第五章 病毒
一、 病毒的一般特性 二、 噬菌体
一、 病毒的一般特性
1、病毒的概念:
病毒:是一类超显微的非细胞生物,每一种病毒 只含有一种核酸;它们只能在活细胞内营专性寄 生;在离体条件下,它们以无生命的化学大分子 状态存在. 病毒粒子:完整的、具有感染性的病毒颗粒。
2、病毒的基本特点
▪个体极小(以nm计),能通过滤菌器,形态多 样,有球状、杆状、复合型。 ▪无细胞结构,主要由蛋白质、核酸构成,一个 病毒体内仅含一种核酸,核酸以单链或双链形式 存在。 ▪生活方式为专性活细胞内寄生,病毒酶系不全, 离开活体后无生命特征。 ▪病毒以复制的方式增殖,包括核酸复制、核酸蛋 白质装配,是在分子水平上进行的。 ▪对抗生素不敏感,对干扰素敏感。
噬菌斑
噬菌斑(plaque)
噬斑
荧光假单胞菌
以培养时间为横坐标,以 噬菌斑数为纵坐标,绘 制成的曲线为一步生 长曲线。
可分以下阶段:
潜伏期
裂解期
稳定期
一步生长曲线
潜伏期:从噬菌体吸附细菌到细菌细胞释放 新的噬菌体之前的这段时期.曲线平行于横 轴,噬菌体数无变化.样品中无游离的噬菌 体。(潜伏期前的噬菌斑数是噬菌体数,也 就是感染噬菌体的细菌数).
1. 实验设计依据:1个菌体被1个噬菌体感染,避免二 次吸附;细菌群体被噬菌体同步感染。
2. 实验过程: 敏感菌10ml
Phage 1ml
混匀,5min,使之吸附
离心或用抗phage血清处理, 去除过量phage
高倍稀释,吸附phage的菌悬液(避免多次吸附)
37℃培养,定时取样
取样人为裂解处理(每5min) 样品中加入氯仿裂解细胞
此时为潜伏期,在细胞内还观察不到噬菌体粒子