分析测试中的假阳性来源分析与判定方法的建立

TRFIA检测甲状腺功能出现假阳性的因素分析摘要】目的探讨时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）检测甲状腺功能过程中存在假阳性的因素分析。

方法回顾性统计分析了56例用TRFIA方法检测的甲状腺功能亢进血清标本，再采用化学发光免疫分析(CLIA)方法定量检测甲状腺功能亢进血清标本，进行比对试验，确定TRFIA方法的假阳性率，并分析影响TRFIA方法出现假阳性的影响因素及其相应处理方法。

结果 TRFIA方法检测的56例甲状腺功能亢进血清标本,分别送上级医院用贝克曼、雅培、罗氏、拜耳四个生产厂家的检测仪器进行复检后，52例仍为甲状腺功能亢进，6例甲状腺功能正常，表明TRFIA法有89.6％的真阳性率，有10.4％的假阳性率,TRIFA与化学发光法两者符合率为89.6%。

结论 TRFIA出现假阳性的影响因素除了方法学、试剂盒本身之外，还有标本处理、操作不当等多种因素。

以上多种因素会导致TRFIA法检测甲状腺功能出现假阳性，对可疑的临床症状不符合甲状腺功能亢进的血清标本,除了严格操作、做好质控外，一定要认真复测，最好采用不同厂家化学发光仪器进行复查,以排除方法学差异出现的假阳性结果。

【关键词】时间分辨免疫荧光分析(TRFIA) 甲状腺功能亢进化学发光法(CLIA) 假阳性【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）24-0369-02【Abstract】 Objective To investigate the time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA) analysis of false positive factors existing in the process of detection of thyroid function. Methods: the retrospective analysis of 56 cases by TRFIA method for detection of thyroid function hyperfunction serum samples, followed by chemiluminescent immunoassay (CLIA) method for quantitative detection of thyroid function hyperfunction serum samples, were compared to the test, to determine the false positive rate of TRFIA method, TRFIA method and to analyze the impact of the factors which influence the false positive and the corresponding treatment method. Results: the TRFIA method for the detection of 56 cases of hyperthyroidism serum specimens, recheck testing instruments were sent to the hospital, with Backman Roche, Abbott, Bayer four manufacturers, 52 patients still hyperthyroidism, 6 cases of normal thyroid function, TRFIA method shows that the true positive rate 89.6%, false positive rate10.4%, TRIFA and chemiluminescence method, the coincidence rate was 89.6%. conclusion: TRFIA the factors which influence the false positive in addition to methods, kits, and sample processing, improper operation and other factors. These factors will lead to TRFIA method for detection of thyroid function of false positive, with clinical symptoms suspicious does not comply with the serum samples of hyperthyroidism, besides the strict operation, good quality control, must be carefully survey, the bestuse of different manufacturers of chemiluminescence instrument in the review, the false positive results appear to exclude the methodological differences.【Keywords】time-resolved fluoroimmunoassay(TRFIA) hyperthyroidism chemiluminescence (CLIA) false positive甲状腺是一个蝴蝶型的小器官，位于气管前方，它是身体代谢的主要调控者。

如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域，是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。

在实际应用中，ELISA操作的各方面均对结果产生影响，如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。

除此之外，一些非主观因素也会对结果造成较大偏差。

ELISA实验中的假阴性和假阳性结果，让各位实验君头都大了吧？欲哭无泪吧？今天，小编和各位一起分享下假阴性、假阳性的原因及解决办法。

假阴性①标本用肝素或EDTA等抗凝处理，易造成HBsAg检测结果假阴性。

肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷，能吸附酶标记物不易洗脱有关。

EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中的辣根过氧化物酶活性，造成假阴性。

肝素②采用双抗体夹心法测定抗原时，如果用一步法测定，而此时被测物浓度过高，则可能由于勾状效应导致检测结果为阴性。

为避免这种情况可以对样本进行稀释，或者直接改用双抗体夹心两步法。

双抗体夹心法③样本内被测物的浓度较低，也易造成假阴性结果。

比如某些疾病发展初期被检物浓度低于检测限。

④某些情况下，个别个体的基因突变也可能导致检测结果为假阴性。

尤其是检测用抗体的结合位点在突变区的情况下，这种情况虽然极其罕见，但是也可能存在的。

假阳性假阳性的出现通常是样本中掺杂有同源或同工物质，例如类风湿因子、补体、交叉反应物质和其它物质等。

类风湿因子①血液样本处理时，如有溶血会使样本中具有弱过氧化物酶活性的亚铁血红素催化底物四甲基联苯胺（TMB）显色，产生假阳性结果。

因此，在处理ELISA最常检查的血清样本时，要注意凝集过程、离心过程等细节，避免出现溶血和掺杂血细胞。

②RF（一种能结合多种动物IgG Fc的自身IgM抗体）可与酶标二抗Fc结合造成假阳性。

为避免这种情况，在检测抗原时可加入2-巯基乙醇使RF降解，或用热变性IgG（63℃，10 min）进行封闭处理。

预防出生缺陷产前实验室筛查结果假阳性现象分析及应对策略乔秀真【摘要】目的探讨预防出生缺陷产前实验室筛查结果假阳性现象的影响因素及应对策略.方法对300例产前实验室筛查初试高危者甲胎蛋白 (alpha-fetoprtein,AFP)、人绒毛膜促性腺激素(human choionic gonadotophin,β-hCG)、游离雌三醇(uncojugated estriol,uE3)3种血清学指标进行复测及孕妇临床相关信息复核,重新评估风险.结果产前筛查初试高危孕妇300例经复检有18例转为低危.因孕周偏差造成复检结果与初试结果不符情况居首位,其他依次为血标本未及时分离血清在室温久置、测试系统误差及孕妇年龄、体质量填报错误.结论为降低产前实验室筛查结果假阳性率,应重视孕妇各种临床信息的采集及实验室工作人员的培训,对实验室血清学指标检测进行分析前、分析中、分析后全程质量控制及检测后的咨询,追踪随访妊娠结局.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2018(039)004【总页数】4页(P461-464)【关键词】先天畸形;实验室筛查;假阳性反应【作者】乔秀真【作者单位】河北省衡水市第二人民医院检验科,河北衡水053000【正文语种】中文【中图分类】R722.11我国是出生缺陷发生大国，每年均有大量缺陷儿出生，其中染色体异常是新生儿缺陷的重要原因之一[1]，给国家及家庭带来沉重负担，故降低出生缺陷，提高人口质量，关乎社会和未来。

产前筛查和产前诊断是减少出生缺陷的重要举措[2]。

实验室血清学筛查通过抽取孕妇静脉血，检测血清中甲胎蛋白(alpha-fetoprtein，AFP)、人绒毛膜促性腺激素(human choion ic gonadotophin,β-hCG)、游离雌三醇(uncojugated estriol,uE3)等的含量，结合孕妇的人种、年龄、孕周、体质量、是否吸烟及有无胰岛素依赖性糖尿病病史等临床信息，对胎儿是否患21-三体综合征、18-三体综合征、开放性神经管缺陷3种目标疾病的风险进行评估。

怎样看艾滋病检测的“假阳性”艾滋病（AIDS），想必大家听到就觉得非常可怕，目前已经成为威胁人们身体健康的头号公共疾病杀手。

如果不幸感染人免疫缺陷病毒（HIV），将会失去一切抵御病菌的能力，严重威胁着患者的生命。

HIV肆虐的传播让人心生惶恐，检测是艾滋病防治的第一步，扩大检测也是我国长期实施的艾滋病防治策略，只有及时诊断和发现HIV感染者，才能启动抗病毒治疗，减少HIV传播并改善病人的预后。

今天主要围绕艾滋病检测的“假阳性”展开讨论，希望能够帮助大家了解更多有关艾滋病的知识。

一、艾滋病及其症状艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征，属于一种免疫缺陷疾病，是由HIV感染引起的，以人体CD4+T淋巴细胞减少为特征的进行性免疫功能缺陷，疾病后期可继发各种机会性感染、恶性肿瘤和中枢神经系统病变的综合性疾患。

艾滋病作为一种传染病，危害性极大，病死率较高。

当人体感染HIV后，导致人体全身免疫系统失去作用，这种情况下，即便是小小的感冒也可能会夺走患者的生命。

正常情况下，HIV在人体潜伏期一般为8到9年，在人体潜伏期内无特殊症状表现。

HIV感染者在成为艾滋病病人前，往往会经过数年，甚至数十年的潜伏期，由于人体免疫功能丧失，极易引发多种感染，如肺结核、带状疱疹、口腔霉菌感染，此外，还有一些是受到特殊病原微生物引起的肺炎、脑炎、肠炎等，在患病后期往往引发恶性肿瘤，直至死亡。

1.艾滋病检测的“假阳性”HIV检测后呈现假阳性，说的就是患者本身没有感染HIV,但初筛检测结果呈阳性。

出现此类情况会直接影响检测者心情，造成巨大心理压力。

那么到底什么是“假阳性”呢？其检测方法是什么？HIV检测策略的基本原则是，首先进行HIV筛查试验，有反应的样本再进行HIV补充试验，补充试验阳性的可做出诊断。

HIV筛查试验常用的检测方法有酶联免疫吸附试验、化学发光、快速检测（免疫荧光试验、免疫层析试验、免疫凝集试验等）；HIV补充试验包括抗体确诊试验和核酸试验。

ABO血型鉴定假阳性的原因浅析目的：探讨ABO血型鉴定假阳性的原因。

方法：ABO血型玻片法正定型以及试管法反定型。

结果：在血型鉴定的过程当中，会出现各种干扰因素，进而对鉴定的过程产生影响并且引起一些假象，最终导致血型的鉴定出现假阳性或者是假阴性反应。

结论：在临床血型鉴定工作当中需要采用正反定型对照的方式，来对血型进行进一步的确定，避免在鉴定的过程当中出现的影响因素导致血型鉴定的结果出现误差。

标签：血型鉴定；ABO血型；原因分析；假阳性引言血型指的是在人体的血液当中以血液抗原的形式表现出来的一种遗传性状。

一般的情况之下，人体的血型是不会发生改变的。

平常所说的血型，指的是ABO 血型系统以及RH血型系统。

如果在输血的过程当中，此两种系统出现不合，则极有可能会导致人体出现输血反应，造成极大的威胁。

所以，对于ABO血型进行鉴定的准确性以及可靠性，是极为重要的。

但是，往往在血型鉴定的过程之中，会出现一系列的影响因素，对鉴定的过程造成干扰，并且导致一些假象的发生，例如在人体的血液当中含有较高含量的冷凝集素，或者是人体自身的免疫性的抗体等等，都有可能会导致受检人体的红细胞之上的抗原出现减弱的情况，最终，在血型鉴定的结果之中，就会出现假阳性的反应或者是假阴性的反应。

而如果在血型鉴定过程当中受检人体的血浆之中有过多的白细胞，就会对其凝胶间隙造成堵塞，最终导致鉴定的结果出现假阳性等。

所以，针对ABO血型鉴定出现假阳性或者假阴性的原因进行分析，对于临床的鉴定工作来讲有着重要的指导意义。

1血型鉴定影响因素影响血型鉴定的因素有以下几个方面：1.1患有白血病、使用免疫制剂患者或者是淋巴瘤患者，其血型鉴定会受到一定的影响。

同时，先天性丙种球蛋白缺乏症患者也会受到影响。

1.2老年人。

由于人体随着年龄的增长体内抗体的水平会逐渐的下降，进而会对鉴定工作造成影响。

1.3新生儿。

出生在6个月以内的婴儿由于其抗体多半来自于母亲，再加上婴儿自身的血型抗体效价比较的低，所以不适宜进行反向定型，为鉴定工作带来了困难。

乙型肝炎检验的假阴性与假阳性结果原因分析目的了解乙型肝炎检验出现假阴性与假阳性结果的原因，进而指导临床诊断与治疗。

方法择取自2012年3月至2014年3月我院门诊实验室检验结果假阴性或假阳性乙型肝炎患者的临床资料，统计并分析检验结果。

结果乙型肝炎检验结果出现假阴性或假阳性的诱因具有多样性，其中就假阳性结果诱因来讲，实验室操作失误占44.44%，试剂因素占25.93%，检验方法不当占18.52%，其他因素3份占11.11%；针对假阴性结果诱因来讲，其中实验室操作失误占45.71%，试剂因素占25.72%，检验方法不当占17.14%，其他因素占11.43%。

结论为了保证乙型肝炎检验结果的准确性，必须要全面了解导致假阴性与假阳性的原因，强化实验室医生、临床医生、患者及其家属之间的配合。

标签：乙型肝炎；假阴性；假阳性乙型肝炎作为临床上常见病毒性肝炎之一，简称乙肝，据流行病学调查发现，其流行广泛，危害性较大[1]。

目前，乙型肝炎病毒血清标志物两对半检查已成为了临床上的一项常规检查项目，是强化乙型肝炎患者早诊断与早治疗、防治交叉感染的关键手段。

现阶段，如何确保乙型肝炎检出率，降低错检漏检发生率，已成为了临床检测工作者研究的重要课题[2]。

为了深入探究乙型肝炎检验出现假阴性与假阳性结果的原因，本文主要对自2012年3月至2014年3月我院门诊实验室检验结果假阴性或假阳性乙型肝炎患者的临床资料进行回顾性分析，相关报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料本组选择自2012年3月至2014年3月我院门诊实验室检验结果呈假阴性或假阳性乙型肝炎患者为研究对象，均应用ELISA法进行检验，其中男性占有78例，女性有72例，年龄（0-82）岁，平均年龄在（44.67±6.67）岁之间。

1.2 一般方法对自2012年3月至2014年3月来我院门诊实验室行乙型肝炎检验的1500份检验结果进行系统抽样分析，并对检测结果错误状况进行统计分析，总结导致检测结果出现错误的原因。

金标试剂假阳和假阴的原因分析1、假阳：大多数假阳性信号出现的原因都是由于相似的问题，即在常规的结合步骤进行时蛋白与胶体金颗粒特异性结合。

在此过程进行期间，蛋白质被三种主要的力吸收在胶体金的表面上。

（1）电荷引力：胶体金颗粒带有负电荷，这是由于在将氯金化钠转化为胶体金时，使用的还原剂（经常是柠檬酸盐）带有的一层负电荷被吸附在胶体金颗粒的表面。

负电荷将吸引带有正电荷的蛋白并且足以使其靠近结合区的表面，这样就有可能发生假阳性。

低于等电点的蛋白带有正电荷，因此可能会与胶体金颗粒表面发生强烈的吸引作用。

尤其是带有富含赖氨酸和精氨酸的蛋白区域在低于赖氨酸的等电点（pH 10.4）和精氨酸的等电点（pH 12.5）时会带有大量的正电荷。

（2）疏水作用力：一旦蛋白质彼此十分接近（之间的距离大约小于1nm），蛋白质的任何疏水区很有可能与胶体金表面的疏水区接触并且与之结合。

因此富含非极性氨基酸（例如色氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸）的蛋白质会与胶体金表面发生强结合作用。

（3）配位键结合力：配位键结合力是所有吸引力中最强的结合力。

含有大量富含硫的氨基酸（由于存在半胱氨酸和甲硫氨酸）的蛋白质强结合胶体金颗粒表面。

这是由于在金原子（具有传导带电子的能力）和硫原子（带有价电子）之间的吸引力造成的。

（4）伴随捕捉抗体而产生的假阳性信号：有许多因素可能会影响捕捉抗体发生非特异性结合反应。

产生假阳性信号可以归结于疏水作用力、非特异性免疫反应、抗体中的添加物、带有大量的正电荷、在与胶体金颗粒吸附的捕捉抗体中富有高浓度的含硫氨基酸。

在标记过程中这些因素都会引起抗体与胶体金颗粒表面吸附并与其结合。

有些样品可能非常具有粘性的（例如血清），这种因素也会使流速减慢。

当检测体系中没有足够的样品或活性物质来使金标沿着检测带移动时，胶体金颗粒也会粘附在捕捉抗体带上。

（5）样品的问题：许多样品中含有可能与金标粒子或捕捉抗体发生非特异性结合的物质，并且产生非特异性结果。

雅培i2000化学发光分析仪检测HCV抗体的假阳性分析目的分析雅培i2000化学发光分析仪在HCV抗体检测中的假阳性。

方法对本院2013年1月～2014年6月所有需要进行HCV抗体检测的患者通过雅培i2000化学发光分析仪进行检测。

结果22849例患者血清标本中，共检出阳性血清131例，经南京市第一医院核医学中心进行HCV-RNA确诊后，110例阳性，21例阴性。

结论雅培i2000化学发光分析仪在HCV抗体检测中的假阳性（16.03%）较高，因此仍应结合临床资料及确认试验结果综合判断。

标签：雅培i2000化学发光分析仪；HCV抗体；假阳性全自动雅培化学发光免疫分析仪是一种利用化学发光原理结合免疫技术对样本中恒量物质进行定性和定量的仪器，它结合了化学发光和免疫两方面的优势，从而具有灵敏度高、准确度高、特异性好、背景干扰小的优点，近几年在临床检验和食品安全等领域得到了广泛的应用[1]。

HCV是一种经血液传播的病毒，HCV抗体的存在提示个体可能已感染HCV、可能携带感染性HCV和/或可能传播HCV病毒。

虽然大部分感染个体没有症状，但是HCV感染可能发展成为慢性肝炎、肝硬化和/或增加患肝细胞癌的风险。

通过筛查可以使丙型肝炎尽早发现。

HCV抗体常以酶联免疫吸附法（ELISA）作為初筛试验，而雅培化学发光法（CLIA）在近几年的应用也越来越广泛。

自2013年雅培i2000化学发光分析仪在我院投入使用以来，至2014年6月共检测22849例患者血清标本，现将结果报道如下。

1资料与方法1.1一般资料南京市溧水区人民医院2013年1月～2014年6月所有需要进行HCV抗体检测的患者共计22849例。

标本收到后立即以4000r/min离心10min，然后进行检测。

1.2仪器、试剂雅培i2000化学发光仪及配套HCV抗体试剂。

ARCHITECT 丙型肝炎病毒抗体项目采用化学发光微粒子免疫检测法（CMIA），检测HCV基因组中已知的结构蛋白HCr43和非结构蛋白c100-3抗体。

ELISA法检测乙肝表面抗原假阳性结果原因分析发表时间：2011-11-02T10:37:13.357Z 来源：《中外健康文摘》2011年第23期供稿作者：和景霞[导读] ELISA方法检测HBsAg假阳性的报道时有。

和景霞（河南省三门峡市中医院检验科河南三门峡 472000）【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）23-0285-01 用ELISA法检测乙肝表面抗原、二对半在临床上已是常用的、结果准确的查测方法。

旦量操作不当等各种影响因素都会造成假阳性、假阴性结果。

我们在试验中出了一例HBsAg假阳结现报道如下：患者、男、45岁。

2010年9月16日来我院内科门诊做健康体检。

门诊检查血压、心率正常，无既往病史。

心电图正常，肝胆B超未见异常。

患者于清晨空腹以真空采血管按要求定量采血检测血常规、肝、肾功能及乙肝二对半，按常规操作分离血清，无溶血、乳糜及黄疸等。

实验室检测结果：血、尿常规检测正常；生化肝、肾功能指标正常。

用ELISA方法检测乙肝二对半结果为HBsAg（+）；HBsAb （+）；HBeAg（-）；HBeAb（-）；HBcAb（-）。

再用ELISA方法复查，仍为此种模式。

改用金标方法复查HBsAg，结果为 (-)。

我们又检测了该标本的HBV-DNA含量，结果为低于检测值下线，（考贝数在103次方一下），说明是一例假阳性结果。

本次ELISA试剂为英科新创（厦门）科技有限公司生产，批号2010035104，有效期20110310；金标试剂为英科新创（厦门）科技有限公司生产，批号2010064211，有效期201106；HBV-DNA检测试剂为中山大学达安基因股份有限公司生产，批号2010004，有效期20110216。

讨论80年代中其以前检测乙肝的方法采用琼脂扩散法及琼脂电泳法、反向间接血凝等方法。

80年代以后临床上逐步采用ELISA职代了上述检查方法至今，ELISA的问世是检测乙型肝炎的为一方法敏感、特异性强、较准确、假阳低检测方法。