光电五分类血球

五分类血球仪检测原理MEK7222/8222 白细胞分类的测定原理MEK-7222/8222，计数原理是wbc/rbc/plt电阻法，分类是使白细胞通过鞘流进入鞘流池内，然后通过检测对白细胞照射时发生的散射光，对白细胞进行分类。

这些散射光，根据血细胞的容积、血细胞的复杂性（有无颗粒、核的构造等）的不同，光的强度和方向有所不同，因此，通过以激光直进方向和同方向小角度的散射光（以下称为Size）、激光直进方向和同方向大角度的散射光（以下成为Complexity）、与激光直进方向相对垂直的方向的散射光（以下称为Granularity）为参数的散点图，可以对淋巴细胞、单核细胞、嗜中性白细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞进行分类。

另外，Size表示血细胞的大小、Complexity表示血细胞的复杂度、Granularity表示血细胞的颗粒的程度。

这种方法提供了三个散射图，MAIN散点图 NE-EO散点图 MO-BA散点图Neutrophil Count(嗜中性白细胞) Lymphocyto Count（淋巴细胞） NEC LYC Monocyto Count（单核细胞） MOC Eosinophil Count（嗜酸性白细胞） EOC Basophil Count（嗜碱性白细胞） BAC 散点图有下列三种。

纵轴是Size、横轴是Complexity的散点图（以下称为S-C散点图）；纵轴是Size、横轴是Granularity的单核细胞/嗜碱性白细胞分类用散点图（以下称为MO-BA分类用散点图）；纵轴是Size、横轴是Granularity的嗜中性白细胞/嗜酸性白细胞分类用散点图（以下称为NE-EO分类用散点图）。

淋巴细胞分布在S-C散点图的LY区域。

单核细胞及嗜碱性白细胞分布在S-C散点图的MO-BA区域。

进一步展开到MO-BA分类用散点图时，则单核细胞分布在MO区域，嗜碱性白细胞分布在BA区域。

嗜中性白细胞及嗜酸性白细胞分布在S-C散点图的NE-EO区域，进一步展开到NE-EO分类用散点图时，嗜中性白细胞分布在NE区域，而嗜酸性白细胞分布在EO区域。

血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.目录一、 库尔特原理...............................................................................................................2 二、 比色法.......................................................................................................................3 三、 半导体激光流式细胞术...........................................................................................4 四、 判断血细胞分析仪性能的参数...............................................................................61. 准确性.......................................................................................................................6 2. 重复性.......................................................................................................................7 3. 携带污染率...............................................................................................................8 4. 线性...........................................................................................................................9 五、 溯源性与质控、校准 .............................................................................................10 1. 溯源性.....................................................................................................................10 2. 校准.........................................................................................................................13 3. 质控.........................................................................................................................15文件编号：MXQ-12044-血球五分类版本：V1.01of22一、 库尔特原理血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.20 世纪 50 年代初，库尔特先生利用电阻抗原理设计了血细胞计数仪。

血细胞分析仪五分类检测技术与原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分类转向五分类，从二维空间进而转向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。

本文重点就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述1、电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法这是Coutler公司1987年推出的新技术，血球悬浮在电解液中，用一定的电流通过传感器的内外两个电极，由于血细胞电阻抗很大，当血细胞通过两个电极时，电极间阻抗瞬间增大，形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲，根据脉冲的大小可测出细胞的体积。

在测量红细胞时，利用一个脉冲甄别器，将幅度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲，因血液中白胞的数量不及红细胞的1/500，故其总数据近似认为是对红细胞计数。

在测量白细胞时，利用溶血素，使红细胞溶解，再对剩下的白细胞计数。

在对血小板计数时，调低脉冲甄别器的阈值，计出总数，再减去红细胞的计数（其中已包括白细胞的计数），即为血小板计数。

由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相同，故仅靠体积是不能完全区分，利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部结构可以弥补这一缺陷。

虽然细胞壁不能使低频电流通过，但能通过高频电流，细胞核的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可以用来区分白细胞。

激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。

激光散射对细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强，借此可将粒细胞区分开来，美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分析仪五分类就是利用电阻法、高频电导及激光散射联合检测法2、光散射和细胞化学染色联合检测法它利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。

嗜酸性粒细胞有很强的过氧化氢酶活性，中性粒细胞浆内含有较为丰富的过氧化氢酶，单核细胞次之，原始细胞则极少，而淋巴细胞和嗜碱性细胞则缺管此酶。

复查完毕后的报告签发模式。 • 6、直方图、散点图的利用。
血细胞自动分析异常结果人工
显微镜复检
• 1、镜检复核的现状
• 血细胞分析仪仍只能作为CBC 分析的一种过筛手段 ，当遇到 可疑情况 ，尤其是在病理条件下 ，其测定结果并不可靠 ， 需要人工以显微镜复查 ，这已是不争的事实 。但是 ，国内 目前各医院检验科对CBC异常结果基不或很少进行人工显微 镜复查 ，这种现象在经济发达的沿海地区更是普遍 。有资料 显示 ，国内各医院 CBC实际镜检率在0% ～15% ，大部 分医院镜检率< 5%或者不镜检 。这种现象引发了不少的医疗 投诉 、纠纷或事故 。分析这类题出现的原因可能有 : (1)认识 不够 ，认为血细胞分析仪尤其是五分群的血细胞分析仪的检 测结果可靠 ，不需要复查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻烦 ， 图省事 ； ( 4 )目前没有一个可参照的执行标准 ，即对CBC结 果的人工复查的标准 、内容 、方法及程序尚无明确的规定 。
• 在激光技术中目前有半导体 激光和气体激光。半导体激 光功率弱,但作为细胞分类自 己足够;气体激光功率强。二
者比较半导体激光具有寿命 长(7~10年)体积小,启动快,耗 电小,对稳压要求低,更为经济 适用等特点。
• （1） 电阻抗、高频电导及激光散射联 合检测法
• 即库尔特公司的VCS技术。
• V:代表体积容量。电阻法微孔技术应用于计数血细胞和测 定其体积的大小。
• 血细胞五分类技术是一种综合应 用光学、 机械学、流体力学、电子计算机、细胞生 物 学、免疫学等学科技术，让被测溶液流 经测量区域 并逐一检测其中每一个细胞的 物理和化学特性从而对 高速流动的细胞或 亚细胞进行快速定量测定和分析的 方法。
它一秒钟能分析几千个细胞，并同时测定 细胞 的多个参数。阻抗法也在五分类血细 胞仪中被采用，即所谓的鞘流阻抗法。