动物细胞的培养条件

动物细胞培养[高中生物]　1.阐明动物细胞培养的条件和过程。

2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

一、动物细胞培养的条件和过程1．动物细胞工程常用技术(1)常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。

(2)基础：动物细胞培养。

2．动物细胞培养(1)概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

(2)培养条件①营养a．合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。

b．天然成分：血清。

c．培养液：即液体培养基。

②无菌、无毒的环境a．对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。

b．在无菌环境下进行操作。

c．培养液需定期更换，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

③温度、pH和渗透压a．温度：以36.5 ℃±0.5 ℃为宜。

b．pH：以pH为7.2～7.4为宜。

c．适宜的渗透压。

④气体环境a．O2作用：细胞代谢所必需的。

b．CO2主要作用：维持培养液的pH。

c．气体组合：95%空气＋5%CO2。

(3)培养过程②过程(4)相关概念①细胞贴壁：悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

③原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

④传代培养：分瓶后的细胞培养。

判断正误(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性( )(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( )(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集( ) (4)动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH( )答案　(1)×　(2)×　(3)√　(4)√探讨点　动物细胞培养1．动物细胞培养的原理是细胞增殖。

2．幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？提示　幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养，原因是这些细胞分裂能力强。

动物细胞培养及胚胎培养培养基的要求动物细胞培养时对培养基的要求：培养基按其来源可分为天然培养基和合成培养基。

天然培养基的营养成分与细胞在体内所需条件比较接近，但就细胞在体外生存的环境来说，合成培养液也有其独特之处，譬如成分便于控制和标准化。

体外培养的细胞直接生活于培养基中，无论何种培养基都应该能满足细胞生长所需的营养与生理的基本要求。

(1)营养成分：1）氨基酸合成培养液中的氨基酸以12种必需氨基酸为主，这些氨基酸不能由细胞自身合成，必需由培养液供给。

在氨基酸的成分中谷氨酰胺的作用特别重要，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，在配制各种培养液中应补加一定量的谷氨酰胺。

2）单糖葡萄糖是最常用和最好的单糖3）维生素维生素在细胞代谢过程中必不可少，主要可以提供辅酶和辅基。

生物素、叶酸、泛酸、核黄素、维生素B12等等4）其他成分：细胞生长过程中除需钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素外，还需要一些微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼等。

此外，为优化细胞生存环境，合成培养基中有时还添加些其他成分，包括核酸降解物、抗氧化剂等。

（2）促生长因子及激素各种激素、生长因子对于促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的状态具有十分重要的作用。

如胰岛素能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸，泌乳素可促进乳腺上皮细胞生长的作用。

各种生长调节因子的作用更加明显并具有特异性。

（3）pH大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害影响。

造成培养基pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的二氧化碳。

解决这一问题可采取两种方法：一是用具有一定缓冲能力的培养基，如使用NaHCO3-CO2缓冲系统，二是采用开放式培养的方法，使细胞代谢产生的二氧化碳及时逸出培养皿。

（4）渗透压细胞必须生活在等渗的环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定的耐受性。

注：天然培养基主要指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。

合成培养基是人工配制的培养基，给细胞提供一个近似体内生存的环境，又便于控制和标准化的体外生存环境，但合成培养基尚未成为十分完全的培养基。

动物细胞培养必备知识·素养奠基一、动物细胞培养概念从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

二、动物细胞培养的条件1。

营养条件:(1)合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。

（2)天然成分：血清等.（3）一般使用液体培养基,即培养液。

2。

无菌、无毒的环境：(1）培养液和培养用具灭菌处理。

(2）无菌环境下操作.（3）培养液定期更换的目的：清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

3。

温度、pH和渗透压:(1)适宜的温度：哺乳动物多以36。

5±0。

5℃为宜。

(2）适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

(3)适宜的渗透压。

动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性？说明你的理由。

提示:不能。

动物细胞培养只是细胞的增殖，没有体现细胞的全能性。

4.气体环境：95％空气和5%CO2。

（1)O2作用：细胞代谢所必需的。

(2）CO2的主要作用：维持培养液的pH。

三、动物细胞培养的过程填一填：基于动物细胞培养的过程，完成下面的问题:（1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法.(2）过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类:①悬浮在培养液中生长增殖;②贴附于某些基质表面生长增殖。

(3）进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理，然后用离心法收集.（4)过程③为传代培养，进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。

四、干细胞培养及其应用1。

干细胞分布：早期胚胎、骨髓和脐带等。

2.种类：胚胎干细胞和成体干细胞。

3.判一判：基于干细胞的类型和应用,判断下列说法的正误。

(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能. (×)提示:成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。

人教(2019)生物选择性必修三(学案+练习)动物细胞培养1．动物细胞培养及其条件(1)动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

(2)动物细胞培养的条件 ①营养：除糖类、氨基酸、无机盐、维生素之外，通常还需加入血清等一些天然成分。

②无菌、无毒环境⎩⎨⎧培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌环境下操作定期更换培养液，清除代谢物③温度、pH 和渗透压适宜的温度：36.5±0.5 ℃；适宜的pH ：7.2～7.4；渗透压也是需要考虑的一个重要环境参数。

④气体环境⎩⎨⎧95%的空气：其中O 2为细胞代谢必需的5%的CO 2：维持培养液的pH 2．动物细胞培养的过程(1)过程(2)体外培养的动物细胞类型①一类细胞能够悬浮于培养液中生长增殖。

②另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长繁殖，而且还会发生接触抑制现象，从而使细胞停止分裂增殖。

(3)生长特点①细胞贴壁：将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象称为细胞的接触抑制。

(4)原代培养和传代培养①原代培养：通常指分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养。

②传代培养：指分瓶之后的细胞培养。

3．干细胞培养及其应用(1)分布：存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。

(2)类型：胚胎干细胞和成体干细胞等。

(3)胚胎干细胞：简称ES细胞，存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。

(4)成体干细胞①分布：成体组织或器官内。

②类型：骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。

③特性：一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。

哺乳动物细胞培养条件1.“温度得合适呀，这就像人得待在舒服的环境里一样，得知。

比如小敏培养小鼠细胞，温度设高了，那些细胞就像在蒸桑拿，没多久就死翘翘啦。

要是温度不对，细胞能好好活吗？哼。

”2.“培养基得选对，这就像给孩子选合适的奶粉，得知。

比如小宇用了不适合的培养基培养猪细胞，那些细胞饿得慌呢，都不长个啦。

培养基不合适，细胞能茁壮成长吗？不可能呀。

”3.“二氧化碳浓度有要求呢，这就像花儿需要合适的空气成分，得知。

比如小萱培养的人类细胞，二氧化碳浓度不对，细胞就像喘不过气来的人，状态差得很。

要是不控制好，细胞能正常代谢吗？悬乎着呢。

”4.“得有合适的渗透压，这就像游泳得在合适深度的水里，得知。

比如小辉培养的牛细胞，渗透压高了，细胞里的水都被抽干啦，像瘪了的气球。

渗透压不合适，细胞能完好无损吗？肯定不行啦。

”5.“pH 值要稳定，这就像人的情绪得平稳，得知。

比如小琳培养的猫细胞，pH 值老变，细胞就像在坐过山车，一会儿舒服一会儿难受，最后都生病了。

pH 值不稳定，细胞能健康吗？够呛哦。

”6.“无菌环境是必须的，这就像生活的地方不能有病菌一样，得知。

比如小俊在有菌的环境里培养猴细胞，那些细菌就像小怪兽，把细胞都吃光啦。

要是有菌，细胞能安全吗？做梦呢。

”7.“营养物质得充足，这就像人吃饭得吃饱，得知。

比如小琪培养的兔细胞，营养不够，细胞就像没吃饱饭的小孩，有气无力的。

营养不足，细胞能有活力吗？没门儿。

”8.“细胞密度得合适，这就像住房子得有合适的人数，得知。

比如小涛培养的狗细胞，密度太大，细胞们挤得难受，就像在拥挤的公交车里，都长不好啦。

密度不合适，细胞能好好发展吗？肯定不行呀。

”9.“光照条件也有讲究，这就像人睡觉和起床需要合适的光线，得知。

比如小萌培养的羊细胞，光照太强，细胞就像被晒晕了一样，功能都受影响啦。

光照不对，细胞能正常工作吗？不可能啦。

”10.“添加的生长因子要合适，这就像给汽车加合适的润滑油，得知。

2019版生物选择性必修3 课后集训第1章细胞工程第2节 1动物细胞培养题组一动物细胞培养的条件1．下列不属于动物细胞培养的条件是()A．无毒、无菌的环境B．合成培养基通常需加血清、血浆C．pH＝7的中性环境D．提供细胞代谢所需的O22．动物细胞体外培养需要满足一定的条件，下列说法错误的是()A．细胞培养液通常会添加一定量的抗生素，以防止杂菌污染B．O2是细胞代谢所必需的，CO2有利于维持培养液pH的稳定C．使用合成培养基时，通常要加入血清、血浆等一些天然的成分D．多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，适宜温度为25±0.5 ℃题组二动物细胞培养的过程3．下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是()A．原代培养和传代培养前都可以使用胰蛋白酶B．培养过程中需将细胞置于含95%O2和5%CO2的混合气体的培养箱中C．配制合成培养基要加入糖、促生长因子、氨基酸、琼脂等成分D．培养液中添加适量的抗生素可为细胞提供无菌、无毒的培养环境4．小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上；该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。

下列有关叙述错误的是()A．使用合成培养基培养动物细胞时通常需添加一些血清等天然成分B．培养基内加入适量的抗生素以防止培养过程中杂菌的污染C．相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同D．培养上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象5．下列关于动物细胞培养过程的叙述，错误的是()①制作细胞悬液时，可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理②悬液中分散的细胞很快贴附在瓶壁上，细胞贴壁体现了细胞的适应性③10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型④细胞培养在含混合气体的培养箱中，其中的CO2可刺激细胞的呼吸⑤动物细胞培养需要在严格无菌的条件下进行⑥用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液⑦根据培养时是否有接触抑制现象判断细胞是否癌变A．②③④B．②③⑥C．②④⑥D．④⑥6．如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)，据图分析，下列说法错误的是()A．动物细胞培养需要使用液体培养基B．OA段的培养称为原代培养C．AB段可能发生了接触抑制现象，可用胰蛋白酶处理使细胞分散开来D．培养过程中，细胞可通过有丝分裂和减数分裂实现细胞增殖题组三干细胞的培养及应用7．下列关于胚胎干细胞的叙述，不正确的是()A．动物胚胎的每一个细胞都是胚胎干细胞B．胚胎干细胞具有分化为动物各种组织的潜能C．胚胎干细胞的遗传物质在质和量上与受精卵相同D．胚胎干细胞在体外可诱导分化为不同类型的组织8．胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，可以进一步分裂、分化成各种组织干细胞，再进一步分化成各种不同的组织。