第３２卷第２期 ２０１３年３月 华中农业大学学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＶｏＩ＿３２ Ｎｏ．２ Ｍａｒ．２０１３。９Ｏ～９６
鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养
及生物学特性
边艳超 牧 仁Ｌ 李向臣。 李云章 关伟军 １．内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特０１００１８； ２．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京１００１９３
摘要为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性，取３０￣５０日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌，分离培 养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示，试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞，原代培养并传 代至１６代，免疫细胞化学染色检测卫星细胞表面特异性标志Ｄｅｓｍｉｎ、ＭｙｏＤ呈阳性表达，ＲＴ－ＰＣＲ检测 Ｄｅｓｍｉｎ、 Ｍ 、Ｍｙｆ５、ｐａｘ７呈阳性表达；绘制生长曲线，结果说明细胞具有较强增殖能力；应用流式细胞仪对细 胞进行周期分析，结果显示Ｓ期细胞所占比例为８．９４ ；骨骼肌卫星细胞向成肌细胞诱导１０ ｄ后，免疫细胞化 学染色检测成肌特异性标志骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达；骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞诱导７ ｄ后，油红（）染色 呈阳性，ＲＴ－ＰＣＲ检测脂肪细胞特异性标志ｐｐａｒ７、ＬＰＬ呈阳性表达。结果表明试验成功建立了鲁西黄牛胚胎 骨骼肌卫星细胞的体外扩增培养体系，且该骨骼肌卫星细胞有发育形成肌管和脂肪细胞的多项分化潜能。 关键词鲁西黄牛胚胎；骨骼肌卫星细胞；体外扩增；培养体系；增殖能力；分化 中图分类号 Ｓ ８２３ 文献标识码Ａ 文章编号１０００—２４２１（２０１３）０２—００９０—０７
骨骼肌卫星细胞（ｓｋｅｌｅｔａｌ ｍｕｓｃｌｅ ｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｃｅｌｌｓ），称肌肉干细胞（ｍｕｓｃｌｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ），最早由 Ｍａｕｒｏ等＿１］在蛙骨骼肌中发现。多年的研究表明， 骨骼肌卫星细胞是位于肌细胞膜和基膜之间的一种 经特化的、具有增殖和多项分化能力的生肌干细胞， 是组织工程理想的种子细胞。对成年的哺乳动物而 言，卫星细胞是肌肉损伤修复或再生的中介［２］。骨 骼肌卫星细胞一般处于静息状态，当骨骼肌受到负 重、外伤等外界刺激后，卫星细胞被迅速激活，便具 有了增殖分化、融合成肌管、再形成肌细胞的能 力＿３ ］。在不同培养条件下，骨骼肌卫星细胞能分化 为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞等不同 胚层的细胞，这种可塑性吸引了众多研究者的目光。 骨骼肌卫星细胞在骨骼肌早期生长发育以及再生中 发挥重要作用，因此在骨组织创伤修复和组织工程 等临床应用中具有广泛的应用前景［５］。 目前，学者们已成功地分离出人、鼠、猪、鸡等骨 骼肌卫星细胞＿ｌ６。 ，但对牛的骨骼肌卫星细胞的分 离培养及分化潜能的研究尚未见报道，本试验采用 联合酶消化法和差速贴壁法成功分离得到鲁西黄牛 的骨骼肌卫星细胞，并证实该细胞具有发育形成肌 管和脂肪细胞的多项分化潜能。 １材料与方法
微生物群对黄牛消化 系统的意义 山西省临猗县畜牧兽医局 周 鹏 李亚蓉 动物的消化道内都存在有不同的微生物群，这些微生 物群在正常情况下，保持着相对平衡的生理性组合，对动 物的消化吸收、新陈代谢、生理健康起着重要的作用。现特 就黄牛消化道中微生物群的作用和意义作一浅述，以对微 生物群在黄牛消化道中的分类、利害或定居作进一步科学 分析及确切认识。从而利用微生物群的生存环境、作用机 理、互动互斥为黄牛的消化吸收、免疫功能提供一个安全 生产、健康成长的良好平台。 １．概念 微生物群是动物消化系统各个不同部位长期定居的 各种有益有害细菌、真菌的总称，生物学称之谓微生态系。 微生物群的定居定位、生理生化及相互间的平衡对黄牛及 其他动物的消化机能、营养吸收、新陈代谢等有着十分重 要的意义。 ２．分类 微生物群根据其生理特性、生化作用、定居部位的不 同约有３００多种，大体可分为三种类型： （１）致病菌群包括有假产气菌、变形杆菌、葡萄球 菌、梭状芽胞杆菌、肠沙门氏杆菌、肠毒原珠菌、痢疾杆菌、 条件性致病菌等。致病菌在正常时，保持着与其他细菌在 数量上的相对平衡，不可能致动物发病。但在环境条件突 变、外来细菌侵入的情况下，便可大量繁殖增数，使消化道 内微生态系的平衡遭到破坏，黄牛及其他动物呈现各种病 理状态，是产生腹泻、便秘、肠道感染、肝损伤、恶性肿瘤及 脑炎的罪魁祸首。 （２）￣Ｌ－－Ｊ－致病又对动物体有益的菌群包括肠球菌、 大肠杆菌、链球菌、拟杆菌等。此类细菌既可致病，产生毒 ２４农业拗ｌ ｉ｛搐 素、致癌致脑炎因子，又能在胃肠道中起分解作用，对黄牛 肠道中粗纤维的消化起到一定的作用。同时可排斥抑制外 来有害菌的生长，刺激免疫功能的产生，帮助肠道中残留 食物的再消化及矿物质的吸收。我们把这类菌群称为中型 菌群。 （３）有益茵群有双歧杆菌、乳酸杆菌、真菌类等。此 类菌群少量存在于黄牛的瘤胃，大部分存在于结肠内，对 消化吸收、抑制外来菌的生长、刺激机体产生免疫功能、合 成某些维生素起着极为重要的作用，是动物消化系统绝对 不可缺少的微生物群体。 ３．意义 以上三类菌群在黄牛健康状况下，在消化道各胃肠段 的分布合理，数量及定居处于平衡状态，而且有互动保护 作用，所以黄牛机体能够进行正常的生理活动，维持健康 的生命。一旦菌群遭到破坏，ａＰ＃ｌ＂来有害菌的侵入，外界环 境的突变、饲草饲料霉变、日粮配合不当等不利因素，皆可 致微生物群失衡，动物机体即可发病，此时有害菌群峰值 升高，有益菌群峰值降低，中性菌群中的可致病菌与有害 菌大量繁殖并产生毒素，刺激胃肠黏膜通透性增强而进入 血液，使黄牛产生不同类型的病症。尽管它们之间有相互 激活与保护作用，但出现以上情况时，也难以发挥作用。因 此，微生态系在黄牛消化道中的平衡与失调对黄牛的生 理、生化、健康有着至关重要的意义。 ４．结束语 微生物群在动物消化道中的存在，是动物与疾病斗争 的结果，也是动物在消化吸收、新陈代谢、生理生化过程中 必需的重要物质。
哪里有卖鲁西黄牛的？鲁西黄牛养殖利润如何？
鲁西黄牛是一种品质很优良的牛种，它的体格强壮，体型高达，肌肉壮硕。肉质纹理呈现大理市纹路。在我国肉牛界有很高声誉。现如今在我国很多地方都有开办肉牛养殖场，在牛种的选择上，鲁西黄牛是一种比较热门的选择，那么，哪里有卖鲁西黄牛的？鲁西黄牛养殖利润如何呢？现在我们就来了解一下吧。
哪里有卖鲁西黄牛的？
鲁西黄牛主要集中在山东地区，建议去那边采购，货源正宗。
鲁西黄牛养殖利润如何？
体重300斤左右的肉牛公牛牛犊，需投资3000元左右，每月均匀用草300斤左右，折现金100元上下。精密料每月240斤左右，折现金300元上下。如牛有各种疾病的预防与食盐，每月按50元计算。饲养200头牛需饲养员3人，筹备草料与管理1人。人均工资每月按
2000元计算，饲养半年合计工资5万。每头牛合工资费用170元。如每月均匀生长110斤那么半年就能够生长700市斤左右，加上原来买的300斤合计就能够到达1000斤以上。
投资如下：
1.牛犊：3000元
2.饲料：400元（一个月，单纯饲料饲养的情况下），6个月需要2400元/头
3.防疫：50元（一头牛一个月投入），6个月需要300元。
4.人工：300元（养殖到出栏每头牛）
每头肉牛到出栏需投资6000元左右
饲养六个月加上买牛时的体重按1000斤计算每头牛可卖到10000左右，减去上述每头牛的全部费用，一头牛的纯利润就是3500-4000元左右，在管理不好的状况下饲养半年也不低于2500元。如果购买鲁西黄牛，发情期10个月开始发情，配种后10个月下牛，每年产1只，利润率可达到3500以上。
鲁西黄牛的发源地在我国山东地区，如果想要寻找纯种的鲁西黄牛的话，最好还是到山东那边去购买，比较正宗。关于鲁西黄牛的养殖利润还是比较高的。因为这种牛的身体素质较好，不易生病，而且牛肉质量高，卖的价格也比较高。一般来说，养殖半年的利润可以达到3500以上每头。当然具体成本利润估算要以当地实际牛肉价格为准，本人只是在理想的状态下为您计算一下。以上内容由本人为您整理，希望对您有所帮助。
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牛生产学
名词解释：
1．肉牛的生产力：又称产肉力，是指肉牛在一定的饲养管理条件下，一定的时间内所提供出来的一定标准、一定数量牛肉产品的能力。
2．补偿生长：当幼牛营养贫乏，饲喂量不够或由于饲料质量不好，牛的生长速度变慢或停止。当营养恢复正常时，生长加快，经过一段时间的饲养仍能长到正常体重。
3．肥育：在宰杀之前的一段时期使猪、鸡等家畜、家禽很快地长肥。通常是喂给大量的精饲料。也叫育肥、催肥。
4．胴体重：宰前活重-（头重+皮重+血重+内脏重+腕跗关节以下的四肢重）。
5．泌乳周期：母牛第一次产犊后便进入了成年母牛的行列，开始了正常的周而复始的生产周期。因为乳用母牛的主要生产性能是泌乳，所以它的生产周期事围绕着泌乳进行的，因而称为泌乳后期。
6.围产期：奶牛临产前15天到产后15天这段时间。按传统方法，前15为干奶期，后15为泌乳期。
7.全混合日粮（TMR）：根据牛群营养需要的粗蛋白、能量、粗纤维、矿物质和维生素等，把揉切短的粗料、精料和各种预混料添加剂进行充分混合，将水分调整为45%左右而得的营养较平衡的日粮。
8.酒精阳性乳：是指用68%、70%、72%、75%酒精与等量牛奶混合而产生微细颗粒或絮状凝块的牛奶。分为高酸度酒精阳性乳（酸度为18-20°T以上，加酒精发生凝固的牛奶）和低酸度酒精阳性乳（酸度在11-18°T之间，加酒精可产生细小絮状凝块的牛奶）。
9.早期断奶:人为缩短犊牛的哺乳期，减少犊牛的哺乳量。
10.泌乳曲线：奶牛在从产犊到干奶的整个泌乳过程中，产奶量呈一定规律性的变化，以时间为横坐标，以产奶量为纵坐标，所得的泌乳期奶牛产奶量随时间变化的曲线。
11.干奶：为了保证母牛在妊娠后期体内胎儿的正常发育，使母牛在紧张的泌乳期后能有一充分休息的时间，使其体况得到恢复，泌乳得以修复与更新，在母牛妊娠的最后两个月采用人为的方法使母牛停止泌乳。
12.肉牛异地肥育：在甲地繁殖并培育犊牛、架子牛，在乙地专门进行肉牛肥育，发挥各种优势。
