QTL定位的原理和方法
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qtl定位的原理和方法QTL定位(定位关联分析)是一种现代分子遗传学研究中最受欢迎的方法之一,用于检测性状与基因位点之间的关联。
它采用大量的DNA样本进行分析,以定位具有显著影响的基因位点,以便将某个性状与其遗传控制位点联系起来。
下面将对QTL定位的原理和方法进行详细介绍:一、QTL定位的原理1、遗传距离QTL定位所使用的原理是双亲亲代遗传距离(PBT),即从一只父母中继承的遗传信息离该代性状之间的距离。
因此,在发现基因位点与性状间存在关联关系时,这些基因位点应该处于控制该性状的PBT之内。
2、显著的统计功能PBT表明,当两个或多个位点之间存在最大的相互影响时,它们应该被认为是具有可能共同控制某一性状的位点。
计算这些位点之间的关联关系时,QTL定位使用了高度灵活的统计功能来确定可能控制性状的位点。
3、方差分析QTL定位采用了ANOVA(方差分析)的方法对样本位点的遗传信息进行更精确的分析。
这将帮助我们更准确地定位具有良好关联关系的基因位点。
二、QTL定位的方法1、映射表首先,根据QTL定位要求,会有一张明确的映射表,用于建立基因位点与性状之间的关联关系。
该映射表由DNA分子标记(如微卫星)、RNA分子标记和细胞表面标记组成,用于确定基因位点的具体位置。
2、细胞表型接下来,需要拿出相关的细胞表型数据,如果是杂交的环境下,样本的性状可以用已知的表型数据及其位点来与受检样本进行比较。
3、统计分析最后,使用统计分析来研究基因位点与性状之间的关联关系,以确定突变可能使性状发生变化的基因位点。
总之,QTL定位是一种利用映射表、细胞表型和统计分析来定位可能与某个性状紧密关联的基因位点的重要方法。
它可用来帮助我们发现形态性状与遗传物质之间的关联,从而更好地了解遗传分析和分子基因组学。
数量性状的分子标记(定位的原理和方法讲义)作物中大多数重要的农艺性状和经济性状如产量、品质、生育期、抗逆性等都是数量性状。
与质量性状不同,数量性状受多基因控制,遗传基础复杂,且易受环境影响,表现为连续变异,表现型与基因型之间没有明确的对应关系。
因此,对数量性状的遗传研究十分困难。
长期以来,只能借助于数理统计的手段,将控制数量性状的多基因系统作为一个整体来研究,用平均值和方差来反映数量性状的遗传特征,无法了解单个基因的位置和效应。
这种状况制约了人们在育种中对数量性状的遗传操纵能力。
分子标记技术的出现,为深入研究数量性状的遗传基础提供了可能。
控制数量性状的基因在基因组中的位置称为数量性状基因座()。
利用分子标记进行遗传连锁分析,可以检测出,即定位()。
借助与连锁的分子标记,就能够在育种中对有关的的遗传动态进行跟踪,从而大大增强人们对数量性状的遗传操纵能力,提高育种中对数量性状优良基因型选择的准确性和预见性。
因此,定位是一项十分重要的基础研究工作。
年,等发表了第一篇应用连锁图在番茄中定位的论文。
之后,随着分子标记技术的不断发展以及许多物种中分子连锁图谱的相继建成,全世界出现了研究的热潮,每年发表有关研究的论文数量几乎呈指数增长(图),显示了该研究领域的勃勃生机。
目前,定位研究已在许多重要作物中展开,并且进展迅速。
本章主要介绍定位的原理和方法。
图年期间国际上每年发表有关研究的论文的数量. 数据从英国信息系统检索得到第一节数量性状基因的初级定位定位就是检测分子标记(下面将简称为标记)与间的连锁关系,同时还可估计的效应。
定位研究常用的群体有、、和。
这些群体可称为初级群体()。
用初级群体进行的定位的精度通常不会很高,因此只是初级定位。
由于数量性状是连续变异的,无法明确分组,因此定位不能完全套用孟德尔遗传学的连锁分析方法,而必须发展特殊的统计分析方法。
年代末以来,这方面的研究十分活跃,已经发展了不少定位方法。
一、定位的基本原理和方法孟德尔遗传学分析非等位基因间连锁关系的基本方法是,首先根据个体表现型进行分组,然后根据各组间的比例,检验非等位基因间是否存在连锁,并估计重组率。
数量性状的分子标记QTL定位是一种用于研究数量性状的分子标记方法,通过对群体中的基因组的变异性进行检测,确定与数量性状相关的区域。
本文将介绍QTL定位的原理和方法,包括遗传连锁、测量数量性状和构建遗传图谱等。
QTL定位的原理和方法主要基于两个关键概念:连锁和重组。
连锁是指两个位于同一染色体上的基因间的紧密关联性。
重组是指两个位于同一染色体上的基因之间的基因重组事件。
在基因座重组时,基因座之间可能发生重组,导致基因座的位置发生改变。
通过对基因座的重组情况进行检测,可以推断基因座之间的连锁关系。
QTL定位的第一步是测量数量性状。
数量性状是指受多个基因和环境因素影响的连续变量性状,如体重、身高等。
在进行QTL定位之前,需要通过测量数量性状的表型值来确定样本的表型差异。
对于数量性状的测量,可以使用传统的测量方法,如体重测量、尺寸测量等,也可以利用高通量测序技术,如RNA测序、蛋白质质谱等。
QTL定位的第二步是构建遗传图谱。
遗传图谱是指基因座之间的相对位置,用于描述基因座之间的连锁关系。
构建遗传图谱的主要方法是通过对群体中的基因型进行分析,确定基因座之间的连锁关系。
常用的构建遗传图谱的方法包括连锁分析、复合杂交分析等。
连锁分析是通过对多个基因座的基因型进行测定,确定基因座之间的连锁关系。
复合杂交分析是通过将多个群体之间的交配与测量数量性状的表型值,来推断基因座之间的连锁关系。
QTL定位的第三步是确定与数量性状相关的区域。
通过对基因座的重组情况进行分析,可以确定与数量性状相关的区域。
具体的方法包括相关分析、关联分析等。
相关分析是通过计算基因座之间的相关系数,来确定与数量性状相关的区域。
关联分析是通过对基因座的基因频率进行比较,来确定与数量性状相关的区域。
QTL定位的最后一步是验证与数量性状相关的区域。
通过对已定位的区域进行验证,可以确定与数量性状相关的基因。
验证方法包括驱动基因分析、功能鉴定等。
驱动基因分析是通过对数量性状的变异性进行分析,来确定与数量性状相关的基因。
QTL 定位方法分子标记技术和数量遗传学的发展,使得分子遗传学与数量遗传学相互渗透和融合,从而形成了一个新的研究领域—分子数量遗传学(Molecular Quantitative Genetics)。
分子数量遗传学研究的内容,就是借助分子标记,采用适当的统计分析方法明确QTL 在染色体上的位置及其效应。
而QTL 定位的原理是:利用适当的分离群体,构建较高密度的、分布较均匀的、覆盖全基因组的分子标记连锁图。
根据遗传连锁的基本遗传学原理,对分离群体中单株的标记基因型和性状的表型值进行一定的统计分析,将决定数量性状的QTL 定位在分子标记连锁图中。
目前,QTL 定位的方法主要有单标记分析法(Edwards et al, 1987),区间作图法(Lander and Botstein, 1989)和复合区间作图法(Zeng, 1994)等。
单标记法(Single marker analysis)是最简单的分析标记与性状关联的方法,包括以标记为基础的分析方法(Marker-based analysis, MBA)和以性状为基础的分析方法(Trait-based analysis, TBA,Lebowitz et al., 1987)。
前者利用每个标记位点不同基因型间的性状均值差异,以传统的单因素方差分析法测验被研究的数量性状在标记基因型间的差异显著性。
对于一个作图群体而言,任意标记位点具有三种基因型(F2群体)或两种基因型(回交群体、重组自交系、双单倍体系),分析每一基因型个体的数量性状均值的差异,并进行F 测验,当F 测验显著时,则表明该标记位点可能与一个或多个QTL 连锁。
利用这种方法进行的数量性状分析,既简单又符合QTL 定位的基本统计原理,且不需要完整的分子标记连锁图,是定位QTL 的最为有效方法。
但不足之处是不能准确估计QTL 的位置,且往往会低估其遗传效应。
以性状为基础的分析方法的原理是假定因选择而使数量性状的高表型个体中的QTL 增效等位基因和低表型个体中的QTL 减效等位基因的频率增加,当QTL 的等位基因与某一标记基因连锁时,会因相互关联而导致高、低表型个体间标记基因频率的差异。
数量性状基因定位的原理及方法随着现代分子生物学的发展和分子标记技术的成熟,已经可以构建各种作物的分子标记连锁图谱.基于作物的分子的标记连锁图谱,采用近年来发展的数量性状基因位点(QTL)的定位分析方法,可以估算数量性状的基因位点树目、位置和遗传效应。
本文介绍了数量性状基因定位的原理以及分析方法。
每一种方法都有自己的优点,但也存在相应的缺陷。
1 数量性状基因定位的原理孟德尔遗传学分析非等位基因间连锁关系的基本方法是,首先根据个体表现型进行分组,然后根据各组间的比例,检验非等位基因间是否存在连锁,并估计重组率。
QTL定位实质上就是分析分子标记与QTL之间的连锁关系,其基本原理仍然是对个体进行分组,但这种分组是不完全的。
2 数量性状基因定位的方法自然界存在生物个体的性状、品质等多为数量性状,它们受多基因的控制,也易受环境影响。
多基因及环境的共同作用结果使得数量性状表现为连续变异,基因型与表现型间的对应关系也难以确定。
因此,长期以来,科学工作者只是借助数理统计方法,将复杂的多基因系统作为一个整体,用平均值和方差来表示数量性状的遗传特征,而对单个基因的效应及位置、基因间的相互作用等无法深入了解, 从而限制了育种中数量性状的遗传操作能力。
20 世纪80 年代以来发展的分子标记技术为深入研究数量性状的遗传规律及其操作创造了条件, 提高了植物育种中目标数量性状优良基因型选择的可能性、准确性及预见性。
下面主要介绍了几种定位方法。
2.1 QTL 定位方法连锁是QTL定位的遗传基础。
QTL 定位是通过数量性状观察值与标记间的关联分析,即当标记与特定性状连锁时,不同标记基因型个体的表型值存在显著差异,来确定各个数量性状位点在染色体上的位置、效应, 甚至各个QTL 间的相关作用。
因此, QTL 定位实质上也就是基于一个特定模型的遗传假设, 是统计学上的一个概念, 有可信度(如99% , 95%等) ,与数量性状基因有本质区别( 图1)。
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数量性状的分子标记(QTL定位的原理和方法讲义)数量性状的分子标记(qtl定位的原理和方法讲义)作物中最重要的农艺和经济性状,如产量、品质、生育期、抗逆性等,都是数量性状。
与品质性状不同,数量性状受多基因控制,遗传基础复杂,易受环境影响。
它们表现出持续的变异,表型和基因型之间没有明确的对应关系。
因此,数量性状的遗传研究非常困难。
长期以来,我们只能用数理统计的方法从整体上研究控制数量性状的多基因系统,用平均值和方差来反映数量性状的遗传特征,因此无法理解单个基因的位置和作用。
这种情况限制了人们在育种中对数量性状的遗传操作能力。
分子标记技术的出现使进一步研究数量性状的遗传基础成为可能。
控制数量性状的基因在基因组中的位置称为数量性状位点(QTL)。
QTL定位可以通过分子标记进行遗传连锁分析来检测。
借助与QTL连锁的分子标记,我们可以在育种中跟踪相关QTL的遗传动态,从而大大提高人们对数量性状的遗传操作能力,提高育种中数量性状良好基因型选择的准确性和可预测性。
因此,QTL定位是一项非常重要的基础研究工作。
1988年,Paterson等人发表了第一篇关于利用RFLP连锁图谱定位番茄QTL的论文。
此后,随着分子标记技术的不断发展和许多物种分子连锁图谱的完成,世界各地掀起了QTL研究的热潮。
QTL研究发表的论文数量几乎每年都呈指数增长(图5.1),这表明了该研究领域的活力。
目前,QTL定位研究已在许多重要作物上开展,并取得了快速进展。
本章主要介绍QTL定位的原理和方法。
图5.11986~1998年期间国际上每年发表有关qtl研究的论文的数量.数据从英国bids 信息系统检索得到第一节数量性状基因的初步定位qtl定位就是检测分子标记(下面将简称为标记)与qtl间的连锁关系,同时还可估计qtl的效应。
qtl定位研究常用的群体有f2、bc、ri和dh。
这些群体可称为初级群体(primarypopulation)。
用初级群体进行的qtl定位的精度通常不会很高,因此只是初级定位。