RNAsaver(RNA长效保存液)

通用反转录试剂盒(M-MLV)使用说明货号：RP1105规格：50T/100T保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为1年。

产品内容：试剂盒组成50次100次M-MLV(200U/μL)50μL50μL×25×M-MLV Buffer200μL400μL(10uM)100μL200μLOligo(dT)16RNasin(40U/μL)25μL50μLdNTPs(10mM)50μL100μLO1mL1mL×2RNase-free ddH2说明书1份1份产品简介：通用反转录试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应。

它采用M-MLV进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。

通用反转录试剂盒中配置的酶为进口的酶。

RT酶采用进口的M-MLV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。

通用反转录试剂盒可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

操作步骤：一、反转录反应1、在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分：1-5μg总RNA或50-500ng mRNA2μL Oligo(dT)或2pmole基因特异性引物16O至14.5μL补RNase-free ddH22、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：4μL5×M-MLV Buffer1μL dNTPs0.5μL RNasin1μL M-MLV3、42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。

4、95℃加热5min终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。

5、若用于后续PCR扩增,用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50μL，取2-5μL作为PCR 反应模板。

注意事项：1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。

DEPC处理水使用说明
货号：R1600
规格：100ml/500ml
保存：室温储存，有效期至少12个月。

产品说明：
DEPC处理水是用DEPC(Diethypyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压消毒的高纯水。

经检测不含RNase、DNase和Proteinase。

高压蒸汽灭菌后DEPC分解成二氧化碳和酒精，因此DEPC处理水不同于DEPC，基本上不含DEPC，99.99%以上是水。

DEPC处理水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。

注意事项：
如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

手上通常有RNase，必须戴一次性手套操作，以防RNase污染。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关试剂：
R10505×RNA Loading Buffer(非变性)
R1100TriQuick总RNA提取试剂
R1200总RNA提取试剂盒
M101010×MOPS缓冲液
SY1040SYBR Green‖(10000×)
SR0080RNAsaver RNA长效保存液
SR0020RNA wait(非冻型组织RNA保存液)
P1023酚：氯仿＝25：24（PH<5.0）
P1011酚：氯仿：异戊醇＝25：24：1（PH<5.0）。

RNAfixer 无液氮RNA样品储存液目录号：RN15目录编号包装单位RN1501 50mlRN1502 100ml产品储存和稳定性：透明液体，室温(18-25℃)保存期限为12 个月，如果使用时发现有沉淀或者析出，可以在37℃加热重新溶解后使用，不影响产品质量。

如何使用RNAfixer：RNAfixer只用于新鲜组织，浸泡入RNAfixer前禁止冷冻组织。

只需要迅速将新鲜组织剪成长，宽，高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入RNAfixer即可（只要有一边厚度不超过0.5厘米，RNAfixer可以迅速渗透，其它两边的尺寸并不重要）。

将新鲜组织浸泡在5倍体积的RNAfixer中，按照指示存放在适当的温度。

1.动物组织RNAfixer并不破坏或者溶解组织结构，因此浸泡在RNAfixer中达到渗透平衡的组织可以从RNAfixer中取出，然后切成更小的块，然后放回到RNAfixer中下次继续使用。

小器官如小鼠肝，肾，和脾不需要剪切，可以完整的存放在RNAfixer中。

2.植物组织很多植物组织直接浸泡入RNAfixer即可，有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层，需要先破坏掉腊质层，便于RNAfixer渗透。

3.组织培养细胞细胞吹打下来后，离心收集细胞,弃上清，用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。

将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。

加入五到十倍体积RNAfixer, 混均。

4.血和血浆和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。

RNAfixer也可以保存抗凝全血，血清和血浆。

对于全血加入3倍体积RNAfixer，混匀。

5.酵母离心收集3X108的细胞（>12，000g离心两分钟），立刻将细胞团重悬在0.5–1 ml 的RNAfixer中。

酵母细胞可以保存在RNAfixer中25℃8小时或者4℃一个星期。

如果要保存存更长时间，将酵母细胞在RNAfixer中放置一个小时后，再次于>12,000g 离心5分钟，将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010773758.4(22)申请日 2020.08.04(71)申请人 中牧实业股份有限公司地址 100070 北京市丰台区南四环西路188号总部基地八区16-19号楼(72)发明人 李双男　张贺楠　何至远　于雷　(74)专利代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 11002代理人 商秀玲(51)Int.Cl.C12N 1/04(2006.01)C12R 1/93(2006.01)(54)发明名称一种RNA病毒保存液及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种RNA病毒保存液及其制备方法和应用。

本发明通过复配二糖、原位凝胶剂和碳链长度为3‑22的直链或有支链的脂肪醇来制备冻存液，用于在对RNA病毒进行冻干保存之前或投入使用之前的非超低温保存，可以在较长时间内保持RNA病毒的滴度。

本发明通过实验验证，以本发明的RNA病毒保存液保存的犬瘟抗原在4℃条件下保存28天滴度下降不超过1log，显著提升了RNA病毒在‑40℃～4℃液体的条件下的保存状态，可大幅度提高多联多价疫苗生产方面的灵活性。

权利要求书1页 说明书7页CN 111961592 A 2020.11.20C N 111961592A1.一种用于RNA病毒保存的组合物，其特征在于，以质量体积百分含量计，包括如下组分：二糖20％～70％、原位凝胶剂0.5％～3％和碳链长度为3-22的直链或有支链的脂肪醇0.2％～2％。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以质量体积百分含量计，包括如下组分：二糖30％～50％、原位凝胶剂1％～2％和碳链长度为3-22的直链或有支链的脂肪醇0.5％～1.5％。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述二糖为蔗糖、乳糖或海藻糖的一种或多种；和/或，所述碳链长度为3-22的直链或有支链的脂肪醇为丙二醇、丙三醇、十四烷醇或十八烷醇中的一种或多种；和/或，所述原位凝胶剂为卡波姆、泊洛沙姆和壳聚糖中的一种或多种。

核糖核酸RNA保存液的应用介绍RNA保存液顾名思义，就是用于保护核糖核酸RNA延长其在细胞外的保存时间的溶液，对于不同的样本，不同的实验目的，RNA保存液的成分也会有差异，通常用于动物组织细胞的就不适用于植物细胞，本文这里主要指针对病毒的RNA保存液。

病毒的RNA保存液主要是用于病毒核酸检测或者病毒基因组测序等实验研究，病毒也仅仅只遗传物质核酸为RNA的病毒。

此RNA保存液属于灭活型病毒保存液，将采样拭子样本浸没，由于保存液中添加的裂解盐会很快裂解病毒的膜蛋白使病毒迅速灭活，保存液中的RNA酶抑制剂可以抑制RNA酶活性，保证病毒核酸RNA在一段时间内不降解。

从而，此款RNA保存液既能快速灭活病毒消除其感染性，又能释放病毒核酸，保证后续能通过检测核酸判断样本是否被感染。

产品特点：
通常来说，样本能够保存常温1周，37℃1天，4℃至少保存1个月，组织4℃浸泡过夜后-20℃或-80℃可长期保存。

再没有采样之前，室温可稳定保存1年以上。

低温贮存可能会产生沉淀或晶体析出，用之前需37℃完全溶解沉淀。

注意事项：
1.此RNA保存液只适用于RNA病毒的样本，不适用核酸为DNA的病毒；
2.此RNA保存液不适用植物组织样本的RNA；
3.采样拭子采样后的样本必须完全浸没于采样管中的病毒保存液内，且完全密封。

由于此款RNA病毒保存液主要是用于RNA病毒的核酸PCR、核酸检测的，不建议自己配制，如果需要的量比较大，建议直接找德晟这样的生产厂家，而且除了灭活型病毒保存液，还有非灭活型病毒保存液。

RNAwait(非冻型组织RNA保存液）货号：SR0020规格：10ml/100ml保存：室温保存，有效期两年。

产品说明：RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。

组织获取后立即浸入RNAwait保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。

操作流程：1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。

RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。

2.将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；3.快速将较大的组织切成厚度<0.5cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。

组织的厚度一定要<0.5cm。

组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。

较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。

4.保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait 完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。

在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

注意事项：1.组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。

2.冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。

3.保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。

细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。

RNA（DNA）保存液⽆液氮RNA/DNA样品储存液(RNA/DNA keeper)⽆液氮RNA/DNA样品储存液是⼀种在较⾼温度下保存RNA/DNA的溶液，它能迅速渗⼊细胞内，通过⾼效⼀直RNA/DNAse的活性尔保存RNA/DNA的完整性。

常温运输组织样品的最佳选择。

保护RNA/DNA不降解，37度⼀天，25度⼀周，4度⼀个⽉。

⼴泛⽤于邮寄，长途运输保存病毒、细菌、果蝇、植物组织、动物组织、培养细胞、悬浮细胞（⽩细胞、流式细胞仪收集的细胞）等。

●产品说明RNA/DNA样本保存液是⼀种⽆毒的可直接使⽤的样品保存液，其原理是抑制RNA/DNAse活性，保护新鲜组织样本⾥的RNA/DNA免受降解。

实验证明，即使对于脾脏等 RNA/DNAse丰富、很难提取到完整 RNA/DNA的组织，也能保证提取效果。

●组分RNA/DNA样本保存液 20 mlRNA/DNA样本保存液 100 ml●形态⽆⾊液体●制品保存室温保存●适⽤范围●RNA/DNAse含量丰富的组织；●需提采集多个样本，且采集时间、空间跨度较⼤；●不⽅便马上提取 RNA/DNA⽽⼜没有液氮或超低温冰箱保存样品；●室温下或只⽤冰的条件下长途运输样品。

使⽤⽅法组织样本：将组织块切成每边不超过 0.5 cm的⼩块（如样品为⾻头，需打碎成⼩块），在室温下浸没于 5-10倍体积的 RNA/DNA样本保存液中即可；菌体/培养细胞：离⼼收集菌体/培养细胞，室温下加⼊离⼼后体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可；⾎液样本：将⾎液样本⽤红细胞裂解液（N9331/N9332）处理后，离⼼收集⽩⾊或淡红⾊沉淀，室温下加⼊沉淀体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可。

§注意事项：●RNA/DNA样本保存液如出现沉淀，37℃加热振荡混匀。

●加⼊ RNA/DNA样本保存液后，样本不能⽴即置于-20℃或-80℃，要先 4℃置放过夜，待组织充分浸润后再置于低温保存。

北京雷根生物技术有限公司
RNA 保存液
简介：
RNA 的保存对于其下游实验极其重要。

提取RNA 后，由于残存的RNase 或其他物质容易破坏RNA ，所以应该妥善保存。

Leagene RNA 保存液用于保存已经抽提好的RNA 溶液，超低温存储。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体要求操作。

2、 一般溶解于RNA 保存液，-70℃或超低温存储。

3、 如需从上述保存液中分离出RNA ，应离心，弃上清，用DEPC 处理水溶解。

注意事项：
1、应注意避免RNase 污染。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 24个月有效。

相关：
编号 名称 NR0053 NR0053 NR0053 Storage RNA 保存液 5ml 10ml 50ml 4℃ 避光 使用说明书 1份 编号 名称
DC0032 Masson 三色染色液
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
NR0042 RNase A(10mg/ml,DNase free)
PE0025 SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(5×)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。

RNAlong RNA长期保存液目录号：RN18目录编号包装单位RN1801 1mlRN1802 2ml产品介绍：RNA性质不稳定，极易降解。

溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA，即便是储存于-20 ºC也难免降解。

为解决这一问题，可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中，可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解。

RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。

需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

产品储存：4℃。

注意事项：1.RNA长期保存液可能抑制逆转录酶活性，做RT-PCR反应前应该用乙醇沉淀RNA。

2.在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg /μl。

用RNA长期保存液溶解RNA沉淀：1.对固体RNA 沉淀，每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA长期保存液，反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。

干燥的RNA沉淀难以溶解，可反复吹打混匀后50 ºC 加热10-15 分钟。

最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA 沉淀，然后按液态RNA 操作。

2.对液态RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液，混匀。

注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。

3.测定OD 值。

注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。

4.将溶解的RNA 样品储存于-20 ºC或者-70 ºC。

从RNA长期保存液中沉淀RNA：1.估计RNA 溶液终体积。

加入4 倍体积的无水乙醇，混匀。

如果溶液体积过小操作不便，可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于0.25μg /μl，可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀，然后再加入4 倍体积乙醇。

RNAsafety TM组织RNA保存液使用说明书1．产品性能简介RNAsafety TM组织RNA保存液是一种液态、无毒的组织保存试剂，能迅速稳定组织，保护非冷冻、新鲜组织的RNA于原始状态，而不会引起RNA的降解。

尤其适用于不能立即进行RNA分离的地点收集样品，方便的进行样本的转送和运输。

（1）RNAsafety溶液不影响组织结构，保存后组织可在室温下切割和称量。

（2）RNAsafety可与大多数RNA提取方法兼容，如常用的TRIzol试剂。

（3）保存在RNAsafy溶液中的组织材料可以从RNAsafety溶液中取出，切割使用后，重新放回溶液中继续保存，而不影响组织RNA的质量。

（4）RNAsafety溶液可保存在室温下，保质期至少6个月。

2．产品用途（1）RNAsafety溶液可广泛应用于多种脊椎动物样品，如脂肪、胃脏、膀胱组织、小肠组织、肌肉、软骨、肾脏、心脏、睾丸、皮肤、脾脏、肺脏等，但不能用于胰腺样品的RNA保存。

（2）RNAsafety还可以用于细菌、真菌、组织培养细胞和一些植物的RNA 保存。

（3）RNAsafety可填充入动物腔，或者将器官浸没在RNAsafety溶液中，在长时间、冗长的解剖中稳定RNA。

（4）用RNAsafety溶液保存的样本，可在常温保存一周而样本的RNA 保持稳定，实现样本在常温条件下转送和运输，省去使用干冰运输的麻烦。

3．使用RNAsafety的方法RNAsafety只能用于新鲜组织，在浸入RNAsafety之前不能冷冻组织。

获取组织样品后，简单切碎组织样品（建议任何一边的最大厚度不大于0.5cm），迅速将组织碎块浸泡到5-10倍体积的RNAsafety中保存。

动物组织：RNAsafety不会溶解或破坏组织样品的结构，可将已经平衡在RNAsafety溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到RNAsafety中。

小器官如鼠肝、肾和脾可以完整地保存在RNAsafety中。