（一）急性淋巴细胞白血病按免疫标志分为非T细胞型和T细胞型。前者又可分为无标志性急淋（Null-ALL）普通型急淋（Common-ALL）、前B细胞型急淋（Pre-B-ALL）和B细胞型急淋（B－ALL）4个亚型；T细胞型又分为不成熟胸腺细胞型（immature T-ALL），普通的胸腺细胞型（eommon T-ALL）和成熟胸腺细胞型（mature T-ALL）。见表5－3－1 和表5－3－2.
表5－3－1 急性T淋巴细胞白血病（T－ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征CD7CD5CD2CD1CyCD3SmCD3CD4CD8Ⅰ幼稚胸腺细胞型immature T-ALL+-/+-/+--/+---Ⅱ普通胸腺细胞型common T-ALL+++++-/+++Ⅲ成熟胸腺细胞型 mature T-ALL+++-+/-++/--/+表5－3－2 急性非T淋巴细胞白血病（non-T-ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征HLA-DRCD19CD10CD22CD20CyIgMSmIgⅠ无标志型急淋Null-ALL+-/+-----Ⅱ普通型急淋common-ALL+++-/+-/+--Ⅲ前B细胞型急淋pre-B-ALL++++++-ⅣB细胞型急淋B－ALL＋＋+/-++-+ （二）急性非淋巴细胞白血病应用免疫学标志进行分型尚正在探索中，髓细胞系的免疫膜标志；粒细胞系为过氧化物酶＋、CD34＋、CD13＋；单核细胞系为α－萘酚醋酸酯酶＋，可被氟化钠抑制，CD34＋、CD13＋、CD14＋；红细胞系为血型糖蛋白（Gl ycophorin）及红细胞膜收缩蛋白（Spectrin）＋；巨核细胞系为血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa+、Ⅰb/Ⅲa＋。急非淋膜标志与FAB分型的关系见表5－3－3. 表5－3－3 急性非淋巴细胞白血病FAB分型与膜标志抗体M1M2M3M4M5M6M7 HLA－DR++-+++/-+/-CD34++/--+/-+/--+/-CD33+++
白血病免疫分型测定
方法
流式细胞仪(BeckmanCoulter，贝克曼库尔特)
原理：
三色直接免疫荧光法。正常血细胞的分化成熟过程中，细胞膜、细胞浆有抗原的表达与血细胞的分化发育阶段密切相关，因此这些抗原的表达与否可作为鉴别细胞和其分化阶段的基础。利用荧光素标记的单克隆抗体对血液或骨髓进行染色，通过FCM对白血病细胞细胞膜和细胞浆抗原进行分析，由此了解所测白血病细胞的系列属性及其分化程度。三色染色在白血病免疫分型中较为常用。根据分型需要，选择相应抗原的标记抗体，一般FITC标记抗体和PE标记抗体搭配为一组，再加PC5标记抗原CD45单克隆抗体，共三种抗体加入一管
标本采集与处理
受检者的准备 检查对象生活饮食处于日常状态，腰穿采骨髓。
采集部位 腰穿采骨髓
抗凝剂 肝素抗凝
要求 1．样本量至少3ml。
2．样本应在采集后6小时内处理，冷冻的标本或已固定的标本不能用。
3．样本白细胞计数应在4.0-10.0×109/L之间。若>10.0×109/L，
样本需要稀释，用PBS稀释；若<4.0×109/L，应分离单个核
细胞。
4．溶血样本不能用。
试剂
品牌 剂型 规格 贮存
贝克曼库尔特
成分 1：单克隆抗体 液体 1ML 2—8℃
2：全血溶血试剂 液体
A：甲酸 液体 70ML 室温
B：碳酸钠等 液体 32ML 室温
C：多聚甲醛 液体 14ML 室温
白血病免疫分型测定
方法
流式细胞仪(BeckmanCoulter，贝克曼库尔特)
原理：
双色直接免疫荧光法。荧光素标记的各种单克隆抗体加入到全血中，与细胞膜上或膜内相应的抗原结合，经过溶血、洗涤（和固定）等步骤后，在流式细胞仪上进行分析，从而得到百分数。
标本采集与处理
受检者的准备 检查对象生活饮食处于日常状态。
采集部位 骨髓采血
抗凝剂 EDTA或肝素抗凝
要求 1．样本量1ml。
2．样本应在采集后6小时内处理，冷冻或溶血的标本不能用。
3．样本白细胞计数应在4.0-10.0×109/L之间。若>10.0×109/L，
样本需要稀释，用PBS稀释；若<4.0×109/L，应分离单个核细胞。
试剂
品牌 剂型 规格 贮存
贝克曼库尔特
成分 1：单克隆抗体 液体 2—8℃
(CD34 No. IM1871 CD45-PC5 No.IM2653/IM2652
Flow-Count荧光微球 No.7547053)
2：全血溶血试剂(Q-Prep) 液体(No.7546946)
A：甲酸 液体 70ML 室温
B：碳酸钠等 液体 32ML 室温
C：多聚甲醛 液体 14ML 室温
(Optilyse C No.IM1401) 液体 室温
3：鞘液(No.8546859) 液体 20L 室温
白血病免疫分型讲课最终本
引言
白血病是一种常见的血液系统恶性肿瘤，其发生与免疫系统的异常功能有着密切的联系。免疫分型是指根据白血病细胞表面的免疫表型特征对其进行分类和鉴定的方法。通过免疫分型，我们可以更好地理解白血病的发生机制，为个体化治疗提供参考依据。本文将重点介绍白血病的免疫分型方法及其临床应用。
1. 白血病的免疫分型
白血病的免疫分型是基于白血病细胞的免疫表型特征进行分类和鉴定的方法。在临床上，常用的免疫分型方法主要包括免疫组织化学染色、流式细胞术和免疫基因重排检测等。
1.1 免疫组织化学染色
免疫组织化学染色是一种通过对组织切片中的细胞进行特异性标记，以观察和分析细胞表面抗原表达情况的方法。通过对白血病组织切片进行免疫组织化学染色，可以确定白血病细胞的免疫表型特征，从而进行免疫分型。
1.2 流式细胞术
流式细胞术是一种通过流式细胞仪对细胞进行单个细胞的快速、准确地分析的方法。通过标记白血病细胞表面的特定抗原，并利用流式细胞仪进行检测和分析，可以确定白血病细胞的免疫表型特征，进而进行免疫分型。
1.3 免疫基因重排检测
免疫基因重排检测是一种通过检测白血病细胞中免疫相关基因的DNA或RNA重组情况，来确定白血病细胞的免疫表型特征的方法。通过免疫基因重排检测，可以发现白血病细胞克隆性演变和克隆扩增的过程，为免疫分型提供重要依据。
2. 白血病免疫分型的临床应用
白血病免疫分型在临床上有着重要的应用价值。通过免疫分型，可以更准确地确定白血病的诊断和分型，为患者提供个体化的治疗方案。此外，免疫分型还可以评估患者的预后风险和治疗反应，指导治疗方案的调整。
2.1 诊断和分型
免疫分型可以通过确定白血病细胞的免疫表型特征，帮助医生更准确地进行白血病的诊断和分型。不同类型的白血病具有不同的免疫表型特征，通过免疫分型可以将白血病分为急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性非淋巴细胞白血病（AML）等不同亚型，进而为患者提供合理的治疗方案。
