1 目的
规范Waters e2695液相色谱仪的操作规程，正确使用本仪器，保证检测工作顺利进行以及操作人员、设备、周围环境的安全。
2 适用范围
本指导书适用于Waters e2695液相色谱仪、2489紫外检测器及随机工作站。
3 职责
操作人员按本规程操作仪器，对仪器进行日常维护，作使用登记。
保管人员负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期维护，保养。
科室负责人负责对仪器综合管理。
4 仪器性能指标
e2695系统
4.1.1 泵/溶剂管理系统：相互独立控制的线性双柱塞驱动装置,双压力传感器反馈回路, 无脉动, 无需混合器和阻尼器。
4.1.1.1溶剂数：4
4.1.1.2流速范围：以为增量
4.1.1.3流速精度：±%RSD
4.1.1.4流速准确度：±%RSD
4.1.1.5操作压力：0-6000psi(0-410bar) ，可设上,下限
4.1.1.6混合范围：~%，以1% 增量
4.1.1.7梯度准确度：±%，不随反压变化
4.1.1.8梯度精度：±%，不随反压变化
4.1.1.9压缩补偿：自动，连续
4.1.1.10梯度曲线：多种梯度曲线: 线性, 凸线和凹线等11种
4.1.1.11系统体积：< 650μL, 不随反压变化
4.1.2 自动进样器/样品管理系统：
4.1.2.1样品盘数：120位,分5个样品盘,每个样品盘可放置24个2ml样品瓶
4.1.2.2进样次数：每个样品可进样1到99次
4.1.2.3进样精度：<%RSD
4.1.2.4样品污染度：<%
4.1.2.5进样准确度：±1 uL
4.1.2.6进样体积：to 100 uL
4.1.2.7进样线性度：> coefficient of deviation
4.1.3 在线柱塞清洗装置：
可在线清洗柱塞杆，可防止因缓冲盐溶液结晶而造成的堵塞，延长密封圈的使用寿命。
4.1.4 在线脱气装置：
4.1.5柱温箱：
4.1.
5.1温度设定范围：室温至65℃
4.1.
5.2温度稳定性：±0.15℃
4.1.
5.3柱容量：4根柱
检测器：
2489双波长紫外检测器
双通道紫外检测器，可进行双波长同时测定；最新专利梯形狭缝池设计，确保低噪音，高灵敏度，宽线性范围；Maxplot,Ratioplot优化灵敏度，检测共流出物杂质，可作简单峰纯度鉴定。
4.2.1.1波长范围：190-700nm
4.2.1.2 灯：氘灯，具有灯优化软件,可以延长灯的使用寿命，可编程控制灯的开关4.2.1.3波长准确度：±
4.2.1.4波长重现性：±
4.2.1.5光谱带宽：5nm
4.2.1.6噪音：5 X 10-6AU
4.2.1.7漂移：≤1 X 10-4AU/hr
4.2.1.8线性范围：< 5% at AU
4.2.1.9流通池：池长10mm，池体积10ul
4.2.1.10 采集速率：80Hz
5 操作规程
操作前准备
5.1.1色谱柱的检查与安装首先打开柱温箱门看是否是所需用的色谱柱，若不是则旋下色谱柱螺母，卸下色谱柱，马上用死堵堵上。取出所需色谱柱，两端用螺母旋紧，固定
在卡槽上，注意色谱柱的方向，不能装反。
5.1.2 溶剂的准备。
5.1.2.1 甲醇或乙腈必须用HPLC纯，其他无机试剂也最好用HPLC纯，且需经过μm 滤膜溶剂过滤装置过滤。试剂的纯净非常重要。必须要采用超纯水，可以用哇哈哈纯净水替代。
主机操作
5.2.1灌装及清洗系统
5.2.1.1当真空脱气机第一次使用或当真空管是空的，或当改变溶剂，且当前溶剂与真空管中溶剂不相溶时，应当灌装清洗系统。
5.2.1.2如果使用易挥发的混合溶剂或改变溶剂时，若系统长时间关机（比如，隔夜）灌装系统推荐将泵的流速控制在高水平（3-5ml/min）。
5.2.1.3使用注射器灌装系统（干灌装）：点击仪器面板上“Menu/status”按钮，选择“Direct Function”,然后点击“dry prime”选择欲灌装的通道并逆时针方向旋开灌装/排放阀，将专用注射器插入灌装/排放阀入口内，拉动注射器活塞吸入大约10毫升灌装液或直到管路中不在有气泡为止。灌装完成后顺时针方向拧紧灌装/排放阀。
5.2.1.4首次灌装系统时，使用干灌装并使用异丙醇、甲醇、乙醇作为灌装溶剂。
5.2.1.5置换管路中的流动相，使用湿灌装：点击仪器面板“Menu/status”按钮，选择“Direct Function”,然后点击“wet prime”选择欲灌装的通道。
5.2.1.6如果当前管路中溶剂是有机的或水而当前流动相也为有机溶剂或为水，在能互
相溶解的情况下，用流动相作为灌装溶剂。
5.2.1.7如果当前管路中溶剂是有机的或水而当前流动相也为有机溶剂或为水，但不能互相溶解的情况下，使用异丙醇灌装系统。
5.2.1.8如果管路中溶剂为有机的而当前流动相为缓冲盐或管路中为缓冲盐而流动相为有机溶剂时，使用10%异丙醇、甲醇、乙醇灌装系统。
优化泵的性能
5.3.1总是把存放溶剂瓶的溶剂瓶架放在泵的顶部（或在相对于泵较高的位置）。
当使用盐溶液的时候，常需要用水冲洗所有流路。这样就可以将阀门端口的沉淀的盐冲洗掉。在运行泵之前，用至少两倍体积（30ml）的水冲洗真空脱气机，特别是当泵关闭较长时间时或者通道中使用易挥发混合溶剂时。
5.3.3当基线长时间不能处于稳定状态时，通常情况下应考虑溶剂进口过滤器是否堵塞。当溶剂过滤器堵塞时，应将其从溶剂瓶中取出并将其放入30%硝酸溶液中超声清洗30min。在将其重新装入溶剂瓶之前，必须用MillQ水对其进行彻底的清洗。长期处于水或缓冲液中的过滤器常因为溶剂中藻类等微生物的生长，造成过滤器的堵塞。因此建议在使用完此类流动相后，用50%乙腈清洗溶剂过滤器。
5.3.4当使用缓冲溶液时，在关闭系统前必须将通道中的溶剂置换成50%乙腈，以防止藻类等微生物的生长。
使用Empower色谱工作站
5.4.1双击电脑桌面上的Empower快捷图标，出现Empower登陆窗口。输入用户名与密码，默认账号为“system”，密码为“manager”，点击“OK”进入Empower工作站。
