霉菌的观察 实验报告

实验五 霉菌的形态观察、微生物的测微与计数

一．实验目的

1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。

2.学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。

3.了解血球计数板的构造和使用方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。

4.总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。

二、实验原理

1. 霉菌定义及用途

 霉菌不是真菌分类中的名词，而是丝状真菌的统称。

 霉菌在自然界中广泛分布，与食品的关系密切，是人类在实践活动中最早利用的一种微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。

 霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。

2.霉菌特征

 霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

 菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

 霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3-10um)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。因此，用低倍镜即可观察。

3.霉菌的菌落

 松：由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状；

 大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个培养皿；

 干：外观干燥，不透明；

 挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取；

 颜色：由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。

同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。

4、霉菌的菌丝形态

 构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝的宽度一般为3-10μm，比放线菌菌丝宽很多倍，其菌可伸长并产生分枝。

霉菌细胞培养与观察

一、实验目的：

1. 培养霉菌；

2. 观察霉菌菌丝细胞结构，细胞核，细胞器；

3. 观察菌丝不同部位霉菌细胞形态。

二、实验材料：

1.试剂：面包，固定液（冰乙酸，甲醇），PBS缓冲液（磷酸二氢钾，氢氧化钠，蒸馏水，PH调至7.2磷酸盐缓冲液，健那绿）蒸馏水, 50%乙醇。

2.器材：载玻片，盖玻片，镊子，培养皿，吸水纸，吸管，光学显微镜

三、原理：

霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称，不是分类学的名词，霉菌细胞具1至多个细胞核。细胞壁分为三层：外层无定形的β葡聚糖（87nm)；中层是糖蛋白，蛋白质网中间填充葡聚糖（49nm)；内层是几丁质微纤维，夹杂无定形蛋白质（20nm)。

构成霉菌体的基本单位称为菌丝，呈长管状，宽度2～10微米，可不断自前端生长并分枝。在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。菌丝体常呈白色、褐色、灰色，或呈鲜艳的颜色（菌落为白色毛状的是毛霉，绿色的为青霉,黄色的为黄曲霉），有的可产生色素使基质着色。霉菌繁殖迅速，常造成食品、用具大量霉腐变质，但许多有益种类已被广泛应用，是人类实践活动中最早利用和认识的一类微生物。

霉菌菌丝一般为颜色鲜艳，且菌丝为单层细胞，故可直接用于观察其显色结构、细胞壁，染色后可观察其细胞器。

四、操作步骤：

1. 霉菌的培养：

一般的霉菌，将面包放置在30℃左右，湿度在75%以上，两至三天即可产生黄曲霉菌。

2.制片观察：

在载玻片上加一滴蒸馏水，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的液滴中，用解剖针小心地将菌丝分散开。（注意：挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态；加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。）在低倍镜下找到霉菌细胞，移到视野中央，切换至高倍镜观察。

名称 实验“观察酵母菌和霉菌” 年级 八上 生物 实验类型 分组实验

姓名 组

员 指导老师 提交时间

实验内容

材料用具 酵母菌培养液、橘子皮上的青霉、吸管、镊子、显微镜、解剖针、载玻片、盖玻片、放大镜、稀释的碘液、吸水纸

目的要求 认识酵母菌、霉菌的形态结构 方法步骤

酵母菌电镜照片 青霉菌电镜照片

(1)观察酵母菌

1. 取一滴酵母菌培养液，滴在载玻片上、盖上盖玻片、用显微镜观察，就能看到一个个椭圆形的细胞，细胞中有明显的液泡，这就是酵母菌。

2. 在盖玻片的一侧滴一滴碘液、用吸水纸从另一侧吸引，对酵母菌进行染色、在显微镜下能看到酵母菌细胞中染上颜色的细胞核和淀粉粒。有的细胞上长出大小不一的突起，这是酵母菌在进行出芽生殖。

（2）观察青霉

1.从培养皿中取一块长有青霉的橘子皮，垫上白纸，用放大镜观察，可以看到一条条直立生长的白色绒毛，这就是青霉的直立菌丝，菌丝的顶端长有成串的青绿色的孢子。

2.用解剖针挑取少许长有袍子的菌丝，制成临时装片，置于显微镜下观察。注意观察菌丝有没有颜色，直立菌丝的顶端有没有扫帚状的结构，以及孢子的着生状态和颜色。

讨论 1.酵母菌的细胞结构有什么特点2.青霉孢子的颜色和着生状态有什么特点

注意事项 1.制备酵母菌培养液时，应将装置放在25-30℃的环境中培养，以使酵母菌快速繁殖。

2.酵母菌培养液应含有一定浓度的糖，但是糖的浓度不宜过高。

3.培养青霉时，可以在培养皿里垫一层吸水纸，加适量的水，并盖上盖，放在阴暗温暖的环境中。每天往里面加适量的温水，以保持一定的温度。 “观察酵母菌和霉菌”实验报告单

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4.青霉分生孢子梗上成串的孢子容易碰落，盖盖玻片时要特别小心，动作须轻缓，盖好后不能移动位置。

《观察酵母菌与霉菌》实验教案

一. 实验目的

1. 观察酵母菌的形态与结构并掌握其特征。

2. 观察霉菌的菌落特征，学会霉菌的一般制作方法。

3. 观察并掌握各种霉菌的个体形态及生长繁殖方式。

4. 进一步熟悉显微镜的使用。

二. 实验原理

酵母菌是一类单细胞真菌，一般呈圆形、椭圆形，无性繁殖以芽孢为主，也有少数是裂殖，有些酵母菌能产生囊孢子，有的能形成假菌丝。酵母菌的菌落似细菌菌落，但较大且厚，多呈白色，少数为红色。酵母菌在液体中生长可形成菌膜、菌环、沉淀和浑浊。酵母菌的细菌结构较完善，即有壁、膜、质、核等结构。酵母菌的细胞形态、繁殖方式和培养特征均为菌种鉴定的依据。

酵母活细胞新陈代谢旺盛，活力强，还原力也强，若无毒的染料进入细胞，既被还原脱色，但死细胞及代谢作用缓慢的老弱细胞无此还原力。美兰是无毒染料，且能被活细胞还原成无色，故可用来区别细胞的死活。

霉菌是一些小型丝状真菌、单细胞（根霉、毛霉）或多细胞（曲霉、青霉），其细胞结构与酵母类似，同属真核细胞。

霉菌形态较复杂，个体较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。其菌丝分为气生菌丝与营养菌丝（菌丝比放线菌粗得多）观察时请注意菌丝是否具有横膈膜、有无假根、无性繁殖时形成何种孢子，孢子着生方式以及孢子头的构造等，以区别各种不同霉菌的形态。

霉菌菌落由分枝状菌丝组成，较疏松，呈毛状、棉絮状、绒毛状或毡状。由于不同霉菌形成的孢子均有不同颜色、构造、性状，故菌落表面呈现出不同的结构和色泽特征。菌丝一般呈白色或灰白色，菌落中心的菌丝较老，先产生孢子，故常形成同心圆。

三. 实验器材

1. 菌种：面包酵母、根霉、曲霉、青霉。

2. 仪器：显微镜。

3. 其它：生理盐水、乳酸酚棉兰染液、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、美兰、镊子、大头针。

四. 步骤与方法

1. 酵母菌细胞形态观察

（1） 制片：用接种环挑取一环面包酵母菌种于载玻片上的一滴美兰染液中混匀，盖上盖玻片静置4~5分钟。盖时先将盖玻片的一边与液滴接触，然后慢慢放下，避免产生气泡。