南方根结线虫侵染黄瓜幼根组织病理学观察
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黄瓜根结线虫病的发生规律与防治措施翟乃家; 卢振宇【期刊名称】《《农业科技通讯》》【年(卷),期】2010(000)011【总页数】3页(P145-147)【关键词】黄瓜根结线虫; 发病规律; 传播途径; 防治措施【作者】翟乃家; 卢振宇【作者单位】山东省淄博市农业科学研究院淄博255033【正文语种】中文【中图分类】S436.421.2随着我国农业结构的调整、温室大棚的迅速发展和菜田复种指数的不断提高,致使土壤中的根结线虫数量剧增,病害面积、发病率逐年上升,防治难度越来越大,对黄瓜生产危害严重,已成为黄瓜生产的主要病害之一。
同时,根结线虫又加重了枯萎病、根腐病等土壤疾病的发生,严重地危害和阻碍了黄瓜产业的健康发展。
黄瓜根结线虫生活在土壤中,单纯依靠化学农药防治,不仅成本高,而且极易造成环境污染和高毒农药残留,不利于无公害黄瓜的生产。
因此,如何在有效防治黄瓜根结线虫病,已成为黄瓜生产中急需解决的问题。
我们结合多年的黄瓜生产实践和观察,初步摸索出一套防治黄瓜根结线虫病的有效措施,可以达到事半功倍的效果。
现将黄瓜根结线虫病的发生与有效防治措施介绍如下。
1 发病症状黄瓜根结线虫主要侵染黄瓜的根系,侧根和须根最易受害。
其对寄主的危害方式,一是直接的机械损伤,破坏寄主表皮细胞;二是以吻针刺伤寄主,分泌唾液,破坏寄主细胞的正常代谢功能而产生病变,使根表产生变形或使植株内部组织受到破坏。
黄瓜受害后典型症状为根部形成瘤状物根结,以侧根和须根上为多,小的根结肉眼可见,小米粒大小或呈微肿状,较大的根结呈球状,绿豆或黄豆大小,中后期根部可产生大型肿大物。
根结初为白色,表面光滑,后期变褐,粗糙,剖开根结,可见乳白色线虫。
发病后根系吸收、输送养分和水分的能力下降,形成弱苗,影响产量。
病轻时地上部无明显症状,病重时表现生长不良,矮小、黄化、萎蔫,似缺肥水或枯萎病症状,结瓜少而小,多为畸形。
根结线虫侵入造成的伤口有利于其他土壤病原物的侵入,常与枯萎病等土传病害共同发生,形成复合侵染而加重损失。
黄瓜根结线虫病
佚名
【期刊名称】《吉林蔬菜》
【年(卷),期】2003(000)004
【摘要】黄瓜根结线虫病在局部地区大棚、温室蔬菜发生相当严重,甚至造成全大棚、温室毁种。
〔症状)①其地上部分的症状为植株矮小,发育不良。
在土壤干旱和水分供应不足时,中午前后可出现萎蔫症状。
②根部症状是在须根和侧根上。
【总页数】1页(P36)
【正文语种】中文
【中图分类】S436.421
【相关文献】
1.黄瓜南方根结线虫病的根结大小与线虫各虫态数量间的关系 [J], 王玉玲;刘奇志;周海鹰;李娜;王丽;田雅婷
2.黄瓜根结线虫病的鉴别与防治研究 [J], 王霞; 梁小平; 李碧霞
3.兼防黄瓜根腐病和根结线虫病的淡紫拟青霉和哈茨木霉的筛选 [J], 张雅静;孔令安;宋美燕;张怡静;房庆;杨俊;彭德良;黄文坤;彭焕;朱英波
4.五种不同处理对温室黄瓜植株农艺性状、产量及根结线虫病害防控的影响 [J], 李志萌;崔丽朋;田朝辉;万秀娟;申庆华;张晓炎
5.41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂对黄瓜根结线虫病的防治效果 [J], 林雪;张桂娟;卢铁军;张晓晴;聂清燕;严文胜
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黄瓜根结线虫病黄瓜根结线虫病黄瓜根结线虫病(左)和二令幼虫(右)【病害名称】:黄瓜根结线虫病【症状特征】:主要发生在根部,侧根或须根上,须根或侧根染病后产生瘤状大小不等的根结。
解剖根结,病部组织里有很多细小的乳白色线虫埋于其内。
根结之上一般可长出细弱的新根,致寄主再度染病,形成根结。
地上部表现症状因发病的轻重程度不同而异,轻病株症状不明显,重病株生育不良,叶片中午萎蔫或逐渐黄枯,植株矮小,影响结实,发病严重时,全田枯死。
【发病规律】:在温室或塑料棚中单一种植几年后,导致寄主植物抗性衰退时,根结线虫可逐步成为优势种。
南方根结线虫生存最适温度25-30℃,高于40℃,低于5℃都很少活动,55℃经10分钟致死。
田间土壤湿度是影响孵化和繁殖的重要条件。
土壤湿度适合蔬菜生长,也适于根结线虫活动,雨季有利于孵化和侵染,但在干燥,或过湿土壤中,其活动受到抑制,其为害砂土中常较粘土重,适宜土壤pH4-8。
【防治措施】:1.选用抗病和耐病品种。
选用无病土进行育苗,培育无病壮苗。
移栽时发现病株及时剔除。
2.在根结线虫发生严重田块,实行与石刁柏2年或5年轮作,可收到理想效果。
此外,芹菜、黄瓜、番茄是高感菜类,大葱、韭菜、辣椒是抗耐病菜类,病田种植抗耐病蔬菜可减少损失,降低土壤中线虫量,减轻下茬受害。
保护地重病田,定植时,穴施10%力满库颗粒剂,每亩5公斤,有很好效果。
3.深耕或换土。
在夏季换茬时,深耕翻土25 厘米以上,同时增施充分腐熟的有机肥;或把25 厘米以上表层土全部换掉。
有条件地区对地表10厘米,或更深土层淤灌几个月,可在多种蔬菜上起到防止根结线虫侵染,繁殖和增长的作用,根结线虫虽然未死,但不能侵染。
4.黄瓜拉秧后,及时清除病残根,深埋或烧毁,铲除田间杂草。
5.夏季高温土壤消毒处理。
在夏季高温时,在大棚内撒施麦秸,再撒施过磷酸钙100 公斤左右,翻入地下,盖地膜,密闭大棚,使棚温高达70℃以上、土壤内10 厘米深温度高达60℃左右,闭棚15—20 天。
南方根结线虫在河北日光温室黄瓜上的种群动态李秀花;马娟;高波;王容燕;陈书龙【摘要】为明确蔬菜南方根结线虫(Meloidogyne incognita)在日光温室中的种群动态,对河北一年两茬日光温室黄瓜土壤中及根系上的线虫数量进行了系统调查.结果表明,在土壤中一年四季均可检测到2龄幼虫(J2)和卵.土壤中J2和卵的数量在7月中旬作物收获时达到高峰(450.1条/100 mL土和333.4粒/l00mL土),在7月19日-9月14日作物休闲季节均呈下降趋势,12月下旬秋冬茬作物收获时分别达到30.3条/100 mL和176粒/100 mL土.对冬春茬黄瓜,J2大量侵入期在3~5月,高峰期在3月下旬;3龄幼虫发生高峰期在4月下旬和5月中下旬;4龄幼虫发生高峰期在5月中旬和6月中下旬;根结数量在6月中下旬达到高峰.对秋冬茬黄瓜,J2和3龄幼虫发生高峰期均在10月中旬;4龄幼虫发生高峰期在10月下旬;12月下旬根系内雌虫数量和根结数量在秋冬茬黄瓜收获时达到高峰期.对一年两茬日光温室黄瓜,根结线虫对冬春茬的危害重于秋冬茬.【期刊名称】《河北农业大学学报》【年(卷),期】2016(039)005【总页数】5页(P87-91)【关键词】南方根结线虫;种群动态;侵染;黄瓜;日光温室【作者】李秀花;马娟;高波;王容燕;陈书龙【作者单位】河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室,河北保定071000;河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室,河北保定071000;河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室,河北保定071000;河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室,河北保定071000;河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室,河北保定071000【正文语种】中文【中图分类】S432.4+5;S641.2根结线虫(Meloidogyne spp.)是为害最严重的植物病原线虫,在世界各地广泛分布,可寄生于3000多种植物,尤以茄科、葫芦科和十字花科等植物受害严重[1]。
10%噻唑磷颗粒剂防治黄瓜根结线虫药效研究摘要进行10%噻唑磷颗粒剂防治黄瓜根结线虫效果试验,结果表明:用10%噻唑磷颗粒剂进行土壤处理防治黄瓜根结线虫有较好的效果,持效期较长,推荐用量22.5~30.0 kg/hm2。
关键词10%噻唑磷颗粒剂;黄瓜根结线虫;防效黄瓜是人们喜爱的蔬菜之一,在各地广泛种植,西安地区也不例外。
但近年来,由于受黄瓜根结线虫的危害,在根部形成瘤状根结,使黄瓜根系受到破坏,影响根系对水分的吸收,造成植株生长缓慢,主要以南方根结线虫(M. incognita)为侵染危害优势种群[1]。
同时,由于线虫在黄瓜根部造成伤口,对病原菌侵入十分有利,使黄瓜枯萎病等土传病害发生加重,严重影响了黄瓜的产量与品质[2]。
为了减少黄瓜根结线虫造成的危害,研究10%噻唑磷颗粒剂、5%克线丹颗粒剂对黄瓜根结线虫的防治效果,现将试验结果报告如下。
1 材料与方法1.1 试验地概况试验在西安市长安区砲里街办大棚内进行,土壤为黑油土,肥力中等,pH 值7.8。
2011年7月25日播种,8月20日以黑籽南瓜作为砧木进行嫁接,9月3日移栽。
移栽前基施有机肥15 t/hm2、复合肥750 kg/hm2。
1.2 试验材料供试药剂:10%噻唑磷颗粒剂(日本石原产业株式会社生产,市购)、5%克线丹颗粒剂(苏州富美实植物保护剂有限责任公司,市购)。
供试黄瓜品种:津优3号。
防治对象:根结线虫(Meloidogyne spp.)。
1.3 试验设计试验根据所用药剂及其剂量不同共设5个处理,分别为10%噻唑磷颗粒剂15 kg/hm2(A)、22.5 kg/hm2(B)、30.0 kg/hm2(C),5%克线丹颗粒剂150 kg/hm2(D),以空白作对照(CK)。
4次重复,随机区组排列,小区面积10 m2。
1.4 施药及调查方法10%噻唑磷颗粒剂、5%克线丹颗粒剂在定植前一天分别拌细土撒于畦面,然后翻耕20 cm深,使药剂和土壤充分混匀。
黄瓜根结线虫,又称南方根结线虫[1]。
随着设施蔬菜栽培面积的不断增加和种植年限的不断延长,使固原市原州区设施蔬菜园区黄瓜根结线虫病的发生呈逐年加重趋势[2]。
据2009—2010年调查数据表明,黄瓜根结线虫病在头营镇马园蔬菜园区、官亭镇乔洼设施园区发生比较重,棚室死苗率一般为15%~42%,最严重的几乎绝收。
为了探明黄瓜根结线虫病在原州区的发生规律,有效指导菜农开展防治工作,笔者于2009—2010年连续2年对黄瓜根结线虫开展了相关试验研究,初步摸清其发生规律及防治方法。
1病原经室内鉴定表明,幼虫呈细长蠕虫状,病原线虫雌雄异型,雄成虫线状,无色透明,尾端稍圆,大小1.00~1.50mm×0.03~0.04mm 。
雌成虫梨形,多埋于寄主体内,大小0.41~1.59mm×0.26~0.81mm ,每雌线虫可产卵300~800粒。
2发病症状该病仅在根部发生,尤以侧根和枝根最易受害。
须根或侧根染病后产生大小不等的瘤状根结。
对根结解剖后可发现有很多细小的乳白色线虫埋于病部组织[3]。
根结上长出的细弱新根可致寄主再度感染。
染病后轻者地上部症状不明显;重者植株发育不良、矮小、叶片中午萎蔫或逐渐黄枯,影响结实,有的甚至全田枯死。
此外,感染该病后,黄瓜对其他病害的抗性也明显减弱。
3传播途径初侵染源:病土、病苗及灌溉水;远距离移动和传播则依靠流水、风、病土搬迁、带病的种子、农机具沾带的病残体和病土和其他营养材料以及人的各项活动。
4发生条件雌虫产卵后经数小时在寄主根内形成1龄幼虫,脱皮后钻出卵壳即为2龄幼虫,后在土中移动,寻找根尖,从根冠上方侵入,定居在生长锥内,并分泌刺激物,形成巨形细胞和根结(虫瘿)。
病原线虫以2龄幼虫和卵囊中的卵随病残体在土壤中越冬,生长季节可呈对数进行增殖。
温度:适宜的繁殖温度是25~30℃,低于5℃或高于40℃则活动较少,在55℃条件下持续10min 则可致死;湿度:一般来说,适合蔬菜生长的土壤湿度条件也适合根结线虫,适宜湿度40%~70%;pH 值:适应范围较宽,4~8均可;地势高燥、土质疏松、盐分低的中性砂土适宜根结线虫的活动,发病较重。
黄瓜根结线虫病的发生和防治黄瓜根结线虫病,分布很广,我国各地均有发生。
寄主植物较多,除黄瓜外还有丝瓜、苦瓜、冬瓜、西瓜、甜瓜、番茄、辣椒、茄子等多种作物。
它不仅直接影响蔬菜作物的生长发育,还可通过根结线的危害,导致或加剧镰刀枯萎病的发生,促使植株快速死亡。
症状此病仅发生于根部,尤以侧根和枝根最易受害。
根部被害部位产生大小不等的瘤状物或根结,形如鸡爪状。
剖视其内部,可见病组织中有白色细小梨形雌虫埋于内。
在根瘤或根结部上常常产生稀疏细小的新根,之后新根又被病染呈现根结肿大。
重病株地上部分表现为生长衰弱,植株矮小、叶色淡而无光泽,不结实或结实不良。
天气干旱或水分供应不足时,中午前后地上部常出现萎蔫状,早晚气温低时,也能恢复正常。
病原此病是由根结线虫侵染所致。
雌虫头尖,腹部膨大,整体呈鸭梨形,大小为0.45~1.6×0.26~0.80毫米。
雌虫呈线形,无色透明,大小为1~1.5×0.03~0.04毫米,主要生活在土中。
发生规律根结线虫以第二龄幼虫在土壤中越冬。
每个雌虫可产卵300~600粒,雌虫当年产的卵不孵化,留在虫瘿(瘤肿内)中,随病残体在土壤中越冬。
到次年环境条件适宜时,越冬卵孵化为幼虫。
也有以幼虫在土壤中越冬,幼虫侵入寄主前,在土中作短距离移动,寻找寄主。
幼虫多从嫩根部分侵入,刺激被害寄主细胞加速分裂,使受害处形成肿瘤或根结(虫瘿),根结线虫就在虫瘿内发育。
幼虫发育至三龄时开始两性分化,四龄时性成熟,并开始交尾产卵。
雄虫不久离开寄主在土中死亡。
孵化的第一龄幼虫留在卵壳内,到第二龄才出卵壳,并离开寄主植物到土中,寻找新的侵染点,进行再次侵染或在土中越冬。
影响发病的因素土壤温湿度与发病的关系。
土壤温度在25℃~30℃,土壤持水量在40%左右时,适宜于根结线虫的发育。
其不耐高温,通常在55℃左右经5分钟即死亡。
地势和土质与发病的关系。
根结线虫是好气性的,凡地势高燥,土质疏松的中性砂土,适宜根结线虫的活动,因而发病重。
黄瓜根结线虫病的发生与防治摘要介绍黄瓜根结线虫病的病原、发病症状、传播途径及发生条件,并提出综合防治措施,以为黄瓜根结线虫病的防治提供参考。
关键词黄瓜;根结线虫病;发生;防治黄瓜根结线虫,又称南方根结线虫[1]。
随着设施蔬菜栽培面积的不断增加和种植年限的不断延长,使固原市原州区设施蔬菜园区黄瓜根结线虫病的发生呈逐年加重趋势[2]。
据2009—2010年调查数据表明,黄瓜根结线虫病在头营镇马园蔬菜园区、官亭镇乔洼设施园区发生比较重,棚室死苗率一般为15%~42%,最严重的几乎绝收。
为了探明黄瓜根结线虫病在原州区的发生规律,有效指导菜农开展防治工作,笔者于2009—2010年连续2年对黄瓜根结线虫开展了相关试验研究,初步摸清其发生规律及防治方法。
1病原经室内鉴定表明,幼虫呈细长蠕虫状,病原线虫雌雄异型,雄成虫线状,无色透明,尾端稍圆,大小1.00~1.50 mm×0.03~0.04 mm。
雌成虫梨形,多埋于寄主体内,大小0.41~1.59 mm×0.26~0.81 mm,每雌线虫可产卵300~800粒。
2发病症状该病仅在根部发生,尤以侧根和枝根最易受害。
须根或侧根染病后产生大小不等的瘤状根结。
对根结解剖后可发现有很多细小的乳白色线虫埋于病部组织[3]。
根结上长出的细弱新根可致寄主再度感染。
染病后轻者地上部症状不明显;重者植株发育不良、矮小、叶片中午萎蔫或逐渐黄枯,影响结实,有的甚至全田枯死。
此外,感染该病后,黄瓜对其他病害的抗性也明显减弱。
3传播途径初侵染源:病土、病苗及灌溉水;远距离移动和传播则依靠流水、风、病土搬迁、带病的种子、农机具沾带的病残体和病土和其他营养材料以及人的各项活动。
4发生条件雌虫产卵后经数小时在寄主根内形成1龄幼虫,脱皮后钻出卵壳即为2龄幼虫,后在土中移动,寻找根尖,从根冠上方侵入,定居在生长锥内,并分泌刺激物,形成巨形细胞和根结(虫瘿)。
病原线虫以2龄幼虫和卵囊中的卵随病残体在土壤中越冬,生长季节可呈对数进行增殖。
杨凌地区黄瓜根结线虫种类鉴定伏召辉;仵均祥【摘要】明确杨凌地区黄瓜根结线虫的种类,为有效防治奠定基础,本试验采用传统形态学鉴定方法,对采自杨凌地区东魏店、西魏店、南庄村以及殿背湾露天与大棚黄瓜地的根结线虫样本进行了分离鉴定.结果表明,杨凌地区危害黄瓜的根结线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita Chitwood).【期刊名称】《陕西农业科学》【年(卷),期】2010(056)005【总页数】3页(P30-32)【关键词】黄瓜;根结线虫;形态学鉴定【作者】伏召辉;仵均祥【作者单位】西北农林科技大学,植保学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,植保学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文黄瓜(Cucumis sativus Linn.)是我国广泛种植的重要蔬菜之一。
近年来,因为其经济效益显著,生产上连年种植,并且种植面积逐年增加,已经成为杨凌地区的主要蔬菜作物。
根结线虫(Meloidogyne spp.)是植物病原线虫中种类最多,分布最广,危害最严重的一类,1855年Berkeley最先在英国黄瓜根际发现根结线虫[1],随后许多学者相继进行了研究。
黄瓜根结线虫的发生给黄瓜生产带来巨大的损失。
在适宜的环境条件下,黄瓜根结线虫能迅速繁殖,严重影响黄瓜正常生长发育,轻者减产20%-30%,重者减产达50%-70%,甚至绝产[2]。
目前,生产上对根结线虫的防治主要是利用化学药剂和抗病品种,但效果并不理想,原因在于根结线虫种间致病性和抗药性差异很大[3],因此,对根结线虫种类的准确鉴定就成为根结线虫有效防治的前提条件。
鉴于此,笔者对陕西省杨凌地区黄瓜根结线虫进行分离鉴定,旨在明确当地黄瓜根结线虫的种类,为黄瓜抗病育种和综合防治提供理论依据。
1 材料与方法1.1 症状观察在黄瓜地选取疑似根结线虫危害植株,拔出根部检查有无根结线虫,确认是否属根结线虫危害,然后对根结线虫危害植株进一步仔细观察并记录害状特点。
武威市黄瓜根结线虫病病原鉴定
漆永红;吕和平;杜蕙;曹素芳;高赟
【期刊名称】《甘肃农业科技》
【年(卷),期】2009(000)009
【摘要】对甘肃省武威市黄瓜根结病病原线虫进行了分离鉴定,确定该市黄瓜根结病病原线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita).
【总页数】3页(P9-11)
【作者】漆永红;吕和平;杜蕙;曹素芳;高赟
【作者单位】甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃,兰州,730070;甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃,兰州,730070;甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070
【正文语种】中文
【中图分类】S436.3
【相关文献】
1.豫北地区黄瓜根结线虫病个体扩展动态与病原鉴定 [J], 刘鸣韬;常庆喜
2.黄瓜南方根结线虫病的根结大小与线虫各虫态数量间的关系 [J], 王玉玲;刘奇志;周海鹰;李娜;王丽;田雅婷
3.黄花倒水莲根结线虫病的病原鉴定 [J], 章淑玲;陈晓波;丁玲
4.栀子根结线虫病的病原鉴定 [J], 陆秀红;黎达境;黄金玲;李红芳;张禹;刘志明
5.大庆温室黄瓜根结线虫病原鉴定 [J], 姬妍茹;肖湘;张正海;李国巍;董艳;杨庆丽;高宇;聂迪;石杰
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中国农业大学学报2008,13(4):5卜56JoumalofChinaAgriculturaIUniversity南方根结线虫侵染黄瓜幼根组织病理学观察刘奇志1李娜1’2王丽2谢德燕1(1.中国农业大学农学与生物技术学院,北京100193;2.中国农业大学生物学院,北京100193)摘要人工接种南方根结线虫(MP£oidogy行incog疗i£口),观察不同侵染时间黄瓜根部组织的病理特征。
结果显示:接种后6d的根尖分生区、伸长区出现膨大、对称的根结,根中心的原形成层细胞分化出巨型细胞;10d在根毛区及以上部位出现既有对称又有偏于一侧的根结,周围有原生木质部导管出现,根结中巨型细胞阻断了导管}16d次生维管组织提早出现;20~30d导管纵向排列无序,形状扭曲,皮层中有新维管组织产生。
总之,随侵染时间的延长,根部受害部位逐渐由内皮层扩展至皮层,根结逐渐由巨型细胞、提早形成的次生维管组织以及皮层中的新维管组织共同形成;导管逐渐受阻,排列扭曲无序。
关键词黄瓜;南方根结线虫;根结;巨型细胞;维管组织;病理结构中图分类号S436.421.29;S432.25文章编号1007—4333(2008)04一0051一06文献标志码AHistOpathoIOgicaIStructureofcucumberradiCIeinfeCtedbyrOOt-knOtnematOdeLIUOi.zhil,LINal”,WANGL.2,XIEDe-yanl(1.co¨ege0fAg舢myandBiot∞hnoIogytChinaAgrjcuIturalUniVer8jty,朗ijing100193,ChinaI2.coIIegeofBio嘲icalScience,ChinaAgrlcuIturalUniVersity,鼬ijing100193,china)Abs”actPathOIogjcalfeaturesOfacucumberradicIetIssueinocuIatedwilhrool·knOtnematodes(RKN,Me『ofdDgynjn—cog几jfa)wereobserVedOndifferentdays.Si×daysafterinoculaliOn,thecucumbernD0ttipwass¨ghtIyswolIenandSymmetricaIr∞t—knOtswereOb∞rvedatthemeristematicande10ngatiOnZ0nes.Giantce¨sweredIfferentiatedbyp旧一viOuScambiumcefIsinthecenter0f竹IercDt,10daysafterinocuIatiOn,symmetricaIandsecOndaryroot.knOtswereob一∞~edatther00thairandupperZones.Ves∞Iswere∞paratedbygiantceIIs,aroundwhichproIoxylemVes∞Iswereob∞rvedll6daysafterinocuIation,hyp弘Va∞uIartI胬ueappearedear¨erthannormaI;20—30daysafterinocuIation,theverticalarrangementofVes∞lswasdisordered,shapewasdistortedandanewVascuIarti豁ueappearedinlhecortex.WithtimeafterinocuIationwithRKN,theiniuredDartsoftheroottissuedevelopedfromendodermtocorte×,therOot-knOtsweregradualIyfOrmedbygiantce¨s,earIierappearedhypo-VasculartissuesandnewVasculartissuesinthecOrte×;VesseIswere8u竹ocatedgradua¨yuntiI廿1eyweredi∞rderedanddislortedinshape.Keywordscucumber;root-knolnemalode,nD0t—knol,giantce¨IVascuIartissue;pathoIogicaIstructu怕以南方根结线虫(MPzoidogynPi行cDg,2i£口)、爪哇根结线虫(M.,口撇,lif口)、花生根结线虫(M.口rP一,z口r缸)和北方根结线虫(M.^口p缸)为主要植物病原的根结线虫危害多种作物[1]根部,造成重大病害,其中瓜类、茄类、豆类作物受害最重[2]。
关于线虫问题,多数研究集中在防治方面,近些年在抗性基因定位、克隆、品种分子选育等方面也有研究报道[3],但对根结线虫侵染后根部组织结构变化的研究较少,仅见少量有关巨型细胞的报道陆川。
如,爪哇根结线虫(M..『口口口以i∞)侵染豆科植物(Ⅵ一c缸厂口妇)后正常细胞核多次分裂而胞质不分裂,从而形成巨型细胞[43;巨型细胞过多消耗寄主营养,影收稿日期:2008一01—15基金项目:国家“863”计划课题(2006AA062354)作者简介:刘奇志,教授,主要从事线虫的生物防治研究,Dmail:lqzzyxl26@126.com}王丽,副教授,通讯作者,主要从事植物超微结构与病变特征研究,纪zhang@cau.edu.cn中国农业大学学报2008年第13卷响植物体营养和水分的运输[41;根结线虫侵染鹰嘴豆(chickpea)后所产生的巨型细胞来源取决于取食位点细胞,位点不同,细胞来源可能不同,由此推断巨型细胞可以来源于多种细胞[51;不同种的根结线虫,侵染产生的巨型细胞数量不同,每个巨型细胞内的细胞核数目不同,取食位点也不同[5。
61;植物对根结线虫的抗性表现在植物生长过程中对巨型细胞的解体形式,如南方根结线虫侵染不同品种的烟草,产生的巨型细胞在不同品种中的解体形式不同,抗性品种中所产生的巨型细胞以空洞化的形式解体,以此枯竭根结线虫的食物来源,最终导致根结线虫饥饿死亡,由此认为巨型细胞空洞化具有积极意义,可能是寄主植物的一种抗性机制口]。
但是,此时的巨型细胞毕竟已经导致了植物过多营养的消耗以及营养和水分的运输[8]。
因此,跟踪观察根结线虫侵入寄主植物后不同时间内巨型细胞的形成部位和来源分化、维管组织的病理学特征,对及时采取有效措施控制根结危害部位的扩展、进而控制生产中根结线虫的危害有指导意义。
本研究拟观察南方根结线虫侵染黄瓜(CHcH—missn£而"s)寄主后,随侵染时间的延长,根部根结的病理结构变化,以明确根部受害时间、部位及病理特征,为进一步探讨根结线虫的致病机理、确定防治时间、选择或研制有效的防治药剂提供参考。
l材料与方法1.1根结线虫收集及接种自来水洗带有大量根结的寄主根系,去表面土后,1%(质量分数)的NaCl0消毒4min,自来水冲洗3min,蒸馏水漂洗4次,剖取根上的卵块置于30肚m尼龙筛上,室温孵化二龄幼虫,每日收集幼虫,4℃保存Ⅲ,取近5d内收集的幼虫接种[6’81。
1.2幼苗培养花卉营养土(吉林省德惠市芳洁花土厂生产)、沙子和黏土按3:3:o.5比例(体积比)混合,高压灭菌锅121℃、0.105MP大气压下湿热灭菌40mim,以杀死其中的微生物和线虫。
将灭菌土装入具有小格(上底4.5cm×4.5cm、下底3cm×3cm、高5cm)的培养盘内,装2盘,每盘72棵。
黄瓜种子(市售千秋四号)浸泡发芽后,分别埋入方格中,每格种子1粒。
28℃、14h和20℃、10h光照培养箱培养,每2d淋或浇1次水。
长出第1片真叶时(约6d)在其中一盘内每孔接种根结线虫约150条,作为处理,未接种根结线虫的一盘作为对照。
接种后每2d取样观察1次,记录黄瓜根系根结数量、大小,并进行染色、切片观察。
1.3根系透明及染色分别取接种苗及对照苗6株,次氯酸钠一酸性品红法染色观察,酸性甘油(加若干滴5mol/LHCl)保存[引,于OlympusBX51光学显微镜下观察根结的形成及其部位,并拍照。
1.4石蜡切片及染色南方根结线虫在19.5℃下生活周期为44d,30℃条件下生活周期20d[10]。
本试验黄瓜幼苗培养温度为20~28℃,观察至第30天根表面见到卵块止(根结线虫1个生活周期)。
从接种后第3天开始,每2d取接种及对照幼苗各3株切片染色。
第1次取初发现的根结,之后每次取根系上较大的根结,对照苗取根系对应部位。
FAA固定24h后每隔1h依次用体积分数分别为70%、80%、90%、95%、100%的酒精脱水,其中100%酒精脱2次;二甲苯透明后60℃浸蜡包埋;旋转切片机横、纵切片,厚度10似m;动物胶粘片于载玻片上,40℃烘干,番红一固绿对染,加拿大树胶封固[11。
12。
,0lympusBX51光学显微镜下观察并拍照。
2结果与分析2.1根结数量及根结最大直径观察黄瓜幼苗接种根结线虫后,在观察周期内,根结数量及根结最大直径变化随接种天数的增加而增加(图1)。
接种后6d,在接种苗的各级侧根根尖部位开始见有根结(图2(c)),直径最大可达0.5mm,而对照根相应部位只有O.1mm;接种后10d,对照根系生长正常,主根明显,下胚轴笔直,苗根的相应部位只有O.2mm(图2(a)),而接种苗主根不明显,下胚轴弯曲。
根尖部位及远离根尖的部位均有明显根结(rk),既有对称的又有偏于一侧的,部分根结成串存在(图2(b)),直径最大可达1.1mm;16d时接种苗根结数量明显增多,直至第30天时平均每株幼苗根结数增加到54.5个,根结直径最大可达2.8mm(图1),而对照根无根结,相应部位只有O.4mm。
2.2根系整体观察及整体透明染色观察本实验观察到根结出现的第一时间在接种后第6d,根尖部位整体透明NaClo酸性品红染色后,观察到红色膨大、对称的根结,最初出现部位主要在各级侧根尖端的分生区及伸长区(图2(c));接种后8第4期刘奇志等:南方根结线虫侵染黄瓜幼根组织病理学观察53嚣、赧埒轻接种后天数量蹬删好骧斗<嚼圈1根结线虫接种天数与根结数量及根结最大直径的关系Fig.1Relationshipbetweennematodeincubationperiodandr∞t—knotquantityanditsbiggestsized,通过NaClo酸性品红染色,在伸长区之上的根毛区及更上方可见侵入根内的二龄根结线虫(图2(f));接种后10d,根系整体观察,根结线虫侵染的幼苗主根不明显,下胚轴弯曲,根结明显,有的连接成串,可见既有对称又有偏于一侧的根结(图2(b))。