MMP-9与E-Cad在胃癌中的表达及临床病理学意义

山东医药２００９年第４９卷第ｌ０期　

非小细胞肺癌组织中　

表达变化及意义　ＭＭＰ一９和Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ的　

付伟　，吕铮　，刘爱东　，周立军　。张志勇　

（１唐山市工人医院，河北唐山０６３０００；２唐山市职业技术学院）　

［摘要］　采用免疫组化法检测６４例非小细胞肺癌及１８例正常肺组织中的基质金属蛋白酶一９（ＭＭＰ－９）及上　

皮型黏附素（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ）。结果显示，非小细胞肺癌组织中ＭＭＰ－９、Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ阳性表达率分别为６５．６３％、　

４２．１８％，正常肺组织分别为３３．３３％、７７．７８％，两种组织相比，Ｐ均＜０．０５；ＭＭＰ－９及Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达均与非小细　

胞肺癌的分化程度及淋巴结转移有关（Ｐ均＜０．０５），二者在非小细胞肺癌中的表达呈负相关（ｒ＝一０．４７６７，Ｐ＜　

０．０５）。认为ＭＭＰ－９和Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ在非小细胞肺癌发生发展中具有协同作用，检测这两个指标可能对判断非小细　胞肺癌的预后有一定价值。　

［关键词］肺肿瘤；非小细胞肺癌；基质金属蛋白酶；上皮型黏附素　

［中图分类号］　Ｒ７３４．２　［文献识别码］Ｂ　［文章编号］　１００２－２６６Ｘ（２００９）１０－００６９－０２　

上皮型黏附素（Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ）表达缺失与肿瘤的　

进展有关，其功能的修复要通过基质金属蛋白酶－９　

（ＭＭＰ－９）与细胞基质作用后产生的诱导作用来实　

现。ＭＭＰ－９属于明胶酶类，在细胞外基质的降解和　

再塑造中发挥作用。我们采用免疫组化法检测了　

６４例非小细胞肺癌组织中的ＭＭＰ－９及Ｅ．ｃａｄｈｅｒｉｎ，　

探讨二者在非小细胞肺癌发生发展中的作用及相关　

性。　

１资料与方法　

１．１　临床资料２００５年６月一２００７年ｌ２月收治　

的非小细胞肺癌患者６４例，男４２例，女２２例；年龄　

３６～７８岁。有淋巴结转移者３３例，无淋巴结转移　

者３１例。术前均未进行放化疗。术中留取肿瘤标　

本，取经病理检查证实的正常肺组织ｌ８例作对照。　

全科医学临床与教育２０１０年１月第８卷第１期Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｐｒａｃｔｉｃｅ　Ｊａｎ．２０１０，Ｖｏ１．８，Ｎｏ．１　

复方藤梨根制剂抑制胃癌转移与ＭＭＰ一９、　

ＴＩＭＰ一１和Ｅ—ｃａｄ表达的关系研究　

方勇　秦建岭　郭勇　潘宏铭　・３５・　

基础研究・　

【摘要１目的观察复方藤梨根制剂对胃癌细胞ＭＭＰ一９、ＴＩＭＰ—ｌ和Ｅ—ｃａｄ蛋白表达的影响，探讨其抗胃癌　细胞转移的作用机制。方法　以ＳＧＣ一７９０ｌ胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型，将裸鼠随机分为０．９％　氯化钠溶液组（对照组）、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量及高剂量组，接受连续２１　ｄ灌服治疗。待裸鼠衰竭或　死亡后解剖观察肿瘤转移等情况；用免疫组化方法检测肿瘤组织中ＭＭＰ一９、ＴＩＭＰ一１和和Ｅ—ｃａｄ蛋白表达的　变化。结果根据胃癌裸鼠动物模型的转移部位进行赋值评分，氯化钠溶液与中、高剂量组比较差异有统计学　意义（Ｆ＝５．１５，Ｐ＜０．０５），与低剂量组之间比较差异无统计学意义（Ｆ＝Ｉ．２７，Ｐ＞０．０５）。经免疫组化法检测，对照组　的胃癌细胞的ＭＭＰ一９明显高于中、高剂量复方藤梨根制剂组（　３．８６，Ｐ＜０．０５）；对照组的胃癌细胞的，ｒＩＭＰ一１　蛋白表达明显低于中、高剂量复方藤梨根制剂组（　４．３０．Ｐ＜０．０５）：而Ｅ—ｃａｄ表达各组之间差异无统计学意义　（　０．４１。Ｐ＞Ｏ．０５）。结论　复方藤梨根制剂可能是通过下调ＭＭＰ一９和上调ＴＩＭＰ一１的途径发挥抗胃癌转移作　用：而对Ｅ—ｃａｄ的异常表达没有明显调节作用　【关键词１复方藤梨根制剂；　胃癌；　转移；ＭＭＰ一９；ＴＩＭＰ一１　

Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｓｔｕｄｙ　ａｍｏｎｇ　ＭＭＰ－９，ＴＩＭＰ－１　ａｎｄ　Ｅ－ｃａｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｆｕｆａｎｇ　Ｔｅｎｇｌｉｇｅｎ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ＦＡＮＧ　Ｙｏｎｇ，ＱＩＮ　Ｊｉａｎｌｉｎ，ＧＵＯ　Ｙｏｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｓｉｒ　Ｒｕｎ　Ｒｕｎ　Ｓｈａｗ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１００１６，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ａｎｄ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｔｒｉｘ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－９　ｆＭＭＰ－９），　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－１（ＴＩＭＰ－１）ａｎｄ　Ｅ—ｃａｄｈｅｆｉｎ（Ｅ－ｃａｄ），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｂｙ　Ｆｕ￣ｎｇ　Ｔｅｎｇｌｉｇｅｎ　ｍｉｘｔｕｒｅ（ＦＦＴＬＭ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｎｕｄｅ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　ｍｏｄｅ　ｏｆ　ＳＧＣ一７９０　１　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｉｎｔｏ　ｓａｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＦＦＬＭ，ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＶＦＬＭ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＦＴＬＭ　ａｎｄ　ａｃｃｅｐｔｅｄ　２１　ｄａｙｓ　ｏｆ　ｏｒａｌ　ｉｎｆｕｓｉｏｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｓｉｔｕａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｄｉｓｓｅｃｔｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｅａｄ　ｎｕｄｅ　ｍｉｃｅ．　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＭＭＰ－９，ＴＩＭＰ－１　ａｎｄ　Ｅ—ｃａｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ａｆｔｅｒ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ａｎｄ　ｃｏｕｎｔｅｄ　ｔｈｅ　ｓｃｏｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｏｒｇａｎ，ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｓａｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｉｄｄｌｅ，ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＦｒＬＭ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ（Ｆ＝５．１　５，Ｐ＜０．０５）．Ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｓａｌｉｎｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｆ＝Ｉ．２７，Ｐ＞Ｏ．０５）．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＭＭＰ－９　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｇｒｅａｔｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｉｄｄｌｅ，ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＦＴＬＭ（Ｆ＝３．８６，　Ｐ＜０．ｏｓ）．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＴＩＭＰ－１　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｍａｒｋｅｄｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｍｉｄｄｌｅ，ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ＦＦＴＬＭ（Ｆ＝４－３０，Ｐ＜０．０５）．Ｂｕｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｅ－ｃａｄ，ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｆ＝０．４　１，Ｐ＞０．ｏ５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｂｙ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ＦＶｒＬＭ　ｗａｓ　ｂｙ　ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＭＭＰ一９，ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＩＭＰ—ｌ，ａｎｄ　ｗｉｔｈｏｕｔ　

MMP-9在胃腺癌中的表达意义

张颖;张古林;胡建功

【摘 要】目的 探讨MMP-9在胃腺癌中的表达意义.方法 采用免疫组化S-P法检测10例正常胃黏膜上皮、20例癌旁组织、60例胃腺癌组织中MMP-9的表达,并分析其表达意义及与胃癌临床病理特征的关系.结果 在正常胃黏膜上皮、癌旁组织、胃腺癌组织中,MMP-9的表达阳性率在胃腺癌组织中显著高于正常胃黏膜上皮及癌旁组织中(P＜0.01),在癌旁组织中显著较高于正常组织中(P＜0.05).MMP-9的表达阳性率在低分化癌组显著高于中分化癌组(P＜0.05),在浸润肌层及浸润浆膜层组显著高于浸润黏膜下层组(P＜0.05),在淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05).MMP-9的表达阳性率与患者性别、年龄、肿瘤体积等无关(P>0.05).结论

MMP-9的表达增强可能与胃癌的转移侵袭有关;MMP-9可能促进了胃癌的发生发展.

【期刊名称】《河北医药》

【年(卷),期】2013(035)003

【总页数】2页(P365-366)

【关键词】胃腺癌;基质金属蛋白酶-9;免疫组织化学

【作 者】张颖;张古林;胡建功

【作者单位】067000,河北省承德市,承德护理职业学院病理教研室;067000,河北省承德市,承德护理职业学院病理教研室;067000,河北省承德市,承德护理职业学院病理教研室 【正文语种】中 文

【中图分类】R735.2

胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，位居癌症死因的第二位［1］。胃癌的发生涉及肿瘤细胞与宿主之间复杂的相互作用，多个基因及其产物参与了过程的调控。基质金属蛋白酶(matrix m etalloproteinases，MMPs)是一类结构中含有Zn2+的肽链内切酶家族，是肿瘤细胞突破基底膜屏障的主要执行者。其中MMP-9为明胶酶，可选择性降解ECM和基底膜的主要成分O型胶原和明胶，为肿瘤细胞浸润和转移创造必需条件，并同时促进肿瘤中新生血管的形成［2］。本研究通过检测胃癌组织中MMP-9蛋白的表达及其与胃癌临床病理学特征之间的相关性，旨在探讨其在胃癌发生发展中的作用，为胃癌预后的判断及临床治疗提供一定的理论参考依据。

MMP—9在胃癌细胞中的表达及意义

摘要 目的：探讨MMP-9在人胃癌细胞SGC7901、BGC-823中的表达及意义。方法：选择两种不同的胃癌细胞（人胃癌转移淋巴结细胞SGC7901，人胃低分化腺癌细胞BGC-823细胞），采用细胞免疫化学SABC法对两种胃癌细胞中MMP-9表达情况进行检测和分析。结果：MMP-9在两种胃癌细胞中都高表达，且差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：MMP-9在胃癌细胞SGC7901中的高表达与其细胞的转移能力密切相关。

关键词 胃癌细胞 金属蛋白酶-9 细胞免疫化学胃癌是我国消化道最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率占肿瘤的首位，本研究选择胃癌细胞株SGC7901、BGC-823，旨在研究MMP-9在胃癌细胞中的表达情况，探讨MMP-9在促进胃癌细胞侵袭转移中的作用。

资料与方法

细胞及试剂：人胃癌转移淋巴结细胞SGC7901购自武汉生命科学细胞中心，人胃低分化腺癌细胞BGC-823细胞购自武汉博士德生物工程有限公司。RPMI-1640购自Gibeo公司；MMP-9单克隆抗体购自北京中杉金桥有限生物公司；DAB显色试剂盒及即用型（鼠/兔）SABC免疫组化染色试剂盒购自北京中衫生物技术有限公司。PIRA裂解液购自北京中衫生物技术有限公司。

方法：①细胞培养：将复苏的胃癌细胞SGC7901、BGC-823细胞分别接种于5ml培养液的培养瓶中，在37℃二氧化碳的恒温培养箱内（CO2浓度为5%）培养2～3天，所用的培养液1640均含10%小牛血清、青霉素、链霉素个1U/ml，每天观察培养细胞的生长情况，根据培养液的颜色变化，每1～2天换一次培养液，待培养细胞长满培养瓶底70%～80%时备用。②细胞免疫化学法：常规消化细胞，制备细胞悬液，将细胞经胰酶消化收集后，并调整细胞密度为2×105/ml。将高压灭菌的盖玻片放入6孔培养板内，常规培养。弃去培养基，PBS清洗细胞3次，在各细胞爬片上滴加一抗工作液MMP-9，37℃孵育1～2小时。PBS冲洗5分钟×3次。滴加生物素标记二抗工作液，37℃孵育10～30分钟；同上洗涤。滴加SABC，37℃孵育10～30分钟；DAB显色，苏木精复染后常规脱水、透明、封片。镜下观察并摄片。