《基因工程的》每章思考地的题目
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第一章绪论名词解释:1.基因操作:将在细胞外产生的核酸(物质)分子插入到病毒,质粒或其它载体系统中,再整合到特定的宿主中,从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。
2.间断基因:序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区,使一个基因分隔成不连续的若干区段。
我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。
3.启动子:DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。
4.亚克隆:当初始克隆中的外源DNA片段较长,含有许多目的基因以外的DNA片段时,在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行,将目的基因所对应的一小段DNA找出来,这个过程叫“亚克隆”。
填空题:1.基因操作的核心部分是基因克隆,基因克隆的基本要点有(克隆基因的类型),(受体的选择)和(载体的选择)。
2.(基因)是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的,也可以是(不连续的);可以是(DNA),也可以是RNA;可以存在于染色体上,也可以(存在于染色体之外如质粒、噬菌体)。
3.基因操作并不是一个法律概念,除了包括基因克隆外,还包括基因的(表达)、(调控)、(检测)和(改造)等与基因研究相关的内容。
4.启动子是指(基因转录过程中控制起始的部位)。
通常一个基因是否表达,(转录起始)是关键的一步,是起决定作用的。
在转录过程中,启动子还是(RNA聚合酶)的结合位点。
5.原核生物的RNA聚合酶主要由两部分组成:(核心酶)和(σ因子),其中σ-因子并不参与RNA的合成,它的作用主要是(识别要转录的起始位点)。
6.从(启动区)到(终止区)的这一段距离称为一个转录单位,或者一个转录产物,其中可包括一个或者多个基因。
7.转录终止子主要有两种,一种是(依赖ρ因子),另一种是(不依赖ρ因子)。
8.基因的书写方式,通常是写出的DNA序列总是与(mRNA)相同的那条链,方向是从(5')到(3')。
对于碱基的位置,一般自转录起始点向两个方向编号,其中转录起始点定为(+1),(在起始点上游第一个碱基)定为-1。
《基因工程》思考题第一章绪论1. 简述基因操作、基因重组和基因工程的关系。
2. 为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物?3. 简述基因的结构组成对基因操作的影响。
4. 谈谈你对gene的认识,并简要说说gene概念的演变过程.5. 如何理解gene及其产物的共线性和非共线性?6. 试从理论和技术两个方面谈Gene Engineering诞生的基础.第二章基因工程的基本原理与支撑技术1. 试比较原核基因组与真核基因组的结构和功能特点2. 试比较原核基因和真核基因表达调控的主要方式和特点3. 分析比较琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的异同点?4. 琼脂糖凝胶电泳中,简述影响DNA在凝胶中迁移速率的因素.5. 小量制备质粒DNA,用质粒中特定的酶切发现切割不动,试分析可能原因及克服方法?6. 在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质分子量的常规方法?7. 印迹分子杂交有哪些种类,并说明在什么情况下需要使用这些方法。
8. 核酸分子的标记有哪些方法,各有何特点?9. 由mRNA反转录成cDNA和DNA的PCR扩增是两个完全不同的酶催化反应过程,如何将两个过程联系在一起,实现由mRNA起始扩增出DNA?10. Primer是PCR反应体系的四大要素之一,PCR的许多应用都是通过primer设计来实现的,请问primer设计的一般原则是什么?11. 在PCR反应的后期,或者循环次数过多时,反应体系中就会出现一种所谓的平台效应(Plateau effect),请问什么叫Plateau effect?产生Plateau effect的原因有哪些?12. 在对PCR产物进行电泳检测时,有时会出现拖带或非特异性扩增条带,请分析其原因?如果检测结果是看不到DNA带或DNA带很弱,那又是为什么?13. 通过双向蛋白质电泳发现某蛋白质与某植物的一种表型密切相关,若要利用编码该蛋白质的基因来转基因植物,试问如何分离得到该基因?14. 现有一序列已知的DNA片段和一序列未知的DNA片段,你分别如何设计测序策略?15. 设想一下在什么情况下你希望知道一个基因或一段DNA的序列?16. 什么叫有性PCR?有性PCR导致DNA重组的分子机制跟体内重组有何异同?17. Explain the PCR. List the steps in carrying it out; include all the components and special conditions, explaining why each one is used. Illustrate the process with appropriate labels. Use the correct scientific terminology in your explanation.第三章基因工程操作的基本条件1. 试指出影响限制性内切核酸酶(Restriction endonuclease)切割效率的因素.2. 在酶切缓冲液中,一般需加入BSA,请问加入BSA的作用是什么?并简述其原理?3. 何谓Star activity?简述Star activity的影响因素及克服方法.4. 某DNA序列中存在DpnI酶切位点,以此DNA为模板,在体外合成DNA序列,当用该酶进行酶切时,发现切割不动,试分析可能原因?5. 天然的质粒载体(plasmid vectors)通常需经改造后才能应用,包括去除不必要的片段,引入多克隆位点等。
基因工程原理课后思考题第一篇:基因操作原理第一章:基因工程概述P(12):1 简述基因操作,基因重组和基因工程的关系?2 为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物?3 简述基因的结构组成对基因操作的影响?第二章:分子克隆工具酶P(38):1 限制性内切酶可分为哪几种类型,各有何特点?2 哪些酶可用于DNA片段的末端标记?3 DNA聚合酶有哪些类型,各有什么活性?4 在分子克隆中所用的酶主要作用于哪些底物?第三章:分子克隆载体P(69):1 作为一个最基本载体,它必须具备哪些功能元件?2 何为α-互补,在载体构建中有何作用?3 请简要描述λ噬菌体溶原状态和裂解循环的基因调控模式及其在构建载体中的作用?4 简述M13KO7辅助噬菌体的遗传学特性和生物学功能及其在制备单链DNA中的作用?第四章:人工染色体载体P(84):1 大容量克隆载体有哪些种类,各有何特点?2 简述用Y AC克隆载体构建基因文库的原理?3 BAC克隆载体有哪些显著的优点?第六章:基因工程操作中大分子的分离和分析P(116):1 在基因工程操作中有哪些检测核酸和蛋白质相对分子量的常规方法?2 印迹分子杂交有哪些种类,并说明在什么情况下需要使用这些方法?3 核酸分子的标记有哪些方法,各有何特点?4 DNA转化有哪些方法,各有何优点?第七章:基因芯片技术P(132):1 基因芯片技术与传统的Northern杂交技术相比有何异同?2 简述DNA在芯片上的固定原理及基因芯片的制作过程?3 简述mRNA反转录标记方法的类型及特点?4 结合自己的专业试述cDNA芯片技术的用途及前景?第八章:PCR技术及其应用P(154):1 如何理解PCR扩增的原理和过程?2 通过PCR技术扩增已知序列侧翼的未知序列的关键问题是什么?用PCR作染色体步查有何特点?3 PCR产物的克隆与一般的DNA片段克隆有何异同点?4 为什么在定量PCR中要引入Ct值的概念?第十章:DNA诱变P(186):1 DNA诱变有哪些种类,各有何特点?2 什么叫有性PCR?有性PCR导致DNA重组的分子机制与体内重组有何异同?3 简述Kunkel定点诱变的基本原理?第十一章:DNA文库的构建和目的基因的筛选P(209):1 基因组DNA文库有哪些类型?其相关的特点是什么?2 构建大片段基因组文库过程中需要注意哪些问题?3 均一化cDNA文库构建的基本原理是什么?4 扣除cDNA文库构建的基本原理是什么?主要用途是什么?5全长cDNA文库构建的基本原理和基本类型是什么?6 基因克隆筛选的几种方法和相关技术特征有哪些?第十二章:基因组研究技术P(225):1 简要叙述真核生物基因组物理图的构建方法和原理?2 鸟枪法和克隆重叠群法这两种基因组测序法各自有何优缺点,适用范围有何不同?3 如何对基因组测序获得的序列进行注解以确定哪些序列为编码序列?对这些预测的基因如何进行功能鉴定?4 讨论基因组研究作为平台技术在基因工程中的应用?5基因组工程利用了哪些技术手段?第二篇:基因工程应用第十三章:植物基因工程P(225):1 什么叫植物基因工程?试比较植物基因工程与常规植物育种的异同点?2 试阐述植物基因工程快速发展的原因?3 简述植物基因工程的方法及其原理和优缺点?4 转基因植株的鉴定方法有哪些,作为一组完整的转基因植株鉴定的数据至少包含哪些参数?5植物基因工程的发展向世界展现出了一幅壮丽画面,试进行阐述?第十四章:动物基因工程P(272):1 简述反转录病毒在动物基因工程中的作用?2 试述基因敲除与基因敲入的区别?3 质粒载体和病毒载体有何异同?4 试述转基因动物的鉴定方法?5谈谈你对转基因动物生物安全性的看法?6 真核细胞转染有哪些方法?7 简述转基因小鼠的制备过程?。
01基因工程复习题答案版基因工程原理复习题思考题基因工程绪论1、基因工程的定义与特征。
定义:在体外把核酸分子(DNA的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。
特征:1、具跨越天然物种屏障的能力。
2、强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增。
2、试述基因工程的主要研究内容。
1)、目的基因的分离2)、DNA的体外重组(载体、受体系统等)3)、重组DNA分子转移到受体细胞及其筛选4)、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。
3、基因工程在食品工业上有何应用发展?主要是通过基因重组,使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率;或者改良这些有机物组成成分,提高利用价值。
4、转基因是一把双刃剑,请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。
转基因技术所带来的好处是显而易见的,在人类历史进步和发展中起到了积极作用。
首先,通过该项技术可以提供人们所需要的特性,改良培育新品种;第二,延长食品保存时间或增加营养成分;第三,将抗虫防菌基因转入到作物中,使作物本身产生抵抗病虫害侵袭的能力,减少了农药的使用量,有利于环境保护;第四,转基因技术及基因食物在医学方面得到广泛研究和应用。
人们对转基因技术的主要担忧在于环境方面。
外源基因的导入可能会造就某种强势生物,产生新物种或超级杂草、损害非目标生物、破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性,也即转基因生物存在潜在的环境安全问题。
转基因作物的大面积种植已有数年,食用转基因食品的人群至少有10亿之多,但至今仍未有转基因食品对生命造成危害的实例;更何况目前每一种基因工程食品在上市前,都要经过国家法律认可,食品卫生部门和环境部门的严格检测。
只有测试合格了,才能投放市场。
因此公众完全可以安全地消费、大胆地食用转基因食品。
第一章1、生物技术:是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。
2、先进的工程技术手段是指:基因工程、发酵工程、细胞工程、酶工程和蛋白质工程等新技术。
3、改造生物体:指获得优良品质的动物、植物或微生物品系。
4、生物原料:指生物体的某一部分或生物生长过程产生的能利用的物质,如淀粉、糖蜜、纤维素、生物碱、乙醇等有机物,也包括一些无机化学品,甚至某些矿石。
5、基因工程:指在基因水平上,采用与工程设计十分类似的方法,按照人类的需要进行设计,然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系。
6、DNA重组技术:将目的基因与载体DNA在体外进行重组,然后把这种重组DNA分子引入受体细胞,并使之增殖和表达的技术。
也称基因操作。
7、基因克隆(DNA分子克隆):在体外重新组合DNA分子的实验过程中,是通过能够独立自主复制的载体分子质粒或噬菌体为媒介的,将外源DNA或外源基因引入到寄主细胞进行增殖,从而获得大量相同的重组DNA分子,或者外源基因表达获得大量的蛋白质。
8、基因工程理论依据:不同生物的基因有相同的物质基础,遗传密码是通用的,基因是可切割的,基因是可以转移重组的,基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。
9、基因工程的操作步骤:获得目的基因,构造重组 DNA 分子,转化或转染,表达,蛋白质产物的分离纯化。
10、基因工程研究的发展可分为:?基因工程的准备阶段(在40年代明确了遗传的物质基础问题;在50年代解决了基因的自我复制和传递的问题;在50年代末期和60年代阐明了遗传信息的流向和表达问题)?基因工程问世(20世纪60年代末70年代初,发现:限制性内切酶和DNA连接酶等工具酶,使DNA分子进行体外切割和连接,即体外重组成为可能。
)?基因工程的迅速发展阶段(发展了一系列新的基因工程操作技术,构建各种克隆载体,培育出许多转基因动物、转基因植物,生产了许多生物药品。
智慧树知到《基因工程》章节测试答案第一章9、生物工程的上游技术是()基因工程及分离工程基因工程及发酵工程基因工程及细胞工程基因工程及蛋白质工程答案: 基因工程及蛋白质工程第二章1、下列()克隆载体对外源DNA的容载量最大?质粒YAC黏粒λ噬菌体答案: YAC2、K1enow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了()的活性。
5’→3’合成酶3’→5’外切酶5’→3’外切酶转移酶答案: 5’→3’外切酶8、双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()DNA的聚合反应DNA的连接反应DNA的降解反应特殊的DNA连接答案: DNA的聚合反应9、已知某一内切酶在一个环状DNA上有4个切点,当用此酶切割该环状DNA,可以得到()个片段。
5432答案: 410、下列()克隆载体对外源DNA的容载量最大?质粒黏粒酵母人工染色体λ噬菌体质粒答案: 酵母人工染色体11、有关PCR的描述下列哪项不正确:()是一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增的产量按 Y=m(1+X)n扩增的对象是氨基酸序列答案: 扩增的对象是氨基酸序列12、同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是()L-DNA>cccDNA>OC-DNAOC-DNA>cccDNA>L-DNAcccDNA>L-DNA>OC-DNAL-DNA>OC-DNA>cccDNA答案: cccDNA>L-DNA>OC-DNA13、将外源基因导入真核细胞的过程称()转染转导感染转化答案: 转导14、限制性内切酶的命名遵循的一定原则()种名种名,菌株号或生物型属名菌株号答案: 种名,菌株号或生物型15、因工程中常作为基因载体的一组结构是()质粒、线粒体、噬菌体质粒、噬菌体、动植物病毒染色体、叶绿体、线粒体细菌、噬菌体、动植物病毒答案: 质粒、噬菌体、动植物病毒16、能使X—gal变蓝的条件是()有α—片段α—受体片段同时具有α—片段和α—受体片段同时具有β—片段和β受体片段答案: 同时具有α—片段和α—受体片段17、用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是()抗性标记选择分于杂交选择RNA 反转录免疫学方法答案: 抗性标记选择18、当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时,不会明显影响存活能力()75%~90%60%~75%75%~105%105%以上答案: 75%~105%19、关于遗传物质的转移的主要方式,下列不是的是()转变转化转导转染答案: 转变20、关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义,下列哪种说法是正确的?()来自噬菌体,用于复制病毒DNA来自细菌,有防御病毒侵染的意义来自噬菌体,具有抗微生物作用来自酵母菌,参与DNA复制答案: 来自细菌,有防御病毒侵染的意义21、DNA重组过程中连接常用的温度是()15℃50℃80℃100℃答案: 15℃22、DNA重组过程中酶切常用的温度是()0℃37℃80℃100℃答案: 37℃第三章1、下列不是大肠杆菌表达元件的是()复制子终止子核糖体结合位点启动子答案:2、大肠杆菌感受态CaCl2转化法中在()温度下水溶液中热击处理37℃42℃57℃100℃答案:8、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是()重组质粒渗透至细胞外重组质粒被细胞内核酸酶降解重组质粒在细胞分裂时不均匀分配重组质粒杀死受体细胞答案:9、分子克隆中用T载体主要是与下列哪种产物连接()单酶切产物双酶切产物同裂酶产物PCR产物答案:10、()可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解,或使表达的蛋白正确折叠,从而达到维护目的蛋白的目的。
《医用基因工程》复习思考题第一章基因和基因组及基因工程的概念一、名词概念①移动基因(插入序列;转位子);②断裂基因;③RNA剪辑;④内含子(间隔序列)与表达子;⑤重叠基因;⑥重复序列;⑦假基因;⑧启动子与终止子;⑨起始位点、终止位点。
二、讨论题1.什么叫基因何谓基因的新概念基因的主要功能是什么2. 一种基因一种酶的提法妥否?3.基因密码子三联体间是否存在着逗号?4.基因表达的产物中,氨基酸序列相同时,基因密码子是否一定相同为什么5.6.何谓转位子和转位作用转位的后果如何7.8.基因中最小的突变单位和重组单位是什么?9.基因工程应包括哪些内容何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明10.11.真核细胞基因组中常有内含子存在,能否在原核细胞获得表达能,为什么不能,为什么第二章基因工程中常用的工具酶1.什么是限制性核酸内切酶?2.什么是R/M现象如何解释3.4. II型核酸内切酶的基本特点有哪些?5.影响II型核酸内切酶活性的因素有哪些如何克服和避免这些不利因素6.7. DNA连接酶有哪两类有何不同8.9.甲基化酶有哪两类有何应用价值10.11.什么叫同尾酶、同裂酶在基因工程中有何应用价值12.13.平末端连接的方法有哪些?(图示)14. Klenow酶的特性和用途有哪些?举例说明。
15.反转录酶的特性有哪些有何应用价值16.17.列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。
18.列举末端核甘酸序列转移酶的应用之一。
19.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率?20.基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些?21.用寡核甘酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护,常用何种办法解决?第三章基因克隆载体1.基因工程常用的载体有哪5种其共同特性如何2.3.什么是质粒质粒分哪几种有哪两种复制类型,质粒的分子生物学特性有哪些4.质粒存在的三种形式是什么?5,分离质粒的基本步骤有哪些?6.分离纯化质粒的方法有哪几种?简述CsCl密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理,如何选择合适的分离方法?7.作为理想质粒载体的基本条件有哪些?8.什么叫插入失活,举例说明之。
复习题1 (包括分子生物学基础知识)(请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!)一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题:将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内,两者用“;”隔开。
1.基因操作(Gene manipulation)的核心部分是基因克隆(gene cloning), gene cloning的基本要点有(),()和()。
2.()是遗传物质的基木单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的,也可以是();可以是(),也可以是RNA;可以存在于染色体上,也可以()3.基因操作并不是一个法律概念,除了包括基因克隆外,还包括基因的()、()、()和()等与基因研究相关的内容。
4.启动子(Promo(or)是指()。
通常一个Gene是否表达,()是关键的一步,是起决定作用的。
在转录过程屮,Promoter还是()的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成:()和(),其屮。
■因子并不参与RNA 的合成,它的作用主要是()。
6.从()到()的这一段距离称为一个转录单位,或者一个转录产物,其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种,一种是(),另一种是()。
8.重叠基因(Overlapping gene)是指(),间隔基因(Interrupted gene)是指()三、选择题:从备选答案中选出正确的结果,正确答案是唯一的。
四、简答题:1.简述基因克隆的两个基本特征?参考答案:基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子(一般情况下都是DNA)在不同宿主屮的繁殖,打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征,基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆(subcloning) ?参考答案:基因克降:一定程度上等同于基因的分离,即从复杂的生物体基因组中,经过酶切,消化等步骤,分离带有目的基因的DNA片段。
基因工程原理复习题思考题5、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。
同尾酶:来源不同,识别的序列不同,但能切出相同的粘性末端,连接后不能被相关的酶同时切割。
同裂酶:识别序列相同,切割位点有些相同,有些不同。
分完全同裂酶和不完全同裂酶(PS:完全同裂酶:识别位点和切点完全相同。
不完全同裂酶:识别位点相同,但切点不同。
)6、连接酶主要有哪些类型?有何异同点?影响连接酶连接效果的因素主要有哪些?类型:DNA连接酶和RNA连接酶异同点:相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点:DNA聚合酶识别脱氧核糖核苷酸,在DNA复制中起作用;而RNA聚合酶聚合的是核糖核苷酸,在转录中起作用。
7、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。
(传说中的网上答案)1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。
2、在体系中加一点切载体的酶,只要连接后原来的酶切位点消失。
这样可避免载体自连,应该可以大大提高平端连接的效率。
3、足够多的载体和插入片段是最重要的。
4、平端的连接对于离子浓度很敏感5、尽可能缩小连接反应的体积6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好8、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些?1)大肠杆菌DNA聚合酶2)Klenow fragment3)T7 DNA聚合酶4)T4 DNA聚合酶5)修饰过的T7 DNA聚合酶6)逆转录酶7)Taq DNA聚合酶第四章基因克隆的载体系统1、作为基因工程载体,其应具备哪些条件?具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性(可转移性);具有合适的筛选标记;具有较高的外源DNA的载装能力;具有多克隆位点(MCS);具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。
3、载体的类型主要有哪些?在基因工程操作中如何选择载体?基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒(plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大类。
这些载体均需经人工构建,除去致病基因,并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选的标志基因、单一的限制酶切点等。
基因工程复习题题型:名词解释(10个)30分;填空(每空1分) 20分;选择题(每题1分)10分;简答题(4个)20分;论述题(2个)20分。
第一章绪论1.名词解释:基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义:基因工程。
克隆:无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2.什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现(标志着DNA重组时代的开始);B) 载体的使用;C) 1970年,逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么?基础研究:基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究:基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释:限制性核酸内切酶:一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构:双链DNA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构。
同尾酶:来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端:DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为粘性末端。
平末端:DNA片段的末端是平齐的。
第3章基因工程1.(选择性必修3 P71“旁栏思考”)根据所掌握的知识,推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么?答:原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,所以它在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制。
限制酶就是它的一种防御性工具。
当外源DNA入侵时,它会利用限制酶来切割外源DNA,使之失效,以保证自身的安全。
2.(选择性必修3教材P71“旁栏思考”)限制酶来源于原核生物,为什么不能切割自己的DNA 分子?答:限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割。
限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
3.(选择性必修3教材P72“旁栏思考”)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗?试简要说明。
答:不相同。
DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶连接的是单个脱氧核苷酸。
4.(选择性必修3 P72正文拓展)天然的DNA分子是否可以直接用作基因工程载体?为什么?答:不可以。
具有能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等特点的DNA分子才可以直接用作基因工程的载体。
实际上天然的DNA分子一般不完全具备上述条件,往往需要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
5.(选择性必修3 P74“拓展应用1”)限制酶不切割细菌本身的DNA分子原因是什么?答:含有某种限制酶的细胞的DNA分子或者不具备这种限制酶的识别序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。
6.(选择性必修3 P74~75“探究·实践”)DNA的粗提取实验中过滤能否用滤纸代替纱布?答:不可以,因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失,影响最终提取的DNA量。
7.(选择性必修3 P77“相关信息”改编)Bt抗虫蛋白造成害虫死亡的原因是什么?答:当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后,多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合,导致细胞膜穿孔,最后造成害虫死亡。
第二章1. 名词解释(1)顺反子(cistron):基因所对应的一段核昔酸序列被称为顺反子(cistron ), 一个顺反子编码一种完整的多肽链。
它是遗传的功能单位。
(3) 转位因子(transposable elements ):是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一个位置,甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。
(4) 基因组(genome:细胞中,一套完整单倍体的遗传物质的总合。
(5) 启动子(promoter ):是DN曜上一段能与RNAit合酶结合并能起始转录的序列,其大小不等,具有转录目标基因的mRNA勺功能。
启动子是基因表达不可缺少的重要元件。
(6) 基因(gene),基因是DNA#子中含有特定遗传信息的一段核昔酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
(7) 顺反子(cistron):基因所对应的一段核昔酸序列被称为顺反子(cistron ), 一个顺反子编码一种完整的多肽链。
它是遗传的功能单位。
(8) 终止子(terminator ),在基因3 端下游外侧与终止密码子相邻的一段非编码的核昔酸短序列,具有终止转录的功能,叫做终止子(terminator )。
(9) 断裂基因(split gene ),真核生物的结构基因是不连续的,编码氨基酸的序列被非编码序列所打断,因而被称为断裂基因( split gene )。
在编码序列之间的序列称为内含子(intron ),被分隔开的编码序列称为夕卜显子(exon) 0(10) 顺式作用元件(cis-acting elements ),指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DN海列。
包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
(11) 反式作用因子(trans-acting elements ),可结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子称为反式作用因子(trans-acting elements )。
大学基因工程题库及答案基因工程是一种利用分子生物学技术对生物体的基因进行操作和改造的科学。
以下是一些大学基因工程的题目和答案示例:1. 题目:简述基因工程的基本步骤。
答案:基因工程的基本步骤包括:(1) 目的基因的获取;(2) 载体的选择与构建;(3) 目的基因与载体的连接;(4) 转化受体细胞;(5) 筛选含有重组DNA的细胞;(6) 目的基因的表达与检测。
2. 题目:什么是基因克隆?请说明其在基因工程中的重要性。
答案:基因克隆是指将特定的DNA片段插入到载体中,然后在宿主细胞内进行复制和表达的过程。
基因克隆在基因工程中的重要性体现在:(1) 允许科学家研究和分析特定基因的功能;(2) 可用于生产药物和疫苗等生物制品;(3) 有助于理解基因表达的调控机制。
3. 题目:PCR技术在基因工程中的应用是什么?答案:聚合酶链式反应(PCR)技术在基因工程中的应用主要包括:(1) 快速扩增目的基因,为基因克隆和表达提供足够的DNA模板;(2) 用于基因突变的检测和分析;(3) 制备单链DNA模板,用于DNA测序;(4) 用于基因表达分析,如定量PCR。
4. 题目:转基因生物的安全性问题主要包括哪些方面?答案:转基因生物的安全性问题主要包括:(1) 环境安全性,即转基因生物可能对生态系统产生的影响;(2) 食品安全性,即转基因食品对人体健康的潜在影响;(3) 生物安全性,即转基因生物可能对非目标生物产生的影响。
5. 题目:基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理是什么?答案:CRISPR-Cas9基因编辑技术的原理是利用一种来自细菌的RNA导向的核酸酶系统。
该系统由两部分组成:(1) 一段小RNA (sgRNA),它能够特异性地识别目标DNA序列;(2) Cas9蛋白,一种核酸酶,能够在sgRNA的引导下精确地切割目标DNA。
通过这种机制,科学家可以在特定的基因位点进行切割,实现基因的敲除、插入或替换。
6. 题目:基因治疗的基本原理是什么?答案:基因治疗的基本原理是将正常或修正后的基因导入到患者的细胞中,以补偿或修复缺陷基因的功能。
基因工程思考㼵答案一、填空题1.702.(1)分子水平上的操作;(2)细胞水平上的表达3.克隆基因的类型;受体的选择;载体的选择4.限制性酶切图谱5.属名的第一个字母;种名的前两个字母;株名6.(1)减少酶量;(2)缩短反应时间;(3)增大反应体积7.EcoK;EcoRl8.GGCC;异源同工酶(同裂酶)9.枯草杆菌蛋白酶;(1)5'-3'合成酶的活性;(2)3'-5'外切核酸酶10.碱性磷酸酶;5’端的磷酸基团11.Ca2+13.DNA聚合酶I:5'一3'外切核酸酶;5'一3'合成酶14.S1核酸酶切割;DNA聚合酶补平15.核酸水解酶H;RNA16.质粒DNA;病毒DNA;质粒和病毒DNA杂合体17.复制区:含有复制起点;选择标记:主要是抗性基因;克隆位点:便于外源DNA的插入18.质粒消除(或治愈)19,pMBl;pSCl01;pSF2124(R质粒)20.1000kb;300kb21. 严紧22.pBR322和M13;pMBl;转座子23.它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA的扩增;对某些噬菌体(如λ噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚,其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24.没有合适的限制性内切核酸酶识别位点;选择标记25.质粒;λ噬菌体;4526.(1)分子量大,(2)酶的多切点,(3)无选择标记27.复制区;IG区28.75%~105%29.螯合Mg2+离子,抑制核酸酶的活性30.中和DNA分子的负电荷,增加DNA分子间的凝聚力31.(1)合成探针;(2)合成cDNA;(3)用于PCR反应;(4)进行序列分析32.T—载体33.第二链合成时形成的发夹环34.乙醇使DNA分子脱水35.(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)具有翻译的起始和终止信号36.接受外源DNA的生理状态37.(1)黏性末端连接;(2)平末端连接;(3)同聚物接尾连接;(4)接头连接法38.基因组DNA克隆;基因组DNA文库39.cDNA克隆;cDNA文库40.聚合酶链式反应(PCR)41.0︒C;42︒C42.(1)遗传学方法;(2)物理筛选法;(3)核酸杂交法;(4)表达产物分析法43.插入外源片段的种类较多,大小又极为相似的重组体的筛选44.基因组DNA;cDNA45.Klenow酶填补的方法;T4DNA聚合酶46.(1)用M13噬菌体载体合成单链DNA探针;(2)从mRNA反转录合成单链cDNA探针;(3)用不对称PCR合成单链DNA探针47.外源基因是否进行了转录48.两种不同的细胞群体能够表达不同的基因,即在一个群体中能够表达一些基因,而在另一个细胞群体中不能表达这些基因49.Northern印迹50.Southern印迹51.5’→3’合成酶;3’ →5’外切核酸酶52.(1)克隆的是完整的基因;(2)使用的是表达载体;(3)不含内含子53.(1)印迹的对象不同:Northern是RNA,Southern是DNA;(2)电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性条件54.(1)抗体能够被吸附到固体支持物上;(2)同一个抗原可以同几种抗体结合;(3)抗体能够被标记二、选择题(单选或多选)1.c;2.c;3.b;4.b 5.b,C,d,e;6.c;7.b;8.d;9.d;10.B;11.a;12.a;13.d;14.b 15.d;16.c;17.a,b;18.a;19.c;20.d;21.c;22.C;23.b;24.C;25.d;26.a,C,d;27.b;28.c;29.b;30.a;31.c;32.a,c,d,e,33.a,b,c;34.b;35.c;36.c;37.d;38.b;39.c;40.a;41.c;42.a,b,c;43.b;44.b;45.d;46.a;47.a;48.c;49.c;50.b;51.c;52.c;53.b;54.a,c,d;55.a;56.b;57.a,b;58.c;59.a;60.d;61.b;62.c;三、简答题1.答:Sanger DNA测序法是建立在两个基本原理之上:(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程);(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端,双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端,因此会终止聚合反应的进行。
基因工程思考题答案【篇一:基因工程习题及答案】选题1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指(b)a . i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶e. rnaase2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b )a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。
b. 它们的识别序列完全相同。
c. 它们的切割方式可以相同,也可以不同。
d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样,但切割位点间的序列一样。
e. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是(a)a. 37 ℃b.30 ℃c.25 ℃d.16 ℃e.33 ℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b)a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。
b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。
c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp , s- 腺苷蛋氨酸能促进反应,但不是绝对需要。
d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性, ii 类限制酶对dna 只有切割活性而无甲基化活性。
e.ii 类限制酶要求严格的识别序列和切割点,具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切割概率为 ( d )a. 1/44b. 1/66c. 1/64d.1/46e. 1/1066. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c )a. ph:2-4b. ph:4-6c. ph:6-8d. ph:8-10e. ph:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d)a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后,可能会阻碍限制酶的酶解活性。
b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差异的。
c.有些限制酶对同一dna 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
基因工程》双语课每章思考题第一章1什么是基因工程?2基因工程的操作步骤有哪些?3基因工程的应用范围?基因操作可以应用在哪些领域?4什么是GMO?5在基因工程领域有重要贡献的科学家有哪些?试例举三位及其贡献。
6基因工程的三个发展阶段?第二章1 DNA、RNA勺主要区别?2 DNA (or RNA )的组成?3 DNA变性概念及诱发因素。
4中心法则的主要内容。
5遗传密码子的概念。
6基因的概念、类型。
7基因的表达。
8原(真)核生物基因的结构及区别。
9遗传物质及其相互联系。
10某研究小组对一个克隆的DNA序列(非模板)进行测序,其碱基顺序(假定)如下:5* ・CCGGCGGCAATGGCGGCGTCGGCGACCCAGGAGGCCGACTAA'CGGACCG ・3(1 )请写出模板链的碱基顺序及转录的碱基序列(2) 翻译从何处开始、何处结束(3) 可能编码的氨基酸序列(4) 如果基因突变,那部分区段变异会影响该基因编码和蛋白质功能(密码子见下表)1 DNA提取的三个基本条件。
2在DNA提取中,酚/仿提抽的目的是什么?3纯化DNA或RNA时,通常将DNA溶解在哪种物质中,为什么?4利用紫外分光光度比值来确定提取的DNA或RNA纯度时:当A26O=1时,相当于』有g?ml dsDNA或卩g?ml ddDNA'当AQ60/A280=1 .8时,为较纯的,当A260/ A 280 =2.0时,为纯当A260/ A 280>2.0有杂质,当A260/ A 280<1 .8有残留的物质5请简述Southern杂交的原理和过程6 请简述Southern Blotting、Northern Blotting 和Western Blotting 的区别?7请简述核酸电泳的原理。
第四章1限制性核酸内切酶三种类型的特点?为什么基因工程中需选II型酶。
2 Type II restriction endonucleases 的命名原则。
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【人教版】生物选修三:1.3《基因工程的应用》课后习题(含答案)(word版可编辑修改)【优化设计】2018-2019学年高中生物 1。
3基因工程的应用课后习题新人教版选修3课时演练·促提升A。
黑麦与六倍体普通小麦杂交,杂种通过秋水仙素或低温处理得到八倍体小黑麦B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株D。
自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上解析:A选项八倍体小黑麦的培育利用的是染色体变异。
C选项利用的原理是基因突变。
D选项属于基因重组,但是发生在自然条件下,不符合基因工程“按照人们的愿望,进行严格的设计”的概念。
答案:B2。
下列关于基因工程的说法中,正确的是( )A.基因工程的设计和施工是在细胞水平上进行的B。
基因工程都是在生物体外完成的C。
基因工程是对蛋白质进行的操作D。
基因工程能打破物种间的界限,定向改造生物性状解析:基因工程是DNA分子水平上进行设计和施工的。
《基因工程》双语课每章思考题
第一章
1什么是基因工程?
2基因工程的操作步骤有哪些?
3基因工程的应用范围?基因操作可以应用在哪些领域?
4什么是GMO?
5在基因工程领域有重要贡献的科学家有哪些?试例举三位及其贡献。
6基因工程的三个发展阶段?
第二章
1 DNA、RNA的主要区别?
2 DNA(or RNA)的组成?
3 DNA变性概念及诱发因素。
4 中心法则的主要内容。
5 遗传密码子的概念。
6 基因的概念、类型。
7 基因的表达。
8 原(真)核生物基因的结构及区别。
9 遗传物质及其相互联系。
10 某研究小组对一个克隆的DNA序列(非模板)进行测序,其碱基顺序(假定)如下:5’-CCGGCGGCAATGGCGGCGTCGGCGACCCAGGAGGCCGACTAACGGACCG -3’(1)请写出模板链的碱基顺序及转录的碱基序列
(2)翻译从何处开始、何处结束
(3)可能编码的氨基酸序列
(4)如果基因突变,那部分区段变异会影响该基因编码和蛋白质功能(密码子见下表)
第三章
1 DNA提取的三个基本条件。
2 在DNA提取中,酚/仿提抽的目的是什么?
3 纯化DNA或RNA时,通常将DNA溶解在哪种物质中,为什么?
4 利用紫外分光光度比值来确定提取的DNA或RNA纯度时:
当A260=1时,相当于含有μg•ml-1 dsDNA 或μg•ml-1 ddDNA
当A260/ A280=1.8时,为较纯的,当A260/ A280=2.0时,为纯
当A260/ A280>2.0 有杂质,当A260/ A280<1.8 有残留的物质
5 请简述Southern杂交的原理和过程
6 请简述Southern Blotting、Northern Blotting和Western Blotting的区别?
7 请简述核酸电泳的原理。
第四章
1 限制性核酸内切酶三种类型的特点?为什么基因工程中需选II型酶。
2 Type II restriction endonucleases的命名原则。
(EcoR I)
3 酶活性单位定义?
4 Bal31、ExoIII、DNase I,酶的作用特点。
5反转录酶。
6 BAP和CIP分别指什么酶,作用特点是什么?
7 DNA Ligase的特点?
8 DNA polymerase 与DNA Ligase的异同点?
9 A fragment of mouse DNA with EcoRI sticky ends carries the gene M. This DNA ,which is 8kb long, is inserted into the bacterial plasmid pBR322 at the EcoRI site.the recombinant plasmid is cleaved with two different restriction enzyme. The size fragments that were obtained on an agrose gel are isted below. Draw the restriction map for this sequence. (10 pts)
EcoRI BamHI EcoRI + BamHI
8.0kb 5.5kb 4.0kb
6.0kb 4.5kb 3.5kb
4.0kb 3.0kb
2.5kb
1.0kb
第五章
1 寄主的概念
2 载体的概念
3 基因克隆的概念
4 啤酒酵母属于原/真核寄主?
5 整株植物可以作为寄主吗?
6 穿梭载体的概念
7 真核寄主与元和寄主的主要区别?
8 现在可以利用大肠杆菌生产人胰岛素吗?y
9 载体应具备的4个主要条件?(复制起点,克隆位点,标记gene,安全)
10 质粒的结构特点有哪些?
11 质粒的拷贝数是什么?
12 按拷贝数,质粒可以分为哪几类?
13 标记基因有哪些?
14 MCS连杆?T4噬菌体的特点?
15 温和噬菌体的概念?烈性噬菌体的概念?
16 为什么可以选择λ-噬菌体作为克隆载体?它的优缺点(特点)有哪些?
17 λ噬菌体分类?插入型,替换型。
举例说明
18 使用替换型载体克隆外源DNA的三个步骤
19 charon vector特点?
20 M13噬菌体周期?M13噬菌体结构特点?
第六章
1 合成cDNA的方法有哪些?
2 基因组文库和cDNA文库的异同?
3 构建基因组文库的一般程序?
4 如何利用YAC载体构建基因组文库?
5 简要介绍SMART方法的原理和步骤?
第七章
1 简述PCR技术原理及基本步骤?
2 PCR引物设计有哪些原则?
3 RT-PCR的原理和基本步骤?
4 Nested PCR的原理和基本步骤?
5 Inverse PCR的原理和基本步骤?
6 RADP、RFLP、AFLP原理和异同点?
第八章
1 转化子和重组子的异同?
2 Southern blotting原理及基本步骤?
3 Nouthern blotting原理及基本步骤?
4 western blotting原理及基本步骤?
5 Southern blotting、Nouthern blotting 、western blotting的异同点?
第九章
1 人类基因组计划四张图分别是什么?
2 大规模测序有哪些策略?
3 凝胶阻滞实验原理及基本步骤?
第十章
1 基因芯片的原理?
2 举例说明基因治疗的方法?
3 检验艾滋病病毒的方法和原理?
第十一章
1 利用基因工程生产药物的优缺点?
2 蛋白质基因工程的原理及基本步骤?
3 蛋白质基因工程有哪些应用?
第十二章
1 植物基因工程的基本方法?
2 动物基因工程的基本方法?
3 植物基因工程有哪些应用?
4 动物基因工程有哪些应用?
第十三章
1 克隆羊“多莉”的操作步骤?
2 你了解哪些克隆方法?
3 你觉得哪种克隆方法在未来最有发展前景,为什么?
第十四章
1生物伦理学的基本理念有哪些?2你是否赞成克隆人,为什么?
3你是否赞成基因治疗,为什么?4你是否赞成干细胞治疗,为什么?
5 你怎样看待生物安全性问题?。