蛹虫草中抗HIV-1活性成分的研究

中药抗HIV活性成分的研究进展Research progress on anti HIV active components of traditional Chinese medicine叶菁摘要：传统中药中的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源广泛等特点，因而在防治艾滋病方面有着独特的优势和巨大的潜力。

通过国内外文献资料查新对最近年来具有抗HIV活性的中药及其相关化合物进行综述。

发现中药或天然药用植物中含有多种抗HIV的药理活性物质，如生物碱类、萜类、多糖类、蛋白质类。

有望从中获得抗HIV的有效药物，并为实验室研究工作和临床用药做参考。

因此从天然产物中寻找高效低毒的抗HIV药物为今后的重要研究方向。

关键字：中药；天然化合物；抗HIV活性；艾滋病Abstract: Natural compounds in traditional Chinese medicine showed the unique advantage and great potential in the prevention and treatment of AIDS cause the characteristics of structural diversity, low toxicity, wide sources. A review of recent studies on anti HIV activity of traditional Chinese medicine and its related compounds by means of domestic and international literature review, found that the traditional Chinese medicine or natural medicinal plants abound in anti HIV pharmacological active substances such as alkaloids, terpene, polysaccharides, proteins. the traditional Chinese medicine is expected to be the raw materials of the extract of effective anti HIV drugs, and the drugs can be the reference for laboratory research and clinical application. Therefore, it's a significant direction to find high effective and low toxic anti HIV drugs from natural products.Keywords: traditional Chinese medcine；natural compound；anti-HIV activity；AIDS艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiency syndrome，AIDS)，是一种由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)引起的，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病。

蛹虫草虫草素研究进展蛹虫草，又称冬虫夏草，是一种珍贵的中药材，被誉为“软黄金”。

在现代医学研究中，蛹虫草已被发现含有多种生物活性成分，具有抗肿瘤、抗衰老、免疫调节等多种药理作用。

蛹虫草虫草素是蛹虫草中的一种重要成分，其研究进展备受关注。

本文将对蛹虫草虫草素的研究进展进行详细介绍，以期为蛹虫草的科学研究提供参考。

一、蛹虫草虫草素的提取方法蛹虫草虫草素是从蛹虫草中提取得到的一种生物活性成分，其提取方法对其质量和药效具有重要影响。

当前，主要的蛹虫草虫草素提取方法包括超声波提取、超临界流体提取、微波辅助提取等多种技术手段。

超声波提取是将蛹虫草粉末与溶剂放入超声波提取仪中，在超声波的作用下，促进溶剂与蛹虫草中的有效成分迅速混合，加速提取速度和提取效率。

超临界流体提取是利用超临界流体作为提取介质，通过调节温度和压力等条件，将蛹虫草中的虫草素迅速提取出来。

而微波辅助提取则是利用微波辐射加热来加速蛹虫草中虫草素的溶解和扩散，提高提取效率。

这些新型的提取方法在提高蛹虫草虫草素提取效率和药效方面发挥了积极作用。

蛹虫草虫草素是一种复杂的生物活性成分，其主要化学成分包括多种多糖、蛋白质、核苷酸、氨基酸等。

多糖是蛹虫草虫草素的主要成分之一，具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。

蛋白质是蛹虫草虫草素的重要组成部分，具有抗菌、抗病毒、促进细胞再生等作用。

蛹虫草虫草素中还含有丰富的核苷酸和氨基酸，对人体健康具有重要作用。

研究蛹虫草虫草素的化学成分，有助于深入了解其药理作用和药效特点。

蛹虫草虫草素具有多种重要的药理作用，在现代医学研究中备受关注。

蛹虫草虫草素具有抗肿瘤作用。

研究表明，蛹虫草虫草素可以通过调节肿瘤细胞的生长周期、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞的增殖等多种途径发挥抗肿瘤作用。

蛹虫草虫草素具有抗炎作用。

实验研究表明，蛹虫草虫草素可以抑制体内炎症介质的分泌，减轻炎症反应，对炎症性疾病具有一定的防治作用。

蛹虫草虫草素还具有抗氧化、免疫调节、抗衰老等多种药理作用，为人体健康提供了全面的保护。

蝉花和蛹虫草mat基因的蛋白质分析一、蝉花主要生物mat基因蛋白活性成分分析；多糖：多糖具有独特的生物活性，是许多中草药的主要活性物质，具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗辐射、抗衰老等功效，近年来尤以免疫调节作用成为研究开发的热点。

Kiho和Nagail"从蝉花中分离出半乳甘露聚糖C-3 (galactomannan), 它是一种水溶性多糖，相对分子量27000，由D-甘露糖和D-半乳糖以4:3比例组成，以20 mg/kg的剂量对小鼠Sum肉瘤的抗肿瘤作用，结果抑制率为47%。

退秋阳和陈宝骥鬥等从蝉花中提取的多糖，以冬虫夏草多糖为阳性对照，对小鼠进行淋巴转化试验、Ea 及E玫瑰花试验、特异性免疫玫瑰花试验、巨噬细胞吞噬试验、抗绵羊红细胞抗体效价试验，结果表明蝉花多糖具有明显的提高免疫功能作用。

Takano和Yahai5)从蝉花发酵液中分离出一种可以促进Th1免疫反应的蛋白多糖，该多糖可以增加大鼠派氏集合淋巴结细胞中白介素-2和干扰素γ的浓度，并且通过毒理实验表明该蛋白多糖对大鼠没有毒副作用。

谭艾娟和:立琨4等报道蝉花发酵液中含有丰富的透明质酸(Hyaluronic acid,HA)，达11.35mg/mL.透明质酸是由乙酰氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸为结构单元的高分子非蛋白酸性粘多糖，由于保湿型强、生物相容性好，在高档化妆品中应用广泛，还常作为枯弹性保护剂用于眼科如眼球晶体移植手术、视网膜剥离手术、开放性玻璃体切除手术及青光眼手术等，也用于治疗类风湿性关节炎和骨性关节炎等疾病:此外，HA具有抗癌作用，可有效刺激免疫系统、阻止癌细胞扩散51.HA为蝉花的次级代谢产物，从蝉花发酵液中提取可以克服从动物组织中提取HA受原料限制的不足，又有利于蝉花的综合利用开发。

含氮类化合物：核苷类：蝉花中核苷类成分包括腺苷、虫草素、鸟苷、尿苷、腺嘌呤、鸟嘌呤等。

腺苷是- -种嘌呤核苷，其含量是评价各种虫草内在质量的主要指标温鲁和唐玉玲回报道蝉花菌丝体中的腺苷含量为1.90 m/g.约为冬虫夏草的4倍。

蛹虫草多肽的提取及体外抗氧化活性研究采用酶解法获取蛹虫草子实体中的多肽，并对中性蛋白酶和木瓜蛋白酶提取出的蛹虫草多肽进行体外抗氧化活性的测定。

结果表明，蛹虫草多肽具有一定的还原能力、清除DPPH的能力和清除羟自由基的能力，并且采用木瓜蛋白酶提取出的多肽活性均优于用中性蛋白酶提取出的多肽。

这为以后蛹虫草多肽在医学、食品及保健品等领域广泛应用提供了重要理论基础。

标签：蛹虫草；多肽；蛋白酶；抗氧化0 引言蛹虫草[Cordyceps militaris（L.）Link]是一种和冬虫夏草同属异种的药食兼用真菌，又名北冬虫夏草。

研究表明蛹虫草含有与冬虫夏草相近的功能物质及药用功效[1]。

蛹虫草含有蛋白质、虫草酸、脂肪、SOD酶、虫草素、虫草多糖和很多微量元素。

众所周知，多肽是机体完成各种生理活性必不可少的一种物质，在生物的代谢活动和疾病治疗中也有着举足轻重的作用，因此该研究现已成为一大热点[2]。

但目前国内外的学术研究，有关蛹虫草多肽内容的很少，大部分都围绕虫草素和虫草多糖的研究。

本文对蛹虫草子实体中多肽的提取、及体外抗氧化活性进行研究，旨在为日后蛹虫草多肽类物质的研究及其应用提供参考意见。

1 材料与仪器1.1 材料与试剂蛹虫草子实体、30%过氧化氢溶液、无水乙醇、硫酸亚铁、水杨酸、蒸馏水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、DPPH、铁氰化钾、三氯乙酸、三氯化铁、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶。

1.2 仪器设备粉碎机、恒温水浴锅、分光光度计、离心机、电子天平、筛子、锥形瓶等。

2 实验方法2.1 多肽的提取将蛹虫草磨成粉用筛子过滤后，取6个150ml锥形瓶加入10 g虫草粉、90ml 蒸馏水，三个分别加0.5 g木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，室温下充分溶胀30min后放入恒温水浴锅中3 h，调节温度为55 ℃和50 ℃。

酶解完成后沸水浴煮沸10 min，离心（4000 r/min）10 min得上清即为肽类物质。

2.2 蛹虫草多肽体外抗氧化活性研究2.2.1 蛹虫草多肽对羟自由基清除能力的测定采用水杨酸法测定。

蛹虫草虫草素研究进展作者：王长文王忠王锦锋吴鸿雪来源：《福建农业科技》2019年第02期摘;要：虫草素是蛹虫草中重要的生物活性之一，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、提高免疫力等生物功效，目前主要从蛹虫草相关培养物中提取虫草素。

从虫草素的药理作用、提取、分离纯化、测定以及优化虫草素的产量方面进行综述，总结蛹虫草虫草素研究进展，并进行相关展望。

关键词：蛹虫草;虫草素;药理作用;提取纯化;产量DOI： 10.13651/ki.fjnykj.2019.02.019Abstract： Cordycepin is one of the important biological activities in cordyceps militaris， with the biological effects of antitumor， antiinflammation， antibacterial， antivirus and improving immunity. At present， cordycepin is mainly extracted from cordyceps militarisrelated cultures. In this paper， the pharmacological effects， extraction， separation， purification， determination and optimization of cordycepin production were reviewed. The research progress of cordycepin was summarized and the related prospects were prospected.Key words： Cordyceps militaris; Cordycepin; Pharmacological effect; Extraction and purification; Yield虫草素Cordycepin又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素，是一种腺苷类物质。

第6卷第4期北华大学学报(自然科学版)Vol.6No.42005年8月JOU RNA L OF BEIHUA U NI VERSIT Y (N atural Science)Aug.2005文章编号:1009-4822(2005)04-0324-06中药蛹虫草的抗肿瘤活性及机制研究纪朋艳,罗 速,崔新颖,王艳双,孙林英(北华大学医学院,吉林吉林 132013)摘要:中药治疗肿瘤越来越受到医学界的重视,研究了中药蛹虫草及其人工培植品的主要抗肿瘤相关活性成分的特点及药理作用,探讨了蛹虫草及其人工培植品的抗肿瘤作用及其抗肿瘤机制.随着研究的深入,中药蛹虫草及其人工培植品对人类抗肿瘤将发挥重要作用.关键词:蛹虫草;抗肿瘤;活性成分;作用机制中图分类号:R273 文献标识码:A收稿日期:2005-04-06作者简介:纪朋艳(1976-),女,硕士研究生,主要从事肿瘤生化研究.癌症在我国乃至全世界发病率及死亡率均很高,且癌症患者一旦被发现,绝大多数为中晚期,治疗难度极大.我国传统的一些中药以其毒副反应小、疗效显著等越来越受到人们的青睐.蛹虫草又名北冬虫夏草、北虫草、蛹草,是蛹虫草菌寄生在鳞翅目、鞘翅目、双翅目等昆虫蛹体上生成的一种虫草混合体,隶属真菌门、子囊菌亚门、麦角菌目、麦角菌科、虫草属.天然野生蛹虫草始载于5新华本草纲要6[1].现代中医学巨著5中华药海6也有记载[2].此外,5全国中草药汇编6记载:/蛹虫草(北虫草)的子实体及虫体也可作为冬虫夏草入药0[3].蛹草及其人工培植的蛹虫草与名贵中药冬虫夏草为同属真菌植物,其化学成分基本相同[4~7],最有希望成为天然冬虫夏草的替代品.本文就有关蛹虫草及其人工培植品的抗肿瘤作用进行探讨.1 蛹虫草的活性成分蛹虫草具有多种生物活性物质,其主要药效成分且与抗肿瘤作用相关的有如下几种:1)虫草菌素:虫草菌素又称虫草素、蛹虫草菌素、3.-脱氧腺苷,是由Cunning ham 等[8]分离得到的一种腺苷类活性物质.蛹虫草是目前报道的300多种冬虫夏草中惟一能大量产生虫草素的虫草.虫草菌素具有抑菌[9~11]、抗病毒[12]、杀虫[13]的生物活性.表现出的药理作用有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、扩张支气管、显著增强肾上腺素等作用.2)虫草多糖:虫草多糖具有良好的增稠性、触变性、抗盐、耐热和广泛pH 的稳定性能[14].虫草多糖具有抗炎性[15,16]、抗氧化性[14]、可提高免疫力[17~19]、具有降糖活性[20],另外,还有抗肿瘤、抗辐射等作用.3)虫草酸:它不是酸,而是D -甘露醇,分子式为C 6H 14O 6.具有抗自由基、抗氧化、利尿脱水、镇咳、祛痰和平喘的作用.江晓路等[21]测得蛹虫草和冬虫夏草中含有较高的甘露醇,经发酵的菌丝中,甘露醇含量大大高于天然虫草,为16.04%:冬虫夏草头孢菌丝中为10.81%.现甘露醇已作为人工蛹草的质控指标.4)麦角甾醇:麦角甾醇又称麦角固醇,是脂溶性维生素D 2的前体,甾醇是真菌细胞膜的重要组分,是真菌的特征醇.在虫草中含量相对恒定,通常作为质量控制指标之一.5)超氧化物歧化酶:它是一种生物活性蛋白质,这种酶具有清除新陈代谢中产生的超氧阴离子自由基的能力,又是超氧阴离子的底物诱导酶,其功能是保护细胞免遭有氧代谢物的损伤,在维护机体活性氧代谢的平衡中起重要作用,表现出的作用为抗癌、防衰、减毒等.6)硒:硒被称为微量元素中的抗癌之王,是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -PX)的必需组分,GSH -PX 可引起人体不断产生的可致癌自由基的破坏.柞蚕蛹草和冬虫夏草中硒的含量分别为0.54ppm 和0.34ppm,高出58.82%[4],张显科等[5]测得蛹虫草与冬虫夏草中硒含量分别为0.96和0.38ppm.7)核苷类:蛹虫草中含有3-氨基-3--脱氧腺苷,高瓜氨酰基腺苷和赖氨酰氨基腺苷等包含虫草素在内的腺苷、尿苷、尿嘧啶、腺嘌呤等物质.腺苷具有镇静、扩张血管、改善心脑血液循环、促进造血、防止心律失常、抑制神经递质释放和调节腺苷酸环化酶活性功能等生理活性.天然蛹虫草核苷含量为1.39%,冬虫夏草为1.46%,人工培养的蛹虫草发酵菌丝为1.42%[21].2抗肿瘤作用蛹虫草所具有的特殊的生物活性成分,使之具有抗肿瘤作用.2.1抑制肿瘤细胞的增殖和转移1)体内动物实验:20世纪60年代就有报道证实蛹虫草的主要活性成分之一虫草素可延长艾氏腹水瘤小鼠的存活时间,具有抗肿瘤作用[22].吴洪臻等[23]也报道,虫草素对小鼠S180瘤的抑瘤率为49.11%,阳性对照组-环磷酰胺组的抑瘤率为55.91%,治疗效果无显著性差异(P>0.05).蛹虫草的人工培植体同样具有显著的抗肿瘤作用.刘洁等[24]发表于1992年的一篇报道表明蚕蛹虫草水煎剂具有明显抑制小白鼠S180瘤块生长,延长荷瘤小鼠寿命,降低小鼠荷瘤率.刘洁等[25]发表于1997年的另一篇报道,分别于Sw iss小鼠皮下接种S180瘤细胞50万,于C57BL小鼠皮下接种Lew is 肺癌细胞160万.然后给予蚕蛹虫草治疗,CML对S180和Lew is肺癌的抑瘤率分别为61%和65%,存活率对照组分别为30%和33%,CM L组分别为70%和75%,并且测得CML对Lew is肺癌瘤细胞转移抑制率达75.88%.人工蛹虫草子实体对荷肝癌(H22)小鼠也具有抑瘤作用[25],600mg/kg人工蛹虫草子实体灌胃给药10d,可以明显抑制荷肝癌小鼠的肿瘤生长,抑瘤率可达到39.5%.孙科峰等[27]研究表明蛹虫草对S180实体瘤小鼠的肿块生长有一定的抑制作用,环磷酰胺阳性对照组的抑瘤率为51.04%,蛹虫草组抑瘤率为30.72%. 300mg/d和600m g/d剂量的蛹虫草子实体对S180腹水型荷瘤小鼠的生命延长率为180%和193%,与环磷酰胺对照组作用相似.2)体外实验:有关蛹虫草及其工培植品抑制肿瘤的作用在体外也有研究.刘凤安等[28]研究表明,喉癌细胞对蚕蛹虫草及与其作对比的冬虫夏草都很敏感(P<0.05),且蚕蛹虫草对癌细胞的杀伤具有浓度和时间依赖性.从克隆形成试验结果来看,两种药物作用的喉癌克隆形成率随药浓度的增加有明显下降.这是首次证明蚕蛹虫草具有抗喉癌作用.Yoo等[29]也证明蚕蛹虫草提取物能抑制B16-F10黑色素瘤的生长.有研究表明麦角甾醇过氧化物糖基化形式以10g/L的浓度可有效抑制K562, WM-1341,H L-60和RPM I-8226等肿瘤细胞的增殖,抑制率为10%~40%[30].2.2协同治疗作用有研究发现,蛹虫草与其他的抗癌药联合使用可大大增加其抗肿瘤活性.汤新强等[31]通过测定荷H22实体瘤小鼠的瘤重和H22腹水瘤小鼠的存活时间表明,人工蛹虫草胞外多糖与治疗剂量的广谱抗恶性肿瘤药新一代铂类化合物-碳铂(carboplatin,CBP)合用,呈剂量依赖性地增强CBP 对H22实体瘤的抑制作用,并延长H22腹水瘤小鼠的存活时间,与CBP组比较,差异显著.另外,经实验证明,人工蛹虫草胞外多糖与毒性剂量的CBP 合用可对抗CBP引起的血小板数量减少,并且可呈剂量依赖性地对抗CBP引起的骨髓细胞GSH-Px活性降低和丙二醛(MDA)生成增加.吴洪臻等[23]的实验表明虫草素低剂量组、虫草素高剂量组、环磷酰胺组的抑瘤率分别为45.72%,49.11%, 55.91%,但虫草素与环磷酰胺的联合用药组其抑瘤率却达到了88.55%.Kodama[32]等的研究表明虫草素在脱氧柯福霉素(dCF)存在的情况下对末端脱氧核苷酸转移酶阳性(TdT+)的白血病细胞有较强细胞毒作用,对T dT-的细胞却不敏感.2.3对抗癌诱变剂的拮抗作用郁利平等[33]采用U DS检测法研究发现强癌诱变剂甲基甲烷磺酸酯(MMS)与蛹虫草同时作用BALB/C小鼠脾淋巴细胞时,其UDS反应性明显低于M MS单独作用时UDS的反应性,提示蛹虫草具有对癌诱变剂M MS所致BALB/C小鼠脾细胞DNA损伤的拮抗作用.Price等[34]发现虫草素可以保护费希尔鼠胚胎细胞(H43)免于化学性致癌物3--甲基胆蒽引起的转化.杨企震等[35]以蛹虫草每日4只(约5g),水煎或研末分2次服用.30d为1疗程,一般用药2疗程,最长达9疗程.服药期间不再服用其他抗肿瘤药物.其结果49例癌症患者中效的有13例,显效的有23例,无效13例,总有效率为73.5%.这其中对淋巴肉瘤、胸膜恶性间皮瘤、急性淋巴白血病、鼻咽癌、前列腺癌、多发性骨髓瘤的有效率为100%.325第4期纪朋艳,等:中药蛹虫草的抗肿瘤活性及机制研究3抗肿瘤作用机制抗肿瘤中药的特点之一是抗肿瘤机制多样,同一种中药有多个抗肿瘤机制,而不同的中药可能会有相同的抗肿瘤作用机制.根据目前的研究状况,蛹虫草的抗肿瘤机制主要有以下几点.3.1增强免疫力肿瘤的发生、发展与免疫状态有不可分割的联系,因此免疫调节是最普遍的中药抗肿瘤机制.孙艳等[26]研究表明,人工蛹虫草子实体可显著增强荷肝癌小鼠NK细胞活性且能促进小鼠的淋巴因子IL-2的产生.而IL-2又能诱导原始NK 细胞的增量分化和前体NK细胞分化成熟表现活性,激活的NK细胞增强其裂解肿瘤细胞的能力.有报道认为虫草素的磷酸化形式3--脱氧腺苷酸增加人NK细胞破坏瘤的活性[36].刘民培等[37]在荷S180实体瘤小鼠体内通过镜检对鸡RBC的吞噬数目表明人工蛹虫草子实体300,600mg/kg2种剂量均对网状内皮系统和单核M h吞噬活性有明显的提高,且与其剂量有显著的量效关系.另外,对刺激脾中T细胞等分泌T NF-B和IL-2的水平有明显的提高,B细胞合成抗绵羊红细胞(SRBC)循环抗体的能力在人工蛹虫草子实体300,600mg/kg 时其HC50分别为(434?32)和(438?32),荷瘤对照组为(247?32),显著提高分泌抗体的能力.刘洁等[24]认为蛹虫草抗肿瘤的作用机制是通过提高机体免疫能力,促进小鼠脾淋巴细胞转化率,激活腹腔巨噬细胞吞噬活性而实现的.孙科峰等[27]采用L929细胞杀伤法测定得出600mg/kg蛹虫草子实体蛹虫草组TNF-B细胞溶解率为(30.07?9.82)%,与S180腹水型荷瘤对照组(20.04?2.89)%相比P<0.05,同时促进荷鼠的淋巴因子IL-2的产生.可见蛹虫草可通过提高患瘤动物机体的细胞免疫,体液免疫并促进各细胞因子的分泌,增强免疫细胞的功能,通过宿主介导而发挥抗肿瘤作用. 3.2抑制核糖核酸的合成国内外关于虫草素对癌细胞核糖核酸的合成影响研究较多.Ioannidis等[38]证实虫草素可选择性抑制L5178细胞mRNA,继而影响蛋白质合成,其对L5178细胞增殖的IC50为0.27L mol/L,抑制作用可被腺苷取消.这是因为虫草素与腺苷竞争核苷磷酸酶.Moshe等[39]在子宫颈癌传代细胞(Hela)中的研究表明虫草素可以使完全核糖体和核糖体的前体(45S)水平显著降低,18S核糖体的前体可以从45S核糖体中分裂,但32S核糖体的前体不能从中产生.tRNA的合成也被降低.核不均一RNA 的合成没有受到影响,但胞浆不均一RNA的合成轻微减少.Glazer等[40]通过对L1210细胞中核糖体RNA、非多聚腺苷酸核不均一RNA和多聚腺苷酸核不均一RNA的合成测定,都提示虫草素能引起对各种形式的RNA的抑制作用,2--脱氧柯福霉素能增强这种抑制作用.Penman等[41]研究发现虫草素抑制人子宫颈癌传代细胞(Hela)mRNA,抑制的是mRNA的转录,但对hnRNA和转运至细胞浆没有影响.而Desrosiers等[42]发现虫草素阻碍Novikoff肝癌细胞45SrRNA前体的合成,其浓度与hnRNA的合成相对抗.虫草素的活性形式3--脱氧腺苷-5.-三磷酸盐对主要负责hnRNA合成的RNA聚合酶Ò比对主要负责rRNA前体合成的RNA聚合酶Ñ敏感.研究表明[43]在艾氏腹水瘤细胞中,虫草素在0.05,0.23,0.45mmol浓度时对次黄嘌呤-8-14C掺入到核酸分别抑制13%,23%和45%.在0.9到1.4mmol虫草素存在的情况下,放射性的前体掺入到核苷酸被抑制80%以上.来源于小分子前体的腺苷酸和鸟苷酸的合成被显著抑制.这些结果表明虫草素影响核酸生物合成的从头合成和补救两种途径.在未标记的AT P,UTP,CT P, GTP存在的情况下,放射性的CTP或GTP掺入到RNA被抑制47%至80%.在鼠肉瘤180腹水瘤中,虫草素干扰RNA的代谢[44].3.3抑制血管生成Yoo H S等[45]在体外试验研究表明,蚕蛹虫草提取物(CM E)抑制H UVEC的生长且有剂量依赖性,同时也能抑制HT1080的生长,但不能抑制B16-F10的生长.在CM E作用3h后,H UVEC的M MP-2的表达减少了6.0%(100mg/L)和22.9% (200mg/L),6h后,HU VEC的MM P-2的表达减少了14.9%(100mg/L)和32.8%(200mg/L).但CME对B16-F10细胞的M MP-9的基因表达没有影响.CME可减少HUVEC中bFGF的表达,下凋eNOS的表达,作用18h,可抑制内皮细胞血管形成.3.4诱导凋亡通过诱导肿瘤细胞凋亡达到肿瘤缩小、消退的目的已成为当今肿瘤治疗的研究热点.Koc等[46]研究发现虫草素作用的ADA抑制的末端脱氧核苷酸转移酶阳性(TdT+)的白血病细胞发生凋亡的典型变化,细胞量减少,染色质凝集,出现膜泡,在琼脂糖凝胶电泳上有180bp的DNA梯状条.虫草素326北华大学学报(自然科学版)第6卷对T dT+的白血病细胞的凋亡诱导与提高蛋白激酶A(PK-A)活性密切相关.3.5对信号传导通路的调节许多研究表明,如果控制细胞增殖、分化的信息传递通路中某一环节的异常,可引起细胞生长失控,导致肿瘤的产生、转移和复发.酪氨酸激酶(T PK)信号传导途径的紊乱在肿瘤的发生发展中具有重要地位.Fuller等[47]研究发现以2@10-7 M a-黑素细胞刺激激素(a-M SH)处理S-91鼠黑色素瘤细胞6d,可引起酪氨酸激酶活性升高90倍,虫草素以1g/L可抑制此酶的活性.3.6抗自由基、抗氧化作用在某些病理情况下无论何种原因使活性氧代谢产物过量,即可引起生物膜多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,产生具有致癌和促进肿瘤生长的毒性物质丙二醛.Li等[48]研究发现,虫草多糖处理肾上腺髓质瘤PC12细胞对由于H2O2所造成的损害具有保护作用,100g/L的虫草多糖可延长PC12细胞成活率达60%以上,可使由H2O2所诱导产生的丙二醛水平显著降低,并显著降低谷胱苷肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性的变化,且有剂量依赖性.3.7抗突变作用实验研究表明,许多中药多糖能减少染色体畸变、SCE和微核的发生率.据报道[49,50]在体外试验中,带有莫洛尼白血病病毒的BALB/M O小鼠胸腺依赖性淋巴细胞,其姐妹染色单体的交换率(SCE)显著高于无这种病毒的BALB/C小鼠胸腺依赖性淋巴细胞的SCE.用10g/L的虫草素处理可降低BALB/M O胸腺依赖性淋巴细胞SCE至与BALB/ C小鼠胸腺依赖性淋巴细胞SCE相同的水平,同时也能减少莫洛尼白血病病毒的产量.另外,还能减少BALB/M O胸腺依赖性淋巴细胞对由丝裂霉素C引起的SCE的诱导的敏感性,同时不影响染色单体畸变.3.8干扰致肿瘤病毒的复制可致肿瘤的病毒能使宿主细胞恶性转化而形成肿瘤,可分为RNA肿瘤病毒和DNA肿瘤病毒. Richardsont等[51]研究发现虫草素以5~10mg/L 的浓度,可抑制C型RNA致肿瘤病毒的复制,可减少7~35倍.在DNA肿瘤病毒牛痘病毒感染的细胞中,虫草素有效抑制病毒mRNA和多聚腺苷酸的合成,对宿主蛋白质合成的抑制主要是对起始阶段的阻碍[52].另有研究发现[53],预先用虫草素处理鼠Balb3T3细胞,感染鼠肉瘤病毒后,抑制培养细胞产生病灶.WU等[54]发现虫草素阻碍由5-I-2--脱氧尿苷诱导的BALB/3T3和BALB/K-3T3细胞产生鼠白血病病毒.3.9引起核酸甲基化Glazer等[55]研究报道用虫草素处理L1210白血病细胞,可显著抑制RNA的甲基化.4目前存在的问题及研究发展趋势蛹虫草以其特有活性成分而发挥着其抗肿瘤作用,其人工培植品的有效性更向人们展示了其广阔的开发应用前景.但对蛹虫草单体成分的提纯和研究还不充分,为了进一步提高其主要成分的疗效,对单体成分应着重开发.另外,中药抗肿瘤的机制是多方面,为了更好地为临床医药开发奠定基础,对其机制的深入研究是非常必要的.相信随着对中草药抗癌作用的重视及研究的深入,蛹虫草及其人工培植品必将为人类治疗癌症作出应有的贡献.参考文献:[1]中国医学科学院药物研究所.新华本草纲要[M].上海:上海科学技术出版社,1988.496~518.[2]冉先德.中华药海[M].哈尔滨:哈尔滨出版社,1993.2024~2025.[3]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(上)[M].北京:北京人民卫生出版社,1982.275.[4]马冰如,何玲,张甲生,等.蚕蛹虫草与冬虫夏草化学成分的比较[J].中国食用菌,1994,13(1):34~37.[5]张显科,王玉柱,刘文霞.蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较[J].辽宁大学学报(自然科学版),1996,23(4):79~82.[6]彭国平,李红阳,袁永泰.冬虫夏草与人工蛹虫草的成分比较[J].南京中医药大学学报,1996,12(5):26~28. 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of ant-i tumor of cordyceps m ilitaris and substitute cultivated by people at home and abroad w as reviewed in this text.Firstly,some properties and pharmacology of active ingredients,w hich are relative to ant-i tumor activity w ere introduced.Their ex perimental and clinical study and mechanism of ant-i tumor were also demonstrated.Finally,The subsistent problem and the market prospect of cordyceps militaris w ere demonstrated.Key words:Cordyceps m ilitaris;Ant-i tumor;Active ingredients;Machanism=责任编辑:王坤>329第4期纪朋艳,等:中药蛹虫草的抗肿瘤活性及机制研究。

Hans Journal of Food and Nutrition Science 食品与营养科学, 2019, 8(4), 258-266Published Online November 2019 in Hans. /journal/hjfnshttps:///10.12677/hjfns.2019.84034Research Progress on Anti-Tumor ActiveIngredients and Anti-Tumor Mechanism ofCordyceps militarisTing Xiang1, Chen Xia1, Jianfu Shen1*, Chaoran Wang2,31College of Biosystems Engineering and Food Science, Zhejiang University; Natural Products and Human Health Research Center, Hangzhou Zhejiang2Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian Liaoning3Institute of Biomedical Innovation, China National Pharmaceutical City, Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Taizhou JiangsuReceived: Oct. 18th, 2019; accepted: Oct. 31st, 2019; published: Nov. 8th, 2019AbstractAs a valuable biological resource, Cordyceps militaris has certain medicinal value in the field of an-ti-tumor. This article firstly organizes the active ingredients with anti-tumor effects in Cordyceps militaris, such as cordyceps polysaccharides, nucleosides, proteinaceous substances and sterols.Secondly, according to the broad-spectrum anti-tumor effect of Cordyceps militaris, its direct or indirect anti-tumor mechanism is classified and summarized, including inhibition of sputum, DNA and RNA biosynthesis and protein translation, induction of tumor cell apoptosis, regulation of cell cycle, inhibition of tumor cell metastasis and invasion, improvement of immune regulation, en-hancement of sensitivity of drug-resistant cells, and the like. Finally, on the basis of summarizing the previous studies, the paper puts forward the focus of future research on the anti-tumor effect of Cordyceps militaris, and explores the research on anti-tumor of Cordyceps militaris.KeywordsCordyceps militaris, Biological Active Ingredients, Apoptosis, Cell Cycle, Immune Regulation,Drug-Resistant Cell Sensitivity蛹虫草中抗肿瘤活性成分及作用机制研究进展项婷1，夏琛1，沈建福1*，王超然2,31浙江大学生物系统工程与食品科学学院，天然产物与人类健康研究中心，浙江杭州2中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连*通讯作者。

蛹虫草多糖的分离及免疫活性的研究
吴光昊;王旻
【期刊名称】《中国天然药物》
【年(卷),期】2007(005)001
【摘要】目的:对蛹虫草的多糖成分进行研究找出免疫活性成分.方法:通过离子交换和分子筛的分离运用HPLC对其进行含量测定,经气相色谱分析和免疫活性测定确定活性成分.结果:得到多糖产物CPS,测定组成为甘露糖,葡萄糖和半乳糖的混合组分,比例为3∶10∶1.HPLC测定纯度为98.78%.通过淋巴细胞转化实验证明其对细胞增殖效果明显,对IL-1的诱生也有明显激活作用.结论:所得多糖产物以葡萄糖和甘露糖为主,含少量半乳糖,免疫活性测定证明该多糖有免疫增强和抗肿瘤活性.【总页数】4页(P73-76)
【作者】吴光昊;王旻
【作者单位】中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009
【正文语种】中文
【中图分类】R965;TQ464.1
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