细胞培养技术ppt课件

2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.保4 证生细长胞增顺殖利的 4、气体环境：
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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思考：动物血清的作用？
主要是：提供有利于细胞生长增殖所需的 激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏 的营养物质等。
加培养液
细胞悬浮液
限增殖的不死的癌症细胞， 形成的细胞群
原代培养 10代细胞
遗传物质 细胞株
未改变
动物细遗已胞传改培物变养质不细能胞系
50代细胞
传代培养
最终培养成生物体
无限传代
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一、动物细胞培养过程
7、什么是原代培养、 传代培养？为什么要进 行传代培养？
原代培养：
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养
传代培养：
培养的细胞→细胞分散→继续培养
进行传代培养的原因：
接触抑制
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一、动物细胞培养过程
8、传代培养中， 第10代细胞与第50 代以后细胞的主要 区别是什么？
细胞癌变,失去接触 抑制特性。
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一、动物细胞培养过程
9、动物细胞培养能否象植物组织培养那样获 得克隆个体？需要诱导其脱分化的过程吗？
不可以，因为高度分化的动物细胞的全能性受 到抑制。
不需要诱导其脱分化。
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一次 培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细胞

1、动物细胞培养过程涉及的概念
细胞贴壁、细胞的接触抑制、原代培养、 传代培养、细胞株、细胞系
2、动物细胞培养条件
3、植物细胞和动物细胞培养的比较
4、动物细胞培养技术的应用
练一练
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培 培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
（5）作为基因工程的受体细胞
6、植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分 培养结果
蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 促生长因子
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
获得细胞 或细胞分泌蛋白
本节内容小结
型可能变 酶(7.2-8.4)的活
化
性较高。
3、动物细胞培养过程中几个重要的概念
（1）. 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上
（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面 光滑、无毒、易于贴附。
（2）接触抑制
细胞从接种到长满 底物表面后，由于 细胞繁殖数量增多 相互接触后，不再 增加。
• （3）原代培养：从机体取出后立即培养的 细胞为原代细胞。一般把培养的第1代细胞 与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培
养成植株。
二4.、动动物细物胞体培细养胞的核正移确植过程技是术（和克A隆动）物
A. 原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株 C. 传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株

3 细胞培养的成本
细胞培养所需要的培养基、培养器具等设备和试剂成本较高，对实验室的经济投入和资 源管理提出了挑战。
常见的细胞培养方法
常见的细胞培养方法包括悬浮 培养、贴壁培养和3D培养等， 每种方法都有其特定的应用场 景和操作要点。
是人体组织、动物器官或者其他细胞培养实验中特定的细胞系。
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细胞培养的条件
细胞培养需要提供适宜的培养基、温度、湿度、气体环境等条件来满足细胞的生长需 求。
研究领域中的应用
细胞培养为科学研究提供了重要手段，帮助科学家探索细胞的生长、分化、信号传导等关键 生物过程。
细胞培养的挑战
1 细胞的易受污染
细胞培养实验容易受到各种污染，因此需要严格的操作规范和无菌技术来保证实验的准 确性。
2 细胞的稳定性
细胞在长期培养中可能会发生突变、漂变等现象，导致实验结果的不稳定性，需要进行 细胞株的验证和维护。
3
细胞培养的操作步骤
细胞培养的操作步骤包括细胞的种植、分离、传代、培养液的更换和细胞的检测等。
细胞培养的应用
生物医学领域中的应用
细胞培养在生物医学领域中广泛应用于药物筛选、疾病模型的构建和组织工程等重要研究方 向。
农业领域中的应用
细胞培养技术在农业领域中可以用于作物改良、病毒检测、种子培育等方面，提高农作物的 品质和产量。
《病毒的细胞培养》PPT 课件
在这份PPT课件中，我们将深入介绍病毒的细胞培养。通过精心设计的布局和 丰富的内容，帮助大家更好地理解细胞培养的背景、步骤、应用和挑战。
细胞培养概述
什么是细胞培养
细胞培养的意义
细胞培养是指将细胞从体内环 境转移到体外培养基内，为研 究和应用提供可控的实验条件。

植物细胞培养技术的基本技术：
一、植物材料的准备 二、培养基的准备 三、培养方法的选择
一、植物材料的准备
1、外植体
外植体：
植物组织培养中作为离体培养材料的器官或 组织的片段。
在继代培养时，将培养的组织切段移入新的 培养基时，这种切段也称外植体。
选取：
建立无菌材料时，取材的大小根据不同植物 材料而异。
植物培养物的生长取决于生长素和分 裂素的比例
高浓度生长素和低浓度生长素分裂素 刺激细胞分裂
低浓度生长素和高浓度生长素分裂素 刺激细胞生长
但是，过量赤霉素和酚类化合物能掩盖上述 现象。
（4）、需要有机氮源
有机氮源为蛋白质水解产物（如谷氨酰胺） 或各种氨基酸。
对细胞早期生长有利
氨基酸的加入主要是为了代替或增加氮源 的供应
常用培养基
MS、N6、B6、LS、RM-1964、B5、 White等。
MS培养基是Murashige（穆拉希吉）和 Skoog（斯科格）于1962年为烟草细胞培养 设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高， 是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量 高，其养分的数量和比例合适，能满足植物 细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较 广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培 养基的基本培养基。
原生质体培养 按 培养对象 分
单倍体细胞培养
按 培养基类型 分
固体培养 液体培养
按 培养方式 分
悬浮细胞培养
固体培养基
定义： 利用琼脂作为支持物的固体培养和固定化细胞培养
特点： 简便易行、培养所占空间小
常用的固化剂： 琼脂、藻酸盐、角叉藻聚糖、明胶、羟乙基纤维素、 聚丙烯酰胺、淀粉、硅胶
固体培养基
苏氨酸、甘氨酸和缬氨酸，通过灭活位于 叶绿体和细胞质上的谷氨酸合成酶而降低氮 的利用