毛细管电泳分析技术在药物研究中的应用

第27卷第1期Vol127,No11广西农业生物科学JournalofGuangxiAgric1andBiol1Science2008年3月Mar1,2008

收稿日期6226; 修回日期223。基金项目广西自然科学基金项目(桂科自8)。作者简介蔡卓(52),男,广东台山人,广西大学副教授,博士;2z@x11。文章编号:100823464(2008)0120084205

毛细管电泳在兽医药品分析中的应用

蔡卓1,江彩英1,谢梅冬2,赵静1

(1　广西大学化学化工学院,广西南宁530004;2　广西兽药监察所,广西南宁530001)

摘要:综述了近年来毛细管电泳技术在兽医药品分析中的应用和进展,主要包括抗生素类残留、磺胺类残留、激素及β2兴奋剂类残留等的检测,并对其今后的发展作了展望。关键词:毛细管电泳;兽医药品;分析中图分类号:S816173 文献标识码:A

Applicationofcapillaryelectrophoresisinveterinariandrugsanalysis

CAIZhuo1,JIANGCai2ying1,XIEMei2dong2,ZHAOJing1

(1　CollegeofChemistryandChemicalEngineering,GuangxiUniversity,Nanning530004,China;

2　GuangxiInstituteofVeterinaryDrugControl,Nanning530001,China)

Abstract:Thedevelopmentandapplicationofcapillaryelectrophoretictechniquesintheanalysis

ofveterinariandrugsareintroduced,theseincludethedeterminationoftheresiduesofantibiotics,

sulfonamides,hormone,andbeta2stimulant;also,theprospectofthisdevelopmentisdiscussed1

・３４・　中国民族民间医药　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ　药物研究　Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｓｔｕｄｙ　毛细管电泳技术在药学研究的应用概述　于虹敏’。林文津　，徐榕青　。张亚敏　１．福建中医药大学，福建福州３５０００１；２．福建省医学科学研究院，福建福州３５０００１　【关键词】　毛细管电泳；药学研究　【中图分类号】Ｒ２８４．１　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００７—８５１７（２ｏ１２）Ｏｌ一００３４—０１　毛细管电泳技术（ＣＥ）是在８０年代后期出现并逐渐　应用到药学等领域的，其最高柱效可达１０５理论板数，最　高灵敏度可达１０—１９　ｍｏｌ，拥有区带电泳，凝胶电泳等多　种形式…。ｃＥ正在逐渐成为药物鉴定的参考或标准方法，　２０１０版药典化药品种中就采用了分离效能较高的毛细管电　泳法，其中抑肽酶增加的去丙氨酸一去甘氨酸一抑肽酶和　去丙氨酸一抑肽酶检查就是采用毛细管电泳法。本文对毛　细管电泳技术在药学领域定性定量研究中的应用作一概述。　１定量分析　药物主成分测定、杂质分析、产品合格检验、生产过　程控制、真伪产品鉴别、药物品质测试等工作都离不开定　量工作，因此定量分析是制药行业必不可少的内容。李喜　凤等　应用高效毛细管电泳法测定蒲公英中主要有效成分　咖啡酸、绿原酸和阿魏酸的含量。吴敏　等应用毛细管电　泳法同时测定中成药及保健品中人参皂苷Ｒｇｌ、Ｒｅ、红景　天苷、淫羊藿苷、腺苷５种苷类成分的含量。　２定性分析　ＣＥ本身和色谱一样，并不具备结构鉴别能力，所以不　能直接用于药物的定性分析。但利用其分离特性并结合其　他技术，ＣＥ也可以用于定性分析。　２．１复杂样品的指纹图谱　徐都冷等　应用高效毛细管电泳技术建立蒙药材森登　的指纹图谱，并对７种不同产地的森登进行了分析，初步　建立了以６个共有峰为特征指纹信息的ＨＰＣＥ指纹图谱。　李伟东等　以１０个批次的通塞脉微丸为样品建立了通塞脉　微丸的毛细管电泳指纹图谱，确认共有指纹峰１６个，并确　定了甘草苷、甘草素、甘草酸单铵盐、肉桂酸、绿原酸、　阿魏酸的峰。苏恒等　采用高效毛细管电泳法，研究了江　浙蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱，为建立更全面的色谱指纹图谱，　满足蛇毒的全面质量管理的需要提供了依据。　２．２手性分离分析　李英杰等　提出了高效毛细管电泳拆分手性药物中间　体１一甲基一３一苯基丙胺的方法，分离快捷，为进一步开　展１一甲基一３一苯基丙胺对映体的研究提供了依据。黄碧　云等　建立一种快速有效拆分苯磺酸氨氯地平对映体的分　析方法。该法可快速有效地分离苯磺酸氨氯地平对映体，　可用于其手性拆分及光学纯度测定。　２．３药物筛选　凌笑梅等　采用毛细管电泳法研究了凝血酶和水蛭素　及肝素问的相互作用，并测定了凝血酶和水蛭素的结合常　数。林炳承　课题组以肝素为模型药物，采用间接激光　诱导荧光检测技术在玻璃芯片上研究了肝素与牛血清白蛋　白之间的相互作用。该作者＿ｌ　还采用毛细管电泳方法研究　ｌ５种不同链长和不同硫酸基含量的硫酸寡聚糖（ＤｅｘＳ）和　Ｇ—ＣＳＦ的相互作用。采用细胞生物学实验观察被筛选出的　寡聚糖与Ｇ—ＣＳＦ结合后对小鼠白血病细胞增生、细胞周　期、细胞表面抗原的表达和细胞形态的影响，以证明毛细　管电泳所筛选出的ＤｅｘＳ具有促进细胞分化等生物学活性。　３展望　综上所述，ＣＥ可以对药物及其产品进行含量测定、指　纹分析、组分定性、纯度鉴定等；利用ＣＥ的峰参数不仅可　以对中药的来源、真伪、品质进行鉴定或判别，还可以对　制药的过程进行监控或动态分析。此外，ＣＥ还可以分析小　分子和大分子药物，已成为基因工程药物的一种有效的分　析和鉴定手段。ＣＥ还能够用以研究药物的代谢过程，测定　代谢产物、分析各种体液中的药物成分及其分布、研究药　物分子的相互作用、探讨药物的毒理等。相信随着ＣＥ技术　不断成熟，必将会得到更加广泛的应用。　参考文献　［１］林炳承．生物化学与生物物理进展，１９９２，１９（４）：２６９—２５８．　［２］李喜凤，郝哲，邱天宝，等．ＨＰＣＥ同时测定蒲公英３种有机酸的含量　［Ｊ］．中国现代应用药，２０１１，２８（４）：３５０—３５３．　［３］吴敏，卢佳，孙成均，等．ＨＰＣＥ法同时测定保健品及中成药中的５种　苷类成分［Ｊ］．华西药学杂志，２０１１，２６（２）：１６５～１６７．　［４］徐都冷，红颜，巴根那，等．蒙药森登ＨＰＣＥ法的指纹图谱研究［Ｊ］．　中国民族医药杂志，２０１１，１（１）：３１—３３．　［５］李伟东，张志杰，蔡宝昌，等．通塞脉微丸高效毛细管电泳指纹图谱的　研究［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１０，１６（１７）：５３—５６．　［６］苏恒，魏晓东，赵丈杰，等．蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱研究及应用［Ｊ］．　中国医药工业杂志，２００９，４ｏ（４）：２８８—２９１．　［７］李英杰，孙鹏，秦世丽，等．高效毛细管电泳法分离１一甲基一３一苯　基丙胺对映体［Ｊ］．理化检验一化学分册，２０１０，（４６）：１７０—１７１．　［８］黄碧云，赵鑫，袁牧，等．苯磺酸氨氯地平对映体的高效毛细管电泳手　性分离［Ｊ］．药学进展２００９，３３，（９）：２２２—２２６．　［９］凌笑梅，刘一，赖先银，等．采用毛细管电泳方法以凝血酶为靶点筛选天　然药物提取化合物［Ｊ］，高等学校化学学报，２００７，２（２８）：２３４—２３７．　［１０］林炳承，等．毛细管电泳筛选与集落细胞刺激因子有相互作用的寡聚　糖及其生物活性［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００８，１１（８）：１２７６—１２８１．　［１１］ＬＩＵ　ＸＪ，ＬＩ　ＡＮＧ　ＡＹ．ＬＩＮ　ＢＣ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｕｄｙｉｎｇ　ｄｒｕｇ—ｐｌ￣ｍａ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ－　ｔｅｍｃｔｉｏｎｓ　ｂｙ　ｔｗｏ—ｉｎｊｅｃｔｏｒ　ｍｉｃｒｏｃｈｉｐ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｆｒｏｎｔａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｅｌｅｃｔｒｏ－　ｐｈｏｒｅｓｉｓ，２００６，２７（２４）：５１２８—５１３１．　［１２］ＬＩＵ　ＸＪ，ＬＩＵ　Ｘ，ＬＩＮ　ＢＣ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｕｄｙｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ—ｄｒｕｇ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｍｉ—　ｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ　ｃｈｉｐ　ａｆｆｉｎｉｔｙ　ｃａｐｉｌｌａｒｙ　ｅｌｅｃｔｍｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｉｎｄｉｒｅｃｔ　ｌａｓｅｒ。＿ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｌｕｏｒｅｓ。－　ｃｃｎｃｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｌｅｃｔｍｐｈｏｒｅｓｉｓ，２００６，２７（１５）：３１２５—３１２８．　（收稿日期：２０１１．１１．２９）　基金项目：基金项目：福建省自然科学基金资助（项目编号：２０１０ＪＯ１０２４）、福建省医学创新课题资助（项目编号：２０１１一ＣＸ一２３）。

天津药学Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　２０１１年第２３卷第５期　３３　

天苷方面显示了一定的优越性。但目前生物合成法还　１６　

存在反应周期长、效价低的问题。因此，通过优化反应　

条件，缩短合成周期，提高红景天苷产率，并在此基础　

上合成活性更强，毒副作用小的新型红景天苷类似物　１８　

具有重要意义。　

参考文献　１　Ｔｒｏｓｈｅｎｋｏ　Ａ　Ｔ．Ｊｕｏｄｖｉｒｓｈｉｓ　Ａ　Ｍ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ　ｏｆ　２一（Ｐ一　１９　ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙ１）ｅｔｈａｎｏ１．Ｋｈｉｍ　ｐｒｉｒ　Ｓｏｅｄｉｎ，１９６９，５（４）：２５６　２纪淑芳，周亚青．红景天苷的合成．沈阳药学院学报，１９８７，４（３）：　１９９　２０　３　Ｅｎｄｏ　Ｋ，Ｓｅｙａ　Ｋ，Ｈｉｋｉｎｏ　Ｈ．Ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ—ｌｉｋｅ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｉｄｒｏ—　ｓｉｄｅ　ｔｏ　ｒｅｎｇｙｏｌ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｙｃｌ　ｏｈｅｘｙｌｅｔａｎｏｉｄｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９８９，４５　２１　（１２）：３６７３　４宋丹青，甄济生．红景天苷合成工艺的改进．中国医药工业杂志，　１９９８，２９（１０）：４４６　２２　５许大艳，刘大有．红景天苷的合成．长春中医药大学学报，２００９，２５　（４）：６１４　２３　６张俊，吴振刚，王庆伟．红景天苷系列类似物的设计合成及抗疲劳　活性初筛．第四军医大学学报，２００９，３０（１９）：１９１６　２４　７李国青，李展．红景天苷合成方法改进．中国药物化学杂志，１９９６，　６（２）：１３６　２５　８张三奇，尚刚伟．合成红景天苷的新途径．中国药物化学志，１９９７，　７（４）：２５６　９张莲姬，李雪梅，田官荣．红景天苷的合成．延边大学学报，２００２，２８　（２）：９７　２６　１Ｏ邓梅，吴振刚，刘雪英．红景天苷及其类似物的合成．第四军医大学　学报，２００７，２８（１６）：１５０１　１１惠永正，曾志宏，刘俊耀．红景天苷类化合物的合成方法．中国专　２７　利：１４０３４６７Ａ，２００３—０３—１９　１２郭益冰，郑成，孟颖．红景天苷及其类似物的合成．南通大学学报，　２００９，８（４）：９　２８　１３　王海波，丁嫒嫒，刘雪英，等．红景天苷及其半乳糖苷类似物体对柯　萨奇Ｂ３病毒的抑制作用．中国医院药学杂志，２００９，２９（１８）：１５１４　１４石天尧，冯书芳，袁立邦．酪醇半乳糖苷的合成及对缺血／再灌注心　２９　脑的保护作用研究．心脏杂志，２０１０，２２（４）：５２４　１５蔡溱，石力夫，姚斌，等．红景天苷及其衍生物体外清除自由基作用　的研究．中国现代应用药学杂志，２００５，２２（２）：１１４　郝丹辉，蒋刚，蒲丰年，等．红景天苷几种不同构型对其抗氧化活性　的影响．四川大学学报（自然科学版），２００９，４６（３）：６９７　彭涛，王林，韩凤昭，等．红景天苷糖碳苷类似物的合成及心肌保护　活性研究．中国药物化学杂志，２００９，１９（２）：８９　Ｗｕ　Ｓ，Ｚｕ　Ｙ，Ｗａ　Ｍ　Ｌ．Ｈｉｇｈ　ｙｉｅｌｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＳＵＳ—　ｐｅｎｓｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｒｈｏｄｉｏｌａ　ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００３，１０６（１）：　３３　许建峰，韩爱明，冯朴荪．高山红景天细胞悬浮培养生长和营养成　分摄取动力学及其计量关系．应用与环境生物学报，１９９７，３（２）：　１００　许建峰，谢健，李宁．高山红景天致密愈伤组织颗粒悬浮培养结构　化动力学模型．大连理工大学学报，１９９９，３９（１）：４３　许建峰，谢健，冯朴荪，等．气升式反应器培养高山红景天愈伤组织　颗粒的动力学与氧传递特性研究．化学反应工程与工艺，１９９８，４　（３）：３０５　王梦亮，张芳，刘滇生．微生物催化Ｄ　葡萄糖与酪醇葡糖基转移　合成红景天甙的初步研究．催化学报，２００６，２７（３）：２３３　王梦亮，李万丽．固定化Ｂ一葡萄糖苷酶催化合成红景天苷的研　究．生物技术，２００９，１９（１）：６８　王梦亮，张瑞芳，任振兴．非水相介质中Ｂ一葡萄糖苷酶催化合成　红景天苷的研究．天然产物研究与开发，２００８，２０：１０７２　ＴｏｎｇＡ　Ｍ，Ｌｕ　Ｗ　Ｙ，Ｘｕ　Ｊ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｕｓｅ　ｏｆ　ａｐｐｌｅ　ｓｅｅｄ　ｍｅａｌ　ａｓ　ａ　ｎｅｗ　ｓｏｕｒｃｅ　ｏｆ　Ｂ—ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｆｏｒ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｇｌｕｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　４一ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ　ｂｅｎｚｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌｓ　ａｎｄ　ｔｙｒｏｓｏｌ　ｉｎ　ｍｏｎｏｐｈａｓｉｃ　ａｑｕｅｏｕｓ—ｄｉｏｘａｎｅ　ｍｅｄｉｕｍ．　Ｂｉｏｏｒｇ＆Ｍｅｄ　Ｃｈｅｍ　Ｌｅｔｔ，２００４，１４：２０９５　Ｋａｔｓｕｍｉ　Ｋｕｒａｓｈｉｍａ，Ｍｉｋｉｏ　Ｆｕｊｉｉ，Ｙｏｓｈｉｔｅｒｕ　ＩＤＡ，ｅｔ　ａ１．Ｓｉｍｐｌｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｂ—Ｄ—Ｇｌｙｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅｓ　ｕｓｉｎｇ　１３一Ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ　ｆｒｏｍ　Ａｌｍｏｎｄｓ．Ｃｈｅｍ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ，２００４，５２（２）：２７０　Ｈｉｒｏｙｕｋｉ　Ａｋｉｔａ，Ｅｉｊｉ　Ｋａｗａｈａｒａ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌｌｙ　ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ　Ｂ—Ｄ—　ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　Ｂ—ｇｌｙｃｏｓｉｄａｔｉｏｎ．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｃａｔａ　Ｂ：　Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２００６，４０：８　ＬｕＷＹ，ＬｉｎＧ　Ｑ，ＹｕＨ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｆａｃｉｌｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆａｌｋｙｌ　Ｂ—Ｄ—ｇｌｕ～　ｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｄ—ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｌｃｏｈｏｌｓ　ｕｓｉｎｇ　ｆｒｕｉｔ　ｓｅｅｄ　ｍｅａｌｓ．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｃａｔａ　Ｂ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２００７，４４：７２　Ｙｕ　Ｈ　Ｌ，Ｘｕａ　Ｊ　Ｈ，Ｌｕ　Ｗ　Ｙ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ．　ｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂ—ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｆｒｏｍ　ａｐｐｌｅ　ｓｅｅｄ　ａｓ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｃａｔａｌｙｓｔ　ｆｏｒ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｏ—ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓ．Ｅｎｚｙｍｅ　Ｍｉｃｒｏｂ．Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００７。４０：３５４　

中国药师２００７年第１０卷第３期ｃｈｉ。ａＰｈａ丌Ｉｌａｃｉｓｔ２００７，Ｖ０１．１０Ｎｏ．３

药物分析中的毛细管电泳技术

索贞赵雪茹高永双（山东省安康医院山东济－７２７２０５１）

关键词毛细管电泳；药物分析；手性分离

中图分类号：Ｒ９２７．１文献标识码：Ａ文章编号：１００８－０４９Ｘ（２００７）０３－０２４１－０３

毛细管电泳（ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＣＥ）是以高压电

场为驱动力，以毛细管及其内壁为通道和载体，利用样品各

组分之间电泳淌度或分配行为的差异而实现分离的一类液

相分离技术。近年来，ＣＥ的发展极为迅速，与传统的药物分

析方法如色谱法、免疫法等相比，ＣＥ具有高效、快速、重现性

好、仅需少量样品和缓冲液等特点，并可根据需要选用不同

的分离模式且仅需一台仪器，能直接进样水溶性蛋白样品。

如ｃＥ可同时检测人体液中游离氨基酸及其代谢物…。这

些优点突出了ＣＥ在这一领域中的优势地位，使毛细管电泳

在药物分析领域有着极其广阔的应用前景。本文着重介绍

普通低分子有机合成药的毛细管电泳分析情况。

１毛细管电泳与药物分析

药物分析大致分为两个部分：一是原料药的定性定量和

相关物质的测定，药物制剂的分析以及稳定性的评价。二是

对体液中的药物进行分析。毛细管电泳的高分离性能、超微

量进样和几乎没有废液等优势旧Ｊ，使其在药物分析中的应用

得以迅速发展。但它也存在检测灵敏度不足和再现性差等

问题。但这些问题会随着科学的不断进步得以解决。２毛细管电泳在药物分析中的应用

２．１药物质量分析

２．１．１解热镇痛药采用高效毛细管电泳安培法对对乙酰

氨基酚及其水解物对氨基酚进行测定，结果在优化的实验条

件下对乙酰氨基酚和对氨基酚在６ｍｉｎ内可得到较好的分

离，检出限分别为０．５和１．０Ｉｘｍｏｌ・Ｌ“【３Ｊ。用毛细管区带电

泳电化学检测法测定了散利痛（ｓａｒｉｄｏｎ）中对乙酰氨基酚和异丙基安替比林含量，结果对乙酰氨基酚和异丙基安替比林

线性范围分别为２×１０一一５×１０～ｍｏｌ・Ｌ“和２×１０～一２