灵芝多糖
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灵芝多糖的药用价值摘要: 灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分之一,具有很高的药用价值。
它是一种重要的生物免疫调节剂,具有广泛而显著的药理活性,能提高机体免疫力、抑制肿瘤、抗衰老、抗血栓、抗血凝、抗病毒、抗氧自由基、降血糖等作用。
关键词: 灵芝多糖; 药用价值;作用灵芝[ Ganoderma l uci dum (Fr . ) Karst . ]是一种珍贵药用菌,含有丰富的活性成分,灵芝多糖( Ganoderma l uci dum polysaccharides ,简称GL P)是灵芝“扶正固本”的有效成分[1 ]。
灵芝多糖是由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物[2 ]。
葡聚糖中大部分为β-葡聚糖,少数为为α-葡聚糖,而β-葡聚糖是其发挥活性的主要成分[3]。
研究表明,灵芝多糖具有广泛的药理活性,具有提高机体免疫力、抑制肿瘤、增强机体耐缺氧能力、消除自由基、抗衰老、抗氧化、抗血栓、抗血凝、抗病毒、降血糖、降血脂等作用。
本文综述了灵芝多糖的药用价值。
1 灵芝多糖的主要成分灵芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide)目前已分离到的有200多种,其中大部分为β –葡聚糖,少数为α –葡聚糖,多糖链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度酒精,在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞内壁。
灵芝多糖大多为异多糖,即除含有葡萄糖外,大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等其他单糖。
灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究。
2灵芝多糖的药用价值2. 1 灵芝多糖的免疫调节作用人体免疫系统是人体防止发生各种疾病并维持健康的防御系统。
人体的免疫系统由胸腺、骨髓、脾脏、淋巴结等免疫器官和T细胞、B 细胞、自然杀伤细胞(N K) 、K细胞、巨噬细胞(M ψ)等免疫细胞以及亿万个免疫细胞因子(白介素、干扰素、各类刺激因子等)组成。
灵芝多糖的功能特性摘要:对灵芝多糖的功能进行了详细阐述及其应用和展望。
关键字:灵芝多糖功能应用Abstract:This paper summarized about ganoderma lucidum polysaccaride's function appliance and development and so on .Keyword:ganoderma lucidum polysaccaride function appliance一、灵芝多糖的功能:1、免疫调节功能迄今为止,关于灵芝多糖免疫调节功能的机制还不十分清楚,普遍认为其免疫功能可能是灵芝多糖能直接或间接激活 T 细胞、B 细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞 (NK)等免疫细胞、促进未经纯化脾细胞在体外增殖,增强 DNA多聚酶a的活性及促进白细胞介素分泌等实现其免疫功能。
据报道,许多适量灵芝多糖可明显增加T细胞增殖、T 细胞表面表型表达及 T细胞诱生 IL-2 能力,增强 T 细胞DNA多聚酶活性、增加 T 细胞亚类数量和功能具有明显免疫增强和恢复作用。
2、抗辐射辐射对机体造成损害的机制之一是产生大量自由基,引发一系列脂质过氧化反应,引起细胞中核酸、蛋白质分子结构的破坏,最终对各组织和器官造成严重的损害,同时,辐射引发免疫功能降低,基因突变等也是严重危害人体健康的。
3、灵芝多糖的抗肿瘤作用灵芝多糖能防止肿瘤的发生和抑制肿瘤的生长,并已用于临床治疗肿瘤。
实验证明,大多数灵芝多糖的抗肿瘤作用是作为一种生物反应调节剂, 通过增强宿主免疫调节功能即宿主介导抗肿瘤活性来实现的灵芝多糖并无细胞毒作用,即不能直接杀死肿瘤细胞, 而是通过增强Ma的吞噬功能,促进T 淋巴细胞增殖, 增强T 细胞的细胞毒作用, 诱导某些免疫因子产生等途径来抑制肿瘤生长。
4、灵芝多糖的抗衰老作用近代的科学研究证明,灵芝菌丝体和子实体中含有的高分子多糖类生理活性物质除具有增强机体免疫功能和抑制肿瘤生长的活性外,还有延缓衰老的作用。
一种提高灵芝多糖含量的灵芝栽培方法说实话提高灵芝多糖含量的灵芝栽培方法这事,我一开始也是瞎摸索。
我最初就按照普通的灵芝栽培法弄,找个合适的木头,把灵芝菌种接上就放一边等着。
结果发现这样长出来的灵芝多糖含量不咋高。
我试过好多不同的木头呢,开始用的是杨树,我寻思这树常见,应该能行。
可是呢,灵芝长起来后测试多糖含量很不尽如人意。
后来我才明白,原来不同的树木材质会影响灵芝的生长和多糖的积累。
像槐树或者柞树这种木质硬一些的更有利于灵芝多糖的合成,感觉就像人吃饭,硬一点的食物可能更有嚼头,对牙口和肠胃发育有好处一样,硬的木质能促使灵芝努力合成更多东西,可能就包括多糖吧。
接种的时候我也走过弯路。
我一开始接种量很少,觉得只要有菌种就行了呗。
但后来发现接种少了,灵芝生长慢,而且多糖含量也不高。
我就加大接种量,结果就有所改善。
这就好比种瓜,瓜种多撒点下去发苗快,灵芝也是这个理。
光照也要合适。
我之前把灵芝搁在太暗的地方,灵芝长得瘦弱枯黄,多糖含量少得可怜。
后来我每天让它适度见光,又不能暴晒,就像我们人晒太阳,晒少了没精神缺钙,晒多了烫伤皮肤,这中间的度要把握好。
土壤或者说栽培基质也很重要。
我试过只在简单的木屑土里栽培,之后就试着往里面加了些麦麸和石膏。
就这一添加改变可不小。
原本基础上灵芝多糖含量提高了不少,就像做饭炒菜,光有主食材不行,还得有点佐料调配。
不过呢,要说具体加多少麦麸和石膏是最好的,这个我还不太确定,还得继续试呢。
还有温度,warmer温度可能更适合灵芝高产多糖,可是太warm 也不行。
冷了灵芝不长,热了又容易生病或者变异,那多糖含量肯定大打折扣。
我没有特别精确的温度数据,就大概在20到25度之间,我感觉这个范围挺好的。
这些方法都是我不断摸索试出来的,希望对想要提高灵芝多糖含量的朋友有点帮助。
我现在还在继续琢磨有没有其他更好的办法呢,比如说能不能加些特殊的营养肥料啥的,但是这个目前还没探索出来,正在想办法呢。
灵芝多糖抗皮肤衰老及相关基因表达的研究的开题报告【摘要】灵芝是一种传统的中草药,在中医理论中被用于治疗多种疾病。
近年来,随着人们对灵芝的深入研究,发现灵芝中含有多种生物活性成分,其中灵芝多糖是一种重要的成分。
本研究旨在探究灵芝多糖对皮肤衰老的抗作用及其相关基因表达的改变,为灵芝的应用提供更加科学的支持。
【研究背景】皮肤衰老是一种常见的现象,随着人类寿命的延长,越来越多的人面临着皮肤老化的问题。
皮肤衰老表现为皮肤失去弹性,皱纹加深,斑点增多等现象。
目前,有很多的护肤产品声称可以抗皮肤衰老,但是有效性并不是十分显著。
由于传统药材中含有多种生物活性成分,因此研究灵芝多糖是否能够有效抗皮肤衰老是有一定意义的。
【研究内容】本研究将从以下几个方面入手:1. 灵芝多糖对皮肤细胞的保护作用:使用不同浓度的灵芝多糖处理皮肤细胞,观察细胞活性变化及抗氧化能力,探讨灵芝多糖对皮肤细胞的保护作用及作用机制。
2. 灵芝多糖抗皮肤衰老的效果:建立皮肤老化模型,观察灵芝多糖对皮肤老化的影响,包括皮肤弹性、皮肤水分、皮肤斑点和皱纹等指标。
3. 灵芝多糖影响相关基因表达的改变:通过基因芯片技术检测灵芝多糖处理后皮肤细胞的基因表达谱,从中筛选出与皮肤老化相关的基因,并分析灵芝多糖对这些基因的影响。
【研究意义】本研究将为灵芝多糖在抗衰老领域的应用提供更加科学的依据。
同时,探究灵芝多糖对皮肤细胞及相关基因的影响,也有助于深入理解皮肤老化的机制。
【研究方法】细胞培养、MTT法、自由基清除能力、建立皮肤老化模型、皮肤弹性、皮肤水分、皮肤斑点和皱纹等指标检测、基因芯片技术。
【预期结果】预计灵芝多糖能够显著提高皮肤细胞的活性及抗氧化能力,减缓皮肤老化的进程,同时将发现灵芝多糖对多种与皮肤老化相关的基因具有调节作用,在更深入了解其调节机制的基础上,为灵芝多糖在皮肤护理及相关药物领域的应用提供更加科学的依据。
近年来,药理学和免疫学的多方研究表明,灵芝多糖芝扶正固本最有效的成分之一,具有广泛的药理活性,排毒、抗放射,提高肝脏、骨髓合成dna、bna的能力,抗肿瘤增强机体免疫等效果。
因此多糖的提取为广大科研人员药研制者所重视,他们不断研究和探索灵芝多糖提取的方为弄清灵芝多糖的化学成分提供有力的理论依据,同时为许多疾病患者带来福音。
一、灵芝茵丝体多糖的提取(一)材料1.菌种:湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。
2.种子培养基:玉米粉2%大米粉2%蔗糖2%磷酸二氢钾o.1g硫酸镁0.05%ph值自然3.发酵培养基:麦麸浸出液10%葡萄糖2%硫酸铵0.2%磷酸二氢钾0.2%ph值自然(二)方法1.种子培养:2.发酵培养生产菌丝体。
3.测定干、湿菌丝体。
将发酵液进行离心,然后取其沉淀物,加人60%蔗糖,进行高速(3000转/分)密度梯度离心5分钟,取上层菌丝体,洗净蔗糖再压干,即得湿菌体,然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。
分别称取其重量。
4.多糖的提取。
(1)菌丝体预处理。
取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,以除去湿菌体中的脂类物质,同时使糖苷酶失去活性,防止多糖的降解。
(2)用热水提取多糖。
取上面经预处理的灵芝湿菌体,放人1:20的热水(95℃)中浸提,一次3小时,连续浸提3次,合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积,再用3倍体积的95%乙醇混合,静置10-12小时,再离心,最后加入75%的乙醇反复洗涤,以沉淀多糖。
此沉淀物为粗多糖,其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质,一般要经过纯化。
(3)多糖的纯化,去蛋白质和deae纤维素柱层析。
去蛋白质一般采用sevag法:加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离,直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。
多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖,分别以0.025mol/l、0.1mol/l 的硼砂,0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱,然后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度,收集有多糖的洗脱液,再浓缩脱盐即得所需的多糖。
灵芝多糖的研究摘要:灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分。
本研究对灵芝多糖的分离和纯化方法作了阐述,对其化学结构作了初步分析,并且对工业发酵方法生产的三种灵芝菌粉与相应的野生或栽培的灵芝子实体进行了灵芝多糖含量方面的比较从而说明,利用现代发酵技术生产灵芝菌粉将很有希望成为以后生产灵芝的一种主要方法。
关键词:灵芝多糖;发酵灵芝菌粉;野生灵芝;栽培灵芝引言灵芝的概述灵芝隶属于真菌界,担子菌纲,无褶菌目,猴椅菌科,万年茸(灵芝)属。
学名为Ganoderma fucldlum(Fr.)Karst。
它是观赏、医药兼用的菌类。
由于整个菇体木化,可长久保存不腐败,故有”万年菌”之称。
1.灵芝的保健作用灵芝是我国传统的扶正固本,滋补强壮的中药,历代医书均将之列为中药上品。
早在2千多年前的春秋战国时期《列子,汤问》列御寇中云“朽壤之一,有菌之者”,并总结当时利于灵芝治病保健的经验:“煮百沸其味清芳,饮之明目,脑清,心静,肾坚,其宝物也”。
[1]最早的医学著作《神农草经》把灵芝列为上品,谓其“久味苦平,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久服轻身不老”。
李时珍的《本草纲目》中对灵芝药性和功效作了详尽的记述:赤芝,苦平无毒,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘;紫芝,甘温无毒,好颜色,治虚痨,治痔。
[2]现代药理和临床研究证明,灵芝中迄今已分离到150余种化合物,但多数药理活性与灵芝多糖有关。
活性多糖是一种具有某些特殊生理功能的多糖类高分子化合物,广泛存在于植物,动物和微生物组织中。
近年来,多糖结构与功能的关系以及多糖复合物疫苗等研究在国际上受到了较多关注。
灵芝多糖主要以下生理功能:(1)调节免疫功能(2)抗肿瘤作用(3)促进体内核酸与蛋白质的代谢(4)抗氧自由基作用(5)灵芝多糖有镇定作用,强心作用和提高实验动物耐受常压缺氧的能力等其他功能2.实验的材料和方法2.1材料泰山赤芝T-1,韩国灵芝K-1,日本灵芝J-1.三种灵芝菌种均为山东莱芜农科所保存品种。
详细解析灵芝多糖作用功效灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医药科技工作者的重视,研究报道也最多。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抗肿瘤,抗放射,解毒,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命,预防肿瘤和癌症、预防心血管病的产生,刺激胰岛素的分泌,可以降低血糖的浓度。
灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性,活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上羟基的数量有关。
灵芝多糖抑制肿瘤3种手段:⒈通过提高机体免疫力,使免疫细胞能在肿瘤发生早期把其杀死、吞噬;⒉提高血小板纤维蛋白的形成能力,大量的纤维蛋白能将早期的肿瘤肿块紧紧包裹,使它与外界隔绝,杜绝肿瘤的营养,从而使它长期处在休眠潜伏状态;⒊降低肿瘤细胞表面电荷,肿瘤细胞表面电荷要比正常细胞高好几倍,表面电荷的降低,肿瘤细胞的分裂调节基因就能启动,从而可抑制肿瘤的无限、快速分裂能力.目前,灵芝多糖已被用作治疗肿瘤的药物之一。
灵芝多糖及其功效:一、什么是多糖多糖与葡萄糖、果糖、蔗糖等性质完全不同,它不是普通的糖,而是指有多个单糖分子通过缩水而成的高分子化合物。
在糖生物学中,把1个糖原单位的糖称之为单糖,2个糖原单位的糖称之为双糖,2至10个糖原单位的糖叫做寡糖,由10个以上的单糖分子组成的糖称为多糖。
多糖又称为聚糖,基本可分为两类,一类是只含有一种单糖单位的多糖,叫做同多糖;一类是含有两种或更多种单糖单位的多糖,叫做杂多糖。
组成多糖的单糖主要有D型的葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和L型的阿拉伯糖等。
多糖广泛存在与自然界的植物、细菌、真菌、藻类及动物体内。
到目前,人类已在自然界中发现了几百种的多糖。
多糖在保健食品中多作为一类非特异性免疫增强剂,用于增强体质、抗缺氧、抗疲劳、延缓衰老等。
不同的多糖具有不同的生理活性,如降血糖、降血脂、降血清过氧化脂质、抗血凝等,部分多聚糖还具有显著的抗癌活性,例如从香菇分离出的香菇多糖,从灵芝中分离出的灵芝多糖等。
灵芝不同生长发育期粗多糖和三萜含量变化规律S567.3A 灵芝是我国传统的药用真菌,具有悠久的药用历史。
据《神农本草经》记载:灵芝性平、味苦,治胸中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久食轻身不老,延年神仙[1]。
现代药理研究证明,灵芝具有抗肿瘤、调节免疫、抗病毒、抗衰老、抗氧化、保肝、消炎抗菌、提高耐缺氧能力等功效[2,3]。
采收、加工、炮制和贮藏等因素对灵芝质量影响很大,其中适时采收是保证灵芝质量的必要条件之一。
近年来有关灵芝采收的研究报道较多[4,5],但均以灵芝多糖作为考察指标。
现代研究发现,三萜类活性物质也是灵芝的主要药效成分[6]。
因此本文对不同生长发育期灵芝子实体中粗多糖和三萜的含量变化进行研究,以期为确定灵芝的适宜采收期提供实验依据。
1 材料与方法1.1 供试菌株供试菌株赤芝05 (Ganoderma lucidum )、赤?〒?06(G.lucidum )、松杉灵芝(G.tsugae )、薄树?卜橹彳?G.capense)、惠州( G.lucidum )、信州( G.lucidum )和京大( G.lucidum ) 由浙江省林业科学研究院生物技术研究所保存;中芝( G.lucidum )、仙芝( G.lucidum )、仙源( G.lucidum )和日本红芝(G.lucidum、由浙江省武义金星食用菌XX公司提供。
1.2?艺舛<?品制备培养料配方:阔叶树木屑75%,麸皮24%,石膏1%,含水量65%。
栽培方法为覆土栽培[7]。
在灵芝子实体现蕾期、芝盖形成期、成熟期和衰老期(各生长发育期灵芝子实体形态特征见表1)进行取样一一用剪刀齐土表剪下子实体,所采子实体样品于60 C下烘干至恒重,用DG120型中草药粉碎机(浙江省瑞安市春海药材器械厂)粉碎,过80 目筛,备用。
1.3? Y侄嗵呛?量的测定本测定所用的试剂除特殊注明外,均为分析纯。
1.3.1? Z咸烟潜曜记?线制作葡萄糖标准曲线的制作参照文献[5,8 ]。
灵芝功效作用与主治灵芝,又称灵芝菌、灵芝蓝盖菌,是一种珍贵的中药材,素有“神草”、“仙草”、“长寿草”之称,被誉为不朽的神奇草药。
灵芝富含多种活性成分,并具有多种功效与作用。
首先,灵芝具有抗肿瘤的作用。
灵芝能够增强机体免疫功能,抑制肿瘤细胞的生长,可作为辅助治疗肿瘤的药物。
灵芝中的多糖和甲氧基化灵芝多糖具有抗肿瘤活性,可以诱导肿瘤细胞凋亡,阻断肿瘤的血液供应。
此外,灵芝中还含有具有抗肿瘤作用的活性物质如灵芝酸等,可以抑制肿瘤细胞增殖,抑制肿瘤的转移和侵袭。
其次,灵芝具有调节免疫功能的作用。
灵芝中的多糖具有增强巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能,可以促进机体产生免疫反应,增强机体的免疫力。
灵芝中的灵芝酸等活性成分也具有调节免疫功能的作用,可以调节免疫细胞的活性,提高机体对外界病原体的抵抗能力。
此外,灵芝还具有抗氧化作用。
灵芝中的多糖、氨基酸、灵芝多酚等活性成分可以清除自由基,减少氧化应激,保护细胞免受氧化损伤。
灵芝中的灵芝酸还能够调节活性氧的代谢,提高机体的抗氧化能力。
抗氧化作用可以延缓细胞的老化过程,提高机体的抗衰老能力。
另外,灵芝还具有调节血脂的功效。
灵芝中的灵芝多糖和灵芝多酚可以降低血中总胆固醇和甘油三酯的含量,提高高密度脂蛋白胆固醇的水平,有助于预防和治疗心血管疾病。
灵芝还可以提高心肌的供血和耐受力,保护心脏功能。
此外,灵芝还具有抗炎、抗菌、降糖、降压、保肝等多种功效。
灵芝中的灵芝多糖和酚类化合物可以抗炎、抗菌,对多种细菌和病毒都具有一定的抑制作用。
灵芝中的活性物质还可以降低血糖、降低血压、保护肝脏功能。
综上所述,灵芝具有抗肿瘤、调节免疫功能、抗氧化、调节血脂等多种功效,对很多疾病有一定的辅助治疗作用。
然而,在使用灵芝时需要注意,灵芝虽然好,但并不是万能药,不能用作替代药物。
患者在使用灵芝时,应咨询医生的建议,在医生的指导下合理使用,避免不必要的风险。
灵芝(Ganoderma lucidum )又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草,是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株。
按本草纲目记载“灵芝性平,味苦,无毒,主胸中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久服轻身不老,延年神仙”。
灵芝中通常含有多种活性物质,包括蛋白质和氨基酸、碳水化合物(主要为多糖)、脂肪和三萜类化合物、维生素和矿物质等[1],具有很高的药用价值。
灵芝多糖(Ganoderma Lucidum polysaccharides ,GLP )是其中主要的一类活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老以及调节血糖等生理功能,是目前灵芝研究领域的一个热点[2]。
本文就近年来灵芝多糖的制备、测定方法、结构分析以及生物活性研究的新进展进行综述。
1 灵芝多糖的提取与分离纯化传统的灵芝多糖提取方法多为热水浸提。
利用多糖溶于热水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂的特点,从灵芝中进行提取。
大致的工艺流程为:子实体粉碎→醇提→热水回流→减压浓缩→离心→醇沉→干燥[3]。
目前对于灵芝多糖的制备过程的研究主要包括提取方法(包括原料的预处理)、分离纯化和纯度鉴定。
1.1 灵芝多糖的提取在灵芝多糖的提取过程中,多糖含量受到很多灵芝多糖的研究进展赵岩1 张莹2 初乐1 和法涛1 葛邦国1 宋烨1(1.中华全国供销合作总社济南果品研究院,山东 济南 250014;2.山东省轻工业设计院,山东 济南 250014)摘要:灵芝多糖是灵芝重要的活性物质,具有抗氧化、免疫调节、抗癌等多种生物活性,具有很大的开发利用价值。
本文综述了目前灵芝多糖提取、分离纯化、含量测定、结构分析和生物活性方面的研究现状,并对灵芝多糖的发展利用前景做了展望。
关键词:灵芝多糖;提取;分离纯化;结构分析;生物活性中图分类号:S567.3.l 文献标识码:A 文章编号:1008-1038(2014)01-0027-04收稿日期:2014-1-7基金项目:“十一五”国家科技支撑计划项目(2008BADA1B06)作者简介:赵岩(1980- ),男,助理研究员,主要从事果蔬加工研究,E-mail: ianzhao@Progress on Research of Ganoderma Lucidum PolysaccharidesZHAO Yan 1 ZHANG Ying 2 CHU Le 1 HE Fa-tao 1 GE Bang-guo 1 SONG Ye 1(1. Jinan Fruit Research Institute, All China Federation of Supply & Marketing Co-operatives, Jinan 250014, China ;2. Shandong Design Institute of Light Industry, Jinan 250014, China )Abstract: Ganoderma lucidum polysaccharides (GLP) were extracted from the Ganoderma lucidum and was one of the most important bioactive substances such as anti-oxidant, immunoregulation,anticancer. The research status on extraction, isolation and purification, structural analysis and biological activity of GLP. The development prospects were forecasted in this paper.Key words: ganoderma lucidum polysaccharides; extraction; separation and purification; structural analysis; biological activity中国果菜CHINA FTUIT VEGETABLEV ol.34 No.2 Feb. 2014果蔬加工. All Rights Reserved.因素的影响,通过正交实验筛选,优化后工艺为:料液比1:30,提取时间3 h,提取温度100℃,碳酸钠盐浓度0.5%。
一、仪器试剂
紫外可见分光光度计,超声波清洗器,分析天平。
硫酸、蒽酮,葡萄糖标准品。
二、样品制备
灵芝子实体粉碎,过80目筛,取2g干粉加入90mL水加热回流提取2h,提取液抽滤后定容至100mL,取10mL加入150mL无水乙醇,4℃放置12h沉淀多糖,离心,弃上清,沉淀加水溶解,并定容至50mL,得到样品溶液。
三、试剂配制
硫酸蒽酮溶液的制备:精密称取蒽酮0. 1g,加80%的硫酸溶液100mL使溶解,摇匀(棕色瓶保存)。
对照品溶液的制备:精密称取无水葡萄糖10m g,加水定容至100mL,摇匀,即得0. 1mg /mL 的葡萄糖对照品溶液。
四、标准曲线的制备
分别精密吸取对照品溶液( 0. 1mg /mL) 0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1.2mL, 置10mL 具塞试管中,加水至2. 0mL,精密加入硫酸蒽酮溶液6mL,置水浴中加热15min,取出,放入水浴中冷却15min,以相应的试剂为空白,按照紫外可见分光光度法,测定625nm 波长处吸光度。
以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
五、样品含量测定
取2mL样品溶液,精密加入硫酸蒽酮溶液6mL,置水浴中加热15min,取出,放入水浴中冷却15min,以相应的试剂为空白,按照紫外可见分光光度法,测定625nm 波长处吸光度。
由回归方程计算, 即得样品含量。
灵芝研究资讯网-灵芝-灵芝孢子粉灵芝多糖类(Polysaccharides)成分作者:灵芝发布于:2014-8-7 10:46 分类:简介多糖类(Polysaccharides)成分多糖类是灵芝属的重要生物活性物质之一。
药理研究表明:从不同灵芝种类中分离出的多糖均具有抗肿瘤作用、免疫调节作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用及抗衰老作用等,是当前一个很热门的研究课题。
全世界灵芝属种类很多,就其多糖类研究主要以灵芝(赤芝、紫芝)研究居多,树舌、松杉灵芝(松杉树芝)虽有研究,相对较少,以日本、中国(台湾)、印度尼西亚、韩国、新加坡等研究较多,发展不平衡。
总的来说,多糖研究的广度、深度不如三萜类化合物。
灵芝多糖的药理活性与单糖连接方式、位置有关,通常单糖以1→3、1→6糖苷键连接的多糖具有药理活性,而纯1→4糖苷键连接的则不显示活性。
多糖的药理活性,还与其组成的立体构型有关,若螺旋状结构破坏,其药理活性则明显降低。
单糖之间的苷键,大多为1→3、1→4、1→6数种,多数为β-构型结构,少数为α-构型结构。
在多数β-构型多糖分子中有分支部分,灵芝多糖含有15%-30%的肽,多糖链分枝密度高或含有一定量肽成分,其生理活性也较强。
因此,多糖的构型与药理活性关系十分密切。
利用研究多糖,首先应采用不同提取方法提纯,加以深入研究,才能比较透彻地了解多糖生物活性的本质。
组成灵芝多糖的单糖类型以葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖为主,还有少量岩藻糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、海藻糖等,少数多糖由单一葡萄糖组成。
由于多糖的结构复杂,不同种类的灵芝菌,不能简单地用某种方法就可确定,必须采用多种方法、多种手段配合使用,将全部有关信息进行综合分析,才能较准确测定获得它的初级结构(一级结构),而它们的高级结构的研究就相对困难,就目前分离技术和研究手段的限制,对多糖类的研究,还不像三萜酸一样研究得透彻,这也说明为什么多糖研究深度和广度不够的原因。
灵芝有效成分的提取方法提取灵芝含有成分的4种方法。
本文主要介绍的是提取灵芝中含有的有效成分的具体方法,有4种不同的提取方法。
大家都知道灵芝的有效成分有灵芝多糖、灵芝酸(灵芝三萜类化合物)、皂甙、麦角甾醇、腺苷、嘌呤、嘧啶、生物碱、内酯等;灵芝中含有生物碱类、甾醇类、酚类、氨基酸、甘露醇、毒角固醇、甙类、内脂、香豆精等。
而灵芝有效成分的提取方法是根据灵芝所含成分的性质决定的,所以根据各自的性质来用各自的方法来提取的。
灵芝含有的几种成分能溶解于热水,其中灵芝酸、皂甙、麦角甾醇等成分在热水中的溶解度较低,在乙醇中的溶解度较高。
灵芝多糖、腺苷、嘌呤、嘧啶、生物碱等成分有用热水提取的,也有用乙醇提取的。
热水提取灵芝酸等成分,提取率较低,但提取费用也较低,从经济方面考虑还是合算的,所以,现在灵芝有效成分的提取大多用水煎法。
1、灵芝的热水提取法:将灵芝子实体先用破碎机破碎成0.5~1cm大的碎块,投入不锈钢提取锅中,加灵芝重量14倍的去离子水。
向锅底回形管中通入蒸气,使水沸腾并保持2h,放出煎液(头汁煎液)。
残渣仍留于锅中,再加12倍量的去离子水,与第一煎一样煎2h。
放出第2次煎液,将2次煎液合并,输入贮液槽,静止1Oh,取吸清液,弃去槽底泥浆状物。
再将清液先用薄膜浓缩,再减压浓缩,当比重达1:1.36(热测),即为灵芝流浸膏。
2、灵芝的醇提取法:将灵芝子实体破碎成0.5~1cm大碎块,投入不锈钢的提取锅中,加灵芝干重8倍的95%食用乙醇,78℃回流lh,放出醇提取液。
残渣仍留在锅中,再加8倍重量的75%食用乙醇,78℃回流lh,放出乙醇提取液。
残渣仍留在锅中,再加8倍量50%食用乙醇,78℃回流lh,放出乙醇提取液。
将3次醇提取液合并在贮液槽中静置l0h;取出上清液,弄去底部沉淀物。
上清液回收乙醇。
去乙醇后的浓缩物可制成酊剂,也可以烘干或喷雾干燥后做成胶囊等制剂。
3、灵芝的酶提取:酶提取就是用能够分解灵芝细胞壁的纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、果胶酶等各种酶,将灵芝细胞壁彻底分解、破坏,从而使贮藏在灵芝细胞壁中的多糖等有效成分,能更多、更快的释放出来,以提高提取得率。
灵芝多糖灵芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide)目前已分离到的有200多种,其中大部分为β–葡聚糖,少数为α–葡聚糖,多糖链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度酒精,在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞内壁。
目录1详细介绍▪灵芝多糖的医疗保健价值▪灵芝多糖的功效2灵芝多糖提取▪灵芝菌丝体多糖的提取▪灵芝子实体多糖的提取3医疗保健价值4特性5赤芝多糖6灵芝多糖质量参数概述灵芝多糖灵芝多糖大多为异多糖,即除含有葡萄糖外,大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等其他单糖。
灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究。
拉丁学名:Ganoderma lucidum (Leyss.: Fr.) Karst.使用部位:子实体规格:灵芝多糖10%-50%性温,味淡。
归心、肺经。
1详细介绍编辑灵芝多糖灵芝多糖是由三股单糖链构成的、具有螺旋状立体构形 (三级结构) 的葡聚糖,其立体构形与脱氧核糖核酸 (DNA) 、核糖核酸 (RNA) 相似,是一种大分子化合物,其分子量从数千到数十万,它是一种从灵芝孢子粉或灵芝中提取的物质。
不溶于高浓度的酒精,微溶于低浓度的酒精及冷水,在热水中能全部溶解。
灵芝多糖都存在于灵芝的细胞壁内壁。
灵芝多糖中除含有葡萄糖外,大多还含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、鼠李糖等单糖,但含量较少。
单糖间糖苷键连接有 1,3、 1,4 和 1,6 数种。
大多为β型结构,少数为α -型结构。
α -型多糖没有药理活性(药效)。
多数多糖链有分支,部分多糖链含有小分子肤链。
多糖链分枝密度高或含有肤链的其药理活性也高。
灵芝多糖在水溶液中多糖链一般由三股糖链组成,在 o. 1 摩 / 升氢氧化纳溶液中时多糖链的三股糖链离解为单股单糖链。
多糖的药理活性与单糖间糖苷键的结合形式有关。
单糖间以β- 1,3 、 1,6 或β-1,4 、1,6-糖苷键连接是有效的即具有药理活性,而纯β-1,4- 糖背键连接的则没有药理活性。
此外,多糖的药理活性还与其立体构形有关,若螺旋形立体结构被破坏,其活性则大大下降。
淀粉、纤维素、糊精也是多糖,但其构形与灵芝多糖 (或其他真菌多糖) 不同。
淀粉、纤维素等多糖没有螺旋形立体结构,单糖间的连接全是β- 1,4-连接。
纤维素是β-型多糖,淀粉、糊精是α -型多糖。
由于其构形不同,所以淀粉、糊精、纤维素都没有药理活性。
灵芝多糖灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一,因此,也特别受到药科技工作者的重视,对它的研究报道也最多。
已分离到的灵芝多糖有 200 多种,其中有数十种的结构已被搞清,分子量已被测定。
灵芝多糖有多方面的药理活性 : 能提高机体免疫力,加速血液微循环,提高血液供氧能力,降低机体静止状态下的无效耗氧量,消除体内自由基,提高机体细胞膜的封闭度,抗放射,提高肝脏、骨髓、血液合成 DNA,RNA,蛋白质的能力,延长寿命等。
灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。
灵芝多糖的医疗保健价值灵芝多糖[1] 是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医药科技工作者的重视,研究报道也最多。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤、抗辐射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性,活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上羟基的数量有关。
对心血管疾病、气喘、过敏、神经衰弱、胃热等有显著效果。
还具有降血压、降血脂、解血瘀、改善血液循环、皮肤美容等作用。
灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。
[灵芝多糖抑制肿瘤3种手段]:⒈通过提高机体免疫力,使免疫细胞能在肿瘤发生早期把其杀死、吞噬;⒉提高血小板纤维蛋白的形成能力,大量的纤维蛋白能将早期的肿瘤肿块紧紧包裹,使它与外界隔绝,杜绝肿瘤的营养,从而使它长期处在休眠潜伏状态;⒊降低肿瘤细胞表面电荷,肿瘤细胞表面电荷要比正常细胞高好几倍,表面电荷的降低,肿瘤细胞的分裂调节基因就能启动,从而可抑制肿瘤的无限、快速分裂能力.目前,灵芝多糖已被用作治疗肿瘤的药物之一。
灵芝多糖的功效灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤、抗辐射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
对心血管疾病、气喘、过敏、神经衰弱、胃热等有显著效果。
还具有降血压、降血脂、解血瘀、改善血液循环、皮肤美容等作用。
灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。
2灵芝多糖提取编辑灵芝菌丝体多糖的提取(一)材料⒈菌种:湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。
⒉种子培养基:玉米粉2% 大米粉2%蔗糖2% 磷酸二氢钾o.1g硫酸镁0.05% ph值自然⒊发酵培养基:麦麸浸出液10% 葡萄糖2%硫酸铵0.2%磷酸二氢钾0.2% ph值自然(二)方法 1.种子培养:⒉发酵培养生产菌丝体。
⒊测定干、湿菌丝体。
将发酵液进行离心,然后取其沉淀物,加人60%蔗糖,进行高速(3000转/分)密度梯度离心5分钟,取上层菌丝体,洗净蔗糖再压干,即得湿菌体,然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。
分别称取其重量。
⒋多糖的提取。
菌丝体预处理。
取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,以除去湿菌体中的脂类物质,同时使糖苷酶失去活性,防止多糖的降解。
⑵用热水提取多糖。
取上面经预处理的灵芝湿菌体,放人1:20的热水(95℃)中浸提,一次3小时,连续浸提3次,合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积,再用3倍体积的95%乙醇混合,静置10-12小时,再离心,最后加入75%的乙醇反复洗涤,以沉淀多糖。
此沉淀物为粗多糖,其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质,一般要经过纯化。
⑶多糖的纯化,去蛋白质和deae纤维素柱层析。
去蛋白质一般采用sevag法:加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离,直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。
多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖,分别以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂,0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱,然后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度,收集有多糖的洗脱液,再浓缩脱盐即得所需的多糖。
⑷多糖纯度的鉴定。
可用电泳法进行鉴定,如果存在单一带,说明为纯多糖。
⒌多糖与多糖中蛋白质含量的测定:取一定量菌丝体粗多糖,加水煮沸溶解,用sevag方法脱去蛋白考马斯亮兰法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。
测得菌丝体中粗多糖含17.01%、多糖含5.43%、蛋白质含量2.16%。
灵芝子实体多糖的提取(一)材料 1.菌种:韩国灵芝栽培种。
⒉子实体栽培生产料:木屑78%,米糠20%,蔗糖1%,石膏1%,ph值自然。
(二)方法⒈子实体栽培。
⒉灵芝子实体预处理。
⒊子实体多糖的提取。
取适量的灵芝子实体,捣碎成粉末,用80目筛过筛,然后用热水提取法进行提取。
具体操作同菌丝体多糖的提取。
提取出的粗多糖含有色素、蛋白质等小分子杂质,也须除去。
⒋去除蛋白质和色素。
子实体粗多糖去除蛋白质也采用se阴法。
去除色素,目前尚未发现很理想的方法。
一般用乙醇进行反复冲洗,但效果不很理想。
⒌多糖纯度的鉴定。
同菌丝体多糖纯度的鉴定。
⒍子实体粗多糖、多糖及蛋白质含量的测定。
具体方法同菌丝体多糖及蛋白质含量的测定。
测得子实体中粗多糖7.5%、多糖1.5%,蛋白质0.6%,其含量均低于菌丝体中的含量。
可见菌丝体阶段就形成了灵芝多糖的有效成分,为灵芝液体深层发酵生产菌丝体提供了科学依据。
3医疗保健价值编辑灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医药科技工作者的重视,研究报道也最多。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤、抗辐射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性,活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上羟基的数量有关。
对心血管疾病、气喘、过敏、神经衰弱、胃热等有显著效果,同时还具有降血压、降血脂、解血瘀、改善血液循环、皮肤美容等作用。
灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。
[2]4特性编辑灵芝多糖由三股单糖链构成,其构型与DNA、RNA相似,是一种螺旋状立体构型物,螺旋层之间主要以氢键固定。
灵芝多糖在单糖组成、糖苷键构型、分子量、旋光度、溶解度等某些理化性质方面存在显著差异。
在已提取到的有200多种灵芝多糖中,大多数是异多糖,即除含有葡萄糖外,还含有半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖等其它单糖;由于来源不同,分子量可从数万到数十万不等,多数伴有分支,部分多糖还含有肽链。
灵芝多糖体对温度很敏感,是热敏性物质,大多不溶于高浓度酒精,而溶于热水。
温度升高,会引起灵芝多糖的降解,多糖体中糖苷键易断裂而形成多个唐单体,而唐单体是没有活性的。
现今提取灵芝多糖多采用膜分离法,整个过程在密闭系统中进行,无需加热,避免和减轻了热和氧对灵芝多糖营养成分的影响。
灵芝结构紧密,具有较好的维持力,灵芝多糖存在于细胞壁内,较难渗出。
研究人员利用超声波高频振荡产生“空化效应”能破灵芝结构的维持力,是灵芝的结构层发生变化,扩大透析膜径,使细胞壁上的多糖尽快释放。
5赤芝多糖编辑赤芝多糖是灵芝多糖的一种,其比其他灵芝种类的含糖种类更丰富。
除含有葡萄糖外,大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等其他单糖。
1g 的赤芝多糖=500g正常状态的赤芝,因此赤芝多糖具有超强的保水、抗氧功能。
用途:1.疾病调理赤芝多糖最广泛应用在疾病调理方面,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,清除自由基,抑制肿瘤,提高肝脏、血液、骨髓合成DNA、RNA,蛋白质的能力,延长寿命。
临床上可用来预防和治疗慢性支气管炎、哮喘病、糖尿病、冠心病、心脏病、神经衰弱、高血压、高脂血症、肝炎、心律失常、白细胞减少等50余种疾病;2.美容护肤皮肤是人体的重要器官,组成这个器官的各个功能层中肌肤细胞,就像人一样有自己的免疫力,免疫力差了就容易受到各种因素的影响,而导致自我代谢和调节能力出问题,进而导致皮肤出现缺水、皱纹、暗哑、色素沉积等各种问题。