高中生物实验：班氏试剂的配制与鉴定结果

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比高中生物学的“检测生物组织中的糖类”是一个经典且重要的实验。

2019版人教版教材中，所用检测试剂为斐林试剂。

2019版浙科版教材中则使用本尼迪特试剂(也称为班氏试剂)。

斐林试剂是由0．1 g／mL NaOH和0．05 g／mL CuSO4配制而成。

其中O．1 g／mL NaOH 溶液称为斐林试剂甲液，0．05 g／mL CuSO4称为斐林试剂乙液。

本尼迪特试剂的配制方法为l将4．3 g硫酸铜(CuS04·5H：0)溶解在50 mL水中，加热使之溶解，冷却后加水至40 mL；另将43 g柠檬酸钠和25 g无水碳酸钠溶解于150 mL水中，加热使之溶解。

冷却后将上述2份溶液混合，用水稀释至250 mL，当溶液不澄清时可过滤。

本尼迪特试剂常被认为是斐林试剂的改良试剂，避免了斐林试剂必须现配现用的缺点，可长期保存。

斐林试剂在储存上具有缺点，而人教版仍选择其作为检测试剂是否存在其他原因?斐林试剂在检测速度和灵敏度等是否具有优势?1、研究背景斐林试剂和本尼迪特试剂反应原理具有一定共性：都是利用Cu(OH)2，与还原性糖的醛基在加热条件下反应，生成砖红色的Cu2O 沉淀以检测还原性糖的存在。

但二者产生cu(OH)2的方式存在差别。

斐林试剂的甲液与乙液直接反应产生Cu(OH)2，Cu(OH)2再与还原性糖反应产生砖红色沉淀。

而本尼迪特试剂中Cu(OH)2的产生过程是：柠檬酸钠和碳酸钠均是强碱弱酸盐，在水中水解产生OH一，与CuSO4溶液混合时，生成的Cu(OH)2与还原性糖反应生成砖红色沉淀。

从原理分析，斐林试剂甲液与乙液强烈反应产生Cu(OH)2，(OH)2很容易沉淀，浓度相对较高。

因此，可推测其检测还原性糖的灵敏度较高。

而本尼迪特试剂利用柠檬酸钠和碳酸钠水解产生OH一，与CuSO4混合后产生的Cu(OH)2。

因为水解产生的OH一数量较少，产生的Cu(OH)2浓度也相对较低。

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲：将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中，加0.5亳升硫酸，混合均匀。

试剂乙：将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

（贮于带橡皮塞的瓶中）※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。

它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此，斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。

2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。

取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。

瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

※双缩脲试剂使用时，先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液（2mL），振荡摇匀，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，与蛋白质发生紫色反应，因此，双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成，但二者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中NaOH溶液（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，CuSO4溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。

（2）使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。

用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。

高中生物实验试剂的配制、用途及用法1、斐林试剂——用于可溶性糖的鉴定配制：试剂甲：取10g氢氧化钠放入容量瓶（或有刻度的烧杯）中，加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中，配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂甲。

试剂乙：取5g硫酸铜放入容量瓶（或有刻度的烧杯）中，加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中，配成质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂B。

使用：用时临时配制，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，现配现用。

2、班氏试剂——用于可溶性糖的鉴定配制：称取86.5g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠溶于400 mL水中。

另称8.65g 硫酸铜溶于50mL热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中，边加边搅拌,搅匀后补足水量至500mL。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

3、双缩脲试剂——用于蛋白质的鉴定配制：A液：取10g氢氧化钠放入容量瓶（或有刻度的烧杯）中，加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中，配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂A。

B液：取1g硫酸铜放入容量瓶（或有刻度的烧杯）中，加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中，配成质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂B。

使用：用时先加A液2mL摇匀后，再滴入3～4滴B液，摇匀观察。

4、苏丹Ⅲ试剂——用于脂肪的鉴定配制：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精中，加热使其充分溶解，成为饱和乙醇溶液，过滤后倒进试剂瓶密封保存备用，可保存数月。

5、苏丹Ⅳ试剂——用于脂肪的鉴定配制：将0.1g苏丹Ⅳ干粉溶于50mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精50mL，充分混合后即可使用。

6、二苯胺试剂——用于DNA的鉴定A液：将1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。

1斐林试剂检测可溶性还原糖原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪.3 双缩脲试剂检测蛋白质原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意：双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）. 应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定.4 碘液检测淀粉原理：淀粉+碘液→蓝色注意：这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉5 DNA的染色与鉴定染色原理：DNA+甲基绿→绿色应用：可以显示DNA在细胞中的分布.鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.6 吡罗红使RNA呈现红色原理：RNA+吡罗红→红色应用：可以显示RNA在细胞中的分布.注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理：正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性.8 线粒体的染色原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9 酒精的检测原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶.10 CO2的检测原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.11 染色体（或染色质）的染色原理：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）染成深色.应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂.12 吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应原理：吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.应用：可用于检测食品营养成分中是否含有维生素 C.13 亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.14 脲酶的检测原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红.应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.15 伊红美蓝检测大肠杆菌原理：在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色.应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.16 刚果红检测纤维素分解菌原理：刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.应用：筛选纤维素分解菌.补充(有部分重复)：1、斐林试剂配制：1）甲液质量浓度为0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml 2）乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等.还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀.如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等.2、班氏尿糖定性试剂配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠.柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐）.使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用.3、双缩脲试剂配制：A液：质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml B液：质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用：鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应.也可用于鉴定多肽.4、苏丹Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用：鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）.5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）. 作用：用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来.能杀死细胞固定.6、质量浓度为0.01g/ml的或0.02g/ml龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用：使细胞核内的染色体着色,便于观察.7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用：观察成熟植物细胞质分离时用.经此处理细胞仍具活性.8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液配制：将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成作用：（1）用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察；（2）用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况. 是活体染色剂.9、丙酮是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素.可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热10、层析液配制：由20份石油醚（在60~900C下分馏出来的）、2份丙酮和1份苯混合而成.是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢.代用品：93号汽油、四氯化碳11、SiO2、CaCO3加入少许SiO2是为了研磨得充分；加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏.12、碘液配制：取2gKI ,溶解在5ml蒸馏水中,再加1gI,待溶解后用蒸馏水稀释至300ml.溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里.作用：用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物.13、二苯胺配制：称取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存.临用前,在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液.作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色.14、NaOH：用于吸收CO2（验证光合作用需要CO2）或改变溶液的pH,15、Ca(OH)2：鉴定CO2（验证呼吸作用产生CO2）.16、NaHCO3：提供CO2等.。

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂 试剂A：将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中，加0.5亳升硫酸，混合均匀。

试剂B：将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

（贮于带橡皮塞的瓶中）于带橡皮塞的瓶中） ※临用时试剂A与试剂B等量混合等量混合2、双缩脲试剂 试剂A：10%氢氧化钠 试剂硫酸铜试剂B：1%硫酸铜3、苏丹Ⅲ试剂 0.1克苏丹Ⅲ溶于20毫升95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不分钟。

得超过10分钟。

4、二苯胺试剂： 将1克二苯胺溶液于100ML冰醋酸中，再加2.75毫升浓硫酸（置冰箱中可保个月，使用前在室温下摇匀）。

存根6个月，使用前在室温下摇匀）。

5、苔黑酚——乙醇溶液（用于RNA的鉴定）的鉴定） 溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中，（可在冰箱中保存1个月）个月）6、班氏试剂： 溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。

另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中，边加边搅拌。

此混合液可长期使用。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

7、茜红染料 将0.1克茜红溶于100ML蒸馏水中蒸馏水中8、酵母亮甲酚蓝 将10ML水放入烧杯中，滴加足够的1%亮甲酚蓝水溶液亮甲酚蓝水溶液 至深蓝色为止。

将1/4茶匙干酵母溶于此水中。

搅拌并煮沸，用前冷却。

9、醋酸洋红染液 冰醋酸45ML＋55ML蒸馏水＋0.5克洋红克洋红 先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸10分钟，待冷却后，即可使用。

却后，即可使用。

10、有丝分裂细胞解离液 38%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。

的比例配成解离液。

11、有丝分裂细胞染液 医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液。

的比例混合 配成染色液。

的鉴定）12、吲哚酚试剂（用于VC的鉴定） 将0.1克吲哚酚粉未溶于是100ML水中。

水中。

（用于细胞有丝分裂根尖的固定）13、卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定） 酒精：冰醋酸=3：1（体积比）（体积比）14、20%肝脏研磨液 1份肝脏4份水。

高中生物染色剂1、斐林试剂配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。

还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。

如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。

称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。

把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。

用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成，故加入柠檬酸钠。

柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂，它能与铜离子形成可溶性络盐）。

使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂配制：A液：质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100mlB液：质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml使用时，先加A液，后加B液作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。

也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ :配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。

能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用：观察成熟植物细胞质分离时用。

高中生物常见试剂及变色反应汇总1、斐林试剂：成分：0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液)。

用法：将斐林试剂甲液和乙液混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。

用于尿糖的测定。

3、双缩脲试剂：成分：0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液)。

用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。

如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。

用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅲ染成红色)。

5、二苯胺：用于鉴定DNA。

DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

6、甲基绿：用于鉴定DNA。

DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

吡罗红：检测RNA，呈红色7、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。

8、70%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭菌。

9、95%的酒精溶液：DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖，使细胞分离开来。

“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15％盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化，并使细胞间的中胶层物质溶解，从而达到分离细胞的目的。

洗去卡诺氏液8％盐酸：（1）盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；（2）盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合11、龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色改良苯酚品红染液：检测染色体，红色健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

第1篇实验目的：1. 学习并掌握班氏法测定葡萄糖含量的原理和方法。

2. 了解班氏试剂的配制和保存方法。

3. 培养实验操作技能，提高分析能力。

实验原理：班氏法是一种常用的比色法，用于测定葡萄糖含量。

该法基于葡萄糖在碱性条件下与铜离子反应生成红色的氧化亚铜沉淀，通过比色测定沉淀物的颜色深浅，从而计算出葡萄糖的含量。

实验仪器与试剂：1. 仪器：分析天平、滴定管、移液管、锥形瓶、烧杯、试管、酒精灯、温度计、比色计等。

2. 试剂：班氏试剂、葡萄糖标准溶液、硫酸铜溶液、氢氧化钠溶液、盐酸、蒸馏水等。

实验步骤：1. 班氏试剂的配制：- 称取1.5g硫酸铜，加入50mL蒸馏水溶解；- 称取0.1g氢氧化钠，加入50mL蒸馏水溶解；- 将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合，充分搅拌；- 将混合液煮沸5分钟，冷却后备用。

2. 葡萄糖标准溶液的配制：- 称取1.0g葡萄糖，加入100mL蒸馏水溶解；- 将溶液转移至1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度；- 配制浓度为0.1mg/mL的葡萄糖标准溶液。

3. 样品处理：- 称取适量样品，加入少量蒸馏水溶解；- 将溶液转移至100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。

4. 测定：- 取5mL葡萄糖标准溶液和5mL样品溶液分别置于锥形瓶中；- 加入5mL班氏试剂，充分混合；- 将锥形瓶置于水浴中，加热至沸腾，保持5分钟；- 冷却至室温，用比色计测定溶液的吸光度。

5. 计算：- 根据标准曲线或标准方法，计算样品中葡萄糖的含量。

实验结果：1. 标准曲线：以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中葡萄糖的含量。

实验讨论：1. 实验过程中，班氏试剂的配制和保存对实验结果有较大影响，应严格按照操作规程进行。

2. 样品处理过程中，应避免样品污染，保证实验结果的准确性。

3. 实验过程中，应注意控制水浴温度，避免加热过度导致实验结果偏差。

结论：通过本次实验，掌握了班氏法测定葡萄糖含量的原理和方法，提高了实验操作技能和分析能力。

班氏试剂(Benedict's Reagent)简介：班氏试剂(Benedict's Reagent)又称本氏液、本尼迪克特试剂、本尼迪克试剂、本尼迪克试液或本尼迪特试剂，是一种浅蓝色化学试剂。

其命名来自于一位美国化学家斯坦利•本尼迪克。

班氏试剂在配制过程中，当把硫酸铜溶液倒入由柠檬酸钠和无水碳酸钠配制的溶液中时，硫酸铜与碳酸钠和柠檬酸钠相遇，能产生出一种可溶性的又能离解出Cu2+的可溶性络盐，即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成，做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。

当利用班氏试剂测定还原性糖时，还原性糖在这种碱性溶液中能将Cu2+还原为Cu+，Cu+再与OH－合成黄色的CuOH，加热后CuOH即变成砖红色的氧化亚铜(Cu2O)沉淀。

Leagene Benedict's Reagent主要由碳酸钠、柠檬酸钠、硫酸铜配等组成，来检测还原性糖，包括除蔗糖之外基本上所有的单糖和双糖，常用于尿糖的鉴定。

该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：TC0001 StorageBenedict's Reagent100ml RT使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、在试管中加入1ml Benedict's Reagent，加热到沸腾，如不变色，则可使用。

2、在试管中滴入新鲜澄清的尿液，充分摇匀。

3、加热上述混合液到沸腾，冷却后观察结果。

4、观察试管内混合液颜色是否发生变化，是否有沉淀物产生，并按下表提示作出判断：沸水浴加热后的现象葡萄糖含量（g/dL）透明蓝色无加热时无变化，仅冷却后有少量沉淀微量，约0.5以下加热后即出现少量黄绿色沉淀少量，约0.5～1加热即再现土黄色沉淀中量，约1～2加热时很快出现多量砖红色沉淀大量，约2以上注意事项：1、班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10:1。

2、如是糖尿病人，检验前两三天最好停止服药。

3、本试剂仅用于科研用途，不宜用于临床检测。