A260／A280＞2.0时，表明RNA 或DNA 碎片较多。

二苯胺法定量测定DNA 的原理为：在强酸、加热条件下，可以使DNA 中的嘌呤碱基与脱氧核糖间的糖苷键断裂，产生嘌呤碱基、脱氧核糖与嘧啶核苷酸。

其中，2’-脱氧核糖在酸性环境中成为w-羟基-r-酮基戊醛，此物与二苯胺反应生成蓝色化合物，在595nm处有最大吸收。

DNA在40-400ug范围内光吸收值与DNA 含量成正比。

在转基因技术中，外源基因导入到植物体中时，通常使用花椰菜花叶病毒CaMV35S启动子启动下游编码基因的转录。

课程目标：1. 理解生化检测的基本原理和重要性。

2. 掌握常见生化检测项目的指标及其临床意义。

3. 学会分析生化检测报告，并能应用于临床实践。

课时安排：2课时教学对象：医学检验专业学生教学资源：1. PPT课件：《生化检测基础》、《常见生化检测项目讲解》2. 教案纸3. 实验器材：试管、滴管、试剂等4. 案例分析：临床病例报告教学过程：第一课时一、导入1. 引导学生回顾医学检验的基本概念和作用。

2. 提出问题：什么是生化检测？它在医学检验中有什么重要性？二、讲解生化检测的基本原理1. 介绍生化检测的基本概念和分类。

2. 讲解生化检测的原理，包括酶学检测、光谱法、电化学法等。

3. 通过PPT展示生化检测的基本原理图解。

三、常见生化检测项目讲解1. 肝功能检测：讲解肝功能检测的指标及其临床意义，如ALT、AST、ALP、TBil 等。

2. 肾功能检测：讲解肾功能检测的指标及其临床意义，如BUN、Scr、eGFR等。

3. 心功能检测：讲解心功能检测的指标及其临床意义，如LDH、CK、CK-MB等。

4. 血糖、血脂检测：讲解血糖、血脂检测的指标及其临床意义，如FBG、HbA1c、TC、LDL-C等。

四、案例分析1. 分享临床病例报告，引导学生分析生化检测报告。

2. 讨论病例中生化检测指标的变化及其临床意义。

第二课时一、复习与巩固1. 复习上节课所学的生化检测基本原理和常见检测项目。

2. 通过提问和讨论，检验学生对所学知识的掌握程度。

二、分析生化检测报告1. 讲解如何分析一份生化检测报告。

2. 分享一份典型的生化检测报告，引导学生分析其中的指标变化及其临床意义。

3. 强调分析报告时应注意的细节，如参考值、变异系数、结合临床症状等。

三、实验操作1. 实验目的：让学生通过实际操作，加深对生化检测的理解。

2. 实验内容：进行一项生化检测实验，如肝功能检测中的ALT、AST等。

3. 实验步骤：讲解实验步骤，指导学生进行实验操作。

生化实验是现代生物学研究中非常重要的实验项目，其是生物学的基础性实验之一，能够提供很多的重要信息，对于研究生物学的相关领域有着非常重要的意义。

生化实验在教学中也占据着非常重要的位置，生化实验教案的设计也就显得尤为重要。

生化实验全套教案设计需要从实验的基础性方面入手，设计出符合授课对象基础知识水平和学习态度的实验教学方案。

在教案设计中，需充分考虑学生的各种知识脉络，例如物理、化学、生物等基础知识，还需要针对各种不同层次的同学，调整教学内容和难度。

生化实验全套教案设计要充分考虑实验条件和实验的安全性。

实验条件是评估整个实验教学成功与否的关键点。

需要在教案设计时充分考虑实验条件，包括实验材料、设备和技术，确保能够顺利完成整个教学过程。

同时，更加重要的是，教师需要为实验设计一个完善的安全操作方案，考虑不同实验条件下的好坏情况，预防事故的发生。

做好实验操作和安全防范，可以保证各个环节的顺利进行。

在教案设计中充分考虑实验的科学性，科学性是生物学研究中必不可少的一个方面，在生化实验中更是不可或缺的重点。

生化实验全套教案的设计需要充分考虑科学性，需要突出实验的科学特点，比如实验的目的、原理、操作步骤、程度等方面，从而使同学们获得更为深入的理解和认识。

在设计实验时，需要围绕实验目的和原理提出问题和难点，让同学们能够从实验中获得更加丰富和深入的知识。

在教案设计中充分考虑实验的教育意义。

生化实验不仅仅是一种教学方式，而且作为教育手段，也有着非常重要的作用。

在设计教学方案时，需要充分思考实验的教育价值，想办法让同学们在实验中得到更多的知识和启示，提高学生的实验能力和学习效率。

除了重要的实验操作和内容以外，还应该加强同学们的实验室合作能力,加强同学们的学术经验能力，帮助同学们更好地理解实验内容，提高实验收获，从而达到教育目的。

为了保障生化实验教学效果，设计生化实验全套教案，一定要细致，系统，周密，确保教学质量的同时也需要充分体现教育意义和科学性。

生化实验教案（优秀版）wo资料徐州工程学院教案纸实验五废水可生化性一、实验目的工业废水中所含有的有机物，有的不容易被微生物所降解，有的则对微生物有毒害作用。

为了合理地选择废水处理方法，或是为了确定进入生化处理构筑物的有毒物质容许浓度，都要进行废水可生化性实验。

鉴定废水可生化性的方法很多，利用瓦勃氏呼吸仪（简称瓦呼仪）测定废水的生化呼吸线是一种较有效的方法之一。

本实验的目的主要在于：1.熟悉瓦呼仪的基本构造及操作方法；2.理解内源呼吸线及生化呼吸线的基本含义；3.分析不同浓度的含酚废水的生物降解性及生物毒性。

二、实验原理微生物处于内源呼吸阶段时，耗氧的速率基本上恒定不变。

微生物与有机物接触后，其呼吸耗氧的特性反映了有机物被氧化分解的规律，一般来说，耗氧量大，耗氧速率高，即说明该有机物易被微生物降解，反之亦然。

测定不同时间的内源呼吸耗氧量及与有机物接触后的生化呼吸耗氧量，可得内源呼吸线及生化呼吸线，通过比较即可判定废水的可生化性。

当生化呼吸线位于内源呼吸线之上时说明废水中的有机物一般是可被微生物氧化分解得；当生化呼吸线与内源呼吸线重合时，则说明有机物可能是不能被微生物降解的，但它对微生物的生命活动尚无抑制作用；当生化呼吸线位于内源呼吸线之下时，则说明有机物对微生物的生命活动产生了明显的抑制作用。

瓦呼仪的工作原理是，在恒温及不断搅拌的条件下，使一定量的菌种与废水用KOH溶液吸收，因此，微生物的在定容的反应瓶中接触反应，反应产生的CO2耗氧将使反应瓶中氧的分压降低，测定氧分压的变化，即可推算出消耗的氧量。

三、实验设备1.瓦呼仪一台；2.离心机一台；3.活性污泥培养及驯化装置一套；4.测酚装置一套。

四、实验步骤1.活性污泥的培养、驯化及预处理(1) 取已建污水活性污泥或带菌土壤为菌种，在间竭式培养瓶中以含酚合成废水为营养、曝气或搅拌，以培养活性污泥。

(2) 每天停止曝气一小时，沉淀后去除上清液，加入新鲜含酚合成为水，并逐步提高酚的浓度。

课题：DNA提取与鉴定一、实验目的1. 学习DNA提取的基本原理和方法。

2. 掌握从动植物细胞中提取DNA的操作步骤。

3. 学习DNA的鉴定方法，包括观察DNA的紫外光吸收特性。

二、实验原理DNA是生物体内的遗传物质，存在于细胞核、线粒体等细胞器中。

DNA提取是将细胞内的DNA与其他成分分离的过程。

本实验采用酚-氯仿法提取DNA，该方法利用酚和氯仿的相容性将蛋白质等杂质去除，从而获得纯净的DNA。

三、实验材料1. 材料：新鲜鸡血、小麦种子、苹果等。

2. 试剂：酚-氯仿混合液、NaCl溶液、75%乙醇、蒸馏水、10×TE缓冲液、二苯胺试剂。

3. 仪器：研钵、离心机、移液枪、微量离心管、紫外可见分光光度计、显微镜。

四、实验步骤1. 材料准备：取新鲜鸡血、小麦种子、苹果等，分别研磨成匀浆。

2. 细胞裂解：将匀浆加入1.5倍体积的酚-氯仿混合液，剧烈振荡，静置10分钟。

3. 去除杂质：将混合液转移至新的离心管中，12000 rpm离心10分钟，弃去上层酚-氯仿层，保留下层水相。

4. DNA纯化：将水相中加入等体积的75%乙醇，混匀后静置10分钟，12000 rpm离心5分钟，弃去上清液，将沉淀用70%乙醇洗涤一次，12000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

5. DNA溶解：将沉淀溶于适量的10×TE缓冲液中。

6. DNA鉴定：a. 取少量DNA溶液，加入二苯胺试剂，观察颜色变化。

b. 使用紫外可见分光光度计测定DNA溶液在260 nm处的吸光度值。

五、实验结果1. DNA鉴定：通过二苯胺试剂，DNA溶液呈现蓝色，证明DNA提取成功。

2. 紫外可见分光光度计测定：DNA溶液在260 nm处的吸光度值为0.45，表明DNA 纯度较高。

六、实验讨论1. DNA提取过程中，酚-氯仿法的操作较为复杂，需要严格控制实验条件，以保证DNA的纯度。

2. 在DNA纯化过程中，乙醇沉淀法是一种常用的方法，可以有效地去除蛋白质等杂质。

生化实验全套教案第一章：引言1.1 课程背景1.1.1 生化实验是生物科学领域的重要实践活动，通过实验可以让学生更好地理解生物学的理论知识。

1.1.2 生化实验能够培养学生的实验操作能力、观察能力和分析能力，提高学生的实践技能。

1.1.3 通过本课程的学习，学生将掌握基本的生化实验原理和方法，为今后的生物学研究或工作打下坚实的基础。

第二章：知识点讲解2.1 生化实验的基本原理2.1.1 生化实验是基于生物化学反应的原理进行的，学生需要了解各种生化反应的基本原理。

2.1.2 学生需要了解生化实验中常用的仪器设备及其使用方法。

2.1.3 学生需要掌握生化实验数据处理的基本方法，如标准曲线法、酶活性计算等。

第三章：教学内容3.1 实验一：蛋白质的提取与鉴定3.1.1 实验原理：通过盐析法提取蛋白质，使用SDSPAGE电泳鉴定蛋白质。

3.1.2 实验材料：鸡蛋白、盐、SDS、PAGE胶等。

3.1.3 实验步骤：包括蛋白提取、蛋白分离、蛋白鉴定等步骤。

第四章：教学目标4.1 知识目标4.1.1 学生能够理解生化实验的基本原理和方法。

4.1.2 学生能够掌握实验操作技能，如蛋白提取、电泳等。

4.1.3 学生能够分析实验数据，得出合理的结论。

第五章：教学难点与重点5.1.1 学生需要掌握生化实验的基本原理和方法。

5.1.2 学生需要熟练操作实验仪器，掌握实验步骤。

5.1.3 学生需要学会分析实验数据，得出合理的结论。

后续章节待补充。

第六章：教具与学具准备6.1 教具准备6.1.1 生化实验室所需的仪器设备，如显微镜、离心机、PCR仪器等。

6.1.2 实验所需的化学试剂和生物材料，如蛋白酶、底物等。

6.1.3 实验讲义和相关参考书籍，供学生参考学习。

6.2 学具准备6.2.1 学生实验室所需的个人防护装备，如实验服、手套、护目镜等。

6.2.2 实验报告表格，用于记录实验数据和结果。

6.2.3 笔记本电脑或平板电脑，用于展示实验相关资料或软件操作。