HPLC法检测合成新橙皮苷二氢查尔酮

HPLC法测定橙皮苷含量
刘卫红
【期刊名称】《中国实验方剂学杂志》
【年(卷),期】2006(12)6
【总页数】2页(P70-71)
【关键词】含量测定方法;橙皮苷含量;HPLC法;高效液相色谱法;自制制剂;质量控制;健儿口服液;指标性成分;中药提取;制剂处方
【作者】刘卫红
【作者单位】河南中医学院第一附属医院
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2;R284.1
【相关文献】
1.HPLC法测定陈桂咳喘消胶囊中橙皮苷的含量 [J], 樊东升;张琳;胡飞霞;苗建铭
2.HPLC法测定加味藿香正气丸(大蜜丸)中橙皮苷的含量 [J], 罗吉;林佩贤
3.HPLC法测定和肝利胆颗粒中柚皮苷和新橙皮苷的含量 [J], 王健芬;许建平;张春花;杨深应;曹朴琼
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HPLC同时测定通腑理气颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量目的建立通腑理气颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量测定方法。

方法采用高效液相色谱法，Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 ?m），流动相为乙腈-水（20∶80），检测波长283 nm，体积流量1.0 mL/min，柱温30 ℃。

结果柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷分别在10.4～166.2、6.1～98、21.2～339.2 ?g范围内呈良好的线性关系，平均加样回收率依次为98.14%、98.36%、96.94%，RSD分别为1.58%、1.79%、2.75%。

结论本方法快速、灵敏，准确度高，可用于通腑理气颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量测定。

标签：通腑理气颗粒；柚皮苷；橙皮苷；新橙皮苷；高效液相色谱法通腑理气颗粒由枳实、陈皮、青皮、厚朴、山楂等饮片组成，具有清热理气、通腑消积功效，用于患者胃肠手术后胃肠功能的恢复，减少肠粘连和肠梗阻的发生。

枳实为方中君药，2010年版《中华人民共和国药典》采用测定辛弗林含量来控制饮片质量[1]。

芸香科植物枳实、陈皮、青皮中均含黄酮类成分、辛弗林和挥发油[2]。

其中黄酮类成分通过拟制手术后炎性介质释放，治疗手术后肠粘连有很好的疗效，以其作为指标成分，能够反映该制剂的质量。

已有文献报道采用高效液相色谱法（HPLC）测定饮片中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量[3]。

也有文献报道对制剂中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷中2种或3种黄酮类成分进行含量测定[4-5]。

为了更好控制本品质量，本研究建立一种同时测定制剂中多指标的方法。

现报道如下。

1 仪器与试药Agilent-1100高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；VWD检测器；Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 ?m），淮阴汉邦科技有限公司；FA1104型万分之一电子分析天平，上海天平仪器厂；水浴锅，巩义市英峪予华仪器厂；紫外分析仪WD-9403C型，北京市六一仪器厂。

HPLC测定止咳清肺口服液中橙皮苷的含量张宇博;刘光斌【期刊名称】《中国执业药师》【年(卷),期】2015(000)012【摘要】Objective:To develop a method for determination of hesperidin content in zhike qingfei oral liquid. Methods:The hesperidin content in the oral liquid was determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Inertsil C18(150 mm×4.6 mm, 5μm)column was used with acetonitrile- 0.1% acetic acid(22∶78, v/v)as the mobile phase. The flowrate was 1.0 ml/min while the detection wavelength was 283nm.Results:The linear range of hesperidin concentration was 0.8 ~9.6μg(r= 0.999 1). The mean recovery rate of hes-peridin was 99.9%(RSD =0.80%,n= 9).Conclusion:The method may be used for the quality control of Zhike Qingfei oral liquid.%目的：建立止咳清肺口服液中橙皮苷的含量测定方法。

方法：采用高效液相色谱法测定制剂中橙皮苷含量。

色谱柱为Inertsil C18（150 mm×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（22∶78，v/v），流速为1.0 mL/min，检测波长283 nm。

一、实验目的本实验旨在通过液相色谱法测定陈皮中陈皮苷的含量，验证实验方法的准确性和可靠性，并分析陈皮苷在陈皮药材中的含量水平。

二、实验原理陈皮苷是一种黄酮类化合物，具有多种生物活性。

本实验采用高效液相色谱法（HPLC）对陈皮中陈皮苷进行定量分析。

该方法基于陈皮苷在特定波长下的紫外吸收特性，通过建立标准曲线和样品分析，计算陈皮苷的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 陈皮药材（购自药材市场）- 陈皮苷对照品（纯度≥98%，购自中国药品生物制品检定所）- 甲醇（色谱纯）- 乙腈（色谱纯）- 水为超纯水- 其他试剂均为分析纯2. 实验仪器：- 高效液相色谱仪（配备紫外检测器）- 色谱柱：问度色谱科技Excsep C18，4.6250 mm × 5.0 m- 超声波清洗器- 电子天平- 移液器- 锥形瓶- 微孔滤膜四、实验方法1. 标准曲线的制备- 称取适量陈皮苷对照品，用甲醇溶解并定容至1 ml，得到浓度为0.4 mg/ml 的对照品溶液。

- 分别吸取0.5 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5 ml对照品溶液至5个锥形瓶中，用甲醇定容至5 ml，得到浓度分别为0.08 mg/ml、0.16 mg/ml、0.24mg/ml、0.32 mg/ml、0.40 mg/ml的标准溶液。

- 将标准溶液进样，记录峰面积，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 供试品溶液的制备- 称取陈皮药材粗粉（过二号筛）约0.2 g，精密称定。

- 将药材置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，密塞，称定重量。

- 超声处理（功率300 W，频率40 kHz）45分钟，放冷。

- 再称定重量，用甲醇补足减失的重量。

- 摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

3. 色谱条件- 色谱柱：问度色谱科技Excsep C18，4.6250 mm × 5.0 m- 流动相：乙腈-水（22：78）- 流速：1.0 ml/min- 检测波长：283 nm- 进样量：5 μl4. 样品测定- 将供试品溶液和标准溶液分别进样，记录峰面积。

血清与上述其它种鹿鞭进行凝集反应,结果仍呈阴性反应,因而需分别制备抗马鹿、抗驯鹿等血清,才有可能鉴别出不同种的鹿鞭。

这也说明我们制备的抗血清种属特异性较强。

414　对于阴性反应者,为了证明是否为伪品,我们制备了常见伪品抗羊、牛血清,其与几种鹿鞭抗原凝集反应均呈阴性,而与羊、牛鞭抗原凝集反应分别呈阳性。

在对抗梅花鹿血清呈阴性反应的样品中,再与抗羊、牛血清反应,呈阳性者就可确证其为何种伪品。

因此,只要制备正品(梅花鹿、马鹿)、类似品(驯鹿、白唇鹿、驼鹿)及伪品(羊、牛)的抗血清,建立储备有多种抗体的血清库,采用免疫凝集试验方法,就能随时准确鉴别各种鹿鞭及伪品。

参考文献1陈代贤,门启鸣1鹿、牛鞭的形态解剖及商品特征比较鉴别1中国药事,1996,10(4):2602仲昭庆,卢守奇1鹿鞭的电泳鉴别1中药材,1997,20(7): 3393王建云,何广新,付　文,等1鹿鞭的微量DNA提取及序列鉴定1中国中药杂志,1997,22(10):5794马　悦,刘　辉主编1研究生免疫学教程1大连:大连出版社, 1998:2555杨廷彬主编1免疫学及免疫学检验1北京:人民卫生出版社, 1998:936陶义训主编1免疫学和免疫学检验1北京:人民卫生出版社, 1997:977龙振洲主编1医学免疫学1第2版1北京:人民出版社,1996: 2118丁培贤,贺天笙1生物免疫化学法检定虎、豹骨的研究1中国药学杂志,1989,24(8):457HP LC法测定陈皮中橙皮甙的含量崔丽华　管玉民　王　健(山东省药品检验所　济南　250012)摘要　采用HP LC法测定陈皮中橙皮甙的含量。

色谱柱为C18,流动相为乙腈-014%磷酸溶液(20∶80),检测波长286nm,方法简便,准确,重现性好,平均回收率分别为:98191%,RSD为1131%(n=6)。

关键词　陈皮　橙皮甙　高效液相色谱法Determination of H esperidin in Pericarpium Citri R eticulatae by HP LCCui Lihua,G uan Y umin and Wang Jiang(Shandong Provincial Institute for Drug C ontrol,Jinan,250012) ABSTRACT　The HP LC method is established for the determination of hesperidin in pericarpium citri reticulatae.The separation is conducted on column C18with a m obile phase of acetonitril-phasphoric acid s olution and detected at 286nm.The average recovery is98191%.This method is sim ple,rapid,accurate and reproducibility.KE Y WOR DS　pericarpium citri reticulatae;hesperidin;HP LC 陈皮为常用中药,具理气健脾,燥湿化痰等功效,临床上用于胸脘胀满,食少吐泻,咳嗽痰多等症。

医学院药学系学生毕业论文论文题目：青皮中橙皮苷提取及纯度测定学生姓名：陈秀秀学号：20070640062专业：药学导师姓名：申睿沈丽霞二○一一年六月目录1.中文摘要 (1)2.英文摘要 (2)3.青皮中橙皮苷提取及纯度测定 (3)前言 (3)材料与方法 (4)实验结果 (7)附表 (8)附图 (9)讨论 (12)结论 (13)参考文献 (14)4.橙皮苷的研究进展 (16)5.致谢 (25)6.个人简历 (26)中文摘要青皮中橙皮苷提取及纯度测定陈秀秀河北北方学院医学院药学系药学专业07级目的：通过优化文献提取橙皮苷的方法得到提取橙皮苷的最佳工艺条件并采用TCL法进行定性鉴别（2010版药典第一部）；采用高效液相色谱法（HPLC）测定橙皮苷的纯度。

方法：以青皮为原料, 用碱液和甲醇做溶剂提取橙皮苷的条件为：粗苷：甲醇：碱液[NaOH浓度为0.1% ] = 1:23:47在85o C以上浸泡4 h, 调节pH 值为4。

即先将甲醇和碱液搅拌混合, 再将粗苷加入, 继续搅拌1h使粗苷溶解完全, 然后过滤至滤液澄清, 用盐酸调滤液的pH值至4, 静置沉淀, 过滤, 滤饼用煮沸过的水洗涤至无色, 甲醇滤液精馏回收, 橙皮苷的收率达85% 以上。

TCL鉴别出与橙皮苷对照品相对应的宽点；HPLC法测定出橙皮苷纯度为85.94%且理论塔板数不低于1000。

结论：此方法操作简便, 易控制且提取橙皮苷的效率较高，所建立的定性定量方法专属性强，重复性好。

关键词：青皮；橙皮苷；薄层色谱法；紫外分光光度法；高效液相色谱法AbstractExtraction and purification of hesperidin in cicus processing andmeasuring its contentCHEN Xiu XiuPharnacy Specialty,Grade 07Department of Pharmacy ,Medical College of Hebei North University Objective:Though the experiment to optimize the optimum technological condition of extracting hesperidin was determined.By using TLC and HPLC to help identify the hesperdin.Methods:With orange peel as raw material, the optimum technological condition of extracting hesperidin with alkali liquor and methanol as solvent was as follows: crude hesperidin: methanol: alkali liquor [W(NaOH ) = 0.1% ] = 1:23:47, soaking for 4 h at the temperature over 85℃and adjusting pH value to be 4. Concretely, mixing and stirring m- ethanol and alkali liquor and then adding crude hesperidin into the solution and going on stirring for 1 h till the crude hesperidin was dissolved completely, filtrating solution of crude hesperidin till the filtrate became clear, adjusting pH value of filtrate to be 4 by using hydrochloride, standing for precipitation and filtrating, washing filtrated cake to be color less with boiled water recovering methanol filtrate by distillation. Under this technological condition, the yield of hesperidin was higher than85%. Result:This method was convenient to operate easy to control and its efficiency of extracting hesperidin was relatively high.Key words: Pericarpium citri Reticulatae Viride; Hesperidin ;TLC UV;HPLC前言青皮中橙皮苷提取及纯度测定青皮（Pericarpium citri Reticulatae Viride），亦称青桔皮或青柑皮，为芸香科柑橘属植物Citrus reticu—lata Blanco及其变种自行落地的未成熟果实。

HPLC测定小儿百部止咳糖浆中橙皮苷含量陈慧【摘要】目的建立止咳药品中橙皮苷的含量的测定方法.方法色谱柱:ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-水-醋酸(35∶60∶5),流量:1.0 mL·min-1,检测波长285nm,柱温:30℃.结果橙皮苷在0.43～1.98μg·mL-1质量浓度范围内呈现良好线性关系(r=0.999 5),百部止咳糖浆中橙皮苷质量浓度为(19.7±2.3) μg· mL-1.结论高效液相法测定橙皮苷的含量具有准确性高、精密度好、有良好的线性关系,可考虑作为小儿百部止咳糖浆中橙皮苷含量测定方法,且可考虑在同类药物中推广.【期刊名称】《广东微量元素科学》【年(卷),期】2016(023)002【总页数】3页(P30-32)【关键词】高效液相色谱法;止咳药品;橙皮苷;百部止咳糖浆【作者】陈慧【作者单位】江西省上饶市立医院,江西上饶334000【正文语种】中文【中图分类】O284.1橙皮苷为二氢黄酮衍生物中的一种，能够抗菌、抗氧化、抗癌，还可以对免疫力进行调节。

根据大量研究结果显示，黄酮类化合物主要有两种作用，促进氧化作用和抗氧化作用[1]，橙皮苷的促氧化作用特别强，能够诱导人类基因发生毒害变化。

目前经常使用分光光度法及高效液相色谱法来测定药品中的橙皮苷，以此来控制药品质量[2]。

目前对于止咳药品中橙皮苷含量测定尚不多见，为探究此类药品中橙皮苷含量，本文以小儿百部止咳糖浆为例，探究高效液相色谱法测定止咳类药物中的橙皮苷含量，现报道如下。

1.1 实验仪器及材料1.1.1 仪器色谱仪选择Prostar325型高效液相色谱仪(美国的Varian公司)；清洗器选择KQ-250型超声波清洗器(昆山市的超声仪器有限公司)；选择BS110S 型的电子天平(北京的赛多利斯有限公司)；选择Cary 50型的分光光度计(美国的Varian公司)。

液相色谱法同时测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量摘要：目的：运用RP-HPLC同时测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量，比较不同流动相对柚皮苷和橙皮苷色谱分离的影响。

方法：运用RP-HPLC法，色谱柱Gemini C18柱（150mm×4.6mm，5um，110Å）；水与乙腈（比例分别采用80∶20、75∶25）为流动相，并用磷酸调节PH值到2.4；检测波长为283nm；流速为1.0 mL/min；柱温为30℃。

结果：混合标样中的柚皮苷和橙皮苷在不同流动相中均得到分离，R分别1.749和1.102，理论塔板数均大于7000，柚皮苷在0.0048～0.03424 μg，橙皮苷在0.05185～0.4148μg范围内与峰面积线性关系良好，r均大于0.9994。

不同比例流动相对柚皮苷和橙皮苷的分离有一定的影响，流动相比例（水∶乙腈）为80∶20的分离度好于75∶25的分离度。

结论：RP-HPLC 可同时测定柚皮苷和橙皮苷的含量，不同流动相对柚皮苷和橙皮苷的分离效果有影响；柑橘类水果由于产地、品种不同其果皮中含有的柚皮苷、橙皮苷含量也不尽相同。

关键词：RP-HPLC法柑橘类柚皮苷橙皮苷我国柑橘类品种较多且深受人们的喜爱。

多年来人们一直比较重视柑橘类果实的开发与利用，而忽视了果皮的价值。

现代医学证明，柑橘类果皮具有很高的药用价值，其中含有丰富的黄酮类物质，分离提取黄酮类物质主要集中在柚皮苷和橙皮苷上[1]。

柚皮苷在降血脂、镇静、抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化等方面具有较强的生物活性；橙皮苷具有抗氧化、抗炎镇痛、免疫调节、抗肿瘤等作用。

在食品工业上，柚皮苷还可作为天然着色剂和风味改良剂，其衍生物二氢柚苷查耳酮和新橙皮苷二氢查耳酮可作为合成高甜度、无毒、低能量的新型甜味剂[2]。

高效液相色谱法具有高效液相色谱法具有高柱效、分析速度快、灵敏度高、重复性好、应用范围广等优点，目前在化学、化工、医药、生化、环保、农业等科学领域获得广泛的应用。