小鼠骨髓细胞染色体制备与观察 PPT

实验三、小鼠骨髓细胞染色 体制备与观察
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿

三、实验步骤：
1、取材：以颈椎脱臼法处死小鼠，取两腿股骨，剔净肌肉，擦去附 着在上面的血污，剪取两端股骨头，暴露骨髓腔，用注射器吸取 KCL(0.075mol/L)溶液，将针头插入骨髓腔上段冲洗，用离心管接收 冲洗液。
2、低渗处理：加KCL至2/3管，用吸管打匀使细胞悬浮于低渗液中，放入
4．离3心：72℃000恒转/分温，离水心5浴min锅，弃中上清，液，静留下置沉淀2物5。min。（吹打不宜过猛） 345678．．、、、、预离固再再制固 心 定 固离片定：：定心：：沿：2：用0加离再02滴00入心加转0管固管入0/吸转分定壁固细/，液加定分胞离入 液5，滴心悬固2离－吹5定液心m3打液，滴i5混n5m，从，m匀打i2弃nl。打0匀，上－匀。弃清3，上0液室c清，m温液留高下，下度固沉留定滴淀下1在物0沉冰m。淀i水n物。预。浸泡的 548394043335130230581168331093091477777、 ． 、 ． 、 ． ． ． ． ． 、 、 ． 、 、 、 、 、 、 ． ． 、 、 ． 、 、 ．55555固离制预染离离预预预固取预低预固制取取再制预预取染预染取离mmmmmooooo定心片固色心心固固固定材固渗固定片材材离片固固材色固色材心lllll/////：：：定：：：定定定：定处定：：：：心：定定：：定：：：LLLLL)))))溶溶溶溶溶沿2用：G22：：：沿以：理：沿用以以：用：：以G：G以20000iii液 液液液液离滴加加加加离颈加：加离滴颈颈滴加加颈加颈2eee0000mmm00000， ，，，，心管入入入入心椎入加入心管椎椎管入入椎入椎0转转转转sss0将 将将将将aaa管吸固固固固管脱固固管吸脱脱吸固固脱固脱K///转/染染染分分分分C针 针针针针壁细定定定定壁臼定定壁细臼臼细定定臼定臼/L液液液，，，分，头 头头头头至加 胞 液 液 液 液 加 法 液 液 加 胞 法 法 胞 液 液 法 液 法染染染离离离，离插 插插插插2入悬入处入悬处处悬处处555555555色色色/心心心离心滴滴滴滴滴滴滴滴滴3入 入入入入固液固死固液死死液死死管777555心5吹吹吹吹吹吹吹吹吹骨 骨骨骨骨定，定小定，小小，小小mmmmmmm，5打打打打打打打打打iiii髓 髓髓髓髓液从液鼠液从鼠鼠从鼠鼠miiinnnnnnn用混混混混混混混混混，，，，、、、i腔 腔腔腔腔，，，，，525522n吸mmm0匀匀匀匀匀匀00匀匀匀弃弃弃，弃细细细上 上上上上取取取取取－－－管lll。。。。。。。。。打打打上上上弃上水水水段 段段段段两两两两两333打匀匀匀清清清上清000冲冲冲冲 冲冲冲冲腿腿腿腿腿ccc匀，，，液液液清液mmm洗洗洗洗 洗洗洗洗股股股股股使高高高室室室，，，液，、、、， ，，，，骨骨骨骨骨细度度度温温温留留留，留晾晾晾用用 用 用 用，，，，，胞滴滴滴下下下下下下留下干干干离 离离离离剔剔剔剔剔悬在在在固固固沉沉沉下沉。。。心 心心心心净净净净净浮冰冰冰定定定淀淀淀沉淀管 管管管管肌肌肌肌肌于水水水111物物物淀物接 接接接接肉肉肉肉肉000低预预预。。。物。mmm收 收收收收，，，，，渗iii浸浸浸。nnn冲 冲冲冲冲擦擦擦擦擦。。。液泡泡泡洗 洗洗洗洗去去去去去中的的的液 液液液液附附附附附，洁洁洁。 。。。。着着着着着放净净净在在在在在入载载载上上上上上3玻玻玻7面面面面面℃片片片的的的的的恒上上上血血血血血温，，，污污污污污水立立立，，，，，浴即即即剪剪剪剪剪锅用用用取取取取取中口口口两两两两两，吹吹吹端端端端端静散 散 散股 股 股 股 股置，，，骨骨骨骨骨2在在在头头头头头5m酒酒酒，，，，，i精精精n暴暴暴暴暴。灯灯灯露露露露露上上上骨骨骨骨骨过过过髓髓髓髓髓几几几腔腔腔腔腔次次次，，，，，或或或用用用用用吹吹吹注注注注注风风风射射射射射机机机器器器器器吹吹吹吸吸吸吸吸干干干取取取取取。。。KKKKKCCCCCLLLLL(((((00000..... 洁净载玻片上，立即用口吹散，在酒精灯上过几次或吹风机吹干。 5、固定：沿离心管壁加入固定液5ml打匀，室温下固定10min。

小鼠骨髓细胞染色体标本制备和核型分 析
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
60、人民的幸福是至高无个的法。— —西塞 罗
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔

9．在干净、湿冷的载玻片上以高距离滴2～3 滴上层细胞悬液，气干或在酒精灯上文火 烘干。注意在滴片时要有一定的高度（大 于40cm），使细胞膜破裂后易于使染色体 散开，并尽量使滴片上的细胞分布均匀， 不要重叠。
10．气干，染色。 在一块洁净的玻板上，将玻片标本有细胞的一面 朝下用牙签架空于玻板上。 11．用滴管将配好的染液充满于玻板与载玻片之间 的空隙中，注意载片上有细胞面的进行染色并在 滴加染液时注意排除气泡。视室温而定，染色15 分钟。 12．染色后，轻轻揭起玻片，倾斜玻片在自来水管 下细水流冲洗数秒，冲掉染液，擦干玻片标本底 面和四周，显微镜观察和分析。注意不要搞错沾 有细胞的一面。选择染色较好、较分散、形态清 晰的细胞分裂相，进行显微观察。
小鼠骨髓细胞染色体 标本的制备与观察
实验目的：
1．初步掌握动物骨髓细胞染色体的制备方法。 2．了解小鼠骨髓细胞染色体的形态特点。Fra bibliotek实验原理：
染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定 形式，是染色质紧密包装的结果。染色体 是有机体遗传信息的载体，对染色体的研 究在生物进化、发育、遗传和变异中有十 分重要的作用。
谢 谢 大 家
核型分析均是以中期染色体为标准，对制 作出的染色体标本进行照相以获得染色体 的显微图像，并将其剪裁排列即成，或用 专用软件进行分析排列。 凡处于活跃增殖状态的细胞，或者经过各 种处理后，细胞就可进入分裂期此时均可 用于染色体分析。
在正常动物体内，骨髓是处于不断分裂的 组织之一。此时给动物注射一定剂量的秋 水仙素可使许多处于分裂的细胞停滞于中 期（ 秋水仙素可阻断纺锤丝微管的组装）， 然后采用常规空气干燥法制备染色体，即 可得到大量可供分析的染色体标本。本方 法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌 操作。