表观遗传学研究实验技术简介
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表观遗传学实验表观遗传学实验ChiP,EMSA ;用于研究DNA ,RNA 与蛋白之间的相互作用1、组织标本:大于50mg 左右,冷冻保存、运输。
2、细胞标本:新鲜标本提取蛋白。
一般6孔板细胞可以做3-5个蛋白。
标本要求:3、蛋白:最好是变性后保存、运输。
EMSA 标本不能变性。
4、其它标本请与我们联系。
形态学实验服务内容收费标准内容说明备注ChiP 引物设计与合成500/样ChiP 引物设计与合成Chip 级别抗体客户提供染色质免疫沉淀(ChiP)3500/样ChiP 实验设计和预实验EMSA 探针设计与合成1000/样EMSA 探针设计与合成每张8个泳道EMSA 凝胶迁移实验6000/张胶片、电子结果、实验资料免费提供NFkb P65探针组织固定及处理—制片—染色—免疫染色—拍照分析等;主要应用于有病理样本的医生的项目,最常用的分析实验是HE 染色分析,以及会用到抗体的免疫组化和免疫荧光实验。
项目价格(元/张)实验结果标本要求石蜡包埋30蜡块固定后的组织HE 染色15染色后的玻片(可拍照)蜡块、切片、组织免疫组化(IHC)50染色后的玻片(可拍照)客户仅需提供一抗免疫荧光(IF)80拍好的图片客户需提供一抗,确定拍照部位。
电镜500图片固定后的标本Tunel 检测260片子荧光可以拍照拍照8拍好的图片确定部位,Nikon 显微镜。
组化分析面议典型图片,数字结果。
IPP6.0软件。
常规分子生物学实验1、组织标本:50大于mg 左右,冷冻保存、运输。
2、细胞标本:收集细胞后用Trizol 重悬。
标本要求:3、DNA 与RNA :低温冷冻保存。
4、其它标本请与我们联系。
服务内容收费标准内容说明备注总RNA 提取100/样品新鲜组织、血液、细胞基因组DNA 提取98/样品新鲜组织、血液、细胞real-time PCR 180/样品曲线、CT 值、实验条件SYBR GREEN 法real-time PCR 195元/样品曲线、CT 值、实验条件Taqman 探针(探针自备)PCR 扩增98/反应<1Kb PCR 定点突变1000/点<1KbmiRNA 荧光定量PCR 检测1180/样品·基因细胞,组织样品加尾法检测miRNA miRNA 荧光定量PCR 检测2180/样品·基因细胞,组织样品SYBR GREEN I 法检测miRNAmiRNA 荧光定量PCR 检测3180/样品·基因细胞,组织样品LNA 探针检测miRNA基因克隆1000/基因PCR 及重组质粒构建,测序有模版基因克隆2000/基因PCR 及重组质粒构建,测序无模版质粒提取80/样品普通质粒过表达慢病毒构建5000病毒、鉴定照片、试验报告WB 鉴定费用另算腺病毒构建4000病毒、鉴定照片、试验报告WB 鉴定费用另算双酶素报告基因4000检测转录因子与DNA 作用sh RNA 慢病毒构建3000病毒、鉴定照片、试验报告WB 鉴定费用另算WB 普通蛋白1200/张电子结果、实验资料、每张8个泳道(送内参)客户需要提供标本、一抗考马斯亮蓝染胶300元/胶拍照图片客户只需要提供标本注:荧光定量PCR 实验收费包含RNA 提取、内参。
表观遗传学的研究及应用随着科学技术的不断发展,人们对于生命的本质越来越感兴趣。
表观遗传学作为一门新兴的学科,在现代生物医学领域中起着非常重要的作用,其所涉及的范围与影响甚至超越了基因遗传学。
那么,什么是表观遗传学,它与遗传学又有何区别,又有哪些重大的研究和应用前景呢?一、什么是表观遗传学?表观遗传学(Epigenetics)是指在不改变 DNA 基序列的情况下,通过因外部环境而改变基因表达的方式来影响遗传物质的遗传信息,进而对细胞、个体特征及其它相关疾病等进行调控的一门学科。
它几乎涉及到生命的各个方面,比如胚胎发育、癌症、自闭症、精神疾病、老年痴呆症等。
它所涉及的遗传信息是保持不变的,但是因为环境和卫生状况的变化,这些基因信息需要产生不同的表现形式。
二、表观遗传学与基因遗传学的区别表观遗传学与基因遗传学的区别在于,前者关注基因表达的修改及其在不变 DNA 序列下的不同表达,后者则关注细胞的遗传物质的变化和传递。
当然,两者有时也有交叉点,但是它们的重心差异明显。
通过了解表观遗传学和基因遗传学之间的差异,我们可以更好地理解遗传现象及其对我们生命的作用,进而观察基础医疗和生命科学领域取得了一些空前的成果。
三、表观遗传学的研究进展与发展表观遗传学的研究主要涉及到 DNA 甲基化、组蛋白修饰及微小 RNA 的调控等方面。
DNA 甲基化是一种将甲基基团添加到DNA 分子的过程,它可以影响基因的表达,从而调节相应表现形式。
组蛋白修饰包括乙酰化、乙基化、甲基化等多种修饰方式,其中乙酰化过程是将乙酰亚基加在组蛋白分子上,使其从而调节基因的表达方式。
微小 RNA 对基因表达也有着很重要的作用,其主要功能是将 Messenger RNA (mRNA)的分解,从而减少mRNA 的生成量,影响相应基因的表达。
目前,表观遗传学的研究得到了广泛的关注和应用,特别是在癌症的治疗和预防中得到了广泛的应用。
研究表明,机体中某些组织会出现特定的 DNA 甲基化模式,这些模式具有很高的识别度,将来可以作为特定疾病的早期检测工具,对于表现出特异性 DNA 甲基化异质性的患者提供针对性治疗,可以甚至发展出个体治疗的方法。
遗传表观遗传学的研究进展遗传表观遗传学是研究个体发育中来自父母后代的表观基因改变的学科。
表观遗传学的研究范围包括DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA及其他细胞膜蛋白的修饰。
表观遗传学对人类疾病的发生与发展起到了重要的作用。
本文将对遗传表观遗传学的研究进展进行探讨。
1. DNA甲基化DNA甲基化是DNA分子中乙酰化发生的一种现象,它能够影响基因表达水平。
DNA甲基化首先被认为是稳定的表观遗传基因改变,但是近年来的研究表明DNA甲基化状态是可逆转的。
研究发现,DNA甲基化酶和DNA脱甲基化酶这两种酶的功能异常都与人类疾病的发生有一定关联。
2. 组蛋白修饰组蛋白是DNA紧密缠绕的包裹物,组蛋白修饰通过改变组蛋白和DNA之间的相互作用来影响基因表达水平。
组蛋白修饰通常包括乙酰化、甲基化、泛素化等。
研究表明,组蛋白修饰与某些人类疾病如肿瘤、心血管疾病等的发生和发展有一定的关系。
3. 非编码RNA非编码RNA是指与蛋白质合成无关的RNA分子。
研究表明,非编码RNA与表观遗传学相关的机制有很大的关系。
例如,一些长链非编码RNA可以通过影响基因转录和翻译来控制基因表达的水平。
4. 表观遗传学与人类疾病表观遗传学与人类疾病之间的关系一直是研究重点。
近年来的研究发现,表观遗传学与肥胖、糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病、精神疾病、癌症等许多疾病都有一定的关联。
以肿瘤为例,研究发现,组蛋白修饰与肿瘤发生和发展密切相关。
研究人员发现,一些组蛋白修饰酶能够促进细胞增殖和侵袭,这些酶在肿瘤细胞中表达较高。
另外,DNA甲基化也与肿瘤的发生和发展有一定关系。
比如,甲基化酶缺陷会导致9号染色体恢复到正常基因表达的肝毒性肿瘤的退化。
5. 表观遗传学与环境因素环境因素是影响表观遗传学的一大因素。
一些环境毒物、药物、营养素等可以通过影响DNA甲基化、组蛋白修饰等表观遗传学机制来影响基因表达水平。
研究表明,慢性营养不良对小鼠脑神经元的DNA甲基化状态和基因表达的影响可以遗传到其后代。
什么是表观遗传学什么是表观遗传学,简述其研究进展表观遗传学(epige***ics)——主要研究任务是通过对生活习惯、饮食习惯等因素的研究,寻找在没有改变dna序列的前体下,环境如何影响我们的基因的答案。
比如说,空气中的污染物如何改变一个人的dna的表达,从而导致像肺气肿或肺癌之类的疾病。
在基因组中除了dna和rna序列以外,还有许多调控基因的资讯,它们虽然本身不改变基因的序列,但是可以通过基因修饰,蛋白质与蛋白质、dna和其它分子的相互作用,而影响和调节遗传的基因的功能和特性,并且通过细胞**和增殖周期影响遗传。
因此表观遗传学又称为实验遗传学、化学遗传学、特异性遗传学、后遗传学、表遗传学和基因外调节系统,它是生命科学中一个普遍而又十分重要的新的研究领域。
它不仅对基因表达、调控、遗传有重要作用,而且在肿瘤、免疫等许多疾病的发生和防治中亦具有十分重要的意义。
表观遗传学(epige***ics)研究转录前基因在染色质水平的结构修饰对基因功能的影响,这种修饰可通过细胞**和增值周期进行传递。
表观遗传学已成为生命科学中普遍关注的前沿,在功能基因组时代尤其如此。
免疫系统被认为是一个解析表观遗传学调控机制的良好模型,而且免疫细胞伯分化及功能表达和表观遗传学的联络甚密,无疑使这一交叉领域的发展一开始就置身于一片沃土之中。
为此,本文对表观遗传学的免疫学意义作一简介,侧面重于t细胞分化特别是th1、th2及相关细胞因子基因表达中的表观遗传学调控。
研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达了可遗传的变化什么是表观遗传学,简述其研究进展表观遗传学,研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达的可遗传的变化的一门遗传学分支学科。
发展一直以来人们都认为基因组dna决定着生物体的全部表型,但逐渐发现有些现象无法用经典遗传学理论解释,比如基因完全相同的同卵双生双胞胎在同样的环境中长大后,他们在性格、健康等方面会有较大的差异。
表观遗传学(研究生课件)一、表观遗传学的基本概念表观遗传学(Epigenetics)一词最早由英国生物学家康韦·里德(ConradWaddington)于1942年提出,意为“基因表达调控的研究”。
表观遗传学关注的是基因表达的可遗传变化,这种变化不涉及DNA序列的改变,而是通过染色质重塑、DNA甲基化、组蛋白修饰等机制实现。
二、表观遗传学的调控机制1.染色质重塑:染色质重塑是指染色质结构发生变化,使DNA 暴露或隐藏于核小体中,从而影响基因表达。
染色质重塑主要通过ATP依赖的染色质重塑复合体实现。
2.DNA甲基化:DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶的作用下,将甲基基团转移至DNA上的过程。
DNA甲基化通常发生在CpG岛上,高甲基化状态往往与基因沉默相关,而低甲基化状态与基因活化相关。
3.组蛋白修饰:组蛋白修饰是指组蛋白上的氨基酸残基发生甲基化、乙酰化、磷酸化等修饰。
这些修饰可以改变组蛋白与DNA的相互作用,进而影响基因表达。
4.非编码RNA:非编码RNA包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)等,它们在基因表达调控中发挥重要作用。
例如,miRNA可以通过与目标mRNA结合,抑制其翻译过程。
三、表观遗传学与疾病表观遗传学异常与多种疾病的发生密切相关。
例如,肿瘤的发生往往伴随着表观遗传学调控机制的紊乱,如DNA甲基化异常、组蛋白修饰异常等。
表观遗传学还与心血管疾病、神经系统疾病、代谢性疾病等密切相关。
四、表观遗传学的应用1.肿瘤诊断与治疗:表观遗传学在肿瘤诊断和治疗方面具有重要应用价值。
例如,通过检测肿瘤相关基因的DNA甲基化状态,可以早期发现肿瘤;同时,针对表观遗传学调控机制的药物研发,为肿瘤治疗提供了新策略。
2.农业育种:表观遗传学在农业育种领域也具有广泛应用。
通过改变植物表观遗传状态,可以提高作物产量、抗病性和适应环境能力。
3.神经科学与心理学:表观遗传学研究为揭示神经系统疾病和心理学问题的发生机制提供了新视角。
表观遗传学研究技术(染色质免疫沉淀实验)1 染色质免疫沉淀技术原理(chromatin immunoprecipitation assay, ChIP) 染色质免疫沉淀是研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。
染色质免疫沉淀作用(ChIP),采用一个转录因子——DNA结合蛋白质与抗体相结合,如,研究人员可以分离与因子结合的染色质片断。
可以通过实时PCR或DNA 微阵列检测那些片断,它们代表了转录因子的活性,即全基因组的“快照”。
它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质,DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集与目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。
而且,ChIP与其他方法的结合,扩大了其应用范围:ChIP与基因芯片相结合建立的CHIP-on-chip方法已广泛用于特定反式因子靶基因的高通量筛选;ChIP与体内足迹法相结合,用于寻找反式因子的体内结合位点;RNA-CHIP用于研究RNA在基因表达调控中的作用。
由此可见,随着CHIP的进一步完善,它必将会在基因表达调控研究中发挥越来越重要的作用。
凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)是目前研究转录调控蛋白和相应核苷酸序列结合的常用方法,但是由于许多转录调控蛋白有相似或相同的DNA结合位点,这种体外分析获取的结果不一定能真实地反映体内转录调控蛋白和DNA结合的状况。
染色质免疫沉淀分析(ChIP)是基于体内分析发展起来的方法,它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的最好方法。
ChIP技术和芯片技术的结合有利于确定全基因组范围内染色体蛋白的分布模式以及组蛋白修饰情况。
酵母表观遗传学的研究和应用酵母是一类广泛存在于自然界中的真核生物,它们在科学研究和工业应用中都具有重要的地位。
酵母表观遗传学是与酵母相关的一项重要的研究领域,它涉及了不同层次的生物学进程和多种技术手段。
本文将介绍酵母表观遗传学的相关知识,重点关注其研究和应用方面,以期帮助读者更全面地了解这一领域的前沿动态。
一、酵母表观遗传学的概念和基本原理酵母表观遗传学是指通过对酵母细胞中基因表达调控和染色质修饰等方面的研究,探索表观遗传修饰与基因表达、发育分化和环境适应等生物学功能之间的关系。
在酵母表观遗传学的研究中,主要涉及到的生物学过程有:1. DNA甲基化:DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰方式,它可以通过在某些基因组区域添加甲基基团,来影响基因的表达和功能。
2. 染色质重塑:染色质重塑是一种通过改变DNA/蛋白质相互作用来重塑染色质结构的过程,它可以影响基因表达和调控,同时还可以参与到DNA修复和DNA复制等生物学过程中。
3. 转录后修饰:转录后修饰是指通过转录后修饰酵母mRNA的方式,来影响蛋白质的合成和功能。
二、酵母表观遗传学的研究方法和技术手段酵母表观遗传学的研究需要涉及到多种技术手段和方法,下面将介绍其中几种比较重要的技术手段和方法:1. CRISPR-Cas9技术:CRISPR-Cas9技术是一种新兴的基因编辑技术,它可以通过选择性编辑DNA序列,来改变某种基因的表达和功能,从而进一步了解其与其他生物学过程之间的相互关系。
2. 转录组学:转录组学是指对酵母细胞中所有转录本进行高通量测序和分析的过程,它可以帮助研究者全面了解酵母基因表达的动态变化和调控机制。
3. 免疫共沉淀:免疫共沉淀是一种常用的蛋白质相互作用分析技术,它可以帮助研究者了解不同蛋白质之间的相互作用关系,并进一步探究其与表观遗传修饰之间的相互关系。
三、酵母表观遗传学在实践中的应用酵母表观遗传学的研究在实践中有很多应用前景,下面将介绍其中几个比较重要的应用方向:1. 药物筛选:酵母表观遗传学可以应用于药物筛选和新药开发,特别是在一些癌症和疾病方面的药物研发中,酵母表观遗传学的研究可以提供新颖的研究思路和技术手段。