g菌g-菌差别[选读]
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G+菌 G-菌为什么要来谈G+菌和G-菌,因为在后面的介绍抗菌药我们会用到,不同的细菌感染所
用的抗菌药不同。例如如,青霉素G(天然青霉素),就主要针对G+菌感染,只对G-
菌部分敏感,这主要和细菌细胞壁的结构有关。 抗菌药主要是一些抗生素,抗生素滥用在中国的情况很严重,其导致的问题可能是
最后细菌感染将无药可治,比如现在出现的一个名词叫“超级细菌”,其产生原因是因为
人们滥用抗生素,导致某些细菌对大部分抗生素都产生耐药性,最后这些细菌感染带来
的结果相当可怕。所以现在国家开始规范抗生素使用,能不用抗生素尽量少用或者不用,
对不同的病症患者使用合适的抗生素,做到不滥用,不多用。由此我们区分不同的细菌
感染将显得非常重要。 G+菌和G-菌的是通过革兰氏染色法来划分的,G+菌和G-菌细菌的细胞壁的组分
和结构不同(参见我的前篇文章:细菌的细胞壁),所以染色结果不同,这样我们就把
其鉴别开来了。
革兰氏染色法
我们来看看什么是革兰氏染色法。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细
菌学家Christain Gram创立。 其一般分为四个步骤:初染,媒染,脱色,复染。
染色液 结晶紫溶液 结晶紫乙醇饱和溶液(取结晶紫约 4~8g,溶于 95%乙醇 100ml
中)20ml,1%草酸铵溶80ml 将上述两溶液混合,过滤。结晶紫不可用龙胆紫代替。前者是纯品,后者不是单
一成分,易出假阳性。结晶紫溶液放置过久会产生沉淀,不能再用。
助染剂 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml
将碘与碘化钾先行混合,加入少许蒸馏水,充分振荡。待完全溶解后再加入其余
的蒸馏水。当溶液由棕黄色变为淡黄色时应弃去。为易于储备,可将上列碘与碘化钾溶
于30ml蒸馏水中,用前稀释。
脱色剂 95%乙醇。
复染剂 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml
将沙黄溶于乙醇中,待完全溶解后加入蒸馏水。
染色步骤 1、 将培养18~24h的培养物涂片,要涂得薄些。将涂片在火焰上加温固定,待
冷却后滴加结晶紫溶液,1min后水洗。 2、 滴加助染剂,1min后水洗。
3、滴加脱色剂,摇动玻片,直至无紫色脱落为止(约 20~30s)水洗。
4 、滴加复染剂,1min后水洗,晾干,镜检。呈紫色者为革兰氏阳性菌,红色者
为阴性菌。
染色结果 有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;
弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。