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第三章分光光度计分光光度计和光电比色计的工作原理相同，都是利用物质对不同波长的光选择性吸收的现象，对物质进行定量及定性分析的仪器。
第一节分光光度计的类型分光光度计也有多种分类方法。
按工作波长范围不同来划分，分光光度计分为红外分光光度计、紫外分光光度计和可见（光）光分光光度计三类。
其中的紫外分光光度计均兼有可见光分光光度计的功能。
按待分析物质对光的吸收性质不同，可分为分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计两类。
上述的红外、紫外和可见分光光度计均属于分子吸收分光光度计。
按待分析物质对光的作用效果来分，可分为发射光谱类分光分光光度计和吸收光谱类分光光度计两大类。
在医学上应用的发射光谱类分光光度计主要有荧光(分光)光度计和火焰(分光)光度计两类。
分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计都属于吸收类分光光度计。
本节主要介绍基层医院最常用的721及722型两种可见（光）光分光光度计。
第二节可见分光光度计的原理及结构一、工作原理吸收式分光光度计都是根据物质对不同波长的光具有选择性地吸收的特点而进行工作的，它们都以朗伯-比尔定律作为定量依据。
当一束平行的、特定波长的单色光照射到有色溶液后，该有色溶液就会对光产生吸收。
溶液的浓度越大，对光的吸收越多。
其吸收程度符合朗伯-比尔定律。
即T＝（Ｉt／Ｉ0）100%Ａ＝－lgＩt／Ｉ0＝ＫＣＬ式中：Ｔ为透射比。
Ｉt为透过光的强度。
Ｉ0入射光的强度。
Ａ为吸光度。
也叫消光度或光密度。
Ｋ为吸收系数。
Ｃ为溶液的浓度Ｌ为溶液的厚度。
朗伯-比尔定律（Ａ＝ＫＣＬ）说明：当一束光通过有色溶液后，溶液的吸光度A与溶液的浓度C及液层厚度L成正比。
吸光度A与溶液的透射比T成负对数关系。
比色分析时，溶液的透射比T很容易测量出来。
通过对透射进行负对数计算，可以得到吸光度值。
再将吸光度除以相应的系数，便可求出待测溶液的浓度。
二、基本结构一般的可见分光光度计由光源、单色器、比色皿、光电转换器、前置放大器、对数放大器、显示部件及电源电路组成。
沪制01080010号722/721型可见分光光度计［使用说明书］上海凤凰光学科仪有限公司目录一、仪器的主要用途 (2)二、仪器的工作环境 (2)三、仪器主要技术指标 (2)四、仪器的工作原理 (3)五、仪器的光学原理 (3)六、仪器的安装使用维修 (5)七、仪器的成套性 (9)八、仪器日常保养与维修 (9)附页故障分析 (9)产品合格证、装箱单 (15)保修卡.......................................................... ......... (16)一、仪器的主要用途722/721型可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。
该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一。
二、仪器的工作环境2.1仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃～35℃，相对湿度不超过85%。
2.2 使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。
2.3 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。
2.4 电扇不宜直接向仪器吹风，以免影响仪器的正常使用。
2.5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
2.6供给仪器的电源电压为AC220V±22V，频率为50Hz±1Hz，并必须装有良好的接地线。
推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。
使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。
2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。
三、仪器的主要技术指标及规格四、仪器的工作原理分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理——比耳定律。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法
1. 引言
2. 分光光度计使用原理
分光光度计利用了物质吸收光的特性。
当光通过溶液时，溶液中的物质会吸收特定波长的光。
根据琴斯定律，溶液的吸光度与光通过溶液前后的光强之比成正比。
分光光度计利用光源发出连续的全谱光，光通过样品池后，被光电二极管或光电探测器测量到。
通过调节光栅或光分束器的角度，选择特定波长的光进入光电传感器，从而测量溶液在该波长下的吸光度。
3. 分光光度计的操作方法
以下是使用分光光度计的一般操作步骤：
步骤1：打开分光光度计
将分光光度计通电，并打开仪器。
等待仪器初始化完成。
步骤2：校准分光光度计
使用标准溶液对分光光度计进行校准。
校准方法根据不同的仪器而有所不同，一般可以在仪器的说明书中找到具体的操作步骤。
步骤3：准备样品溶液
使用试管等容器，制备需要测量的样品溶液。
根据需要，可以使用稀释液将样品适当稀释。
步骤4：设置波长
根据实验需求，选择适当的波长进行测量。
将波长调至所需波长，通常可以通过旋转光栅或光分束器来调节。
步骤5：测量吸光度
将准备好的样品溶液加入样品池中，并将样品池放入分光光度计中。
仪器上的测量按钮，待仪器读数稳定后记录吸光度值。
步骤6：重复实验或测量其他样品
如果需要，可以重复步骤5来测量多个样品的吸光度。
如果需要测量其他波长下的吸光度，重复步骤4即可。
步骤7：关闭分光光度计
实验结束后，关闭分光光度计，进行必要的清洗和保养。
4.。
721分光光度计的使用方法和步骤721分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的实验仪器，其主要功能是测量溶液中物质的吸光度或透过率。
下面将介绍721分光光度计的使用方法和步骤。
一、仪器准备1. 将721分光光度计放置在水平台上，并插入电源线。
2. 打开仪器的电源开关，并等待仪器启动。
二、样品处理1. 准备待测溶液，并使用量筒等工具准确称取所需的溶液体积。
2. 将待测溶液转移到专用的样品池中，确保溶液充满样品池。
三、仪器调试1. 选择适当的波长，根据待测溶液中物质的特性选择合适的波长。
常用的波长有可见光范围内的450nm、550nm、600nm等。
2. 调节光程，根据溶液浓度的不同，选择合适的光程以保证测量的准确性。
光程的选择应根据仪器的使用说明进行操作。
3. 零点校准，使用纯水或空白溶液进行零点校准，将仪器的显示值调整为零。
四、测量操作1. 将样品池放入光度计的样品槽中，并确保样品池与光路平行。
2. 关闭样品槽，开始测量。
3. 读取测量结果，记录显示屏上的吸光度或透过率数值。
五、数据处理1. 根据实验需要，对测得的数据进行进一步处理，如计算溶液的浓度或进行数据分析等。
六、仪器的维护1. 使用完毕后，关闭仪器的电源开关。
2. 清洁样品池，避免样品残留污染下次测量。
3. 定期对仪器进行维护和保养，如清洁光路、校准仪器等。
721分光光度计的使用方法和步骤如上所述。
在使用过程中，需要注意的是选择合适的波长和光程，进行零点校准以及正确放置样品池等。
此外，对仪器的维护和保养也是使用过程中需要重视的事项。
通过正确操作和维护，可以保证721分光光度计的正常使用和准确测量。
掌握分光光度计的使用方法光度计光源出射光束经单色器内光栅色散成展开光谱,经波长选择后,得到所需波长的单色光,该单色光穿过被测样品,其能量被样品吸收一部分,剩余光能被检测器接收。
转换成电信号，经放大后,送至微机单元进行运算处理,由显示器给出测定结果,键盘用来设定测量模式、参数和命令的控制。
分光光度计基本操作方法1.连接仪器电源线，确保电压正确、并且电源有良好的接地性能。
2.接通电源，开机使仪器预热20分钟。
至仪器自动校正后，仪器自检完毕,即可进行测试。
3.用<方式>键设置测试方式，根据您的需要选择，透过率（T），吸光度（A）浓度（C）4.选择您要分析的波长，按键5（设定键）找出屏幕上显示“WL=×××.×nm”字样，按键2或键3输入您所要分析的波长,之后按键7(确认键)、显示器第一列右侧显示“×××.×nm BLANKING”仪器正在变换到您所设置的波长及自动调出0ABS/100%T请稍等。
待仪器显示出您需要的波长，并且已经把参比调成0.000A时，即可测试。
5.将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中，打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。
一般情况下，参比样品放在第一个槽位中。
仪器所附的比色皿，其透过率是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。
比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹，被测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品测试的精度。
6.将参比样品推（拉）入光路中，按<0ABS/100%T>键调“0ABS/100%T”。
此时显示器显示的“BLANKING”，直至显示“100.0”%T或“0.000A”为止。
7.当仪器显示器显示出“100.0%T”或“0.000A”后，将被测样品推（或拉）入光路,这时，您便可以从显示器上得到被测样品的测试参数。
752型紫外可见分光光度计操作规程目的：建立紫外可见分光光度计操作规程，确保其使用安全、正确。
范围：适用于752型紫外可见分光光度计。
操作规程：1. 打开仪器开关，仪器使用前应预热30分钟。
2. 转动波长旋钮，观察波长显示窗，调整至需要的测量波长。
3. 根据测量波长，拨动光源切换杆，手动切换光源。
200-339nm使用氘灯，切换杆拨至紫外区；340nm-1000nm使用卤钨灯，切换杆拨至可见区。
4. 调T零在透视比（T）模式，将遮光体放入样品架，合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。
按下“调0%”键，屏幕上显示“000.0”或“-000.0”时，调T零完成。
5.调100%T/ OA先用参比（空白）溶液荡洗比色皿2-3次，将参比（空白）溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。
合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。
按下“调100%”键，屏幕上显示“BL”延时数秒便出现“100.0”（T模式）或“000.0”、“-000.0”（A模式）。
调100%T/ OA完成。
6.测量吸光度6.1参照操作步骤3、步骤4。
6.2在吸光度（A）模式，参照步骤5调100%T/ OA。
6.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。
合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路，读取测量数据。
7.测量透视比7.1参照操作步骤3、步骤4。
7.2在透视比（T）模式，参照步骤5调100%T/ OA。
7.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。
合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路，读取测量数据。
8.浓度测量8.1参照操作步骤3、步骤4。
8.2在透视比（T）模式，参照步骤5调100%T/ OA。
721可见分光光度计使用方法721可见分光光度计使用方法：721可见分光光度计是一种用于测量可见光范围内溶液或物质吸收光强的仪器。
下面将介绍其使用方法，以帮助您正确地操作该设备。
1. 准备工作：a. 确保721可见分光光度计处于稳定的工作环境，远离振动和干扰源。
b. 检查设备是否正常运转，并将其接通电源。
2. 样品处理：a. 准备待测样品，在使用前确保样品清洁无杂质。
b. 根据需要，将样品与试剂混合或稀释。
3. 设置参数：a. 打开分光光度计软件或直接通过仪器面板设置所需的波长范围。
b. 选择所需的波长，并在仪器上进行设置。
4. 校准仪器：a. 使用标准溶液进行校准。
校准样品将提供一个已知吸光度值，以便校准仪器。
b. 将标准样品放入仪器中，并根据仪器指南进行校准。
5. 进行测量：a. 使用准备好的样品架，将待测样品放入样品室中。
b. 关闭样品室，确保环境光线尽量少干扰测量结果。
c. 运行仪器软件或通过面板启动测量。
d. 仪器将测量样品吸光度，并显示结果。
6. 分析结果：a. 仔细观察测得的吸光度值，并根据需要进行记录。
b. 根据分光光度计和实验要求，将数据转化为所需的浓度或吸光度单位。
7. 清洁和保养：a. 在使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
b. 清洁样品室和光学部件，以确保仪器保持良好的工作状态。
c. 定期进行仪器维护和校准，以保证准确性和稳定性。
请务必按照以上顺序和步骤进行721可见分光光度计的使用，以获得准确的测量结果。
使用前请详细参阅仪器操作手册，以确保操作正确无误，并严格遵守相关安全操作规范。
