常见致病菌

常见致病菌的检测

摘要：近年来食品药品安全的问题屡见不鲜，做好致病菌的检测，是防范于未然的措施，因而显得尤为的重要，也越来越受到人们的重视。这就要求我们对一些常见的致病菌检测技术的要有一定的了解。

关键词：致病菌，肠球菌，霉菌和酵母菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌。

一.肠球菌

（1）、形态与染色【1】

肠球菌为革兰阳性（G+）球菌,广泛分布于自然环境及人和动物消化道内。20世纪80年代以来，肠球菌严重感染的发生率和病死率明显升高，并且由于肠球菌的固有耐药和获得性耐药，使许多常用抗菌药物在治疗肠球菌感染时失败。因此，从分子水平对肠球菌致病因子、肠球菌引起的感染机制与治疗的研究显得尤为重要。肠球菌为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌，无芽胞，无鞭毛，为需氧或兼性厌氧菌。本菌对营养要求较高，在含有血清的培养基上生长良好。

（3）致病性【1】

一般而言，肠球菌的毒力不高。与金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌相比，肠球菌对大多数动物的半数致死量（LD50）值相当高，而且肠球菌很少引起蜂窝织炎和呼吸道感染。

肠球菌只有在宿主组织寄殖，耐机体非特异及免疫防御机制，并引起病理改变，才能导致感染。粘附测定显示肠球菌可通过细菌表面表达的为粘附素，吸附至肠道、尿路上皮细胞及心脏细胞。这些粘附素的表达亦受细菌生长环境的影响。另外，肠球菌可产生一种聚合物质（系一种蛋白表面物质，可聚集供体与受体菌，以利质粒转移），在体外增强其对肾小管上皮细胞的粘附。

细菌生长环境亦影响肠球菌与多形核白细胞反应。血清中生长的肠球菌与多形核白细胞反应较弱，而肉汤中生长的细菌反应较强。体外多形核白细胞对肠球菌的有效杀灭作用需血清补体蛋白参与，而抗肠球菌抗体可增强该作用。

（4）、肠球菌属主要检测步骤如下：【2】

方法一：肠球菌平板计数法检验程序

25g (mL) + 225 mL 缓冲蛋白胨水 ↓

10 倍梯度稀释

↓

选择2 个~3 个适宜连续稀释度，各取1 mL 分别加入灭菌培养皿

人体各部位常见的致病菌

一、人体中的常见的致病菌：

1、葡萄球菌：

属革兰氏阳性球菌。是人体皮肤上寄居最多的致病菌，也见于鼻咽等处。金黄色葡萄球菌致病力最强，主要产生溶血素、杀白细胞素和血浆凝固酶等，造成许多种感染，如疖、痈、脓肿和伤口感染等。金黄色葡萄球菌感染的特点是局限性组织坏死，脓液稠厚、黄色、不臭。也能引起全身性感染。

2、链球菌：

属革兰氏染色阳性球菌。存在于口、鼻、咽和肠腔内。链球菌的种类很多，溶血性链球菌、绿色链球菌和粪链球菌是常见的致病菌。溶血性链球菌能产生溶血素和透明质酸酶、链激酶等，溶解破坏细胞间质中的透明质酸、纤维蛋白和其他蛋白质，使炎症易扩散而缺乏局限化的倾向。脓液特点是比较稀薄，淡红色，量较多。典型的感染是急性蜂窝织炎、淋巴管炎等。绿色链球菌是一些胆道感染和亚急性心内膜炎的致病菌。粪链球菌属厌氧菌，常和大肠杆菌一同引起混合感染。

3、大肠杆菌：

革兰氏染色阴性。寄居于肠道内。对维生素K的合成有重要作用。它的单独致病力不大，若和其他致病菌在一起时，可造成严重的混合感染，如大面积烧伤感染、阑尾脓肿、急性胆囊炎等，产生的脓液稠厚，有粪臭。

4、绿脓杆菌：

革兰氏染色阴性。常寄居于肠道和皮肤上，它对大多数抗菌药物不敏感，故成为继发感染中的重要致病菌，特别是大面积烧伤感染时，可引起难以控制的绿脓杆菌败血症。绿脓杆菌感染的伤口常不易愈合，其脓液呈淡绿色，有腥臭味。

5、变形杆菌：

革兰氏染色阴性。存在于肠道和前尿道，为尿路感染、急性腹膜炎和大面积烧伤感染的致病菌之一。变形杆菌对大多数抗菌药物有耐药性。脓液具有特殊的恶臭。

6、无芽胞厌氧菌：

革兰氏染色阴性的专性厌氧菌。在一般外科感染中，此类细菌为重要的病原体之一。具有临床意义的有脆弱类杆菌、核梭形菌、消化球菌和消化链球菌等多种。这些无芽胞厌氧菌寄生在人体内的腔道，特别是胃肠道（结肠内的数量最多）、口腔、阴道等处。它们与需氧菌共同构成机体的正常菌群。正常情况下保持菌群相对平衡，对人体无害。其致病条件是：当某些原因（如血液供应障碍、组织坏死、需氧菌共生等）造成局部组织的氧化还原电势降低，便有利于无芽胞厌氧菌的繁殖。在机体许多封闭部位，单纯厌氧菌可造成感染，但多数厌氧菌是与其他需氧菌共生而引起感染的。厌氧菌感染脓液有恶臭。目前有效的治疗药是甲硝哒哇（灭滴灵）。

临床常见致病菌

概述临床常见致病菌（不包括真菌）：（1）分几大类和各类所包含的具体细菌种属；（2）生化鉴定要点；（3）各自的主要临床意义。

常见致病菌

表1

革兰阴性 革兰阳性

血培养 脑膜炎奈瑟球菌 伤寒及其他沙门氏菌 大肠埃希菌 肺炎克雷白菌 沙雷菌 铜绿假单胞菌 不动杆菌 流感嗜血杆菌 布氏杆菌 芽孢杆菌属等 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 草绿色链球菌属 肺炎链球菌 肠球菌 产单核李斯特菌 产气荚膜菌等

尿培养 淋病奈瑟球菌 肺炎克雷白菌

沙雷菌 大肠埃希菌 变形杆菌 沙门氏菌属 假单胞菌属等 金黄色葡萄球菌 腐生葡萄球菌 表皮葡萄球菌 肠球菌 链球菌等

痰培养 卡他莫拉菌 脑膜炎奈瑟球菌

流感嗜血杆菌 肺炎克雷白菌

假单胞菌 军团菌 多杀巴斯德菌等 肺炎链球菌 金黄色葡萄球菌

白喉棒状杆菌 结核分枝杆菌

放线菌 诺卡菌等

便培养 伤寒及其他沙门氏菌 志贺菌属 治病大肠埃希菌（出血 产毒 致病 侵袭）等 金黄色葡萄球菌 结核分枝杆菌 蜡样芽孢杆菌 艰难芽孢杆菌等

革兰阳性

葡萄球菌属

分类及常见种属：根据凝固酶实验分为凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌(包括中间和猪)，和凝固酶阴性的表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，里昂葡萄球菌，施氏葡萄球菌等

生化鉴别：

葡萄球菌与链球菌鉴别，葡萄球菌单双葡萄状排列，链球菌单双链状排列，除形态外，葡萄球菌触酶阳性，链球菌阴性。与微球菌区别，微球菌四联排列，产酸实验葡萄球菌阳性，微球菌阴性，杆菌肽敏感实验，葡萄球菌敏感，微球菌耐药。呋喃唑酮敏感试验则相反。

表2 三种葡萄球菌鉴别

金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌

血浆凝固酶 + — —

溶血素 + — —

耐热核酸酶 + — —

致病球菌 致病杆菌

葡萄球菌属（金黄色葡萄球菌） 链球菌属（化脓性链球菌） 埃希菌属（大肠杆菌） 沙门菌属（伤寒杆菌） 志贺菌属（痢疾杆菌） 分枝杆菌属（结核杆菌） 厌氧芽胞梭菌属（破伤风梭菌）

生物学特性 形态与结构 球形，多呈葡萄串状排列。无鞭毛，无芽胞，有的有荚膜。G+ 球形，链状排列。无鞭毛，无芽胞，幼龄菌多由荚膜。G+ 杆状，多数有周身鞭毛，有菌毛，无芽胞。G- 具有周身鞭毛，无芽胞，有菌毛，有荚膜。G- 短小杆状，有菌毛，无芽胞，无鞭毛。G- 细长微弯，无芽胞和鞭毛，用抗酸染色后为红色。G+ 细长，有周身鞭毛，芽胞球形于菌体顶端，G+转G-

抗原构造 有葡萄球菌蛋白A（SPA）、磷壁酸等。 A群链球菌细胞壁上多有多糖抗原，再外层有蛋白质表面抗原。 主要有菌体（O）、鞭毛（H）和K抗原三种。 O抗原产生IgM；H抗原产生IgG；Vi抗原有助于诊断。 有O、K抗原，依据O抗原将志贺菌属分为4群

代谢与培养 需氧或兼性厌氧，在普通培养基上生长良好，耐高温。 兼性厌氧，血平板或含血清的培养基培养。 代谢活跃能发酵乳糖，产酸、产气； 对营养要求不高，普通琼脂平板。 能分解葡萄糖，产酸、不产气，不发酵乳糖。普通平板 专性需氧，营养要求高，37℃，pH6.5～6.8 专性厌氧，营养要求不高，血平板，37℃，pH7～7.5

抵抗力 较强，80℃30min可杀死，对青霉素、红霉素、庆大霉素等过敏。 不强，60℃30min即被杀死，对消毒剂、青霉素、红霉素、磺胺敏感。 强，56℃60min、60℃15min有些仍可存活。 不强，65℃15min、75%乙醇可被杀死，对氯霉素敏感 较其他肠道杆菌弱，60℃10min即被杀死，对酸敏感 强，对湿度、紫外线、75%乙醇、链霉素等敏感。 繁殖体对青霉素敏感、磺胺类有抑制作用，芽胞的强

致病性和免疫性 致病性 致病物质 1、 凝固酶：游离凝固酶；结合凝固酶