高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中19种喹诺酮类药物残留量

液相色谱-串联质谱法检测水产品中磺胺类和喹诺酮类药物残留
液相色谱-串联质谱法检测水产品中磺胺类和喹诺酮类药物残留
建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法检测水产品中磺胺类、喹诺酮类等合成抗菌剂残留的方法.样品以乙腈为提取剂,提取物经脱脂、净化、浓缩后,用流动相溶解.用氘代试剂内标法定量,高效液相色谱-串联质谱法测定.本方法通过梯度洗脱将12种磺胺类、喹诺酮类进行良好分离.标准曲线线性范围0.05～0.8 mg/L,线性相关系数r=0.987 5～0.999 1,回收率为61%～104%,相对标准偏差(RSD)为4.75%～6.12%(n=5),检出限为10～50 μg/kg.
作者：李佐卿倪梅林俞雪钧章再婷谢东华殷居易湛嘉 LI Zuo-qing NI Mei-lin YU Xue-jun ZHANG Zai-ting XIE Dong-hua YIN Ju-yi ZHAN Jia 作者单位：宁波出入境检验检疫局,浙江,宁波,315012 刊名：分析测试学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS 年，卷(期)： 2007 26(4) 分类号：O657.63 R978.2 关键词：液相色谱-串联质谱水产品磺胺类喹诺酮类残留。

试点论坛shi dian lun tan407液相色谱串联质谱法对水产品中喹诺酮类药物的测定◎李新摘要：目的 使用液相色谱串联质谱法对水产品中环丙沙星、氧氟沙星、洛美沙星、诺氟沙星、培氟沙星、恩诺沙星6种喹诺酮类药物残留情况，以建立喹诺酮类药物水产品液相色谱串联质法测定方案。

方法 采用乙腈提取样品，后将提取液进行正己烷液液分配脱脂后，使用强阳离子固相萃取小柱净化的方式，对样品进行液相色谱串联质谱法测定。

在检测中对液相色谱串联质法测定全过程进行适当优化，并分析优化后6种喹诺酮类药物残留检测回收率等。

结果 0～40μg/L 范围内测定6种喹诺酮类药物的线性关系良好，且相关系数均在0.9924～0.9986之间，回收率高达80.36%～92.65%。

结论 对液相色谱串联质法测定全过程进行适当优化，使用强阳离子固相萃取小柱净化方式，可以满足水产品喹诺酮类药物检测的要求，值得深入研究与应用。

关键词：水产品；液相色谱串联质谱法；喹诺酮水产品属于生活中较为常见的食材，尤其是鱼、虾等产品更是由于口感细腻鲜美，深受大众喜爱，但水产品在养殖过程中可能存在一些药物残留的情况，这些药物残留达到一定水平会对食用的大众健康构成严重威胁。

喹诺酮类属于水产品中易于超标的药物残留之一，此类药物属于广谱性的抗菌剂，由于其在革兰仕菌、球菌、杆菌等防治上效果好，所需成本低，使得这类药物成为水产品养殖中不可或缺的药物之一，但过量的药物残留会影响水产品的品质[1]。

而想要真正确保水产品安全，则需要强化对喹诺酮类药物残留的检测质量。

液相色谱串联质谱法属于近些年在药物残留等检测中应用较为广泛的技术，研究在此种检测法基础上进行优化的水产品喹诺酮类药物检测方案，对于提高水产品喹诺酮类药物检测质量，确保水产品安全具有重要意义[2]。

一、实验材料与方法（1）实验材料。

实验器材：实验中所用的仪器为液相色谱仪（Thermo Fisher U3000）、串联质谱仪（TSQ Quantum Access Max）配ESI 离子源、离心机。

高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中19种喹诺酮类药物残留梁晶晶;徐潇颖;丁宇琦;陈万勤;刘柱;罗金文【摘要】A method was developed for the determination of 19 quinolone antibacterials residues in aquatic products by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS) with PRiME HLB purification technique.In this research,the parameters such as purification,concentration,liquid phase separation and mass spectrometry were optimized.The samples were extracted with 80％ acetonitrile-water mixed solution,purified with a PRiME HLB column,and quantified by UPLC-MS/MS in MRM mode after gradient elution on an ACQUITY BEH C18 column(1.7μm,2.1 mm × 100 mm) with methanol and 5 mmol/L ammonium acetate solution containing 0.1％ formic acid as mobile phase.The results showed that there existed good linear relationships for the components in their respective concentration ranges.The average recoveries were in the range of 72.1％-119.9％ with the relative standard deviations of 2.4％-15.6％,the detection limits of 0.5 μg/kg and the quantitation limits of 1.5 μg/kg.With the advantages of good accuracy,simplicity and high sensitivity,this method is suitable for the determination of quinolone antibacterials in aquatic products,and it provides a new way for the determination of quinolone antibacterials residues in aquatic products.%应用PRiME HLB净化技术,采用超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS),建立了水产品中19种喹诺酮类药物残留的检测方法.对样品的净化、浓缩、液相色谱分离及串联质谱等相关检测参数进行了优化.样品经80％乙腈水溶液提取,PRiME HLB固相萃取柱净化,在ACQUITY BEH C18色谱柱(1.7μm,2.1 mm×100 mm)上以甲醇和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸)为流动相梯度洗脱,液相色谱-串联质谱MRM方式进行定量分析.结果表明:各组分在各自浓度范围内线性关系良好,平均回收率为72.1％～119.9％,相对标准偏差为2.4％～ 15.6％,检出限均为0.5μg/kg,定量下限均为1.5 μg/kg.该方法用于水产品中喹诺酮类药物残留的检测,具有准确、快速、简便、灵敏度高等优点,为水产品中喹诺酮类药物残留的测定提供了新途径.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2018(037)002【总页数】7页(P224-230)【关键词】水产品;喹诺酮;PRiME HLB;超高效液相色谱-串联质谱【作者】梁晶晶;徐潇颖;丁宇琦;陈万勤;刘柱;罗金文【作者单位】浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州310052【正文语种】中文【中图分类】O657.63;O657.7喹诺酮类药物是一种具有4-喹诺酮共同基本母核的人工合成抗菌药，可通过直接作用于细菌的核，抑制其DNA旋转酶，破坏其代谢和繁殖，从而迅速杀灭细菌，具有抗菌谱广、抗菌力强等优点，被广泛应用于动物和人类的多种感染性疾病的预防和治疗[1]。

液相色谱-串联质谱法测定水产品中磺胺类及喹诺酮类药物残留量李婵君;李柱梅;秦喜玲;董素静;王彦超【摘要】水产品样品(5.00 g)经乙腈-甲酸(99+1)混合液20 mL提取,无水乙醇除水,浓缩并加正己烷2 mL脱脂.所得溶液进行液相色谱分离.以ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱为分离柱,以不同体积比的甲醇和0.1%(体积分数)甲酸溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱.质谱分析中,采用电喷雾正离子源多反应监测模式检测.采用内标法定量.所涉11种药物的线性范围均为5~200μg·L-1,方法的测定下限(10S/N)在0.07~0.20μg·kg-1之间.在1.0,4.0,20.0μg·kg-1等3个浓度水平进行加标回收试验,回收率在80.3%~119%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.3%~12%之间.%The sample of aquatic products (5 .00 g)was extracted with 20 mL of a mixture of acetonitrile and formic acid (99+1 ).The extract was dehydrated with absolute ethanol.The extract was then concentrated and 2 mL ofn-hexane was added to remove fat.LC separation was performed by using ACQUITY UPLC BEH HILIC chromatographic column as stationary phase,and mixtures of methanol and 0 .1% (φ)formic acid solution with various ratios as mobile phase in gradient elution.ESI+ and multi-reaction-monitoring were adopted in MS/MS. Internal standard method was used for quantification.Linearity ranges of the 11 drugs were found in the same range of 5-200μg·L-1 ,with lower limits of determination (10S/N)in the range of 0.07-0.20μg·kg-1 .Tests for recovery were made by standard addition method at 3 concentr ation levels of 1.0,4.0,20.0μg·kg-1 ,giving values of recovery and RSD′s (n= 6)in the ranges of 80.3%-119%and 1.3%-12%respectively.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2017(053)005【总页数】5页(P527-531)【关键词】液相色谱-串联质谱法;磺胺类;喹诺酮类;水产品【作者】李婵君;李柱梅;秦喜玲;董素静;王彦超【作者单位】郑州市农产品质量检测流通中心,郑州450006;郑州市农产品质量检测流通中心,郑州450006;郑州市农产品质量检测流通中心,郑州450006;郑州市农产品质量检测流通中心,郑州450006;郑州市农产品质量检测流通中心,郑州450006【正文语种】中文【中图分类】O657.63喹诺酮类和磺胺类药物为常见合成抗菌剂，在畜禽和水产养殖中使用十分普遍，但是由于存在着药物滥用、误用及不遵守休药期规定等现象，造成很多动物源性食品中残存各种药物及药物的代谢物，从而对人的身体健康构成威胁或直接造成损害。

基于多反应监测模式下的超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中19种氟喹诺酮类抗生素残留超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）是一种高灵敏度、高效率的分析技术，已经被广泛应用于食品中抗生素残留的检测。

在动物源性食品中，19种氟喹诺酮类抗生素是常见的残留物质，其可能会对人体健康造成潜在危害。

为了保障消费者的健康和食品安全，建立一种快速、准确、可靠的氟喹诺酮类抗生素残留检测方法十分重要。

本文旨在利用UHPLC-MS/MS技术，结合多反应监测模式，对动物源性食品中的19种氟喹诺酮类抗生素进行残留检测，为食品安全监管提供一种有效的检测手段。

一、检测方法的建立1. 样品的准备对动物源性食品样品进行预处理。

取样品10克，加入适量乙腈和盐酸进行均匀混合，并加热水浴提取。

待样品挥干后，用甲醇-水（70:30, v/v）进行溶解并经过滤，得到待测样品溶液。

2. 质谱条件的选择选择Triple Quadrupole质谱仪，同时进行ESI+和ESI-离子源模式下的质谱扫描，并对多反应监测模式下不同的碎片离子进行筛选和优化。

在UHPLC方面，选择适当的色谱柱和流动相条件，确保各种氟喹诺酮类抗生素在分离和检测过程中得到很好的分辨。

3. 方法的验证在建立好的UHPLC-MS/MS方法下，对标准物质进行检测和分析，并进行方法的验证。

通过测定线性范围、灵敏度、准确性、精密度等指标，验证该方法的可行性和准确性。

二、检测结果与讨论1. 检测方法的灵敏度和特异性经过上述步骤建立的UHPLC-MS/MS方法，对19种氟喹诺酮类抗生素进行了残留检测。

结果表明，该方法的灵敏度高，可以在很低的浓度下对目标物质进行快速、准确的检测。

多反应监测模式的优势被充分发挥，对19种目标物质的检测具有较高的特异性和选择性。

2. 样品检测结果通过对多批次动物源性食品中不同样品的检测分析，发现其中部分样品中存在氟喹诺酮类抗生素残留。

尤其是部分肉类产品和禽蛋产品，残留浓度超过监管标准，存在一定的安全隐患。

分析检测Analysis and Testingdoi:10.16736/41-1434/ts.2020.17.056液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中10种喹诺酮类药物残留Simultaneous Determination of 10 Quinolones Aquatic Products by LiquidChromatography-tandem Mass Spectrometry◎ 湛珺雯1,2，程 泷1,2，吴 玉1,2，李昌松1,2（1.德阳市食品药品安全检验检测中心，四川 德阳 618000；2.德阳市食品检验重点实验室，四川 德阳 618000）Zhan Junwen1,2, Cheng Long1,2, Wu Yu1,2, Li Changsong1,2(1.Deyang Safety Inspection and Testing Center for Food and Drug Control, Deyang 618000, China;2.Deyang Food Inspection Key Laboratory, Deyang 618000, China)摘 要：目的：建立通过高效液相色谱-串联质谱法分析方法测定水产品中10种喹诺酮类药物残留的分析方法。

方法：样品加入1%甲酸-乙腈后，使用漩涡混合和超声波提取，经EclipsePlus C18色谱柱（RRHD 50 mm×2.1 mm, 1.8μm）分离后，采用0.1%甲酸水（A）、甲醇（B）和乙腈（C）作为流动相进行梯度洗脱，质谱（ESI+）采用多反应离子监测模式。

结果：10种喹诺酮类药物在2～100μg·L-1范围内线性关系良好，r＞0.9981，检出限为0.5～1.0μg·kg-1，定量限为1.5～2.5μg·kg-1，不同加标水平的平均回收率为81.2%～112.6%，相对标准偏差为2.8%～8.6%。

基于多反应监测模式下的超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中19种氟喹诺酮类抗生素残留作者：来源：《食品安全导刊》2020年第03期摘要：本文的目的是建立动物源性食品中19种氟喹诺酮类抗生素残留量的检测方法，样品经EDTA-Mcllvaine缓冲液提取、PEP固相萃取柱净化，通过Thermo Fisher Hypersil GoldC18（内径100×2.1mm，粒径1.7μm）进行分离，再用0.2%甲酸水溶液和甲醇乙腈溶液（体积比为40∶60）洗脱体系分离目标化合物，将目标化合物的保留时间、前体离子、子离子碎片及其相对丰度作为定性依据，选择响应稳定性好、信号强的子离子碎片作为定量离子，基质外标法定量。

结果表明，19种氟喹诺酮类药物在2～100ng/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.995；加标回收率在60%～120%，相对标准偏差均关键词：多反应监测氟喹诺酮动物源性食品超高效液相色谱-串联质谱联用氟喹诺酮类抗生素药物的发展历史可以追溯到50多年前[1]。

氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones，FQs）是人工合成抗菌药[2-4]，又称吡啶酸类、沙星类药物，是喹诺酮药物的第三代发展产物，主要包括恩诺沙星（Enrofloxacin）、诺氟沙星（Norfloxacin）、培氟沙星（Pefloxacin）、环丙沙星（Ciprofloxacin）、氧氟沙星（Ofloxacin）、沙拉沙星（Sarafloxacin）、依诺沙星（Enoxacin）、洛美沙星（Lomefloxacin）、吡哌酸（Pipemidic acid）、萘啶酸（Nalidixic acid）、奥索利酸（Oxolinic acid）、氟甲喹（Flumequine）、西诺沙星（Cinoxacin）、单诺沙星（Danofloxacin，又名丹诺沙星、达氟沙星）、马波沙星（Marbofloxacin）、氟罗沙星（Fleroxacin）、奥比沙星（Orbifloxacin）、司帕沙星（Sparfloxacin）、双氟沙星（Difloxacin）等。

集美大学硕士学位论文水产品中多种喹诺酮类药物残留量检测方法的研究姓名：魏博娟申请学位级别：硕士专业：农产品加工及贮藏工程指导教师：吴成业2011-06-12水产品中多种喹诺酮类药物残留量检测方法的研究摘要喹诺酮类（Quinolones）药物是一类人工合成的人畜共用抗生素类药物，对革兰氏阴性菌和阳性菌、支原体、衣原体等有抗菌作用，常被用于水产养殖中的病害防治。

随着人们对食品安全问题的关注，渔药残留问题不仅成为各国相关部门关注的焦点，也是普通民众关心的社会问题。

近年来常用于水产品中药物残留的检测方法主要有：酶联免疫测定法、毛细管电泳法、气相色谱法、高效液相色谱法和联用技术。

其中，高效液相色谱法和液质联用技术是目前应用较多的方法，但是大部分方法仅限于测定一种或少数几种喹诺酮类药物。

本论文旨在建立水产品中同时检测多种喹诺酮类药物的高效液相色谱法和高效液相色谱-串联质谱法。

主要进行以下4方面研究：1）研究建立同时检测水产品中6种喹诺酮类药物残留量的高效液相色谱法。

根据高效液相色谱的特点，比较了不同的液相色谱柱对该类药物的分离效果，考察了对分析效果有重要影响的流动相组成及配比、pH、流速、柱温、最适发射和激发波长等液相色谱条件；对前处理过程中样品的提取、净化步骤进行了对比优化；通过对方法的检测限和加标回收率的验证，考察方法的稳定性、准确度和适用范围。

经反复实验探索，最终确定了以酸化乙腈溶液提取样品中残留的恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、噁喹酸和氟甲喹，正己烷脱脂，Varian Bond Elut C18固相萃取小柱净化，经Zorbax Elipse XDB- C18（150 mm×4.6 mm，5 µm）柱分离，用高效液相色谱荧光检测法测定，外标法定量。

实验结果显示，标准品线性关系良好，测得各种药物加标回收率均在75.0%以上，环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星和氧氟沙星检测限为5 µg/kg，噁喹酸和氟甲喹检测限为10 µg/kg，相对标准偏差均在10.00%以内。

收稿日期:2009 07 23 修回日期:2009 12 30基金项目:国家863计划(No.2008A A 100805);农业部行业专项(N yhy zx 07 046);基本科研业务费(2007 gy 02)*通讯作者:冷凯良,男,副研究员,主要从事水产品质量检验研究.第26卷第4期V ol.26 N o.4分析科学学报JO U RN AL O F A N AL Y T ICA L SCIEN CE 2010年8月A ug.2010文章编号:1006 6144(2010)04 0409 06高效液相色谱 串联质谱内标法同时测定水产品中15种喹酮类药物残留量王志杰,冷凯良*,孙伟红,宁劲松,翟毓秀,谭志军,郭萌萌(中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛266071)摘 要:建立了水产品中15种喹诺酮类药物(QNs)残留量的高效液相色谱 串联质谱(H PLC M S/M S)测定方法。

以氘代试剂为内标,样品经酸性乙腈萃取后,用正己烷脱脂,旋转蒸发浓缩,采用H PLC M S/M S 选择反应监测(SRM )正离子模式测定,内标法定量。

可同时对水产品中的15种QNs 进行定性和定量测定。

15种QNs 的检出限(S/N=3)为1.0 g/kg,定量限(S/N=10)为2.0 g /kg;在10.0~200.0ng/m L 时峰强度与质量浓度的线性关系良好(r >0.99)。

方法的平均回收率范围为66%~121%。

该法简便快捷,分析成本低,在一定程度上实现了药物残留的快速检测。

关键词:高效液相色谱 串联质谱;内标法;水产品;喹诺酮类药物;多残留同时测定中图分类号:O657.63 文献标识码:A喹诺酮类抗菌药(Quino lones,QNs)是指人工合成的一类抗菌药物。

自上世纪80年代起,在水产养殖业上有非常广泛的应用,然而过量使用这些抗菌剂会导致水产品中有药物残留,影响人类的健康。

研究表明,QNs 会对中枢神经系统造成不良反应,可致重症肌无力症状加重、呼吸肌无力而危及生命,且有潜在的致癌性和遗传毒性。

QuEChERS－超高效液相色谱－串联质谱法测定蜂蜜中１９种喹诺酮类抗生素倪杨 杨军军 石磊 张莹莹 熊融（北京市农林科学院林业果树研究所，北京市落叶果树工程技术研究中心，农业农村部果品及苗木质量监督检验测试中心（北京），北京 100093）摘要：建立超高效液相色谱-串联质谱法（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS）同时测定蜂蜜中19种喹诺酮类药物含量的分析方法。

实验对样品前处理过程及色谱质谱仪器条件进行优化。

蜂蜜样品与超纯水1∶1混合后涡旋振荡溶解，经乙腈溶液超声提取，再加入氯化钠盐析分层，离心后上清液采用C18吸附剂进行净化处理，以ACQUITY BEH C18色谱柱分离。

在电喷雾离子（electrospray ionization, ESI）源正离子扫描模式下，采用多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式进行检测，外标法进行定量。

结果表明，19种喹诺酮类药物在3 min内完成色谱分离分析，在0.2~50 μg/L质量浓度范围内呈现良好线性关系，相关系数（R2）均大于0.995，检出限（limit of detection, LOD）为0.25~0.50 μg/kg，定量限（limit of quantification, LOQ）为0.80~1.50 μg/kg。

在低、中、高3个添加浓度水平下，蜂蜜中19种喹诺酮类药物的加标回收率为78.9%~96.5%，相对标准偏差（relative standard deviations, RSDs）为1.8%~4.9%（n=6）。

该方法稳定、准确、灵敏、快速，适用于蜂蜜中喹诺酮类抗生素的快速检测和分析确证。

关键词：QuEChERS；超高效液相色谱-串联质谱；喹诺酮类抗生素；蜂蜜Simultaneous determination of 19 quinolone antibiotics in honey byQuEChERS-UPLC-MS/MSNi Y ang, Y ang Junjun, Shi Lei, Zhang Yingying, Xiong Rong(Institute of Forestry and Pomology, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing Engineering Research Center for Deciduous Fruit Trees, Inspection and Testing Laboratory of Fruits and Nursery Stocks (Beijing) Ministry ofAgriculture and Rural Affairs, Beijing 100093, China)Abstract: To establish a method for simultaneous determination of 19 quinolone antibiotics in honey by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) combined with QuEChERS extraction. The pretreatment process and instrument conditions were optimized. Samples were mixed with ultrapure water at a ratio of 1:1, ultrasonic extracted with acetonitrile solution and salted out by adding NaCl. After centrifugation, the supernatant was cleaned up by C18 sorbent and separated on an ACQUITY BEH C18 column. In the electrospray ionization (ESI) positive ion scanning mode, the samples were analyzed by multiple reaction monitoring (MRM) and quantifi ed by external standard method. Result showed that all the 19 quinolone antibiotics were well separated in 3 min and the calibration curves in the range of 0.2-50 μg/L for all compounds were linear with correlation coeffi cients(R2)were more than 0.995. The limits of detection (LODs) and limits of quantifi cation (LOQs) in honey were 0.25-0.50 μg/kg and 0.80-1.50 μg/kg, respectively. The average recoveries of 19 quinolone antibiotics in different matrices at low, medium and high spiked levels were ranged from 78.9%-96.5%, with relative standard deviations (RSDs) in the range of 1.8%-4.9% (n=6). The method is proved to be stable, accurate, sensitive and rapid, and can meet requirements for the rapid and accurate determination of quinolone antibiotics in honey sample.Key words: QuEChERS; UPLC-MS/MS; quinolone antibiotics; honey基金项目：北京市科技计划项目（Z201100008920007），北京市农林科学院科技创新能力建设专项（KJCX20200302）作者简介：倪杨（1985-），女，博士，高级农艺师，研究方向农产品质量安全，E-mail:***************通信作者：熊融（1977-），女，硕士，高级工程师，研究方向植物资源评价与检测技术研究，E-mail:**********************中国蜂业APICULTURE OF CHINA和除杂富集效果有待提高，因其操作复杂、过柱时间长且成本较高，不适合大批量快速检测。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留摘要：在养殖过程中，滥用抗生素、大量使用合成等药物的现象越来越严重，兽药具有致癌、至畸、至突变等不良效用，危害人类健康。

近年来由于滥用兽药引起的食品安全问题频发已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。

一些化学合成药物在畜牧水产养殖业中使用较多，随便使用这些药物是很容易使水产品受到污染的。

在这种情况下，人们吃了这种受到污染的肉类食物，就会使得这些毒素在人体内积累，会使人体产生一定的抗药性。

随着兽药在我国实际生产中的广泛应用，人们对其危害有了更多的认识，这些肉类食品中所残留的兽药也是目前食品安全中所关注的重要内容。

因此，对畜牧水产养殖业的相关产品进行严格的检测，能够保证肉类食品的质量。

本文建立了高效液相色谱-串联质谱HPLC-MS/MS同时测定水产品中喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、磺胺增效剂、林可胺类、硝基咪唑类、类和多肽类8类共38种限用兽药残留的检测方法。

关键词：高效液相色谱；串联质谱；兽药残留本试验同时测定鳗鱼、鳙鱼和小龙虾中的类药物残留，在检测的过程中，检测的药物种类虽多，但前处理方法简单并不需要特殊的实验装置来辅助实验，检测周期短且成本低，从而为水产品的大量检测，提供了更加简便的方法。

一、实验部分1.1实验所用的仪器和试剂实验仪器：质谱仪、高效液相色谱仪、Waters C3色谱柱、IKAT25数显型高速分散机、低温高速离心机和氮吹浓缩仪。

实验试剂：甲醇、正已烷、甲酸、冰乙酸、无水硫酸钠，以上试剂均为分析纯，乙腈、甲酸为色谱纯。

1.2样品前处理样品的提取及净化：称5.00g样品置于50mL聚丙烯离心管中，加入约5g无水硫酸钠及15mL1%的乙酸乙腈溶液，用高速分散机进行提取，离心（5000r/min，5min），收集上清液。

沉淀再用20mL1%的乙酸乙腈溶液按照上述步骤重复提取一次，离心，合并上清液，用提取液将其定容到25mL，混合均匀，将其放到-80℃的冷冻机中冷冻1小时。

高效液相色谱 串联质谱测定水产品中残留的喹乙醇代谢物赵东豪,黎智广,杨金兰,黄 珂,陈培基,林 钦*(中国水产科学研究院南海水产研究所,广州510300)摘 要:建立了高效液相色谱 质谱(LC M S/M S)检测水产品中喹乙醇代谢物3 甲基 喹恶啉 2 羧酸(MQCA)的残留分析方法。

样品先用Pr o tease蛋白酶酶解,然后用乙酸乙酯萃取目标物,氮气吹干后用流动相溶解残渣,以甲醇、乙腈和0 1%甲酸溶液作为流动相,液相色谱串联电喷雾质谱在正离子模式下测定。

MQCA在1~100 g/kg范围内线性关系良好(r>0 999)。

在2、4、8 g/kg3个添加水平上,回收率在82 5%~87 5%,相对标准偏差为4 5%~5 1%(n=6),定量限为1 g/kg。

方法已用于水产品中喹乙醇代谢物的残留分析。

关键词:高效液相色谱 串联质谱;喹乙醇代谢物;3 甲基 喹恶啉 2 羧酸;残留;水产品中图分类号:O657 63 文献标识码:A 文章编号:1000 0720(2010)09 019 04喹乙醇(o laqu i n dox)又名奥喹多司,是一种合成的喹恶啉类药物,在动物生产上常作为抗菌促生长剂使用,能提高饲料转化率[1]。

其在动物体内吸收迅速,生物利用度高,原药排除速度快,但代谢产物3 甲基 喹恶啉 2 羧酸(MQCA)在组织内残留时间比较长[2],被人食用后具有潜在的危害性。

农业部规定了喹乙醇在猪肉和肝脏的最高残留限量[3],标志残留物即为MQC A,但其它畜禽类及水产品暂时没有明确的规定。

研究MQCA 的检测方法,可以有效地监控喹乙醇在动物生产中的应用,对保障食品安全具有重要意义。

当前检测喹乙醇的方法主要有酶联免疫法[4]、高效液相色谱法[5-9]、液相色谱串联质谱法等[10,11],但直接检测喹乙醇标志残留物MQCA 的方法比较少,难以对喹乙醇在动物生产方面的使用做到比较全面的监控。

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中残留的19种喹诺酮类药物丁涛;沈东旭;徐锦忠;吴斌;陈惠兰;沈崇钰;沈伟健;赵增运;练鸿振【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2009(27)1【摘要】建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱联用测定蜂蜜中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、双氟沙星、恶喹酸、氟甲喹、沙拉沙星、司帕沙星、丹诺沙星、氟罗沙星、马波沙星、伊诺沙星、奥比沙星、吡哌酸、培氟沙星、洛美沙星、西诺沙星和萘啶酸等19种喹诺酮类药物残留的方法.比较酸性溶液阳离子固相萃取(PCX柱)、近中性缓冲溶液反相固相萃取(HLB柱)和碱性溶液阴离子固相萃取(PAX柱)3种不同提取净化方法的提取效果,最终选择使用碱性溶液溶解蜂蜜样品,强阴离子固相萃取柱一步富集净化.以甲醇和0.1%甲酸溶液作为流动相,C18作为分析色谱柱,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,选择离子反应监测模式检测19种喹诺酮类药物,内标方法定量.在1～100μg/L范围内,19种喹诺酮类药物的线性相关系数均大于0.991.通过实际样品的添加回收试验,方法的定量限(S/N=10)为1.0 μg/kg,3个添加水平的回收率为71%～118%,相对标准偏差为4.2%～6.7%.【总页数】5页(P34-38)【作者】丁涛;沈东旭;徐锦忠;吴斌;陈惠兰;沈崇钰;沈伟健;赵增运;练鸿振【作者单位】江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;南京大学生命分析化学教育部重点实验室,江苏,南京,210008;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏,南京,210001;南京大学生命分析化学教育部重点实验室,江苏,南京,210008【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.蜂蜜中14种喹诺酮类药物残留的高效液相色谱-串联质谱测定 [J], 曹彦忠;张艳梅;庞国芳;张进杰;石玉秋;李学民;范春林;刘永明;贾光群;刘晓茂2.高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中10种喹诺酮类药物残留 [J], 刘亿婕;高海荣;张聪;游菁菁;王秀云;陈亮;程琳3.超高效液相色谱-串联质谱法测定沙拉酱中16种喹诺酮类药物残留 [J], 黄思聪;杨建涛;黄象金4.超高效液相色谱-串联质谱法测定沙拉酱中16种喹诺酮类药物残留 [J], 黄思聪;杨建涛;黄象金5.分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中17种喹诺酮类药物残留[J], 盛华栋;张水峰;崔海容;叶明立因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水质喹诺酮类抗生素的测定液相色谱—串联质谱法1范围本文件规定了液相色谱-串联质谱对水中13种喹诺酮类抗生素进行测定的方法。

本文件适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中依诺沙星、麻保沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、氟罗沙星、丹诺沙星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氟甲喹等13种喹诺酮类抗生素的测定。

若通过验证，本文件也可适用于其他喹诺酮类抗生素。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

HJ91.1污水监测技术规范HJ91.2地表水环境质量监测技术规范HJ164地下水环境监测技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理水中的喹诺酮类抗生素经固相萃取柱富集，用液相色谱-串联质谱分离检测。

根据保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。

5干扰与消除金属离子与目标化合物能形成络合物，使固相萃取效率降低，可向水样中加入乙二胺四乙酸二钠抑制络合物的形成。

6试剂和材料警告：本方法所使用的有机溶剂对人体健康有害，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱内进行，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服。

6.1除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的超纯水。

6.2氢氧化钠（NaOH）：分析纯。

6.3盐酸（HCl）：1mol/L，分析纯。

16.4甲醇（CH3OH）：农残级或等同规格。

6.5甲酸（HCOOH）：色谱纯。

6.6乙腈（CH3CN）：农残级或等同规格。

6.7甲酸溶液（0.05%）：取50μl甲酸（6.5）溶于100ml实验用水中。

6.8甲酸/乙腈溶液：取90ml甲酸溶液（6.7）和10ml乙腈（6.6）混合，摇匀。

6.9乙二胺四乙酸二钠（Na2EDTA）：分析纯。

6.10标准贮备液：ρ=1.00g/L可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质配制，标准物质纯度大于99.0%。

超高效液相色谱-串联质谱法测定动物组织中19种兽药残留量蒋施;赵颖;金雁;徐宜宏;刘瑜;钟钰【摘要】提出了应用超高效液相色谱-串联质谱法测定动物组织中13种磺胺和6种喹诺酮类兽药残留量的方法.采用乙腈萃取动物组织中兽药成分,经Waters BEH C18色谱柱分离,外标法定量,多反应监测模式采集质谱数据.19种兽药的检出限(3S/N)均为0.5 μg·kg-1.在0.01,0.05,0.20 mg·kg-13个添加水平下,19种兽药的回收率为72.0%～105.1%,相对标准偏差(n=5)为1.02%～9.13%.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)011【总页数】4页(P1319-1322)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱法;磺胺;喹诺酮;动物组织【作者】蒋施;赵颖;金雁;徐宜宏;刘瑜;钟钰【作者单位】沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016;沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016;沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016;沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016;沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016;沈阳出入境检验检疫局综合技术中心,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】O657.63鉴于兽药残留对人体健康及环境的危害性,各国政府管理部门不断修改最高兽药残留限量,要求越趋严格,从而对此类兽药残留分析提出更高的技术要求。

近年来磺胺类和喹诺酮类药物残留的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)[12]、液相色谱质谱法(LCMS)[3]、薄层色谱法(TLC)[4]、气相色谱法(GC)[5]、气相色谱质谱联用法(GCMS)[6]、毛细管电泳法(CE)[7]等。

与以上各种检测方法相比,液相色谱与串联质谱联用可在一级质谱条件下获得很强的待测组分的准分子离子峰,并可对准分子离子进一步裂解,获得子离子峰,进而排除基体干扰,准确辨别目标化合物,具有灵敏度高、进样量少、基体干扰小等显著优点。

80上海市食品药品检验所，上海　201203………………陈　静　郑　荣#　毛北萍　孟　茜　王　柯高效液相色谱-质谱联用法同时测定化妆品中19种喹诺酮类抗生素首次建立高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱测定化妆品中19种喹诺酮类抗生素的含量分析方法。

将不同形态的化妆品样品加入内标后经溶剂超声提取，提取液经高速离心处理，上清液以正己烷脱脂，经0.22 μm 微孔滤膜过滤后取续滤液，色谱柱为Agilent SB-C18 （2.1 mm ×100 mm ×1.7 μm ），流动相为质量分数0.1%甲酸水溶液- （体积比85/15）甲醇/乙腈系统梯度洗脱，流速为0.2 mL/min ，柱温为30 ℃，进样量为2 μL ，经高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱测定，内标法定量。

19种喹诺酮类抗生素在1 ~ 1 000 ng/mL 的质量浓度范围内呈良好线性关系 （相关系数均大于0.995）；回收率为85% ~ 115%，相对标准偏差为1.9% ~ 8.9%。

各化合物最低检出质量比均为1 μg/kg 。

该方法灵敏度高，重复性好，可用于化妆品中多种喹诺酮类抗生素的检测。

化妆品　高效液相色谱-串联质谱法　喹诺酮类抗生素Determination of Nineteen Quinolone Antibiotics in Cosmetics by LC-MS/MS CHEN Jing ZHENG Rong #　MAO Beiping MENG Qian W ANG Ke (Shanghai Institute of Food and Drug Control, Shanghai 201203, China)Abstract ： For the first time, an LC-MS/MS method has been developed for the simultaneous determination of nineteen quinolone antibiotics in cosmetics. Different forms of cosmetic samples with internal standard added were prepared by ultrasonic extraction, the extraction solution was obtained by high-speed centrifugation, the supernatant was degreased by hexane, then filtered by 0.22 μm millipore filter, and the continued filtrate was taken for analysis. A Waters reversed phase column, Agilent SB-C18 (2.1 mm ×100 mm ×1.7 μm) was used with methanol/acetonitrile (volume ratio 85/15)-0.1% (mass fraction) aqueous formic acid as the mobile phase under the condition of gradient elution. When the flow rate was 0.2 mL/min, column temperature was 30 ℃, the injection volume was 2 μL, the samples were determined by high performance liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry, and quantified by internal standard method. The recoveries were 85%-115% with the relative standard deviations of 1.9%-8.9%. All quinolones showed good linearity within the concentration range of 1-1 000 ng/mL, the correlation coefficients were greater than 0.995, the detection limits were 1 μg/kg. The method has advantages of high sensitivity and good reproducibility, which can be used to detect a variety of quinolone antibiotics in cosmetics. Keywords ：cosmetics LC-MS/MS quinolone antibiotic收稿日期：2019-10-10；修回日期：2019-11-28作者简介陈静 （1981—），女，检验员，主要从事食品﹑化妆品检验工作。

2009年1月January 2009色谱Chi n ese Journal of Chro m atographyVo.l 27N o .134~38*通讯联系人:丁 涛,工程师.Te:l (025)52345193,E m a i:l di ngt @jsc i q .gov .cn .基金项目:生命分析化学教育部重点实验室开放课题(No .KLACLS 07010).收稿日期:2008 07 24高效液相色谱 串联质谱法测定蜂蜜中残留的19种喹诺酮类药物丁 涛1*, 沈东旭2, 徐锦忠1, 吴 斌1, 陈惠兰1, 沈崇钰1,沈伟健1, 赵增运1, 练鸿振2(1.江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏南京210001;2.南京大学生命分析化学教育部重点实验室,江苏南京210008)摘要:建立了高效液相色谱 电喷雾串联质谱联用测定蜂蜜中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、双氟沙星、恶喹酸、氟甲喹、沙拉沙星、司帕沙星、丹诺沙星、氟罗沙星、马波沙星、伊诺沙星、奥比沙星、吡哌酸、培氟沙星、洛美沙星、西诺沙星和萘啶酸等19种喹诺酮类药物残留的方法。

比较酸性溶液阳离子固相萃取(PCX 柱)、近中性缓冲溶液反相固相萃取(HLB 柱)和碱性溶液阴离子固相萃取(PAX 柱)3种不同提取净化方法的提取效果,最终选择使用碱性溶液溶解蜂蜜样品,强阴离子固相萃取柱一步富集净化。

以甲醇和0 1%甲酸溶液作为流动相,C 18作为分析色谱柱,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,选择离子反应监测模式检测19种喹诺酮类药物,内标方法定量。

在1~100 g/L 范围内,19种喹诺酮类药物的线性相关系数均大于0 991。

通过实际样品的添加回收试验,方法的定量限(S /N =10)为1 0 g /kg ,3个添加水平的回收率为71%~118%,相对标准偏差为4 2%~6 7%。

关键词:高效液相色谱 串联质谱;喹诺酮类药物;蜂蜜中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:1000 8713(2009)01 0034 05 栏目类别:研究论文S imu lt aneous deter m ination of 19quinolone residues i n honeyusi ng h igh perfor mance liqu id chro matographytande m mass spectro m etryD I N G T ao 1*,SHEN D ongxu 2,XU Ji n zhong 1,WU B i n 1,CHEN H uilan 1,S HEN Chongyu 1,SHEN W e ijian 1,ZHAO Zengyun 1,LI AN H ongzhen2(1.An i m a l,P l an t an d F ood In spection C e n ter (APF IC )o f J ian gsu En try Ex it In spection and Q ua ran tin eBu r eau,N an jin g 210001,Chin a;2.K ey L abor a tor y of An a l y tica l Ch e m istry for L ife S cien ceEdu ca tion M in istr y o f Ch i n a,Nan ji n g Un iv er sity,Nan ji n g 210008,China )A bstracts :A m ethod f or t he si m ultaneous analys is of 19quinolone residues ,enrofloxaci n ,ci p rofl o xacin ,norfloxacin ,ofl o xacin ,difloxaci n ,oxoli n ic acid ,fl u m equi n e ,sarafloxaci n ,spar floxaci n ,danofloxaci n ,fl e roxacin ,m arbofloxaci n ,enofloxaci n ,orbifloxacin ,pipem idic acid ,pefloxacin ,lo m efl o xaci n ,cinofl o xacin ,and nali d ixic acid in honey was developed by high per f or m ance li q uid chro m at ography tandem m ass spectro m etry (HPLC M S/M S).I n co m parison of the three different extraction m et hods ,.i e .acid solution coupled w ith cation exchange solid phase extraction cartridge (PCX ),neutra l buffer sol u ti o n coupled w ith a reversed phase ex tracti o n cartridge (HLB)and alkali sol u ti o n coupled w it h a strong anion exchange solid phase extracti o n cartridge (PAX),the third m ethod w as finall y used .The cartridge was then applied to accu m ulate and purif y the target analyt es from t he sa m ple m atrices in one step .The HPLC separati o n w as perf or m ed on a C 18col u m n w it h a li n ear gradi e nt elution program of m ethanol and 0 1%for m ic acid solution as the m obile phase .Se l e ctive reaction m onitori n g (SRM )was used for t he selecti v e detection of 19qui n olones .The li n earit y of a ll the 19quinolones i n the range fro m 1 g /L to 100 g /L had correlati o n coefficient greater than 0 991.In the detecti o n of spi k ed sam pl e s ,t he detection li m it of the m ethod w as 1.0 g /kg f or all the 19qui n ol o nes ,第1期丁 涛,等:高效液相色谱 串联质谱法测定蜂蜜中残留的19种喹诺酮类药物and t he recoveri e s were71%-118%w it h t he relative standard deviations of4 2%-6 7%.Internal standard cali b rati o n was used for t he quantitati v e anal y sis.K ey w ords:hi g h perfor m ance li q uid chro m at ography tandem m ass spectrom etry(HPLC M S/ M S);quinolone drugs;honey喹诺酮类药物是在喹诺酮母核的基础上进行人工全合成的一类广谱抗菌药,被广泛用于人和动物疾病的治疗[1]。