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![一种酶法合成海藻糖的工艺方法[发明专利]](https://uimg.taocdn.com/d8e77119cec789eb172ded630b1c59eef9c79a4a.webp)
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1740323A [43]公开日2006年3月1日[21]申请号200410051199.7[22]申请日2004.08.24[21]申请号200410051199.7[71]申请人李宝健地址510275广东省广州市新港西路135号中山大学园西区747号之三103室[72]发明人李宝健 徐志祥 [74]专利代理机构广州知友专利商标代理有限公司代理人宣国华[51]Int.CI.C12N 15/52 (2006.01)C12N 15/81 (2006.01)C12P 19/12 (2006.01)C12P 19/14 (2006.01)C12N 15/10 (2006.01)C12N 15/63 (2006.01)C12N 1/19 (2006.01)权利要求书 2 页 说明书 9 页 附图 7 页[54]发明名称一种酶法合成海藻糖的工艺方法[57]摘要本发明公开了一种酶法合成海藻糖的工艺方法，包括下列步骤：a.分别克隆灰树花海藻糖合成酶基因和大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因；b.分别构建灰树花海藻糖合成酶基因和大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因的表达载体；c.在酵母中分别转化、表达灰树花海藻糖合成酶基因以及大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因的表达载体，构成重组蛋白，然后对重组蛋白进行纯化；d.在以蔗糖和葡萄糖为主要成分的反应液中，分别加入纯化的上述重组蛋白合成海藻糖。
本发明应用基因工程、酶工程和发酵工程合成海藻糖，在酶法生产海藻糖方面形成了新的技术和工艺，同时以蔗糖和葡萄糖这两种廉价的原料来实现工业化规模化生产海藻糖，降低了成本，具有重大的经济效益。
200410051199.7权 利 要 求 书第1/2页1、一种酶法合成海藻糖的工艺方法，包括下列步骤：a.分别克隆灰树花海藻糖合成酶基因和大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因；b.分别构建灰树花海藻糖合成酶基因和大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因的表达载体；c.在酵母中分别转化、表达灰树花海藻糖合成酶基因以及大肠杆菌蔗糖磷酸化酶基因的表达载体，构成重组蛋白，然后对重组蛋白进行纯化；d.在以蔗糖和葡萄糖为主要成分的反应液中，分别加入纯化的上述重组蛋白合成海藻糖。
海藻糖制备方法及应用研究概述周培华，刘 兰，刘 赛*，侯文慧，周 颖，袁列江（湖南省产商品质量检验研究院，湖南长沙 410017）摘 要：海藻糖为一种性质稳定且不具有还原性的功能糖，具有保护生物活性物质的特殊功能，在各行各业中应用广泛，且具有广阔的发展前景。
本文主要综述了目前海藻糖的制备方法和海藻糖的应用研究，探讨了海藻糖的发展动态及应用前景，以供相关人员参考。
关键词：海藻糖；功能糖；制备方法；应用研究Review on Preparation and Application of Trehalose ZHOU Peihua, LIU Lan, LIU Sai*, HOU Wenhui, ZHOU Ying, YUAN Liejiang(Hunan Provincial Institute of Product and Goods Quality Inspection, Changsha 410017, China) Abstract: Trehalose is a stable and non reducing functional sugar with special functions of protecting bioactive substances. It is widely used in various industries and has broad development prospects. In this paper, the preparation methods of trehalose and the application of trehalose were reviewed, and the development trend and application prospect of trehalose were discussed, for reference by relevant personnel.Keywords: trehalose; functional sugar; preparation method; application research海藻糖是由两个葡萄糖分子以α-1,1糖苷键构成的非还原性糖，性质很稳定，属于一种功能性糖，它具有保护生物活性物质的特殊功能，能很好地保护细胞和营养物质的结构，使生物体在极端异常情况下，仍能保持生命活力[1]。
用2种新型酶从淀粉中生产海藻糖
孙国凤
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】1995(000)003
【摘要】林原生物化学研究所通过新找出的作用于糖的2种酶,实现了用比以前低的成本生产功能性双糖——海藻糖的技术,从95年春开始正式生产。
据说确立了
与麦芽糖等淀粉糖制法几乎相同过程的低成本制作法,如能进行大量生产,就能供应
食品级的海藻糖(1公斤200日元)。
因价格低,能迅速扩大海藻糖的实际应用范围。
作为糖质的制法改变显示了酶法的优越性。
林原生物化学研究所今后不仅打算独占这项海藻糖制作技术,而且打算在得到各方面协助后积极普及这项技术。
【总页数】1页(P34-34)
【作者】孙国凤
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】TS245
【相关文献】
1.以淀粉为原料利用微生物酶生成海藻糖的新方法 [J], 李晓东
2.酶法转化淀粉合成海藻糖的初步研究 [J], 张海平;杨静;段作营;毛忠贵
3.新型淀粉糖--海藻糖应用前景 [J], 傅其军;潘汉;李有忠
4.海藻糖对α-淀粉酶退浆工艺的影响 [J], 刘晶晶;葛凤燕;蔡再生
5.亟待开发的新型淀粉酶—耐碱性淀粉酶 [J], 刘建军;姜鲁燕
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海藻糖生物转化生产新技术1研究背景1.1海藻糖的分子结构及理化性质海藻糖（Trehalose）是由两个葡萄糖分子以1,1-糖苷键连结而成，分子内不存在游离的半缩羟基，是一种稳定的非还原性二糖。
海藻糖有3种光学异构体，其中αβ型和ββ型在自然界中很少存在，而αα型是最常见的海藻糖。
图a.海藻糖的分子结构（αα型）海藻糖无色无嗅，具很强的热稳定性、酸稳定性和化学稳定性，对蛋白质、核酸、细胞膜等活体成分有很强的稳定作用，在活体受到外界压力（如干燥、冻结、渗透压等）时有保护作用。
1.2海藻糖的来源海藻糖广泛存在于植物（藻类）、细菌、真菌、酵母和无脊椎动物体内（昆虫）。
1.3海藻糖的工业应用由于海藻糖具备稳定的细胞膜和蛋白质结构，海藻糖具有抗冷冻性、保湿性、耐高温性、干燥抗性、非还原性等良好的加工特性，加之外源性的海藻糖具有良好的非特异性保护作用，因此广泛应用于食品、医药、精细化工和化妆品等领域。
海藻糖可作为冷冻食品的保护剂。
使用淀粉的食品，易因淀粉的老化而变硬，出现松散、白浊等现象，工业上主要通过添加糖类抑制淀粉老化，而其中海藻糖防止淀粉老化的作用明显优于其他糖类。
在有效的保护蛋白质分子的天然结构的同时，也保持了食品的质地和风味。
目前已成功利用海藻糖干燥的食品有牛奶、咖啡、果汁、脱水蔬菜等。
海藻糖甜度低，渗透压与蔗糖相当，具有抗龋齿功能，可在食品中代替蔗糖使用。
作为保护牙齿食品的甜味剂广泛应用于各种糖果、口香糖、糕点、饮料、冰淇淋、巧克力等。
海藻糖具有保护生物分子的独特功能，是生物分子的特效保护剂和组织细胞的稳定剂，为医用生物制品，如血液制品、酶、疫苗、病毒、激素、单克隆抗体、重组人体蛋白等的干燥保存、运输和使用带来极大的方便。
英国剑桥Quadsant公司和WHO进行合作，利用海藻糖干燥脊髓灰质炎疫苗，解决从生产地到第三世界一些国家的长途运输中的冷冻问题，统计仅此一项即可节省数百万美元的冷冻系统费用。
海藻糖也可应用于保健品产业。
海藻糖介绍我们都知道，水是生命的源泉。
在各种生物体内，都含有不等量的水。
以植物为例，水生植物的含水量可高达98％，而有些沙漠植物的含水量却只有16％。
如果低于这个百分比，这些植物细胞中的原生质就会遭受破坏而死去。
可是，有这么一种植物，即便含水量降低到5％以下，几乎成为“干草”了，仍然可以保持生命。
有人把这种植物全株做成干制标本，放在植物分类标本橱中，几年后，这株干草无意中落到了水池中，待第二天被人发现时，它竟舒展开全部枝叶，又变得生机勃勃了。
南美洲的沙漠中，也有一种小植物，当水分不充足的时候，它就会自己把根从土壤里拔出来，让整个身体缩卷成一个圆球状。
由于体轻，只要稍有一点儿风，它就会在地面上滚动，一旦滚到水分充足的地方，圆球就会迅速地打开，根重新钻到土壤里，暂时安居下来。
当水分又一次不足，它住得不称心如意时，就会继续游走寻找充足的水源。
这两种植物，都属卷柏科植物，别名有“一把抓、老虎爪、长生草、万年松，九死还魂草，风滚草”等，因为它的不死神奇，引发了一场研究热潮。
人们给这类植物取了一个新的名词“隐生生物(crypohidden life)”。
后来科学家们发现，隐生生物其实广泛存在于生物界，这类生物在干燥时脱水，以极低或停滞的新陈代谢形式处在一种保存状态，当环境允许再水化时它们可立即复活。
目前对这种隐生现象的分子机制还不清楚，但有一点可以肯定：这类生物在干燥时其组织中的海藻糖(trehalose)含量都很高。
海藻糖可能与隐生现象密切相关：在有水的时候，海藻糖帮助卷柏吸收和储存水分，干燥时，海藻糖可以取代组织中的水，保护细胞免遭脱水的伤害，维持细胞的天然结构，保护生物组织与生命物质不受破坏的作用，从而延续着生命的奇迹！享誉世界的天然海藻糖研究表明，海藻糖对生物分子能起到非常重要的保护作用。
现在一些医用生物产品，如血液制品、菌苗、疫苗、单克隆抗体、载药脂质体等容易失活，多采用冷冻干燥制备和低温保存。
如果能利用海藻糖干燥这些生物产品，不仅可以保存其生物活性，而且能改善工艺条件，并在常温下存放。
海藻糖——“生命之糖”我们都知道，水是生命的源泉。
在各种生物体内，都含有不等量的水。
以植物为例，水生植物的含水量可高达98％，而有些沙漠植物的含水量却只有16％。
如果低于这个百分比，这些植物细胞中的原生质就会遭受破坏而死去。
可是，有这么一种植物，即便含水量降低到5％以下，几乎成为“干草”了，仍然可以保持生命。
有人把这种植物全株做成干制标本，放在植物分类标本橱中，几年后，这株干草无意中落到了水池中，待第二天被人发现时，它竟舒展开全部枝叶，又变得生机勃勃了。
南美洲的沙漠中，也有一种小植物，当水分不充足的时候，它就会自己把根从土壤里拔出来，让整个身体缩卷成一个圆球状。
由于体轻，只要稍有一点儿风，它就会在地面上滚动，一旦滚到水分充足的地方，圆球就会迅速地打开，根重新钻到土壤里，暂时安居下来。
当水分又一次不足，它住得不称心如意时，就会继续游走寻找充足的水源。
这两种植物，都属卷柏科植物，别名有“一把抓、老虎爪、长生草、万年松，九死还魂草，风滚草”等，因为它的不死神奇，引发了一场研究热潮。
人们给这类植物取了一个新的名词“隐生生物(crypohidden life)”。
后来科学家们发现，隐生生物其实广泛存在于生物界，这类生物在干燥时脱水，以极低或停滞的新陈代谢形式处在一种保存状态，当环境允许再水化时它们可立即复活。
目前对这种隐生现象的分子机制还不清楚，但有一点可以肯定：这类生物在干燥时其组织中的海藻糖(trehalose)含量都很高。
海藻糖可能与隐生现象密切相关：在有水的时候，海藻糖帮助卷柏吸收和储存水分，干燥时，海藻糖可以取代组织中的水，保护细胞免遭脱水的伤害，维持细胞的天然结构，保护生物组织与生命物质不受破坏的作用，从而延续着生命的奇迹！享誉世界的天然海藻糖研究表明，海藻糖对生物分子能起到非常重要的保护作用。
现在一些医用生物产品，如血液制品、菌苗、疫苗、单克隆抗体、载药脂质体等容易失活，多采用冷冻干燥制备和低温保存。
