氯霉素快速检测试剂条说明书20140311

RIDASCREEN® Chloramphenicol酶联免疫法定量检测氯霉素摘要RIDASCREEN®Chloramphenicol（编号：R1505）竞争酶标免疫分析法定量检测尿液、血清的氯霉素。

试剂盒中包含有酶联免疫试验所需的所有试剂，包括标准溶液。

试剂盒足够进行96次检测（包括标准）。

定量检测需要微孔板酶标仪。

检测限：尿液、血清………………………………………………..………75ppt回收率：尿液、血清 (80)特异性：RIDASCREEN®Chloramphenicol检测的特异性，是通过分析相应抗生素的交叉反应性而得到的。

Chloramphenicol..................................................................100 %Chloramphenicol base ......................................................... 75 %Thiamphenicol.................................................................. < 0.1 %1. 用途RIDASCREEN®Chloramphenicol竞争酶标免疫分析法定量检测牛奶，奶粉，蜂蜜，虾，肉，鱼粉和鸡蛋中的氯霉素。

2. 概要氯霉素是一种广谱抗生素，具有很好的抗菌效果，常用于畜牧业生产中，然而，氯霉素会造成人的再生障碍性贫血，而且诱发浓度还没有确定，所以目前已经禁止在动物及食品中使用氯霉素。

3. 测定原理测定的基础是抗原抗体反应，微孔板包被有针对氯霉素的抗体，加入氯霉素标准或样品溶液和氯霉素酶标记物，游离的氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体（竞争性酶联免疫法）。

没有结合的酶标记物在洗涤步骤中被除去。

氯霉素（Chloramphenicol）ELISA检测试剂盒说明书一、概要氯霉素（chloramphenicol, CAP）是应用广泛的抗菌素，曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。

但由于氯霉素存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。

本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。

操作时间仅需1.5小时。

二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的氯霉素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。

三、适用范围可定性、定量检测动物组织（肌肉、肝脏等）、尿液、血清、肠衣、牛奶、奶粉等样本中氯霉素的残留量。

四、交叉反应率氯霉素……………………………………100%；琥珀氯霉素…………………………………92%；氯霉素-葡萄糖苷酸………………………57%。

五、使用单位需自备的设备及试剂设备：┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平：感量0.01g┅┅刻度移液管：10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶：100ml、500ml┅┅玻璃试管：10ml┅┅聚苯乙烯离心管：10ml、15ml、50ml┅┅微量移液器：单道20μl～200μl、100μl～1000μl多道250μl试剂：┅┅乙酸乙酯（分析纯）┅┅乙腈（分析纯）┅┅正己烷（分析纯）┅┅二水合亚硝基铁氰化钠（分析纯）（供奶样用）┅┅七水合硫酸锌（分析纯）（供奶样用）┅┅葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)（供尿样本用）┅┅醋酸钠（分析纯）（供尿样本用）┅┅肝素钠（分析纯）（供血样本用）┅┅醋酸（分析纯）（供尿样本用）----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块（包被有偶联抗原）2、标准液×6瓶：（2ml/瓶）0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb3、高浓度标准品：（2ml/瓶）100ppb4、酶标二抗…………………………7m l5、抗体工作液…………………………7m l6、底物液A液…………………………7m l7、底物液B液……………………………7ml8、终止液……………………………7m l9、20×浓缩洗涤液………………………40m l10、2×浓缩复溶液………………50m l七、溶液的配制配液1: C液（供奶样专用）0.36M 二水合亚硝基铁氰化钠（Na2Fe(CN)5·NO·2H2O）溶液称取10.7g二水合亚硝基铁氰化钠加去离子水溶解定容至100ml。

氯霉素检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3001一、概要:氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素，对畜禽疾病控制和治疗有重要功效。

但由于氯霉素存在严重的副作用，可抑制人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血，粒细胞缺乏等疾病，欧美等发达国家已相继禁止使用于动物饲料中。

本公司研发的氯霉素(Chloramphenicol)檢測試劑盒是應用抗原，抗体特异性的免疫学原理而建立的一种敏感，特异，简便及快速的檢測产品。

主要應用於檢測蜂蜜、蛋类、牛奶、奶粉、水產品、动物组织(肌肉、肝臟等)、饲料、血清、血浆及尿液樣本中存在的氯霉素。

二、检测原理:本试剂盒利用竞争酶联免疫方法，预先在微孔中包被羊抗兔抗体，实验时先后加入氯霉素标准品或待测样本，氯霉素酶标抗原和兔抗氯霉素抗体。

经过室温温育，反应液中的兔抗氯霉素抗体与微孔板上的羊抗兔抗体结合，待测样品中的抗原与氯霉素酶标抗原竞争微孔板上的兔抗氯霉素抗体。

洗涤后，没有与抗体结合的待测样品中的抗原或酶标抗原被洗去，再加入反应底物，结合的酶标抗原的酶将底物转化为蓝色产物，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色。

反应完成后，样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越浅；反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。

利用标准曲线可计算出样品中氯霉素含量。

三、试剂盒提供试剂:1.羊抗兔抗体包被的微孔板:96孔。

2.氯霉素参考标准品:0，0.025，0.05，0.10，0.25，0.75ppb (ng/ml);1.5ml/瓶(黄色)，一套共6瓶。

3.氯霉素酶标抗原试剂(1X):7ml/瓶。

4.兔抗氯霉素抗体:7ml/瓶。

5.样品稀释液：100ml/瓶。

6.显色剂/底物：11ml/瓶。

7.反应终止液：11ml/瓶。

8.洗涤液(20X)：50ml/瓶，使用前稀释20倍。

四、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器:1.试剂∙乙酸乙酯∙正己烷或正庚烷2.仪器∙均质机(Ultra-turrax)∙微孔板酶标仪∙振荡器∙离心机∙氮气吹干仪或旋转蒸发器∙20µl,50µl,100µl,200µl,及1ml 移液器五、待测样品处理方法:1.蜂蜜a)称取2g 样品加入4ml 蒸馏水溶解均匀。

一、实验目的本实验旨在通过胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行快速、准确的检测，为食品安全监管提供技术支持。

二、实验原理氯霉素残留检验实验采用胶体金免疫层析法，该方法基于抗原抗体特异性结合的原理。

当氯霉素样品与标记有抗氯霉素单克隆抗体的胶体金颗粒混合时，如果样品中含有氯霉素，则氯霉素会与抗氯霉素单克隆抗体结合，形成抗原抗体复合物。

复合物在层析膜上通过毛细作用向前移动，与固定在层析膜上的抗氯霉素抗体结合，形成金标记的抗原抗体复合物，最终在层析膜上形成两条色带：控制线（C）和测试线（T）。

如果样品中氯霉素浓度超过检测限，则在测试线上形成明显的色带；如果样品中氯霉素浓度低于检测限，则测试线上无色带。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）氯霉素标准品（2）阴性对照样品（3）阳性对照样品（4）氯霉素残留样品（5）胶体金免疫层析试纸条（6）试剂：缓冲液、洗涤液、封闭液等2. 实验仪器：（1）电子天平（2）恒温培养箱（3）移液器（4）微量加样器（5）一次性无菌手套四、实验方法1. 样品处理（1）准确称取氯霉素残留样品0.1g，加入1ml缓冲液，涡旋混匀，室温下放置10min。

（2）取1ml样品溶液，加入1ml洗涤液，涡旋混匀，室温下放置5min。

（3）重复步骤（2）两次。

2. 检测（1）取一条胶体金免疫层析试纸条，将样品加样孔浸入样品溶液中，室温下放置5min。

（2）取出试纸条，观察结果。

五、实验结果与分析1. 阳性对照实验阳性对照样品在测试线上形成明显的色带，说明试纸条的性能良好。

2. 阴性对照实验阴性对照样品在测试线上无色带，说明试纸条对阴性样品具有良好的检测效果。

3. 样品检测根据实验结果，氯霉素残留样品在测试线上形成明显的色带，说明样品中氯霉素残留量超过检测限。

六、实验结论本实验采用胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行检测，结果表明该方法具有快速、简便、准确的特点，适用于食品中氯霉素残留的现场快速检测。

氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制肖治理;曾文亮;王弘;沈玉栋;孙远明;杨金易【摘要】为研究应用检测氯霉素(CAP)的胶体金免疫层析技术,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗CAP单克隆抗体,将CAP偶联抗原和羊抗鼠二抗分别结合于硝酸纤维膜作为检测线和质控线,研制CAP胶体金快速检测试纸条.通过优化试验,确定最佳标记pH为8.5、最佳标记量为36 ug/mL、最佳抗原包被浓度和最佳二抗包被浓度分别为0.5,1.0mg/mL.经过试验制成的试纸条检测限为2ng/mL,检测时间5～8min,肉眼即可判断结果.用该试纸条检测CAP残留具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高等特点,适用于现场快速检测和筛选工作.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2013(029)004【总页数】6页(P54-58,62)【关键词】氯霉素;胶体金;试纸条;快速检测【作者】肖治理;曾文亮;王弘;沈玉栋;孙远明;杨金易【作者单位】广东省食品质量安全重点实验室,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省食品质量安全重点实验室,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州510642【正文语种】中文氯霉素（chloramphenicol，CAP）是一种高效广谱抗生素［1］，曾被作为药物应用于畜禽及水产品的疾病治疗和预防。

然而由于其存在较为严重的毒副作用，对人的造血系统和消化系统的危害较大［2］，容易造成再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症和灰婴综合症并对神经系统造成影响［3］。

氯霉素酶联免疫检测试剂盒说明书【反应原理】氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。

在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。

【试剂盒组份】1、酶标板：8孔/条，12条/板2、氯霉素标准溶液(1.5 mL / 瓶)：0 ppb、0.025 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.6 ppb ; 10ppb3、10倍浓缩样品稀释液………………………………30 mL4、10倍浓缩清洗液……………………………………30 mL5、氯霉素酶标记物……………………………………8 mL6、显色液………………………………………………12 mL7、反应终止液…………………………………………12 mL【试剂盒技术指标】试剂盒灵敏度：0.025ppb样本检测下限：生乳…………………………………………………0.1 ppb蜂蜜…………………………………………………0.1 ppb蜂王浆………………………………………………0.1 ppb血清………………………………………………0.025 ppb 鱼虾、蟹、鸡肉、猪肉……………………………………0.025 ppb 饲料…………………………………………………0.25 ppb 蛋…………………………………………………0.025 ppb交叉反应率：氯霉素………………………………………………100%左旋霉素…………………………………………… 1.4% 庆大霉素……………………………………………<0.1% 甲砜霉素…………………………………………… 3.1% 四环素………………………………………………<0.1% 青霉素………………………………………………<0.1% 磺胺甲嘧啶…………………………………………<0.1%回收率：生乳………………………………………70~130%蜂蜜………………………………………70~130%蜂王浆……………………………………70~130%鱼、虾、蟹、乌贼、鸡及猪肉……………70~130%饲料………………………………………70~130%血清………………………………………70~130%蛋………………………………………70~130%批间、批内变异系数：CV≤10%【所需仪器和试剂】所需仪器：酶标仪、离心机、均质机、微量移液器(单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道250µl)所需试剂：乙酸乙酯、正己烷、0.5 N 盐酸溶液、0.5 N 氢氧化钠溶液【注意事项】1、使用前请先将试剂盒回温至室温(置于室温60分钟以上)，各溶液皆摇匀后方可使用。

氯霉素( Chloramphenicol) ELISA检测试剂盒说明书一、概要氯霉素( chloramphenicol, CAP) 是应用广泛的抗菌素, 曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。

但由于氯霉素存在严重的副作用, 能引起人的再生障碍性贫血, 粒细胞缺乏症等疾病, 欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。

本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品, 能最大限度地减少操作误差和工作强度。

操作时间仅需1.5小时。

二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法, 在酶标板微孔条上预包被偶联抗原, 样本中残留的氯霉素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体, 加入酶标二抗后, 用TMB底物显色, 样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关, 与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数, 即可得出样品中氯霉素的含量。

三、适用范围可定性、定量检测动物组织( 肌肉、肝脏等) 、尿液、血清、肠衣、牛奶、奶粉等样本中氯霉素的残留量。

四、交叉反应率氯霉素……………………………………100%;琥珀氯霉素…………………………………92%;氯霉素-葡萄糖苷酸………………………57%。

五、使用单位需自备的设备及试剂设备:┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平: 感量0.01g┅┅刻度移液管: 10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶: 100ml、500ml┅┅玻璃试管: 10ml┅┅聚苯乙烯离心管: 10ml、15ml、50ml┅┅微量移液器: 单道20ml～200ml、100ml～1000ml多道250ml试剂:┅┅乙酸乙酯( 分析纯)┅┅乙腈( 分析纯)┅┅正己烷( 分析纯)┅┅二水合亚硝基铁氰化钠( 分析纯) ( 供奶样用)┅┅七水合硫酸锌( 分析纯) ( 供奶样用)┅┅葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)( 供尿样本用) ┅┅醋酸钠( 分析纯) ( 供尿样本用)┅┅肝素钠( 分析纯) ( 供血样本用)┅┅醋酸( 分析纯) ( 供尿样本用) ----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块( 包被有偶联抗原)2、标准液×6瓶: ( 2ml/瓶)0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb, 0.675p p b,2.025p p b 3、高浓度标准品: ( 2ml/瓶) 100ppb4、酶标二抗…………………………7m l5、抗体工作液…………………………7m l6、底物液A 液…………………………7m l7、底物液B 液…………………………… 7ml8、终止液……………………………7ml9、20×浓缩洗涤液………………………40ml 10、2×浓缩复溶液………………50m l 七、溶液的配制配液1: C液( 供奶样专用)0.36M 二水合亚硝基铁氰化钠( Na2Fe(CN)5·NO·2H2O) 溶液称取10.7g二水合亚硝基铁氰化钠加去离子水溶解定容至100ml。

胶体金免疫层析法快速检测食品和兽药中的氯霉素残留潘嘉慧;田峻;赵亮亮;沈国权;朱海云【期刊名称】《兽医导刊》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】3页(P19-21)【作者】潘嘉慧;田峻;赵亮亮;沈国权;朱海云【作者单位】佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山 528225;佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山 528225;佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山528225;佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山 528225;佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山 528225【正文语种】中文氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种广谱抗生素，其抗菌效果好，价格低廉，曾广泛应用于预防和治疗动物疾病。

然而氯霉素具有严重的毒副作用，会引起动物机体正常菌群失调，同时可能引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏症等疾病。

欧盟2377/90/EEC法规、美国FDA、日本的“肯定列表制度”等均明确规定氯霉素不能在任何动物制食品，以及动物的饲料和生长环境中使用。

2002年我国农业部发布235号公告《动物性食品中兽药最高残留量》，规定氯霉素及其盐、酯（包括：琥珀氯霉素）在所有食品动物、所有可食组织中不得检出。

对氯霉素的标准检测方法有色谱分析法和免疫检测法。

色谱分析法需要先进检测设备、样品前处理步骤繁琐，费用高、耗时长、对操作人员要求较高。

免疫分析法具有快速、灵敏度高、高通量的特点。

其中免疫分析方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析技术等。

酶联免疫分析法操作相对繁琐，对操作人员的专业知识要求较高，相比之下，胶体金免疫层析技术基于肉眼水平的检测，不需任何仪器设备和试剂，比酶联免疫法省略了加显色剂和终止液的步骤，更简化的操作，体积小，易携带，几分钟就可用肉眼观察到颜色鲜明的实验结果，并可保存实验结果。

近年来已有制备氯霉素胶体金免疫层析试纸条的报道，但仍存在适用样品单一、灵敏度不够等不足，本研究特别从优化免疫抗原、包被抗原的结构及优化偶联技术角度出发，提高抗体的特异性、亲和力，从而增加检测的灵敏度和特异性。