硝基咪唑类药物的研究进展

抗结核药物研究进展

任立歆

作者单位: 300074 天津市儿童医院

随着迁移人口的增加、取得性免疫缺点综合征(AIDS)的流行、耐药菌株的显现,使结核病又成为危害人类健康的头号杀手。据WHO估量每一年约有200万人死于结核病,尤其是在A

IDS感染严峻流行的地域。我国是全世界22个结核病高负担国家之一,在数十年的临床应用中,传统药物均显现不同程度的耐药性,阻碍临床医治成效。2000年全国结核病流行病学抽样调查报告显示,取得性耐药率由1984 /1985年的%增至2000年的30% ,耐多药率为% ,其中初始耐多药率为% ,取得性耐多药率为%。严峻的结核病上升形势要求加速新型抗结核药物的研究开发。现将抗结核药物研究进展介绍如下。

利福霉素类

一、利福喷汀( rifapentine)

利福霉素类药物的衍生物,具有广谱抗菌作用,抗菌谱同利福平,试管中抗菌活性比利福平高2～10倍, 向细胞内移动性为利福平的10倍, 对各类生长状态和各类生长环境的结核分枝杆菌均有杀灭作用,是全效杀菌药。利福喷汀的蛋白结合率可达98% ～99% ,口服吸收好,清除半衰期较利福平延长4～5倍[1] ,在组织中停留时刻较长,更适于距离给药,具有长效强杀菌作用[2]。每周1次服药每次450～600 mg, 9个月联合化疗疗程终止时,痰菌阴转率、病变医治有效率和空洞闭合率与利福平每日联用组医治成效一致,说明临床医治成效与利福平相似。

二、利福布汀( rifabutin)

螺哌啶利福霉素s的衍生物,作用机制为抑制RNA聚合酶,干扰DNA生物合成。口服吸收快, 4 h达到峰值。在人体组织散布良好,在肺组织的浓度比血浆浓度高5～10倍,尿液浓度比血浆浓度高100倍。利福布汀的亲脂性、透过细胞壁和干扰DNA生物合成的能力高于利福平,使之能够集中散布在巨噬细胞内且具有较强的活性。该药血清t 1/2约为16 h,要紧用于耐药结核杆菌和非结核分枝杆菌病的医治。

硝基咪唑类药物残留检测方法研究进展

汪纪仓1,2,王大菊2,杨自军1,林霖1(1.河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471003;2.华中农业大学动物医学院,湖北武汉 430070)[收稿日期]2007204-23 [文献标识码]A [文章编号]100221208(2007)0820031203 [中图分类号]S859.84[摘 要] 介绍了硝基咪唑类药物的临床应用情况以及在动物源性食品中残留的危害和国内外对该药使用情况的管理规定。综述了检测硝基咪唑类药物的方法,包括高效薄层色谱法,酶联免疫吸附法,气相色谱法,气相色谱-质谱法,液相色谱法,液相色谱-质谱法,并对未来检测硝基咪唑的精确、灵敏、快速方法进行了展望。[关键词] 硝基咪唑类药物;残留;检测方法

作者简介:汪纪仓(1977年-),男,河南南阳人,讲师,研究方向为兽医药理学与毒理学。通讯作者:王大菊,教授。E-mai:lchinahbwdj@ResearchProgressOnAnalyticalMethodsofNitroimidazolesResiduesWANGJi2cang1,2,WANGDa2ju1,YANGZi2jun1,LINLin1(1.CollegeofVeterinaryScienceandTechnology,HenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang 471003;2.CollegeofVeterinaryMedicine,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan 430070;China)Abstract:52Nitroimidazoleshadbeenwidelyusedinveterinarymedicinefortreatmentofbacterialandprotozoalinfectionsinpoultry(histomoniasisinturkeyetc)andswine(swinedysentery).Anyresiduesofthesecom2poundswerenotpermittedinfood2producinganimalsinmanycountriesbecausetheirmutagenicandpotentialcar2cinogenicproperties.Inthispaper,researchprogressonanalyticalmethodsofnitroimidazolesresidueswassum2marized.Keywords:nitroimidazoles;residues;detect 硝基咪唑类药物是一类具有5-硝基咪唑环结构的药物,包括甲硝唑(Metronidazole,MNZ)、地美硝唑(Dimetridazole,DMZ)和洛硝唑(Ronidazole,RNZ)等。硝基咪唑类药物具有抗原虫和抗菌活性,同时也具有很强的抗厌氧菌作用,药物进入易感的微生物细胞后,在无氧或少氧环境和较低的氧化还原电位下,其硝基易被电子传递蛋白还原成具有细胞毒作用的氨基,抑制细胞DNA的合成,并使已合成的DNA降价,破坏DNA的双螺旋结构或阻断其转录复制,从而使细胞死亡,发挥其迅速杀灭厌氧菌、有效控制感染的作用。1 硝基咪唑类药物的临床应用MNZ除抗滴虫及阿米巴原虫外,还对脆弱拟杆菌、黑色素拟杆菌梭状杆菌属、产气荚膜梭状芽孢杆菌等有良好抗菌作用;DMZ不仅能抗大肠弧菌、多型性杆菌、链球菌、葡萄球菌和密螺旋体,且能抗组织滴虫、纤毛虫、阿米巴原虫等。添加本品于饲料中,可预防螺旋体引起的猪下痢,亦可用于防治禽类的组织滴虫病及六鞭虫病,此外还有增重作用。该类药物主要治疗原虫感染,如牛毛滴虫病、犬贾第虫病、鸡和火鸡组织滴虫病、禽贾第虫病、急性阿米巴痢疾和肠外阿米巴病。另外,还有抗蜜蜂#31# 2007,41(8):31~33/汪纪仓,等 中国兽药杂志微孢子虫病和阿米巴虫病的作用。MNZ内服吸收迅速,其生物利用度为60%~100%,在1~2h内达到峰浓度,在血中仅少量与血浆蛋白结合;消除半衰期犬为4.5h,马1.5~3.3h,一次给药可维持12h;能广泛分布于全身组织,进入血脑屏障,在脓肿及肝脓胸部位可达到有效浓度;血浆蛋白结合率低于20%。甲硝唑主要经尿排出体外。2 硝基咪唑类药物残留的危害及一些国家对其限制使用情况硝基咪唑类药物具有致突变性和潜在的致癌性,被许多国家列为违禁药物。在欧盟,RNZ、DMZ和MNZ分别在1993年、1995年和1998年被禁止用于食用动物,2002年美国食品与药物管理局(FDA)公布了禁止在进口动物源性食品中使用的11种药物,其中包括DMZ及其他硝基咪唑类药物。我国农业部和国家药品监督管理局第227号公告规定MNZ、DMZ及其盐、酯及制剂不准以促进动物生长为目的在所有食品动物饲养过程中使用。3 硝基咪唑类药物的检测方法国内建立的测定生物基质中硝基咪唑类残留的分析方法中,以常规的分析方法如气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、高效薄层色谱法(HPTLC)为主,但缺少确证方法。国外不仅有常规分析方法,而且有确证法如气相色谱-质谱法(GC-MS)、液相色谱-质谱法(HPLC-MS)的报道。3.1 高效薄层色谱法(HPTLC) 应用分析硝基咪唑类药物的报道较少,Gaugain等[1]建立了检测猪和禽组织中RNZ、DMZ和HMMNI(羟基地美硝唑)残留检测的HPTLC法。猪和禽肉用二氯甲烷萃取后蒸干,残余物溶于乙酸铵溶液,正己烷去脂,去脂后的溶液过固相萃取柱,洗脱液吹干溶于甲醇点板。展开剂为甲醇-乙酸乙酯。板干燥后喷吡啶紫外312nm检测。RNZ、DMZ和HMMNI的检测限分别为2、5和5Lg/kg。HPTLC由经典的薄层色谱法发展而来,它的优点是点样量少,分析时间快,分离度和分辨率好,对样品处理要求最低,操作最简便。检出限可达纳克(ng)至皮克(pg)水平。3.2 酶联免疫吸附法(ELISA) Huet等[2]建立了鸡肉和鸡蛋中DMZ、MNZ、RNZ、HMMNI和IPZ(异丙硝唑)的ELISA法,样品用乙腈萃取、正己烷去脂,DMZ在蛋和鸡肉中的检测限分别小于1Lg/kg和2Lg/kg,MNZ的检测限小于10Lg/kg,RNZ和HMMNI均小于20Lg/kg,而IPZ小于40Lg/kg。3.3 气相色谱法和气相色谱-质谱法 Wang等[3]建立了禽肉中DMZ、RNZ和MNZ多残留检测的GC2NPD法(氮磷检测器)。样品用乙腈提取后乙酸酸化,过阳离子固相萃取柱(SCX),乙腈-28%甲醇液洗脱分析物。洗脱液吹干后溶于甲醇进样分析,内标法定量。按照空白样品提取液的3倍信/噪计算,DMZ和MNZ的检测限为0.2ng/g,RNZ为0.5ng/g。DMZ、RNZ和MNZ添加浓度为5Lg/kg时,3种药物的回收率分别为85%、90%和80%,变异系数分别为13.0%、14.3%和11.2%。气相色谱法分离样品具有快速、高效的特点,但只是常规分析法,不能确证分析。Polzer等[4]建立了火鸡和猪组织中4种硝基咪唑类药物及它们的羟基代谢物的GC2NCI2MS法,5g样品加酶和缓冲液水解过夜,缓冲液取出后去脂过萃取柱,分析物测定前衍生化(定容至100LL),内标法定量。DMZ/HMMNI、RNZ、MNZ和MNZOH(羟基甲硝唑)的检测限为0.65~2.8Lg/kg,IPZ和IPZOH(羟基异丙硝唑)为5.2Lg/kg,回收率为95%~120%。Ho等[5]建立了禽和猪组织中DMZ和MNZ的GC2ECNI2MS法,2g样品用甲苯萃取,10mL萃取液加10mL正己烷混合,混合液过固相萃取柱,洗脱液吹干后衍生反应(定容至100LL)进样分析。检测限为0.1~0.6Lg/kg,定量限为0.3~1.9Lg/kg,DMZ添加浓度在1~9Lg/kg时,回收率为101%~106%,变异系数为7.7%~11%;MNZ添加浓度为0.2~2Lg/kg时,回收率为72%~90%,变异系数为14%~23%。Morris等[6]建立的GC2MS2MID检测猪饲料中DMZ和IPZ,检测限达不到2Lg/kg,但两种药物添加水平为0.1mg/kg时,质谱图中可给出足够质谱信息来确证两种药物。GC2MS集高灵敏度和定性分析于一体,应用将越来越广。3.4 液相色谱法和液相色谱-质谱法 有关硝基咪唑药物残留检测方法国内较少,农业部公布了动物性食品中MNZ、DMZ、RNZ残留检测的HPLC法,适用于鸡的肌肉、肝脏组织中单个或多残留的检测,检测限为1Lg/kg,在6~50Lg/kg添加浓度时回收率为60%~120%。样品先用乙酸乙酯提取,液液萃取、固相萃取柱净化等过程,处理方法较为复杂。王建华等[7]建立了鸡的肌肉组织中MNZ、DMZ#32#中国兽药杂志 2007,41(8):31~33/汪纪仓,等 和RNZ残留检测的HPLC法和气相色谱法。HPLC法中采用二氯甲烷提取后,提取液直接过硅胶固相萃取柱净化,样品添加浓度为10~50Lg/kg时,平均回收率为78%~91%,但灵敏度低,检测限为10Lg/kg。艾霞等[8]建立了MNZ在鸡蛋、牛奶及鱼的肌肉和皮肤中残留检测的HPLC法,鸡蛋和牛奶样品用乙酸乙酯提取,鱼的肌肉和皮肤用乙腈提取,提取液旋转蒸干,残余物溶于正己烷-乙酸乙酯(2B1)过固相萃取柱,洗脱液氮气吹干溶于流动相进样分析,MNZ在各组织中的检测限均可达1.0Lg/kg,牛奶和草鱼可食组织中HPLC残留检测方法,检测限和定量限均可达到1Lg/kg,空白鸡蛋、牛奶和草鱼添加MNZ浓度为1、2和4Lg/kg时,回收率为65%~82%,变异系数在6%~12%之间。液相色谱法和气相色谱法一样,不能用来定性,定性的液相色谱-质谱法已有报道,Capitan-Vallvey等[9]采用LC2MS检测水样中5种硝基咪唑类药物的含量,最低检测限在0.2Lg/L。Hurtaud-Pessel等[10]建立鸡肌肉组织中MNZ、RNZ、DMZ和HMMNI4种硝基咪唑类药物多残留检测的LC2MS法,样品处理简单,乙酸乙酯萃取蒸干,去脂后进样分析,内标法定量,检测限在5Lg/kg以下。添加浓度为5Lg/kg时,4种药物回收率为73%~97%,变异系数为17%~26%。Matusik等[11]建立了火鸡组织中DMZ和IPZ及它们代谢物的高效液相色谱热喷雾串联质谱法,检测限为2~10Lg/kg。Cannavan等[12]建立了禽组织和蛋中DMZ检测的高效液相色谱热喷雾质谱法,样品用二氯甲烷(肌肉)或甲苯(肝脏和蛋)萃取,萃取液过硅胶固相萃取小柱,DMZ用乙睛洗脱,洗脱液蒸干后溶于流动相进样分析,检测限为5Lg/kg,添加浓度在5~20Lg/kg时,回收率大于80%。硝基咪唑类药物显示弱碱性,可加H+形成准分子离子,但是质子化效率影响检测限。4 展望随着人们对食品安全问题的日益重视,对兽药残留检测方法的精确度、灵敏度和时效性等要求越来越高,从而要求不断地研究新技术并应用于残留检测。如生物芯片技术的日益成熟,将为兽药残留检测提供新的途径。由于生物芯片上可以集成成千上万密集排列的分子探针,能够在同一时间内分析大量样品,具有巨大的优越性,显示了比较好的应用前景。相信在不久的将来,针对硝基咪唑类药物残留检测的生物芯片研究也会开展起来,快速准确地同时对多种药物残留进行分析,确保食品安全。参考文献:[1]GaugainM,AbjeanJP.High-performanceThin-layerChroma2tographicMethodfortheFluorescenceDetectionofThreeNitroimi2dazoleResiduesinSwineandPoultryTissue[J].JChroA,1996,737(2):343-346.[2]Anne-CatherineHuet,LeenMortier,ElsDaeseleire,etal.De2velopmentofanELISAScreeningTestforNitroimidazolesinEggandChickenMuscle[J].AnalyticaChimicaActa,2005,534(1):157-162.[3]WangJH.DeterminationofThreeNitroimidazoleResiduesinPoultryMeatbyGasChromatographywithNitrogen-phosphorusDetection[J].JChromA,2001,918(2):435-438.[4]PolzerJ,GowikP.ValidationofaMethodfortheDetectionandConfirmationofNitroimidazolesandCorrespondingHydroxyMetab2olitesinTurkeyandSwineMusclebyMeansofGasChromatogra2phy-negativeIonChemicalIonizationMassSpectrometry[J].JChromatogrB,2001,761(1):47-60.[5]HoC,DellaWMSin,WongKM,etal.DeterminationofDimet2ridazoleandMetronidazoleinPoultryandPorcineTissuesbyGasChromatography-electronCaptureNegativeIonizationMassSpec2trometry[J].AnalyticaChimicaActa,2005,530(6):23-31.[6]MorrisWJ,NandreaGJ,RoybalJE,etal.QuantitativeConfir2mationofDimetridazoleandIpronidazoleinSwineFeedbyCapil2laryGasChromatography/massSpectrometrywithMultipleIonDe2tection[J].JAssocOffAnalChem,1987,70(4):630-644.[7]王建华,林黎明,崔鹤.液相色谱紫外法测定鸡肉中三种硝基咪唑残留量[J].化学分析计量,2000,9(4):9-10.[8]艾霞,王大菊,张丛兰,等.高效液相色谱法检测草鱼可食用组织中甲硝唑的残留[J].天津农学院学报,2005,12(2):10-14.[9]Capitan-VallveyLF,ArizaA,ChecaR,etal.DeterminationofFiveNitroimidazolesinWaterbyLiquidChromatography-massSpectrometry[J].JChromA,2002,978(1/2):243-248.[10]Hurtaud-PesselD,DelepineB,LaurentieM.DeterminationofFourNitroimidazoleResiduesinPoultryMeatbyLiquidChroma2tography-massSpectrometry[J].JChroA,2000,882(1/2):89-98.[11]MatusikJE,LeadbetterMG,BarnesCJ,etal.IdentificationofDimetridazole,Ipronidazole,andTheirAlcoholMetabolitesinTurkeybyThermospryTandemMassSpectrometry[J].JAgricFoodChem,1992,(40):439-443.[12]CannavanA,KennedyDG.DeterminationofDimetridazoleinPoultryTissuesandEggsUsingLiquidChromatography-Ther2mosprayMassSpectrometry[J].Analyst,1997,(122):963-966.#33# 2007,41(8):31~33/汪纪仓,等 中国兽药杂志

1052009 - 2010麻醉学科年度进展报告

阿片类药物的研究进展

裴丽坚 黄宇光北京协和医院麻醉科

2009~2010年度已发表在核心期刊上关于阿片类药物的研究报告主要集中于阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的有效性、安全性以及应用阿片类药物与肿瘤复发之间的关系。

1 阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛疼痛治疗的观念在近20年来有了很大的转变，现在认为：慢性疼痛是一种疾病；疼痛永远是恶性的，需要治疗；疼痛是伤害性或潜在组织损伤引起的不愉快感觉，常伴有内分泌、代谢、免疫或精神—心理改变；慢性疼痛的治疗需综合疗法，包括药物、心理治疗、物理治疗、神经阻滞和电刺激等。

1.1 阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的有效性目前的观点认为：单独使用阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛是一种安全的辅助镇痛用药。研究表明：长期使用非甾体类抗炎药（NSAIDs）的患者中有4％出现胃溃疡，有1％出现肾功能不全。和普通镇痛药可能导致的器官毒性相比，阿片类药物的致病率更低且更为经济。阿片类药物能够将慢性非癌性疼痛减轻至更能耐受的程度；使用长效阿片类药物能够更为稳定地控制疼痛；阿片类药物不存在天花板效应。Jane C. Ballantyne等[1]总结分析了近10年阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的有效性。大部分观察试验结果均支持阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛，这是因为大部分观察试验的研究者均是上述观点的支持者。然而随机对照试验结果显示慢性非癌性疼痛治疗中应用阿片类药物仅在早期治疗中可有效缓解疼痛，不能为长期应用阿片类药物的有效性提供证据。开放试验结果显示56%的患者最终因为疗效欠佳或副作用放弃了阿片类药物。阿片类药物效果欠佳的理论依据包括：药物耐受、阿片类药物诱导痛觉过敏、戒断症状以及心理因素。正如Portenoy和Foley（该项治疗的先驱者）指出：必须认识到，阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的成功与否与医患关系、患者的人格特征、用药及剂量方案密切相关。

1.2 阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的安全性2009~2010年度已发表的研究报告显示欧美学者对慢性非癌性疼痛治疗中使用阿片类药物的安全性提出了质疑。Dermot R. Fitzgibbon等[2]分析了慢性非癌性疼痛治疗中与药物相关的医疗诉讼。295例诉讼中药物相关诉讼占17%，大多为年轻男性合并腰背痛，服用阿片类药物者为94%，合用精神类药物占58%。51例诉【摘要】2009~2010年度的阿片类药物研究进展主要集中于阿片类药物治疗慢性非癌性疼痛的有效性、安全性以及应用阿片类药物与肿瘤复发之间的关系，许多研究结果证实阿片类药物本身能够促进肿瘤的复发。【关键词】阿片类药物；慢性非癌性疼痛；肿瘤；复发

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—５４２５．２０１２．０７．０１５　２０１２，Ｖｏ１．２９　Ｎｏ．７亿　与耋物Ｚ程　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　２，２＇－联咪唑硝基衍生物的合成及　与ＤＮＡ相互作用的研究　杨莉宁，姚琳。余丽丽，杨黎燕，尤静　（西安医学院药学院，陕西西安。７１００２１）　摘要：基于硝基咪唑类化合物有着广泛的抗微生物活性，合成了２，２Ｌ联咪唑的单硝基Ｎ０２　Ｈｂｉｉｍ和二硝基　（ＮＯ２）：ｂｉｉｍ两种衍生物，通过元素分析、紫外光谱、红外光谱、热重分析对其进行了表征，并采用紫外光谱法、荧光光谱　法和粘度法研究了二者与小牛胸腺ＤＮＡ（ｃｔ－ＤＮＡ）的相互作用。结果表明，化合物结构的共平面性对其与ＤＮＡ的插入　作用有较大的影响。　关键词：２，２　一联咪唑硝基衍生物；小牛胸腺ＤＮＡ；构效关系　中图分类号：Ｏ　６２６．２３　Ｏ　６５７．３　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２—５４２５（２Ｏ１２）Ｏ７—０ｏ５６－－０４　咪唑是一种广泛用于生物和医药领域的化学药　剂，硝基咪唑类药物除了具有显著的抗菌活性外【¨，还　具有抗病毒　。，　、抗结核　］、抗寄生虫　。　、抗肿瘤　］　等作用，目前已有众多该类药物应用于临床。鉴于硝　基咪唑类药物在抗微生物方面的突出效果，作者合成　了２，２，＿联咪唑（Ｈ２ｂｉｉｍ）的单硝基衍生物ＮＯ　Ｈｂｉｉｍ　和二硝基衍生物（ＮＯ。）　ｂｉｉｍ，对其进行了表征，并采　用紫外光谱法、荧光光谱法及粘度法初步研究了其与　小牛胸腺ＤＮＡ之间的相互作用方式，探讨了化合物　结构与ＤＮＡ相互作用之间的构效关系。这些工作对　于阐明小分子药物对核酸的复制和转录的影响、ＤＮＡ　靶标药物与ＤＮＡ的相互作用机制具有一定的意义，　为药物的定向合成提供了理论基础。　。　１　实验　１．１试剂和仪器　Ｎ，Ｎ－－－甲基甲酰胺、冰醋酸、醋酐、醋酸铵、发烟　硝酸、三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ，阿拉丁试剂公司），分　析纯；乙二醛水溶液，化学纯；小牛胸腺ＤＮＡ（ｃｔ—　ＤＮＡ），生化试剂，Ｓｉｇｍａ公司。所有试剂用前未作进　一步处理；实验用水为二次蒸馏水。　Ｖａｒｉｏ　ＥＬ—ＩｌｌＧ型元素分析仪，德国ＥＡ元素分析　系统公司；ＥＱＵＩＮＯＸ５５型红外光谱仪，德国Ｂｒｕｋｅｒ　公司；ＪＡ２００３型电子天平，上海越平科学仪器有限公　司；ＳＴＡ４４９Ｃ型热分析仪，德国Ｎｅｔｚｃｈ公司；１８００型　ｗａ．・—＋　：酱！　Ｎ　Ｎ．ＮＯ　＝。