高效液相色谱法测定注射用美罗培南的有关物质
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第35卷第3期 长治医学院学报
2021 年 6 月 JOURNAL OF CHANGZHI MEDICAI COLLEGE167Vol. 35 No. 3
Jun. 2021
高效液相色谱法测定注射用美罗培南的有关物质
李金格禹玉洪* *
作者单位山西医科大学药学院药剂教研室(030001)
* 通信作者(E-mail
：3024546064@ qq. com)摘要目的：探讨优化注射用美罗培南杂质A
、B
的测定方法。方法：运用高效液相色谱法(HPLC)
进行检测，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A
：20. 0 mmol-L'1
磷酸二氢钠-甲醇
(89
：11,
V/V)，流动相B
：甲醇，流速1.0 mL-min1,
检测波长220 nm,
柱温30
P。结果：主成分峰与杂质峰可实现
基线分离，杂质A
检测限和定量限分别为1. 62,5.15 ng,
杂质B
检测限和定量限分别为0. 85,2. 51 ng
；1.2~
24.0 ixg-mL-1
的杂质A
具有良好的线性关系(r=0. 999 9) ,0.7-14.0 ixg-mL1
的杂质B
具有良好的线性
关系(r=0. 999 9)
；杂质A
平均加样回收率为101.2%(RSD= 1.38%,“ = 9),
杂质B
平均加样回收率为
100.2%(RSD=1.29%,n = 9)o
经破坏性试验，美罗培南可能的降解杂质A
、B
均不干扰美罗培南主峰的
测定。结论:检测限及定量限、精密度、稳定性、耐用性试验结果均符合HPLC
有关物质测定的方法学验
证要求。本HPLC
法专属性良好，可用于美罗培南的主要杂质A
、B
的定量控制。
关键词美罗培南；有关物质；高效液相色谱法
中图分类号
R97&1 文献标识码
A 文章编号
1006(2021)03-167-05
Determination of Related Substances of Meropenem for Injection by High Performance Liquid Chromatography
LI Jinge, YU Yuhong
Department of Pharmacy, School of Pharmacy, Shanxi Medical University
Abstract
Objective: To explore and optimize the determination method of impulity A andB of meropenem for injection. Meth
ods :Using the high performance liquid chromatography ( HPLC) to detection, Octadecylsilane-bonded silica gel was used as the fi
ler
； The mobile phase A: 20. 0 mmol* L-1 sodium dihydrogen phosphate-methanol ( 89
： 11, V/V) . The mobile phase B : methanol,
the flow rate was 1. 0 mL*min_1 and the detection wavelength was set at 220 nm. The column temperature was set at 30 % . Re
sults :The principal component peak and impurity peak could achieve baseline separation. The detection limit and quantitative limit
of impurity A were 1. 62 ng and 5. 15 ng respectively, and the detection limit and quantitative lim让
of impurity B were 0. 85 ng and
2. 51 ng respectively. There was A good linear relationship between impurity A (r = 0. 999 9) and impurity B ( r= 0. 999 9 ) in the
range of 1. 2-24. 0 |xg*mL_1 and 0. 7 ~ 14. 0 jig* mL-1. The average recovery of impurity A was 101. 2% ( RSD = 1. 38% , n = 9),
and that of impurity B was 100. 2% ( RSD = 1. 29% , n= 9). After stressing test, both of impurities A and B of meropenem didn* t
interfere w让
h the determination of meropenem main peak. Conclusion: The test results of detection lim让
and quant Native lim让，
pre
cision ,stabil让
y and durability all meet the methodological verification requirements of HPLC related substance determination. The
HPLC method has good specificity and can be used for the quant Native control of major impurities A and B.
Key words
meropenem
； related substances
； HPLC
注射用美罗培南(Meropenem, C”H25
弘0
申)
是由日本住友制药公司与英国ICI
制药公司共同
开发的第二代碳青霉烯抗生素，通过干扰细菌细
胞壁的合成发挥杀菌作用，具有广谱耐酶的特
点[1_4]o
在美罗培南原料中常检测出杂质A
及杂 质B,
杂质A(C17H27N3O6S)
为美罗培南四元内酰
胺环结构发生水解反应而形成，系美罗培南的降
解产物；杂质B(C34H50N6O10S2)
为美罗培南与杂
质A
发生聚合反应而形成，系美罗培南的二聚
体X。
本次研究参考了 2020
版《中国药典｝ JPXVII
版《日本药典》对美罗培南及注射用美罗培南有关
物质的测定色谱条件进行优化，并进行方法学验
证，
为后续制剂的开发与储存提供质量评价相关168长治医学院学报
依据［7_9： O
1
仪器与试药
1.1
实验仪器
超纯水系统（Field-p,
费尔德科技仪器有限公
司）；高效液相色谱仪（岛津LC-20AT UV）
；色谱
柱（Hypersil 0DS2,250 mmx4. 6 mm, 5 jjini
）;电子
分析天平
（CPA225D,
精度1/10
万，赛多利斯公
司）；pH
计（FE28,
梅特勒-托利多仪器有限
公司）。
1.2
药品与试剂
美罗培南原料药（深圳市海滨制药有限公司，
批号
：8004L91B）
；美罗培南对照品（中国食品药品
检定研究院，批号
：130506 - 201902,
纯度
99. 94%）
；注射用美罗培南（某医药科技有限公司
自制制剂，批号：20190601,20190602
、20190603）
；
注射用美罗培南（大日本住友制药株式会社，批
号
：2394C）
；杂质A
（深圳卓越生物科技有限公司，
批号：20190329,
含量88%）
；杂质B
（中国食品
药品检定研究院，批号：20190316,
含量
：97. 14%）
；
磷酸为色谱纯（批号：20190415,
天津光复精细化
工研究所）；三乙胺为分析纯（批号：20190212,
福
晨化学试剂有限公司）；甲醇为色谱纯（批号：
20190515,
天津光复精细化工研究所）；磷酸二氢
钾为分析纯（批号：20190213,
天津市大茂化学试
剂厂）。
2
方法与结果
2.1
溶液的制备
2. 1.1
溶剂：精密量取三乙胺1.0 mL,
加水
900 mL,
用磷酸溶液
（1 — 10）
调节pH
值至5.0±
o. 1,
加水稀释至1 000 mL,
作为溶剂。2.
1.2对照品溶液的制备:分别取对照品美罗培
南、杂质A
、杂质B
适量，各置于容量瓶中，加溶剂
超声溶解并稀释为每1 mL
中含美罗培南25
从&、
杂质A24
临、杂质B14
临的对照品溶液。
2.1.3
供试品溶液的制备:分别取美罗培南原料
药、注射用美罗培南（自制制剂）、注射用美罗培南
（参比制剂）适量，各置于容量瓶中，加溶剂超声溶
解并稀释为每1 mL
中含美罗培南5 mg
原料药供
试品溶液、自制制剂供试品溶液、参比制剂供试品
溶液。
2.1.4
系统适用性溶液：取美罗培南原料药适
量,加溶剂制成每1 mL
中含美罗培南5 mg
的溶
液。置60
兀水浴中加热30 min,
放至室温,作为系
统适用性溶液。
2.2
色谱条件与系统适用性试验
参考中国药典2020
版、日本药典JPXVII
版质
量标准有关物质方法，对原料药溶液、制剂溶液及
原料药加辅料溶液进行考察。在中国药典有关物
质方法条件下，原料药与制剂主峰出峰时间存在
差异，且制剂主峰峰形有明显前延，杂质B
峰形
差（见图1A）
。日本药典有关物质方法条件下，
出现主峰前延，主峰杂质与主峰分离度不合格，
杂质B
峰形差（见图1B）
。故以上两种方法均不
适于美罗培南的有关物质检测，最终选择以下色
谱条件。
色谱柱为Hypersil ODS2
，流动相A
： 20 mmol
・L 1
磷酸二氢钠（用1 mol-L-1
氢氧化钠溶液调节PH =
6. 50）
-甲醇（89
：11,V/V）
；流动相B
：甲醇;检测波
长为220 rnn,
柱温为30 %
;流速为1.0 mL-min1,
进样量为10 piLo
记录色谱图（图1C）,
梯度洗脱
程序见表1
。
13 000 {
12 000
11 000-
10 000
9 000
8 000
7 000
6 000
5 000
4 000
3 000
2 000
1 000
06 500
6 000
5 500
5 000
4
4
3
3
2 500
2 000
1 500
1 000
500
0
2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min 0.010 000
9 000：
8 000i
7 000i
6 0001
5 000：
4 000；
3 000：
2 000
1 oooi
Oi
-1 000
匚2
3
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 min
A.中国药典方法;B.日本药典方法；C.优化方法；1.参比制剂；2.原料药及辅料;3.原料药
图1美罗培南HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatogram of
meropenem
