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超高效液相色谱-串联质谱法测定酒类产品中13种添加剂基金项目：“十三五”北海市海洋经济创新发展示范项目（项目编号：bhsfs009）。
收稿日期：2020-11-02；修回日期：2020-11-19作者简介：陈高健（1986-），女，本科，主管药师，主要研究方向：食品、药品检验检测及方法开发研究。
通讯作者：汤丽昌（1986-），男，硕士，主管药师、高级技师，研究方向：食品中食品添加剂、兽药残留检验检测及方法开发研究。
DOI ：10.13746/j.njkj.2020236陈高健，何锦锋，汤丽昌（北海市食品药品检验所，广西北海536000）摘要：建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra high performance liquid chromatography tandem massspectrometry,UPLC -MS/MS)同时测定酒类产品中13种食品添加剂含量的分析方法。
采用Agilent EC -C 18色谱柱（4.6mm×50mm,2.7μm ），柱温30℃，流动相由A （甲醇）和B （10mmol/L 甲酸和10mmol/L 甲酸铵溶液）组成，梯度洗脱，流速0.2mL/min 。
采用电喷雾负离子（ESI -）模式电离，多反应监测（multi-ple reaction monitoring ，MRM ）模式检测，外标法定量。
结果表明，在最佳条件下，13种食品添加剂可在10min 内有效分离,标准曲线线性关系良好（r ＞0.998）。
平均回收率为88.7%～107.1%，相对标准偏差为2.2%～8.7%，检出限为0.02～0.26mg/kg ，平均加样回收率89.9%～104.2%。
该方法快速、准确，灵敏度高，适用于酒类产品中甜味剂、防腐剂等13种食品添加剂的快速筛查和定量分析。
关键词：酒类产品；超高效液相色谱-串联质谱法；食品添加剂；甜味剂；防腐剂中图分类号：TS261.7；TS262文献标识码：A文章编号：1001-9286（2021）04-0116-06Simultaneous Determination of 13Food Additivesin Alcoholic Drinks by UPLC-MS/MSCHEN Gaojian,HE Jinfeng and TANG Lichang(Beihai Institute for Food &Drug Control,Beihai,Guangxi 536000,China)Abstract :In this study we established a method for the simultaneous determination of 13food additives in alcoholic drinks by UPLC-MS/MS.The chromatographic separations were obtained on an Agilent EC-C 18column (4.6mm×50mm,2.7μm)at 30℃.Gradient elution was carried out with methanol as phase A and 10mmol/L formic acid and 10mmol/L ammonium formate solution as phase B,and the flow rate was 0.2mL/min.Electrospray ionization in negative ion mode (ESI-)and multiple reactions monitoring (MRM)were adopted as the basis for quantitative analysis by external standard method.Under the optimal conditions,the 13food additives could be effectively separated within 10min.The standard curves had good linearity (r ＞0.998).The average recoveries were in the range of 88.7%to 107.1%,the relative standard deviations (RSDs)were 2.2%to 8.7%,the limits of detection (LODs)were 0.02mg/kg to 0.26mg/kg,and the average spiked recoveries were 89.9%to 104.2%.The method is rapid,accurate and sensitive,and is suitable for the rapid screening and quantitative analysis of the 13food additives in alcoholic drinks,including sweeteners and preservatives.Key words :alcoholic drinks;UPLC-MS/MS;food additive;sweetener;preservative食品添加剂是为改善食品品质和色、香、味，以及为防腐、保鲜和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质[1]。
超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中精氨酸及衍生物含量田晔;江骥;胡蓓;薛金萍;王洪允【摘要】建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定使用艾普拉唑后人血浆中二甲基精氨酸(ADMA)、对称二甲基精氨酸(SDMA)、单甲基精氨酸(NMMA)、瓜氨酸(Cit)和L-精氨酸(L-Arg)的浓度.采用HILIC亲水相互作用色谱和非衍生化的蛋白沉淀法进行分离分析,色谱柱选取Waters Atlantic HILIC柱(2.1 mm×50 mm×3μm),流动相由乙腈(含0.5％乙酸和0.025％三氟乙酸)-水(含0.5％乙酸和0.025％三氟乙酸)(85:15,v/V)组成,流速0.25 mL/min.采用多反应离子监测(MRM)模式,以电喷雾离子源(ESI)正离子方式检测.结果显示,ADMA、SDMA、NMMA、L-Arg和Cit的线性关系良好,相关系数r均大于0.994 0;ADMA、SDMA和NMMA的线性范围为0.1～5 mmol/L,L-Arg和Cit的线性范围为10～250 mmol/L;5种氨基酸的日内、日间精密度均小于15％,准确度在85％～115％之间.该方法快速、简便、灵敏,可为相关疾病的临床诊断提供一种高效的检测手段.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2016(037)005【总页数】7页(P446-452)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS);艾普拉唑;蛋白沉淀法;亲水性色谱【作者】田晔;江骥;胡蓓;薛金萍;王洪允【作者单位】福州大学化学学院,福建省功能材料工程研究中心,福建省光动力治疗药物与诊疗工程技术研究中心,福建福州350108;中国医学科学院北京协和医院临床药理中心,北京100730;中国医学科学院北京协和医院临床药理中心,北京100730;中国医学科学院北京协和医院临床药理中心,北京100730;福州大学化学学院,福建省功能材料工程研究中心,福建省光动力治疗药物与诊疗工程技术研究中心,福建福州350108;中国医学科学院北京协和医院临床药理中心,北京100730【正文语种】中文【中图分类】O657.63一氧化氮是人体重要的信使分子，L-精氨酸(L-Arg)在一氧化氮全酶(NOS)的催化下，产生一氧化氮(NO)和瓜氨酸(Cit)[1-2]。
a q I2020年11月蜜蜂产品qz质量监控我国蜂蜜中农药残留限量标准探究廖海燕丨文四川省攀西无公害农产品监测中心，攀枝花市617000蜂蜜是一种天然的甜物质，主要成分是果糖和葡萄糖，富含维生素、矿物质、氨基酸等，营养均衡，具有很高的食用、药用、保健价值，是天然的滋补食品。
因其口感好，食用方便，备受人们喜爱。
蜜蜂采集到带有农药残留的花粉和花蜜，接触到含有农药残留的土壤、水源、大气等，将其带回蜂箱，在酿造过程中不能完全降解，造成蜂蜜中农药残留。
人们通过直接食用含有农药残留的蜂蜜，势必对身体健康造成危害。
据调查，全球75%的蜂蜜都有农药残留叫建立蜂蜜中农药残留限量标准，是确保质量安全，保障人们身体健康的基础。
一、我国现有蜂蜜中农药残留限量标准经查阅现行有效标准，我国制定的蜂蜜中农药残留限量标准见表1。
二、存在的问题1.蜂蜜中农药残留限量指标少从表1看，我国目前现有国标和行业标准中，涉及蜂蜜中农药残留限量指标的标准只有10项，允许检出并规定有最高限量值的指标有4项，不得检出的有6项，不得检出指标来源于《食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单》(中华人民共和国农业农村部公告第250号)。
我国现有对食品中农药残留规定最全面的《食品安全国家标准食品中农药最大农药限量》(GB2763-2019)中，规定了483种农药7107项最大残留限量，但没有对蜂蜜及其产品中农药残留限量的规定。
我国现行有效的《食品安全国家标准蜂蜜》(GB14963-2011)是专门适用于蜂蜜的一项强制执行国标，对感官要求、理化指标、污染物限量、表4我国蜂蜜中现行有效农药残留限量标准序号项目名称残留限量(ug/kg)标准1氟胺氧菊酯(Fluvalinate)50GB31650-2019,NY/T1243-2006,GB/T19330-2008 2双甲眯(Amitraz)200GB31650-20193氟氯苯氧菊酯(Flumethyin)10NY/T1243-20064漠嫡酯(Bromopropylate)100NY/T1243-20065汞制剂农药不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号6毒杀芬(氯化烯)(Camahechlor)不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号7咲喃丹(克百威)(Carbofuran)不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号8杀虫眯(克死嫡)(Chlordimeform)不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号9林丹(Lindane)不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号10五氯酚酸钠(Pentachlorophenol sodium)不得检出中华人民共和国农业农村部公告第250号注：统计截止日期2020年5月。
分析检测HPLC-MS/MS测定食糖中4种合成着色剂陈 艳，张 丽，冉艳瑞，黄 立，万 静，马艳红（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650000）摘 要：目的：建立高效液相色谱-串联质谱法（High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，HPLC-MS/MS）测定食糖中4种着色剂的分析方法。
方法：样品经80%甲醇超声提取，再用PWA-2固相萃取柱净化后，经VP-ODS C18柱（2.0 mm×150 mm，5.0 μm）分离，以乙酸铵和甲醇为流动相，梯度洗脱，用HPLC-MS/MS检测。
结果：4种化合物在考察范围内线性良好，相关系数均大于0.999；加标回收率在85.36%～102.30%，RSD为0.42%～2.72%；检出限为2～5 μg·kg-1。
结论：该方法灵敏度高、分辨率高、分析速度快，适用于食糖中合成着色剂的快速筛查和定量分析。
关键词：食糖；高效液相色谱-串联质谱法；合成着色剂；快速测定Determination of 4 Synthetic Colorants in Sugar by HPLC-MS/MS CHEN Yan, ZHANG Li, RAN Yanrui, HUANG Li, WAN Jing, MA Yanhong(Kunming Food and Drug Inspection Institute, Kunming 650000, China) Abstract: Objective: To establish an analytical method for the determination of four colorants in sugar using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Method: The sample was ultrasonically extracted with 80% methanol, purified with a PWA-2 solid phase extraction column, and then separated on a VP-ODS C18 column (2.0 mm×150 mm, 5.0 μm) with a gradient elution using ammonium acetate and methanol as the mobile phases, and detected by HPLC-MS/MS. Result: The four compounds had good linearity within the investigation range, and the correlation coefficients were all greater than 0.999; the standard recovery rate was 85.36%～102.30%, and the RSD was 0.42%～2.72%; the detection limit was 2～5 μg·kg-1. Conclusion: This method has the characteristics of high sensitivity, resolution and fast analysis speed, and is suitable for rapid screening and quantitative analysis of synthetic colorants in sugar.Keywords: sugar; high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; synthetic colorant; rapid determination.食糖作为人们日常生活中的必需品，其安全问题备受关注。
工作研究畜牧业环境 2021.0432摘 要：高效液相色谱-串联质谱法是检测领域中一种非常重要的检测方法，本文针对水产品中的磺胺类药物残留建立了相关的LC-MS法，旨在帮助实验室提高检测效率和检测质量。
本实验建立的方法在1～20ng/mL范围内具有良好线性关系，且7种磺胺药物的相关系数均大于0.998；同时该方法检出限较低，为1ug/kg。
另外测定了5ug/kg添加水平时的回收率，结果显示各类药物的回收率在83%～95%之间。
可见该方法高效准确，可以满足实验需求。
关键词：高效液相色谱-串联质谱法；水产品；磺胺类药物；检测方法1 前言磺胺类药物自发现至今，已有80余年历史。
由于其具有广谱抗菌性、性质稳定、吸收快、使用方便等诸多优点，使其在医疗卫生、食品生产、动物养殖等领域应用广泛。
但在使用过程中也存在着一些缺陷，例如抑菌效果弱、易产生耐药性、用量大、疗程长和发生不良反应等，这些缺陷的存在会造成磺胺类药物的过量使用，由此导致水产、畜禽肉等农产品中药物残留超标，对人体健康产生威胁。
随着检验检测技术的发展，关于磺胺类药物的检测方法已从最初的一种变为现在的多种，主要包括LC-MS（高效液相-串联质谱法）、LC（高效液相色谱法）、快速检测法（ELISA酶联免疫吸附法）、安培检测法等。
其中LC-MS和LC最为常用，在定性定量方面占有很大优势。
本研究以水产品为检测对象，经过一系列条件的优化，建立了关于磺胺类药物的高效液相-串联质谱法的检测方法。
2 材料与方法2.1 实验材料与仪器甲酸（色谱纯，赛默飞世尔），甲醇、乙腈（色谱纯，默克），Captive EMR柱（5982-1003，安捷伦），7种磺胺类药物的混合标准品（100μg/ml，Dr.Ehrenstorfer GmbH）。
0.1%甲酸-水溶液：甲酸：水=1：1000。
超高效液相色谱（1290）-串联四极杆质谱联用仪（6495）（美国，安捷伦）；CF16RN高速冷冻离心机（日本，日立）；涡旋混合器（德国，IKA）；MS2204TS电子天平（瑞士，梅特勒）。
40 |陇科学股份有限公司)；甲酸、乙酸铵(HPLC 级，美国Fluka 公司)；无水硫酸钠(分析纯，西陇科学股份有限公司)；十八烷基硅烷(C18)(上海安谱实验科技股份有限公司)；Na2EDTA ·2H2O(分析纯，广东光华科技股份有限公司)；磷酸氢二钠、一水合柠檬酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；实验室用水为一级水(18.2 MΩ·cm)。
2 实验方法2.1 溶液配制标准储备液：对于固体标，分别称取相当于标准品10 mg (精确至0.01mg)置于10.0mL 容量瓶中，用乙腈溶解后定容至刻度，配制为浓度为1000mg/L 的标准储备液，-18℃避光保存。
标准工作溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙腈逐级稀释配制成系列标准工作溶液，现用现配。
基质空白标准工作溶液：准确吸取适量标准储备液加入6份空白样品，同2.2.2处理配制成系列基质空白标准溶液，现用现配。
Na2EDTA-Mcilvaine 缓冲溶液(0.1 mol/L):准确称取37.2 g Na ２EDTA ·2H2O 、10.9g 磷酸氢二钠和12.9g 柠檬酸于烧杯内，加入一级水约900mL ，搅拌使其溶解，使用1mol/L 的氢氧化钠溶液调节pH 至4.0，定容至1000mL 容量瓶，摇匀即可。
酸化乙腈(含1%甲酸的乙腈溶液，V/V)：准确吸取1mL 甲酸于100mL 容量瓶中，用乙腈定容，混合均匀。
2.2 样品前处理称取5.0g(精确至0.1 g)样品于50mL 具塞塑料离心管中，加入100μL 50μg/L 内标溶液(MG-D5和LMG-D6)，加入2mL0 引言近年来，水产品的消费呈逐年递增趋势[1]，三苯甲烷类染料、氯霉素类、磺胺类、氟喹诺酮类和四环素类等是目前水产品养殖环节常用的病虫害防治药物。
按照我国相关食品安全标准，三苯甲烷类染料、氯霉素类由于毒性较强目前已经禁止在水产品养殖等环节使用。
超高效液相色谱串联傅里叶变换质谱（UPLC-FT-MS）是一种联用技术，它结合了超高效液相色谱（UPLC）的高分离能力和傅里叶变换质谱（FT-MS）的高灵敏度和高分辨率。
这种技术被广泛应用于生物、医药、环境等领域，用于复杂样品的分离和鉴定。
UPLC-FT-MS的工作原理是，首先通过UPLC对样品进行分离，将不同的组分分离出来，然后通过FT-MS对分离出的组分进行鉴定和分析。
FT-MS可以提供高质量的质谱数据，包括精确的质量数、丰富的化学信息和可靠的分子结构信息。
这些数据可以帮助研究人员确定样品的成分和结构。
UPLC-FT-MS的优点包括高分离能力、高灵敏度、高分辨率和可靠的鉴定结果。
此外，这种技术还具有自动化程度高、分析速度快等优点，可以大大提高分析效率。
在应用方面，UPLC-FT-MS被广泛应用于药物代谢、生物标志物发现、环境污染物分析、食品添加剂检测等领域。
例如，在药物代谢研究中，UPLC-FT-MS可以用于研究药物在体内的代谢过程和代谢产物；在环境污染物分析中，UPLC-FT-MS 可以用于检测水体中的有机污染物和重金属离子等。
总之，UPLC-FT-MS是一种非常重要的分析工具，可以广泛应用于各个领域。
随着技术的不断发展，这种技术也将不断创新和完善，为科学研究提供更多的便利和价值。
第42 卷第 11 期2023 年11 月Vol.42 No.111469~1478分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中15种N-亚硝胺化合物汪毅1，梁文耀1，何国山1，陈张好2，周智明2，吴谦1，席绍峰1，谭建华1*（1．广州质量监督检测研究院，国家化妆品质量检验检测中心（广州），广东广州511447；2．广东省药品检验所，广东广州510663）摘要：采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）建立了化妆品中15种痕量N-亚硝胺化合物的分析方法。
水剂样品以水或乙腈分组超声提取，膏霜乳液样品采用亚铁氰化钾-乙酸锌溶液沉淀大分子或者饱和氯化钠-乙腈盐析分组处理后，以Agilent Poroshell 120 SB-Aq（100 mm×3.0 mm，2.7 μm）色谱柱分离，经大气压化学电离源（APCI）电离，多反应监测模式检测，以同位素内标法定量。
结果表明，15种N-亚硝胺化合物在相应质量浓度范围内线性关系良好（r2＞0.995），检出限和定量下限分别为5~15 ng/g和15~45 ng/g。
水、乳、膏霜3种化妆品基质在25、50、100 ng/g加标水平下的平均回收率为88.0%~111%，相对标准偏差（RSD，n=6）为1.4%~9.8%。
该方法用于市售化妆品检测，发现13批次样品检出N-亚硝基二乙醇胺（NDELA），其中1批次超限量值。
方法的专属性强，灵敏度高，精密度好，解决了N-亚硝胺化合物稳定性差、易被干扰等问题，适用于化妆品中15种N-亚硝胺化合物的痕量测定。
关键词：N-亚硝胺化合物；化妆品；超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）；大气压化学电离源中图分类号：O657.63；O623.732文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2023）11-1469-10 Determination of Fifteen N-nitrosamine Compounds in Cosmetics by Ultra Performance Liquid Chromatography-TandemMass SpectrometryWANG Yi1，LIANG Wen-yao1，HE Guo-shan1，CHEN Zhang-hao2，ZHOU Zhi-ming2，WU Qian1，XI Shao-feng1，TAN Jian-hua1*（1．Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute，National Quality Supervision and Testing Center for Cosmetics（Guangzhou），Guangzhou 511447，China；2．Guangdong Institute for Drug Control，Guangzhou 510663）Abstract：An ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometric（UPLC-MS/MS）method was established for detecting 15 trace N-nitrosamine compounds in cosmetics. The final estab⁃lished method involved ultrasonic extraction of cosmetics using water or acetonitrile for different com⁃pounds. The samples were treated with potassium ferrocyanide-zinc acetate solution for precipitating macromolecules or saturated sodium chloride-acetonitrile for salting out.An Agilent Poroshell 120 SB-Aq（100 mm × 3.0 mm，2.7 μm） chromatography column was used for separation，followed by atmospheric pressure chemical ionization（APCI） source and multiple reaction monitoring mode detec⁃tion in the isotope internal standard method for quantification. The result showed good linearity（r2> 0.995） for the 15 N-nitrosamine compounds in their respective concentration ranges，with detection and quantitation limits of 5-15 ng/g and 15-45 ng/g，respectively.The average recoveries for the three cosmetic matrices（aqueous，emulsion，cream） at spiked levels of 25，50，100 ng/g were be⁃tween 88.0% and 111%，with relative standard deviations（RSD，n=6） of 1.4%-9.8%. The method was applied to the detection of commercial cosmetics and N-nitrosodiethanolamine（NDELA） was de⁃tected in 13 batches，with one batch exceeding the limit. The strong specificity，high sensitivity，and good precision made the method could solve the problems of poor stability and easy interference ofdoi：10.19969/j.fxcsxb.23051602收稿日期：2023－05－16；修回日期：2023－06－10基金项目：广东省药品监督管理局化妆品风险评估重点实验室专项（2021ZDZ03）；广东省市场监督管理局科技项目（2022CZ06）∗通讯作者：谭建华，博士，正高级工程师，研究方向：色谱－质谱检测技术研究，E-mail：tanjianhua0734@第 42 卷分析测试学报N-nitrosamine compounds，and was suitable for the trace determination of 15 N-nitrosamine com⁃pounds in cosmetics.Key words：N-nitrosamine compounds；cosmetics；ultra performance liquid chromatography-tan⁃dem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）；atmospheric pressure chemical ionization（APCI） sourceN-亚硝胺化合物是一类具有N-亚硝基结构的化合物，因取代基的不同，形成了种类繁多的同系物，目前已发现超过300种［1］。
2006年9月Sep tem be r 2006色谱C h inese J ou rna l of C h rom a tog raphyVo l .24N o.5432～435收稿日期:2005211230通讯联系人:丁 涛,男,工程师,Te l:(025)52345193,E 2m a il:d ingt @jsc iq .gov .cn.基金项目:南京市科技局招标项目资助(N o.20050200121).高效液相色谱2串联质谱联用测定蜂王浆中的四种硝基呋喃类药物的代谢物丁 涛1, 徐锦忠1, 沈崇钰1, 吴 斌1, 陈惠兰1, 朱 春1, 赵增运1, 蒋 原1, 刘 飞2(1.江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心国家蜂产品基准实验室,江苏南京210001;2.热电(上海)公司,上海201206)摘要:报道了高效液相色谱2串联质谱联用测定蜂王浆中呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮4种硝基呋喃类药物的代谢物残留的方法。
以三氯乙酸作为蜂王浆的蛋白质沉淀剂,同时提供衍生化反应所需的酸性环境;使用4种同位素内标,补偿了衍生化效率、衍生后样品溶液的pH 值及光照对定量结果所产生的影响,极大地提高了定量的准确性。
实验结果表明,呋喃它酮代谢物的检测下限可以达到0.03μg /kg,其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的检测下限可以达到0105μg /kg (S /N 大于5);呋喃它酮代谢物的定量下限可以达到0120μg /kg,其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的定量下限可以达到0125μg /kg (S /N 大于10);线性范围为014～20ng /m L,添加回收率为9717%～10418%(内标校正),相对标准偏差(RSD )为217%～917%。
关键词:高效液相色谱;串联质谱;同位素内标;硝基呋喃类药物;代谢物;蜂王浆中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:100028713(2006)0520432204 栏目类别:研究论文D e te rm in a t io n o f M e ta b o lite s o f N it ro fu ra n A n t ib io t ics in R o ya lJ e lly b y H igh P e rfo rm a n ce L iq u id C h rom a to g rap h y 2T a n d em M a s s Sp e c t rom e t ryD I N G Tao 1,XU J inzhong 1,SH EN C hongyu 1,WU B in 1,CH EN H u ilan 1,ZHU C hun 1,ZHAO Zengyun 1,J I AN G Yuan 1,L I U Fe i2(1.N a tion a l B ee 2P rodu ct Referen ce L a bora tory,A n im a l,P la n t a n d Food In sp ection Cen ter (A PF IC )of J ia n gsu En try 2Ex i t In sp ection a n d Q u a ra n tin e B u rea u ,N a n jin g 210001,Ch in a;2.Therm o E lectron (Sha n gha i )Corp ora tion,Sha n gha i 201206,Ch in a )A b s t ra c t:N itrofu rans a re a group of w ide ly used ve te rina ry an tib io tics tha t have been banned in m any coun tries.Th is has gene ra ted a grea t dea l of in te res ts and dem ands fo r assay of n itro 2fu rans in an i m a l food p roduc ts.To ou r know ledge,th is is the firs t ti m e tha t a h igh p e rfo r m ance liqu id ch rom a tograp hy 2tandem m ass sp ec trom e try (H PLC 2M S /M S )m e thod has been success 2fu lly deve lop ed fo r s i m u ltaneous ly ana lyzing the m e tabo lites of fou r n itrofu ran an tib io tics (fu ra 2zo lidone,fu ra ltadone,n itrofu razone and n itrofu ran to in )in roya l je lly .T rich lo roace tic ac id so 2lu tion w as used bo th to p rec ip ita te p ro te ins and to p rov ide ac id ic reac tion cond ition.Fou r iso 2top e in te rna l s tanda rds w e re u tilized to i m p rove the quan tita tive p rec is ion.The li m its of de tec 2tion (LOD s )w e re 0.03μg /kg fo r the m e tabo lite of fu ra ltadone and 0.05μg /kg fo r the o the r th ree m e tabo lites.The li m its of quan tita tion w e re 0120μg /kg fo r the m e tabo lite of fu ra ltadone and 0125μg /kg fo r the o the r th ree m e tabo lites.The linea r range w as 014-20ng /m L fo r a ll the ta rge t ana lytes.The recove ries ca lib ra ted by in te rna l s tanda rd w e re in the range of 9717%-10418%w ith the re la tive s tanda rd devia tions (RSD s )of 217%-917%.It show ed tha t th is m e th 2od cou ld m ee t the requ irem en ts of na tiona l m on ito ring p lan in C h ina and the M in i m um R equ ired Pe rfo r m ance L i m its (M R PL )se t by the Eu rop ean U n ion.Ke y w o rd s:h igh p e rfo r m ance liqu id ch rom a tograp hy (H PLC );tandem m ass sp ec trom e try(M S /M S );iso top e in te rna l s tanda rd;n itrofu rans;m e tabo lites;roya l je lly 第5期丁 涛,等:高效液相色谱2串联质谱联用测定蜂王浆中的四种硝基呋喃类药物的代谢物 蜂王浆是一种组成十分复杂的蜂产品,具有极高的营养和保健价值。
但是抗生素的滥用,尤其是硝基呋喃类药物的使用,导致蜂王浆产品的质量受到了质疑。
硝基呋喃类药物由于其对人体潜在的危害性[1],已经被欧盟严令禁止使用[2]。
研究证明硝基呋喃类药物在脊椎动物体内会迅速分解,因此检测该类药物的稳定代谢物的方法已被广泛认可。
目前,所报道的检测硝基呋喃类药物代谢物的方法均为液相色谱2质谱联用[3-6]。
由于王浆的基质复杂,无法采用国内外已公布的检测动物组织、水产品和蜂蜜产品的方法进行检测。
本研究利用三氯乙酸溶液作为蜂王浆中蛋白质的沉淀剂,加入4种同位素内标以提高定量的准确性,采用高效液相色谱2串联质谱测定了4种硝基呋喃类药物的代谢物。
该法完全可以满足目前所有国家对该类药物的检测要求。
1 实验部分1.1 仪器和试剂 The r m o F inn igan Su rveyo r 液相色谱系统和TSQ Q uan tum U ltra AM 串联质谱仪。
甲醇(色谱纯)、三氯乙酸(分析纯)、乙酸乙酯(分析纯)、醋酸铵(色谱纯)、磷酸氢二钾(分析纯)、二甲基亚砜(分析纯)、邻硝基苯甲醛(NBA )(分析纯)。
标准工作溶液:呋喃唑酮代谢物(AO Z )、呋喃西林代谢物(SEM ・HC l )、呋喃它酮代谢物(AMO Z )和呋喃妥因代谢物(AHD ・HC l )均购买自S igm a 2A ld rich 公司(纯度≥98%),用甲醇配制成1m g /m L 的单标储备液,按实际检测需求,用流动相稀释为相应的混合标准工作溶液。
内标溶液:AHD 213C 3,AMO Z 2D 5,AO Z 2D 4,SEM 2HC l 2(13C,15N 2)质量浓度均为100μg /m L,均购买自W ITEGA L abo ra to rien B e rlin 2A d le rshofGm bH 公司(纯度≥98%),用超纯水配制成50ng /m L 的混合标准溶液。
1.2 样品的前处理 称取2100g 试样(精确到0102g ),置于50m L 具塞离心管中,加入100μL 50ng /m L 的内标混合溶液、4m L 水、2m L 25%(质量分数)三氯乙酸溶液,于液体混匀器上快速混合1m in,静置10m in;以2500r /m in 的速率离心5m in,转移上层清液于干净的50m L 玻璃离心管中,加入150μL NBA 溶液,置于37℃水浴中振荡过夜(16h )。
取出样品,冷却到室温后,加入4m L 磷酸氢二钾(1m o l/L )缓冲溶液,调节样品溶液的pH 至7～715。
加入8m L 乙酸乙酯,涡旋30s,以2500r /m in 的速率离心5m in,取上层乙酸乙酯溶液到10m L 玻璃试管中,在40℃水浴中用氮气吹干。
