紫外可见分光光度计实验报告

一、实验目的

1. 熟悉紫外-可见分光光度计的仪器结构和工作原理。

2. 掌握紫外-可见吸收光谱的基本概念和知识。

3. 学习利用紫外-可见分光光度计进行样品定量分析的方法。

4. 了解紫外吸收法在生物化学和材料科学中的应用。

二、实验原理

紫外-可见分光光度法（Ultraviolet-Visible Spectrophotometry，UV-Vis

Spectrophotometry）是基于物质分子对紫外光和可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法。当分子吸收特定波长的光时，分子中的电子从基态跃迁到激发态。紫外-可见光谱分析主要用于定量和定性分析，特别是在生物化学和材料科学领域。

三、实验仪器与试剂

1. 仪器：紫外-可见分光光度计、样品池、移液器、电子天平、蒸馏水、标准溶液、待测样品等。

2. 试剂：待测样品溶液、标准溶液、无水乙醇、缓冲液等。

四、实验步骤

1. 样品准备：根据实验需求，将待测样品溶液稀释至合适浓度。

2. 标准曲线制作：

a. 准备一系列已知浓度的标准溶液。

b. 将标准溶液分别置于样品池中，用紫外-可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。

c. 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

3. 待测样品测定：

a. 将待测样品溶液置于样品池中。

b. 在标准曲线对应的波长下，用紫外-可见分光光度计测定待测样品的吸光度。

c. 根据标准曲线，计算待测样品的浓度。 4. 数据处理与分析：

a. 记录实验数据，包括吸光度、浓度等。

b. 对实验数据进行统计分析，如计算标准偏差、相关系数等。

c. 分析实验结果，讨论紫外吸收法在待测样品分析中的应用。

五、实验结果与分析

1. 标准曲线：根据实验数据绘制标准曲线，结果显示吸光度与浓度呈线性关系，相关系数R²>0.99。

2. 待测样品测定：根据标准曲线，计算待测样品的浓度为X mg/mL。

湖 南 大 学 实 验 报 告

课程

实 验 者

名 称

页数（ ）

专业

年级、班

同组者姓名

级别

姓 名

实验 日 期

年

月

日

日期 署教员 签 一、实验目的：

1．了解朗伯-比尔定律的应用，掌握邻二氮菲法测定铁的原理；

2．了解TU1901分光光度计的构造；

3．掌握TU1901分光光度计的正确使用；

4．学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。

二、实验原理

邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。在pH＝2～9 的条件下，邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，其lgK形＝21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104，其反应式如下：

本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO43-，5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。

显色前首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。

4 Fe3+ + 2NH2OH = 4 Fe2+ + N2O + H2O + 4H+

三、仪器及试剂

1. TU1901紫外可见分光光度计

2、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL。

3、0.1%邻菲罗啉水溶液；

4、1%盐酸羟胺水溶液；

5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH4.6）：

四、实验步骤

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实 验 者

1

计 量 标 准 技 术 报 告

计 量 标 准 名 称 紫外、可见分光光度计检定装置

计量标准负责人

建标单位名称(公章) 许昌县质量技术监督检验测试中心

填 写 日 期 2014年10月 日

2

目 录

一、建立计量标准的目的 …………………………………………… （ 3 ）

二、计量标准的工作原理及其组成 ………………………………… （ 3 ）

三、计量标准器及主要的配套设备 ………………………………… （ 4 ）

四、计量标准的主要技术指标 ……………………………………… （ 5 ）

五、环境条件 ………………………………………………………… （ 5 ）

六、计量标准的量值溯源和传递框图 ……………………………… （ 6 ）

七、计量标准的测量重复性试验 …………………………………… （ 7 ）

八、计量标准的稳定性考核 ………………………………………… （ 8 ）

九、检定或校准结果的测量不确定度评定 ………………………… （ 9 ）

十、检定或校准结果的验证 ………………………………………… （ 11 ）

十一、结论 …………………………………………………………… （ 12 ）

十二、附加说明 ……………………………………………………… （ 12 ）

3 一、建立计量标准的目的

实验室的仪器设备准确度是否准确直接影响产品质量是否合格，为确保实验室的设备准确可靠，加强对紫外、可见分光光度计仪器设备进行计量检定/校准与监管，保证量值传递的准确可靠，保证企业和各单位生产及试验的顺利进行，特建立此项标准。

二、计量标准的工作原理及其组成

依据物质分子对紫外、可见、近红外区辐射（光）的选择性吸收和Lambert-Beer定律对物质进行定量分析和定量鉴别的仪器。

实验课紫外实验报告

一、引言

紫外（UV）实验是一种常见的化学实验，通过测量物质在紫外光下的吸收和透射特性，可以得到该物质的吸收光谱，进而了解其分子结构和化学性质。本实验旨在通过紫外吸收光谱的测定，研究物质在紫外光下的吸收特性。

二、实验方法

所需实验器材和试剂：

1. 紫外可见分光光度计

2. 石英比色皿

3. 待测物质溶液

4. 工作曲线样品溶液

实验步骤：

1. 准备工作

a. 将紫外可见分光光度计预热30分钟。 b. 校准分光光度计，设置较低的基准波长，比如190nm。

c. 准备工作曲线样品溶液。

2. 测定待测物质的吸收和透射特性

a. 将待测物质溶液分别倒入两个石英比色皿中。

b. 将一个比色皿放入紫外可见分光光度计，设置起始波长和终止波长，记录吸收光谱曲线。

c. 将另一个比色皿放入分光光度计，测量透射光强。

3. 制备工作曲线

a. 取不同浓度的工作曲线样品溶液，分别倒入石英比色皿中。

b. 分别测量吸收光强，绘制工作曲线。

4. 分析实验结果

a. 根据待测物质的吸收光谱曲线，找出吸收峰的波长。

b. 利用工作曲线，通过比较吸光度和浓度的关系，计算出待测物质溶液中的浓度。

三、实验结果 通过测量待测物质溶液的吸收光谱曲线，我们观察到在特定波长处有吸收峰。根据工作曲线，我们可以比较吸光度和浓度的关系，进而计算出待测物质溶液的浓度。

四、实验讨论与分析

在本实验中，我们使用紫外可见分光光度计测量了待测物质的紫外吸收光谱，并通过工作曲线计算了待测物质溶液的浓度。然而，在实际实验操作中，我们也遇到了一些问题。

首先，由于待测物质的吸收峰可能出现在较高的波长，因此我们需要确保所选用的分光光度计可以测量更高范围的波长。否则，我们可能会错过待测物质的吸收峰，导致测量结果不准确。

其次，待测物质溶液的浓度对实验结果的准确性有很大影响。浓度过高或过低都会导致吸收峰的强度不明显，进而影响测量结果。因此，在进行实验前，我们应该选择合适的样品浓度，避免浓度过高或过低的情况发生。 此外，实验中可能存在误差来源，如光度计的漂移、溶液的制备误差等。这些误差可能会对测量结果造成一定影响。因此，在实验中，我们应该尽量减少这些误差来源，提高实验结果的准确性。