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柱色谱分离
柱色谱分离
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Northwest University
化学国家级实验教学示范中心
(四)提问
1.如何制备好的薄层板? 2.如何使柱色谱分离效果良好?
Nor源自文库hwest University
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五、实验讨论
本实验分离效果如何? 你有什么改进方法?
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六、实验思考问题
[1] 制备好的薄层板为什么要经过活化后才能 使用?不经过活化就使用,对分离结果有 怎样的影响?
[2] 点样时应该注意哪些问题?点样前在距离 板的一端一厘米处划线的目的是什么?
[3] 色谱柱如何清洗和干燥?
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七、实验延伸
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4、柱效和色带的薄层检测 取1块已活化好的硅胶薄层板,画好起始线,用平口
毛细管点样。每块板上点两个样,一个是混合物的,一 个是洗脱出来的色带。用1:3的石油醚-二氯甲烷混合液 作展开剂,比较Rf 值,指出色带为何物?观察色带样点 展开后是否有新的斑点产生,推估柱层析是否达到预期 分离效果。将此板的真实情况画在报告纸上。
0.5%CMC),晾干后活化0.5h
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2、色素的萃取和浓缩: 将干的红辣椒剪碎研细,称取1.0g,置于25mL圆
底烧瓶中,加入10mL二氯甲烷和1粒沸石,水浴加热 回 流 20min 。 冷 至 室 温 后 过 滤 。 将 滤 液 浓 缩 至 剩 约 1mL,即为混合色素的浓缩液。
本实验是用二氯甲烷为萃取剂,从红辣椒中萃取出色素, 经浓缩后用薄层色谱法作初步分析,再用柱色谱法分离第一 个色带(什么色?)。
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4、主要试剂的物理常数(自查)
二氯甲烷 石油醚 硅胶G 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液
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内容提要
一、实验目的与要求 二、实验原理 三、装置图 四、实验操作步骤及注意事项 五、实验讨论 六、实验思考问题 七、实验延伸
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一、实验要求与目的
1、复习色谱法基本原理 2、巩固薄层色谱、柱色谱的规范操作 3、学习并掌握湿法装柱的要点
与生活相关的实验都能引起学生极 大的兴趣。本实验还可让学生探究一些 实验参数,如展开剂的配比比例、柱色 谱洗脱剂的比例、加热萃取时间等等。
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(1)有机化学实验.兰州与复旦合编(第二版) 北京:高等教育出版社,1994.
(2)有机化学实验.兰州大学(第三版) 北京:高等教育出版社,2010.
仪器
色谱柱、薄层板(2块)、 整套回馏装置用仪器、过滤用仪器等
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三、装置图
柱色谱洗脱装置 薄层板展开装置 回馏提取装置等
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四、实验操作步骤
(一)操作步骤
1、制板: 洗净并铺薄层板2块(称1.5克硅胶G,加4.5毫升
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(二)数据记录
将展开的薄层板画下来并计算黄色 斑点比移值
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(三)注意
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1、用过的洗脱液统一回收,不准倒入水池 2、色谱柱中的硅胶要清理干净,统一倒在 垃圾桶中 3、浓缩的混合样留少许做对比用
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二、实验原理
1、色谱法的基本原理 2、薄层色谱、柱色谱的含义 3、红辣椒中主要色素的结构式及名称
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红辣椒含有多种色泽鲜艳的天然色素,其中呈深红色的 色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和少量辣椒玉红素脂肪酸酯所 组成,呈黄色的色素则是β -胡罗卜素。它们都属于类胡萝 卜素类化合物,从结构上看则都属于四萜类化合物。
(3)胡宏纹 有机化学(第3版).南京大学 北京:高等教育出版社,2006.
(4)魏青 基础实验Ⅱ(有机化学实验) 北京:科学出版社,2011.
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基础化学实验Ⅱ (有机化学实验)
红辣椒中色素的分离 (Separation of Pigments
In chilies red)
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实验技能训练要点:
巩固训练柱色谱、薄层色谱在天然 产物提取中的应用
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3、柱色谱分离: 选用内经1cm,长约20cm的层析柱,按照有机化合物
的分离和提纯中3.9.2节[1]中的方法,用8.0g硅胶 (100~200目)在30毫升石油醚中装柱(湿法装柱)。柱 装好后用滴管汲取大部分混合色素的浓缩液,将混合液加 入柱中,小心冲洗柱内壁后改用体积为3:8的石油醚 (36~60℃)-二氯甲烷混合液淋洗,用接收瓶接收先流出 柱子的黄色色带并量取洗脱该色带体积。
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