果蝇性别鉴定
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一、果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法
实验目的
1、了解果蝇的生活史；
2、掌握果蝇的麻醉及观察方法；
3、通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法；
4、了解果蝇的饲养方法； 5、仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状。
（一）果蝇的生活史
果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它是完全变态发育的昆虫。它的生活史包括：卵→幼虫→蛹→成虫四个发育时期。果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以
上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的
最适温度20—25℃。在适宜的温度下大约10—14天就可以繁殖一代。
（三）果蝇的麻醉及观察方法
（1）麻醉的方法
对果蝇进行检查时，可用乙醚麻醉，使它保持静止状态。因果蝇对乙醚很敏感，易麻
醉，麻醉的深度看实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。
果蝇翅膀外展45℃角表示已死)。 a. 麻醉时将乙醚(2－3滴)滴到麻醉瓶塞的绵球上(注意不要让乙醚流到瓶内)，同时麻醉瓶要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀。 b. 将培养瓶倒置，让果蝇向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养瓶塞，迅速将两者瓶口相
接(麻醉瓶在上，培养瓶在下)，轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中，迅速盖好两个瓶塞，并
倒置麻醉瓶，一分钟后果蝇即处于昏迷状态。 c. 麻醉后的果蝇放在白瓷板上，用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻醉。观察完毕后倒入煤油或酒精瓶中(死蝇盛留器)。 (2)果蝇的形态观察
果蝇具有丰富的外表形态特征，包括颜色、眼型、翅型、刚毛的形状等，本次实验中只观察了果蝇的眼色、翅型、刚毛和体形四种形态特征，确定本实验中的果蝇品系如下表：
品系 体色 眼色 翅型 刚毛
3 黄 红 长 直
4 灰 红 残 直
6 灰 白 短 卷
18 灰 红 长 直
22 灰 白 长 直
26 黑檀体 红 长 直
（四）果蝇的雌雄鉴别
果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易。主要由以下几个方面：
特征 雄蝇 雌蝇
个体 小 大
腹部条纹 3 5 腹部末端 圆 尖
性梳 有 无
（五）果蝇的饲养
（1）培养基的制备
实验室所用的果蝇培养基配方如下： A：蔗糖13克，琼脂1.3克，加水100毫升，煮沸溶解。
B：玉米粉17克，加水80毫升，混合均匀。
将B 慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加1.4克酵母粉，混合均匀，稍
冷却后加入1毫升丙酸，调匀后即可分装到培养瓶中。
除了以上的饲料外，常用的还有米粉饲料和香蕉饲料： （2）培养容器 培养果蝇的饲养瓶，常用的有牛奶瓶，大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞（有条件的
地方可改用泡沫塑料作瓶塞）。 饲养瓶先消毒，然后倒入饲料（2厘米厚），待冷却后，用酒精棉擦瓶壁，然后滴入酵母
菌液数滴，再插入消毒过的吸水纸，作为幼虫化蛹时的干燥场所。 （3）原种培养
在作为新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每
瓶5—10对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再把培
养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。
原种每2－4周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到10—15℃，培养时避免日光直射。
思考题
1、如何准确鉴定果蝇的雌雄个体？最主要特征是什么？ 果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易。主要由以下几个方面：
特征 雄蝇 雌蝇
个体 小 大
腹部条纹 3 5
腹部末端 圆 尖
性梳 有 无
2、果蝇的生活史分几个阶段？ 它的生活史包括：卵→幼虫→蛹→成虫。 3、果蝇作为遗传学模式材料的优点有哪些？
（1） 生长迅速，生活史较短，短时间内可获得大量子代；
（2） 容易饲养，在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖；
（3） 染色体数目少，加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料； （4）突变性状多，且多数是形态突变，便于观察。
二、果蝇综合大实验设计
实验目的
1、理解和验证分离定律；
2、了解两对不连锁基因的杂交方法，验证自由组合定律；
3、正确认识伴性遗传的正、反交的差别，验证伴性遗传规律；
4、理解连锁和交换的原理，学习实验结果的数据处理和重组值的计算方法，并绘制遗传学
图。
实验原理
1、果蝇品系选择 目前实验室共有六种果蝇品系，如下表； 品系 体色 眼色 翅型 刚毛 3 黄 红 长 直
4 灰 红 残 直
6 灰 白 短 卷
18 灰 红 长 直
22 灰 白 长 直 26 黑檀 红 长 直
经分析要进行三点测交，就要保证三个性状的基因必须在一条染色体上，而要进行自由
组合定律的实验至少要两对染色体，而且基因分离定理要用常染色体上的基因来做，根据以上性状在染色体上的位置，所以只有6号、26号符合要求。所以本实验正交组选用实验室
中的6号做母本，26号做父本进行杂交。
2、基因分离定律原理——以体色为研究性状 P +/+ 灰 × e/e 黑檀
↓ F1 +/e 灰 ↓⊕
F2 +/+ +/e e/e
1 2 1 灰 黑檀
3、自由组合定律原理——以体色和翅型为研究性状
P ++ mm × ee ++ ↓
F1 +e +m × +e +m ↓ F2 ♀ +＿+＿ +＿mm ee+＿ eemm
3 3 1 1 灰体长翅 灰体短翅 黑檀长翅 黑檀短翅
4、伴性遗传原理——以眼色究性状
P ww ♀× +y ♂ 白 ↓ 红
F1 + m × my 红 白
↓
F2 ++ ww wy +y 红 白 红 白
1 1 1 1
5、基因连锁与三点测交——以眼色、翅型，刚毛为研究性状 P wmsn/wmsn ♀× +++/y ♂
↓
F1 wmsn/ +++ ♀×wmsn/y ♂
↓
F2 wmsn +++ w++ +msn
w+sn +m+
wm+ ++sn
三、实验材料
1、果蝇材料：陕师大生命科学学院遗传学实验室保存的6和26号品系：
品系 体色 眼色 翅型 刚毛
6 灰 白w(1) 短m(1) 卷sn(1)
26 黑檀e(3) 红 长 直 2、实验器具与药品 用具：解剖镜、麻醉瓶、毛笔、培养瓶、白瓷板、死蝇瓶
药品：乙醚
实验步骤： 1、将所选的6号品系和26号品系分别培养，使其产卵。9-10天后，开始收集新羽化的6
号品系处女蝇，同时收集26号品系的雄蝇，分别放在另外的培养基中，25度培养待用。 处女蝇一般是8小时内新羽化的雌性成蝇。 2、2天后，确认放处女蝇的培养瓶中没有幼虫出现，如果有，说明收集处女蝇失败，需重
新收集。 3、亲本杂交，将3-5只处女蝇和5-8只26号雄蝇放入同一个培养瓶中。重复同样杂交2-3
瓶。
在各个培养瓶壁上做好交配类型和培养基序号标记。 4、2天后将杂交瓶里所有亲本果蝇麻醉后弃除。25度条件下，约一周至10天后开始有子1
代成蝇出现。 5、子一代杂交，从亲本杂交瓶中新羽化的子一代雌蝇和雄蝇各2-5只放入同一个培养瓶中。
每种杂交重复2-3瓶。2天后将子一代杂交瓶中的所有果蝇弃除。25度条件下，约1周
至10天后开始有子二代成蝇出现。 6、子二代观察与计数，将陆续羽化出来的子二代成蝇隔天收集一次，深度麻醉后仔细观察，
按照表型和雌雄分别计数。为了防止误将自三代计入，子二代羽化开始8天后停止收集
和计数。
预期实验结果
1、分离定律 （灰:黑檀＝3:1）；
2、自由组合定律 （灰红:灰白:檀红:檀白＝3:3:1:1）;
3、伴性遗传 （红眼:白眼＝1:1；雌:雄＝1:1）；
4、三点测验 （预期有8种表型）
三、果蝇综合大实验结果分析和实验心得
经过一个多月的实验，现将实验结果做以下分析：
1.分离定律的验证： 分离验证数据统计表 表型 灰体 黑檀体 总计
F2 353 88 441
卡方检验 X2检测表 表型 灰体 黑檀体 总计
O 353 88 441
E 331 110 441
(O-E）2 484 484 968
(O-E)2/E 1.46 4.4 5.86
Df=1 p=00.5 查 X2=3.84 因为5.86>3.84，统计学上认为在5%的显著水平上差异显著，观察值和理论值之间的差异不
是随即误差，遗传上认为不符合孟德尔分离定律。
2。自由组合定律的验证： 自由组合验证数据统计表 表形 灰体长翅 灰体短翅 黑檀长翅 黑体短翅 合计
F2 209 144 49 39 441
卡方检验
X2检测表 表型 灰体长翅 灰体短翅 黑檀长翅 黑短翅 总计
O 209 144 49 39 441
E 166 165 55 55 441
(O-E）2 1849 441 36 256 2582
(O-E)2/E 11.14 2.67 0.63 4.65 19.09
Df=13 p=00.5 查 X2=7.82 因为19.09>7.82，统计学上认为在5%的显著水平上差异显著，观察值和理论值之间的差异
不是随即误差，遗传上认为不符合孟德尔自由组合定律。
3.半性遗传规律验证
半性遗传验证数据统计表
表型 白眼雌 白眼雄 红眼雌 红眼雄 合计
F2 116 90 135 100 441
卡方检验 X2检测表
表型 白眼雌 白眼雄 红眼雌 红眼雄 总计
O 116 90 135 100 441
E 110 110 110 110 3441
(O-E）2 36 361 576 121 1094
(O-E)2/E 0.32 3.28 5.18 1.10 9.88
Df=13 p=00.5 查 X2=7.82
因为9.88>7.82，统计学上认为在5%的显著水平上差异显著，观察值和理论值之间的差异不是随即误差，遗传上认为不符合半性遗传定律。
4.三点侧交与基因连锁交换定律验证
