实验名称 观察酵母菌和霉菌
目的要就 认识酵母菌和霉菌的形态结构 实验用具
酵母菌培养液、培养皿中培养好的青霉，吸管、镊子、显微镜、解剖针、载玻片、盖玻
片、放大镜、碘液、吸水纸。
实验步骤 观察现象并记录
1、仔细观察酵母菌 取一滴酵母菌培养液，滴在载玻片上，盖上盖玻片，用显微镜观察。
2、 在盖玻片的一侧滴一滴碘液，用吸水纸从另一侧吸引，对酵母菌染色在显微镜下观察 。
观察被染色的细胞核和淀粉粒
3、观察青霉
从培养皿中取一块长有青霉的橘子皮，垫上白纸，用放大镜观察。 4、观察青霉
用解刨针挑取少许长有孢子的菌丝，制成临时装片，置于显微镜下观察 。
交流
1、 酵母菌的细胞结构有什么特点？
酵母菌的细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和液泡。 2、 青霉孢子的颜色和着生状态有什么特点？
青霉孢子呈青绿色，长有孢子的菌丝看上去呈扫帚状。
3、 你是否在某个酵母菌的菌体上看到大小不一的突起？这是什么？
是。这是芽体。
实验名称 制作孢子印（书上78页） 实验目的 1、了解真菌的生殖。
2、学会制作孢子印的方法。
实验器材
新鲜蘑菇，解剖刀，白纸，培养皿，放大镜。
实验步骤 1、 选取一个较大的新鲜蘑菇，用解剖刀或解剖剪将菌盖从菌柄上取下来。
2、 把菌褶那面朝下平放在白纸或玻璃板上，扣上培养皿或玻璃杯，以免散落的孢子印
被风吹散。
3、 第二天，拿开培养皿和菌盖，就可以看到在白纸或玻璃板上留下与菌褶排列一致的放射状孢子印。 4、孢子印是由菌褶上散落下来的孢子组成的。用放大镜观察孢子，它们呈淡灰色
应观察到的现象 看到鱼菌褶排列一致的放射状孢子印。 实验结论 了解了真菌的生殖和
制作孢子印的方法。
讨论与交流
1、 通过制作孢子印，你有哪些体会？ 通过实验我认识了什么是孢子印，同时学会了制作孢子印。进一步了解了真菌的特
点。
2、 根据你所制作的孢子印，预测一个蘑菇能产生多少个孢子？
15~16亿个。
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实验七 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定
一、实验目的
1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理
酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。酵母菌的繁殖方式分为无
性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂
殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来
观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母活细胞染
色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型
变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美
蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死
细胞和活细胞。
三、实验器材
1.材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡尔酵母(Saccharomyces
calsbergensis)培养2天左右的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。
2.试剂：O.1％吕氏碱性美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液。
3.器材：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、洒精灯等。
四、实验步骤
1.美蓝浸片观察
（1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种环挑去少
量酵母菌放在染液中，混合均匀，染液不宜过多。
注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。
（2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在
菌液上。
注：盖玻片不宜平着放，以免产生气泡。
（3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情
况，并根据颜色来区别死活细胞。
酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵
酵母菌（yeast）是一类单细胞真菌。一般呈圆形、卵圆形、圆柱形，其菌落呈乳白色或红色，表 面湿润、粘稠，易被挑起。酵母菌多数为腐生，专性或兼性好氧，广泛生长在偏酸性的潮湿的含糖环境 中，例如水果、蔬菜、蜜饯的内部和表面以及在果园土壤中最为常见。酵母菌在有氧环境下将葡萄糖转 化为水和二氧化碳，主要用于馒头、面包等食品发酵；在工业上，酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae）
将葡萄糖、果糖、甘露糖等单糖吸入细胞内，在无氧的条件下，经过体内酶的作用，把单糖分解为二氧 化碳和酒精。此作用即酒精发酵。
C6Hi2O6（葡萄糖）T 2 C2H5OH（酒精）+2 CO2 f 在酿酒酵母酒精发酵的生产和应用中，由于细胞破碎和酶纯化等操作往往导致酶活性和稳定性都受 影响，从而降低产酒精效率。而利用细胞固定化可以很好的解决这一问题。微生物细胞固定化方法主要 有三种：载体结合法，交联法和包埋法，其中固定包埋法是目前比较理想的方法。包埋法就是将微生物 细胞均匀地包埋在多孔的水不溶性的紧密结构中，细胞中的酶处于活化状态，因而活性高，活力耐久。
目前，利用聚乙烯醇（PVA）—海藻酸盐是包埋法中比较高效的一种，这种方法以 PVA-海藻酸钠作为混
合溶胶，将酵母细胞固定起来进行酒精发酵，不仅可以使细胞浓度增加，而且可以多次使用，减少了酵 母培养增殖所消耗的糖分；操作简单、过程迅速、颗粒不粘连、颗粒强度大大提高，且增加了颗粒的生 物活性和稳定性，因此可实现连续化生产，提高酒精生产效率。
【实验一】
一、酵母菌的分离与培养
一、 【实验目的】
学习用选择性培养基分离酵母菌。
二、 【实验原理】
大多数酵母菌为腐生，其生活最适 pH值为4.5〜6，常见于含糖分较高的环境中，例如果园土、菜
地土及果皮等植物表面。
酵母菌生长迅速，在液体培养基中比霉菌生长得快。利用酵母菌喜欢酸性环境的特点，用酸性液体 培养基获得酵母菌的培养液（这样做的好处是酸性培养条件则可抑制细菌的生长） ，然后在固体培养基
路漫漫其修远兮，吾将上下而求索 -
百度文库
11 酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,
微生物测量技术,显微镜直接计数法
一、实验目的
1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法 .
3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二、实验原理
染色：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
测量：微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把 10 mm长度刻成
100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测 微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
计数：每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。
在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。
下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数
