基于质谱的微生物鉴定
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生物质谱技术在微生物学中的应用随着现代科技的不断进步,生物学的发展也越来越快速。
其中,生物质谱技术是一种被广泛应用于微生物学领域的高新技术。
它通过对样品中生物大分子如蛋白质、核酸、糖等进行分子解析,提供了微生物领域研究所需的高精度、高通量、高灵敏度、高信息的获得手段,因此在微生物学领域有着广泛的应用。
一、生物质谱技术的基本原理及分类生物质谱技术指用来检测生物样品分子量和结构的一系列物理和化学技术。
生物质谱学包括大量的方法和技术,例如质谱分析、质谱成像等。
质谱分析是基于质谱仪的原理,凭借质量分析仪对分子的质量进行分析,根据分子的质量和质子化程度可以推测分子结构及代谢通路。
质谱成像技术是在分子水平上,对含有多种组分的生物样品进行成像分析。
它利用质谱仪的成像功能,对生物样品进行离子成像,实现在细胞和组织水平上的高分辨率成像。
质谱成像技术不仅可以分析有机化合物、蛋白质和氨基酸等生物分子,还可以发现新的代谢途径、功能基团、化学生物标记物等,成为微生物代谢组学和生物学研究的有力工具。
二、生物质谱技术在微生物代谢组学中的应用微生物代谢组学是在代谢水平上对微生物的全面研究,它是利用各种生物技术单元或方法对微生物的代谢物进行鉴定、分析、识别,从而构建一个完整的微生物代谢物组,进而了解并研究微生物的代谢物谱的整体特点及代谢通路。
在微生物代谢组学领域,生物质谱技术的应用众多,以下列举几种:1.蛋白质谱分析:微生物体内的蛋白质是微生物代谢中最重要的功能性产物之一。
利用生物质谱技术对蛋白质进行分析,不仅可以鉴定新的蛋白质与蛋白复合物,还可以通过拟南芥前体文件夹的生物质谱分析,确定微生物蛋白的后转录修饰。
2. 代谢物质谱分析:微生物代谢产物是微生物代谢组学的重要研究内容,用生物质谱技术对微生物代谢产物进行分析,可以得到微生物的代谢通路和代谢产物谱,精准测定代谢产物的分子式和分子量,加深对微生物代谢的了解。
3. 生物膜成分分析:尤其在酵母细胞中,可以使用生物质谱技术对生物膜结构和成分进行研究,进一步了解细胞内物质运输和信号转导的过程。
微生物质谱快速鉴定微生物是生物学领域中非常重要的一类生物,它们在自然界中起到了关键的作用。
然而,微生物的识别和鉴定一直是一个相对繁琐和耗时的过程。
为了解决这个问题,科学家们开发出了一种高效快速的鉴定方法——微生物质谱。
一、什么是微生物质谱微生物质谱是一种通过分析微生物样品中的质谱图谱来进行鉴定的技术。
质谱是一种通过将物质分子进行离子化,并测量其质荷比来确定其分子结构的方法。
微生物质谱利用质谱技术,能够快速准确地识别和鉴定微生物。
二、微生物质谱的工作原理微生物质谱的工作原理基于微生物在质谱仪中生成的特征质谱图谱。
其过程主要分为样品预处理、质谱测量和数据分析三个步骤。
1. 样品预处理:将待测微生物样品进行分离纯化处理,去除干扰物质。
2. 质谱测量:将预处理后的样品注入质谱仪中,通过化学分析技术将微生物样品中的分子转化为离子,然后利用质谱仪测量这些离子的质荷比。
3. 数据分析:质谱仪将得到的质荷比数据转化为质谱图谱,通过与数据库中的质谱图谱进行比对,确定待测微生物的种属和菌株。
三、微生物质谱的优势相比传统的微生物鉴定方法,微生物质谱具有如下优势:1. 快速:微生物质谱仪能够在几分钟内得出准确的鉴定结果,相比传统的培养方法节省了大量的时间。
2. 高效:不需要纯培养微生物,只需要少量的微生物样品,无需耗费大量的实验室资源。
3. 准确:微生物质谱仪具备较高的鉴定准确度,可以区分微生物亚种和突变株。
4. 全面:微生物质谱技术可以鉴定各种形态的微生物,包括细菌、真菌、病毒等。
四、微生物质谱的应用领域微生物质谱技术已广泛应用于多个领域,包括以下几个方面:1. 医学领域:微生物质谱可用于快速诊断感染性疾病,提供精准的病原菌识别,有助于指导临床治疗。
2. 食品安全领域:微生物质谱技术可以用来检测食品中的微生物污染,保障食品安全,预防食源性疾病的发生。
3. 环境监测领域:微生物质谱技术可用于监测水、空气等环境中的微生物的存在和分布情况,为环境治理提供科学依据。
引言:微生物在生物工程、食品安全、环境监测等领域中起着重要作用,因此,开发快速、准确、高效的微生物检测技术至关重要。
微生物快速检测技术是指能够在较短时间内对微生物进行快速检测和鉴定的技术。
本文将详细介绍微生物快速检测技术的原理、方法和应用。
概述:微生物快速检测技术基于先进的分子生物学、生物化学和光学仪器,在短时间内能够对微生物的存在和数量进行快速和准确的检测。
与传统的培养方法相比,微生物快速检测技术具有操作简便、结果快速、准确性高等优势。
在食品安全领域,微生物快速检测技术能够快速鉴定食品中的致病菌,提高食品的质量和安全性。
在环境监测领域,微生物快速检测技术能够迅速监测水质和土壤中的微生物,为环境保护提供有力支持。
正文内容:一、基于PCR技术的微生物快速检测1. PCR技术的原理和方法:介绍PCR技术的工作原理、步骤和所需试剂。
2. 基于PCR的微生物检测方法:详细介绍基于PCR技术的微生物检测方法,如实时荧光PCR、逆转录PCR等,以及其在食品和环境中的应用。
3. PCR技术的优势和局限性:分析PCR技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
二、基于基因芯片技术的微生物快速检测1. 基因芯片技术的原理和方法:介绍基因芯片技术的工作原理、设计和制备方法。
2. 基于基因芯片的微生物检测方法:详细介绍基于基因芯片技术的微生物检测方法,如DNA芯片、RNA芯片等,以及其在食品和环境中的应用。
3. 基因芯片技术的优势和局限性:分析基因芯片技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
三、基于质谱技术的微生物快速检测1. 质谱技术的原理和方法:介绍质谱技术的工作原理、样品制备和仪器设备。
2. 基于质谱的微生物检测方法:详细介绍基于质谱技术的微生物检测方法,如MALDI-TOF质谱、飞行时间质谱等,以及其在食品和环境中的应用。
3. 质谱技术的优势和局限性:分析质谱技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
《质谱技术在微生物鉴定和检测中的应用》摘要:质谱技术(Mass Spectrometry, MS)是一种根据离子产生的质量图谱来确定样品中分子组成的分析技术。
质谱法不仅可以对传统的目标分析物进行定性和定量分析,还可以用于细菌的快速准确鉴定。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight, MALDI-TOF)质谱仪由于能快速准确地鉴定革兰氏阴性菌和阳性菌的种类,因此是生物学中最常用的质谱仪之一。
质谱法鉴定微生物是以鉴定每个物种的特征光谱为基础的,然后与仪器内的大型数据库进行匹配。
本综述阐述了细菌鉴定面临的挑战和机遇,特别是在微生物学领域中使用MALDI-TOF MS来鉴定微生物和分析抗菌药敏感性。
关键词:质谱技术;MALDI-TOF;特征光谱;细菌鉴定;抗菌药敏感试验质谱(MS)法通过分析电离分子的质荷比(m/z)来对分子进行定性定量分析。
质谱仪扫描的特征图谱可以确定样品内不同分子的组成,并且能够直接分析任何可电离的生物分子。
FENN[1]和TANAKA[2]在MS的基础上,分别建立了电喷雾电离(Electrospray Ionization,ESI)技术和基质辅助激光解吸电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization,MALDI)技术。
MALDI最大的优势在于不需要复杂的预分析,就可以直接对样品与化学基质混合后产生的离子进行分析。
离子飞行时间(TOF)是指用探测器精确测量离子到达飞行管末端所花费的时间。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术是将MALDI技术和TOF技术整合在一起的一种技术。
自从关于MALDI-TOF技术的构想诞生以来,因其快速、高通量、低成本和高效的优点,该技术已经彻底改变了微生物实验室中鉴定微生物的方法。
MALDI-TOF MS的主要优点之一是节省时间,因为细菌鉴定不再需要经过24~48 h,只需不到一小时即可完成。
质谱仪在微生物中的应用及标准化操作
质谱仪在微生物中的应用及标准化操作如下:
质谱仪在微生物鉴定中具有重要作用。
微生物鉴定是临床诊断的重要环节,传统的生化原理检测方法流程复杂且能鉴别的种类有限。
相比之下,质谱技术凭借高通量、快速性、准确性和特异性等优点,在微生物检验方面的应用越来越多。
在质谱技术应用过程中,微生物样本和基质置于靶板上,两者混合干燥后形成晶体。
当紫外激光脉冲作用于晶体时,基质受到激发从固相转为气相,微生物蛋白和基质分子从靶板表面被喷射出去(解吸),质子从基质转移到蛋白(电离),使带正电荷的气相蛋白在静电场高电压作用下加速进入飞行管。
进入飞行管后,离子就以一定的速度飞向离子检测器,该速度取决于它们的“质核比”。
低“质核比”的小离子先到达,随后是“质核比”稍高的大分子。
用离子检测器可以检测每个离子的飞行时间,“质核比”可以计算出来,进而产生质谱图。
质谱图上显示的“质核比”数值在x轴上,信号强度在y轴上,因此已知m/z的越高丰度的蛋白会在质谱图上产生越高的峰。
通过该微生物全部蛋白质所构成的图形与数据库进行比对,从而完成微生物的鉴定。
此外,基质分子所吸收的能量可以使结晶体出现电离反应,并生成不同质荷比的带电离子。
样品离子可以在加速电场的作用下获得相同功能,经由高压加速处理及聚焦处理以后,研究者可以在样品离子进入时间质谱分析器以后进行质量分析。
就质谱技术的实施情况而言,离子的质荷比与飞行时间的平方之间具有正比例关系,相关人员在绘制质量图谱以后请确定的特异性图谱的软件分析比较可以为目标微生物菌种及菌株的区分提供帮助。
谈一谈质谱技术在临床微生物检测中的应用随着医疗技术水平的不断进步,临床检验中引入了越来越多的高新技术,质谱技术就是其中之一,其主要是一种对蛋白质进行分析的较为强大的工具,其存在高通量、快速准确、自动化、操作简便等优点,所以在临床的微生物检验中应用较为广泛,在鉴定病原体方面具有显著效果。
这一技术从出现到发展对传统检验模式进行了挑战,令检验的实效性和灵敏度得以提升。
因此,为帮助病人们进行了解,下面就来介绍一下质谱技术在临床微生物检测中的主要应用。
一、质谱技术的原理和优点质谱技术的主要工作原理是把基质和样品进行混合,而后将其点在相应的金属靶盘上,构成一个共结晶,而后将激光当做能量的来源对结晶体进行辐射,此时基质分子会对能量进行吸收,令样品开始吸附,而后发生电离反应,形成质荷比不同的带电离子。
而样品离子处于加速的电场下,可以产生相同的动能,而后经过高压的加速和聚焦,进入到飞行时间的质谱分析器中,完成质量分析的操作。
其中,飞行时间的平方和离子质荷比呈现正相关的关系,通过计算机的处理,可以形成质量图谱,经过相关的软件进行分析和比较,可以筛选以及确定特异性的图谱,进而鉴定或者区分菌株以及微生物。
现今的临床微生物实验中,在鉴定细菌方面大都依靠传统生化反应以及形态学技术等,在鉴定细菌方面也需首先进分离纯化,就算利用相关的自动化鉴定仪,也需保证时效性的要求,特别是在检测菌血症这类重症感染的过程中。
而质谱技术一般不要求样品纯度,所以样品检测过程中可以不进分离和纯化,可以进行直接的点样。
该方式的操作较为简便,还可不断扩展数据库,所以可准确且快速地完成检测,还可保证高通量。
二、质谱技术在临床微生物检测中的应用就现今的情况来看,质谱技术现已被广泛应用于临床微生物检测中,主要检测的菌种包括霉菌、酵母菌、分枝杆菌、厌氧菌、需氧菌、革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌等。
1、鉴定及分析细菌质谱技术可对多种细菌进行充分分析,其中,检测的样本既可为进分离培养的一些纯菌落,同样也可为原始的临床样本,其可以被直接用来检测。
微生物质谱概述微生物质谱(microbial mass spectrometry)是一种基于质谱技术的微生物学研究方法。
它通过分析微生物体内的代谢产物、蛋白质、核酸等分子的质量和相对丰度,来研究微生物的种类、功能和代谢状态。
微生物质谱技术的出现极大地推动了微生物学研究的进展,为微生物领域的快速鉴定和分类、新物种发现以及微生物代谢途径的研究提供了有效的工具。
质谱技术在微生物学中的应用质谱技术在微生物学中有着广泛的应用。
首先,通过质谱技术可以快速鉴定和分类微生物。
传统的微生物学鉴定方法往往耗时耗力,而质谱技术可以通过分析微生物体内的代谢产物、蛋白质或核酸的质量和丰度,快速准确地鉴定微生物的种类。
其次,质谱技术能够发现新的微生物物种。
通过对未知微生物样本的质谱分析,可以确定其物种和代谢途径,从而帮助科学家发现新的微生物物种。
此外,质谱技术还可以用于研究微生物的代谢途径和功能。
通过分析微生物代谢产物的质谱特征,可以了解微生物的代谢途径和功能,为微生物学研究提供重要的信息。
微生物质谱的工作流程包括样品制备、质谱分析和数据处理三个主要步骤。
1.样品制备:样品制备是微生物质谱分析的关键步骤。
在样品制备过程中,需要从微生物体内提取代谢产物、蛋白质或核酸等目标分子,并对其进行纯化和浓缩处理。
样品制备的质量将直接影响后续质谱分析的结果。
2.质谱分析:质谱分析是微生物质谱的核心步骤。
在质谱分析过程中,样品中的目标分子会被离子化,并通过质谱仪中的离子源产生离子流。
离子流将进入质量分析器,通过分析质量分析器中离子的质量和丰度信息,可以确定分子的质量和相对丰度。
3.数据处理:质谱分析产生的原始数据需要进行进一步的处理和分析。
通过对原始数据的处理,可以获得微生物样品中目标分子的质谱图谱。
进一步分析质谱图谱可以得到微生物样品中各分子的质量和相对丰度信息,从而进行分类和功能分析等研究。
微生物质谱技术在微生物学领域有广泛的应用。
以下是几个微生物质谱应用案例的介绍。
微生物质谱鉴定质谱分析是一种通过测量离子质荷比(质量-电荷比),从而确定其质量的分析方法(通俗点讲,质谱就是一种类型的“秤”,只不过它称量的是离子的质量),在众多的分析测试方法中被认为是一种同时具备高特异性和高灵敏度且得到了广泛应用的普适性方法。
质谱仪器一般由进样系统、离子源、质量分析器、检测器、数据处理系统等部分组成。
由于进样方式、离子源、质量分析器等的不同,质谱仪分为不同的种类,临床上常见的有液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)、气相色谱串联质谱(GC-MS-MS)、电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等等。
我们通常所提到的微生物质谱法采用的就是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对微生物进行鉴定的方法。
MALDI-TOF MS的离子化方式是基质辅助激光解吸电离(MALDI),是一种“软电离”的方式,这种电离方式可以产生稳定的分子离子,因而是检测生物大分子的有效方法,广泛地运用于生物化学,尤其对蛋白质、核酸的分析研究已经取得了突破性进展。
那么,MALDI-TOF MS是如何进行样本检测的呢?首先,用一定强度的激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能量,与样品之间发生电荷转移使得样品分子电离。
离子在高压电场作用下加速进入飞行管中,小离子飞得快,先到达探测器,大离子飞得慢,后到达探测器,从而得出测定结果。
质谱为什么能够鉴定微生物?以细菌为例,细菌是原核生物的一类,是一类形状细短,结构简单,多以二分裂方式进行繁殖的原核生物,是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体,是大自然物质循环的主要参与者。
细菌主要由细胞膜、细胞质、核质体等部分构成,有的细菌还有荚膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。
MALDI-TOF MS之所以能够对细菌进行鉴定,是因为细菌的核糖体蛋白具有保守性,一般不会随生长条件的变化而变化,而不同细菌的核糖体蛋白指纹图谱具有各异性,指纹图谱中的某些峰具有属、种,甚至亚种特异性。
微生物质谱快速鉴定
微生物质谱快速鉴定是一种利用质谱技术对微生物进行快速鉴定和分类的方法。
它基于微生物体内的代谢产物和组织结构的质谱特征,通过分析微生物样品中的质谱图谱,可以确定微生物的种类和身份。
微生物质谱快速鉴定的步骤通常包括以下几个步骤:
1. 样品制备:将微生物样品进行适当的处理和准备,如培养、提取样品等。
2. 质谱分析:将样品注入质谱仪,通过电离和分离等过程,得到微生物样品的质谱图谱。
3. 数据分析:对质谱图谱进行数据处理和分析,利用专业的软件和数据库进行质谱图谱匹配和比对,确定微生物的身份和种类。
微生物质谱快速鉴定的优势在于其快速、准确、高通量的特点。
相比传统的微生物鉴定方法,如细菌培养和生化试验等,微生物质谱快速鉴定能够大大缩短鉴定的时间,同时具有更高的准确性和可靠性。
微生物质谱快速鉴定在医学、食品安全、环境监测等领域具有广泛的应用价值。
它可以用于迅速检测和鉴定病原微生物,帮助医生进行早期诊断和治疗;在食品安全领域可以用于快速检测和鉴定潜在的致病微生物,保障食品的质量和安全;在环境
监测领域可以用于快速检测和鉴定水、土壤和空气中的微生物,评估环境的质量和污染程度等。
微生物鉴定的方法
微生物鉴定是确定或识别微生物种类的过程。
以下列出了常用的微生物鉴定方法:
1. 形态学鉴定:通过观察微生物的形态特征,如大小、形状、颜色和结构,来鉴定微生物。
这可以通过显微镜观察微生物细胞和组织的特征来实现。
2. 培养基鉴定:将微生物分离培养在特定的培养基上,根据不同的培养特性(如生长速度、形态、生理特征等)来鉴定微生物。
培养基可以提供适宜的营养和环境条件,促进微生物的生长。
3. 生化测试:通过测试微生物代谢产物的变化来鉴定微生物。
常用的生化测试方法包括酶活性测试、代谢途径测试和糖发酵测试等。
4. 分子生物学方法:利用分子生物学技术鉴定微生物,包括引物PCR扩增、序列分析、DNA指纹图谱等。
这些技术可以检测微生物的DNA序列并与已知的序列进行比较,从而确定微生物的种类。
5. 免疫学方法:利用免疫学技术鉴定微生物,包括血凝法、免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。
这些方法可以检测微生物特异性抗原或抗体,从而确定微生物种类。
6. 质谱法:利用质谱技术鉴定微生物,如质谱分析、质谱成像等。
这些技术通
过分析微生物代谢产物或特定的质谱图谱,来确定微生物的种类。
综合使用上述的方法,可以更准确地鉴定微生物种类,特别是对于难以通过传统的形态学观察进行鉴定的微生物。
微生物质谱和NGS(下一代测序技术)是两种不同的微生物检测技术,它们在微生物鉴定和分析中具有各自的优势和应用场景。
微生物质谱技术是一种基于质谱原理的微生物鉴定方法,它可以通过对微生物的蛋白质、核酸等生物分子进行质谱分析,快速、准确地鉴定微生物的种类和属性。
这种技术具有高通量、高灵敏度、高特异性等优点,因此在临床微生物检测、食品安全检测等领域得到了广泛应用。
NGS技术则是一种基于高通量测序原理的微生物检测技术,它可以对微生物的基因组进行深度测序和分析,从而获取微生物的基因组信息,包括基因序列、基因表达水平等。
这种技术具有无需预先培养样本、灵敏度高、能够检测未知的微生物等特点,因此在疾病防控、生物食品安全等领域具有广阔的应用前景。
总之,微生物质谱和NGS技术各有优势,可以相互补充,为微生物检测和鉴定提供更加全面、准确、高效的方法。
临床质谱应用
临床质谱应用主要包括以下几个方面:
1.基于质谱的微生物鉴定和核酸分析:通过质谱技术对微生物进行鉴定和核酸分析,可以快速、准确地检测出病原微生物的种类和基因序列,对于诊断和治疗感染性疾病具有重要意义。
2.基于质谱的维生素系列检测、类固醇激素检测(内分泌检测)、药物浓度监测和遗传代谢病筛查:这些应用可以用于检测人体内各种生物分子的变化,帮助诊断和预防多种疾病,如维生素缺乏症、内分泌失调、药物中毒等。
3.质谱成像技术:通过将质谱技术与成像技术相结合,可以直接在组织切片或细胞样品上进行元素成像,对于病理学研究、药物分布研究等具有重要意义。
4.质谱在肿瘤学中的应用:质谱技术可以用于检测肿瘤细胞和组织中异常表达的蛋白质、氨基酸、脂肪酸等生物分子,帮助诊断肿瘤、评估肿瘤恶性程度和预后,以及指导肿瘤治疗。
5.质谱在神经科学中的应用:质谱技术可以用于研究神经系统中神经递质、神经调质、神经肽等生物分子的变化,对于神经科学研究、精神疾病诊断等具有重要意义。
6.质谱在临床药物代谢研究中的应用:质谱技术可以用
于研究药物在人体内的代谢过程、代谢产物的性质和数量,对于临床药物研发、优化治疗方案等具有重要意义。
7.质谱在生物样本分析中的应用:质谱技术可以用于对生物样本(如血液、尿液、组织等)中的生物分子进行定性和定量分析,对于临床诊断、药物治疗监测等具有重要意义。
2020年11月 第21期影像学及诊断检验质谱技术在微生物检测和鉴定中的应用左瑞菊沧州市人民医院,河北 沧州 061000【摘要】随着医学技术的蓬勃发展,质谱技术在医学中的应用越加广泛,质谱技术能够通过样品中离子产生的质量图谱对于其分子构成进行分析,广泛用于临床中细菌的快速鉴定中。
在生物学中常用MALDI-TOF质谱仪对于革兰氏阴性菌种与阳性菌种进行鉴定,通过质谱法对于微生物进行鉴定是基于不同物种不同的特征光谱来进行区别的。
本文通过对近年来相关文献的查阅,介绍了临床基于该技术的应用与样品的制备,简述了微生物检测分类,分析了该技术进行微生物检测的局限性,阐述了在细菌鉴定方面所可能遇见的挑战与应用情况,并就其日后的发展进行展望。
【关键词】质谱技术;质量图谱;细菌鉴定;特征光谱[中图分类号]Q93-331; O657.63 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2020)21-0180-02质谱法是通过对于电离分子质荷比进行分析从而对于分子进行定性定量分析的一种方法,其有事在于能够通过特征图谱对于样品分子组成进行确定的同时,直接分析其可电离生物分子[1]。
在此检测方法的基础上还发展出现了ESI技术与MALDI技术,MALDI技术能够减去复杂的预分析,直接对于检测物的产生离子进行分析,而TOF则是采用探测器将离子到达飞行官末端的花费时间进行测量,两种技术的的整合使用早就了质谱检验技术的基础,随着此种技术的临床广泛应用,微生物实验室中对于微生物的检验鉴定方法发生了翻天覆地的变化,该技术能够优先增加检验的效率,单次检验60min内即可完成,对于临床疾病的判断具有重要意义[2]。
1 质谱检测法的原理和发展质谱技术是一种新型的致病菌检测方法。
其原理是质谱仪离子源通过辐照或者电离效应给予了检测目标物质以较高的能量,目标物吸收能量后被激发,在激发过程中吸收高能的物质会产生强烈的离子化效能[3]。
带电离子发生离子化后被载气带入质谱仪,通过电压的作用加速飞行,因为各个离子间具有不同的质荷比,因此会按照质量数的大小被分离。
质谱技术在临床微生物检测中如何应用近年来,我国各种感染性疾病的发病率不断上升,老龄化人口比例的加重、抗生素使用的广泛、不正确的个人习惯等,导致感染性病原菌的种类呈现出复杂多变的特点,病菌的耐药性也在不断变化,感染性疾病的防治难度更高。
而加强临床微生物检测工作,能够更好的对各种致病的细菌和真菌等进行鉴别分析,以便于采取更好的措施对患者进行治疗。
但传统的生化检验工作受到很多因素的影响,耗时较长、准确性相对较低,已经不能满足当前的临床需求。
而质谱技术的应用,则很好的解决了这个问题。
那么,什么是质谱技术?质谱技术有什么用?咱们下面就来看一看。
1、什么是质谱技术?质谱技术是临床微生物检验中应用较为广泛也较为强大的高新技术,主要应用于对蛋白质进行分析。
在使用质谱技术的过程中,需要先将样品和基质进行混合,混合均匀后点在金属靶盘上形成结晶,对结晶使用激光进行辐射,其中的基质分子会将激光能量吸入,让样品在吸附后发生电离反应,出现不同质荷比的带电离子。
加速的电场会对样品离子的功能性进行激发,再经过高压状态的处理后进入质谱分析器,在计算机技术的处理下形成图谱,便于对微生物和菌株进行区分。
在当前的临床检验工作中,对于细菌等方面的鉴定主要是根据形态学技术标准或传统的生化反应进行的,在进行细菌鉴定的过程中,对于样品的纯度和时效性等都有较高的要求,而质谱技术对此却没有严格的要求,且检查的通量高、操作简便、检验用时低,在临床上有较高的应用价值。
2、质谱技术在临床微生物检测中如何应用?其实在现在的临床微生物检验过程中,质谱技术的应用非常普遍,而其检验的菌种类主要包括厌氧菌、霉菌、酵母菌、分歧杆菌、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。
(1)使用质谱技术对细菌进行鉴定和分析质谱技术对于很多细菌都能够进行充分的分析,其中所使用的样本可以是原始的样本,也可以是培养出的菌群或纯菌落等,都能直接拿来测量,且在这些常见菌的鉴别中有很高的准确性,因此适用范围也较广。