一、无菌的概念（复习）
根据控制作用的效果分类
灭菌（sterilization）: 凡是能够杀死或消除材料或物体上全部微生物的方法；
消毒(disinfection): 能够杀死、消除或降低材料或物体上的病原微生物，使之不致引起疾病的方法；
防腐(antisepsis): 能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。
二、灭菌的方法(复习) 根据控制作用原理、方式和方法分类
物理控制方
化学控制方法两大类
一，物理控制方法
(一) 高温灭菌
1、干热灭菌法
干热灭菌：1500C～1700C下处理1-2小时。
适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。
优点：可保持物品的干燥
火焰灭菌（灼烧灭菌）：常用于金属性接种工具、
污染物品及实验材料等废弃物的处理
火焰灭菌（灼烧灭菌）：常用于金属性接种工具、污染物品及实验材料等废弃物的处理
湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌在相同温度下，湿热的效力比干热灭菌好
2、湿热灭菌
煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、巴氏消毒、实罐灭菌煮沸消毒：水，1000C处理15min以上。
高压蒸汽灭菌(autoclave): 应用最广泛的灭菌方法。将待灭菌的微生物放置在有少量水的加压蒸汽灭菌锅内。将锅内的水加热煮沸，并将其中的空气彻底驱尽后将锅封闭。再持续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而使温度达1000C以上。为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到1210C（压力为1kg/cm2或15磅/平方英寸）, 时间维持15～20分钟，也可采取较低温度（1150C,压力为0.7kg/cm2或10磅/平方英寸）维持35分钟的方法。使用于一切微生物学实验，医疗结构或发酵工厂中对培养基等多种器材、物料的灭菌。
该法不是利用高压来杀死微生物，而是利用提高压力使水的
沸点升高，以提高水蒸汽的温度，更加有效地杀灭微生物。
间隙灭菌法：用流通蒸汽反复多次处理的灭菌法。
巴氏消毒法(pasteurization): 低温消毒法，一般在
630C ,30min或 720C ,15min。用于牛奶，啤酒，果酒，酱油等不能进行高温灭菌的液体可杀死其中的病原菌如结核杆菌、伤寒杆菌等，同时又不损害营养与风味。
。实罐灭菌
是指将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后维持一定时间，再冷却到接种温度，也叫间歇灭菌、分批灭菌。
实罐灭菌无需专门的灭菌设备，灭菌效果可靠，对灭菌用蒸汽要求低（0.2~0.3MPa）。但同时，实罐灭菌温度低、时间长而对培养基成份破坏较大，在工业生产中难以实现自动控制。实罐（二）低温抑菌1．冷藏法
2．冷冻法
(三)干燥和高渗抑菌
干燥或调节溶液渗透压都是通过降低微生物可利用水的数量或活度而抑制微生物的生长。
1.干燥
干燥是使物品或培养物脱水的方法。干燥并不一定杀死微生物，但因使细胞造成代谢停止而抑制微生物生长，有时也可引起某些微生物细胞的死亡。
2.渗透压
增加渗透压是另一种通过限制微生物可利用水而控制其生长的方法。高渗环境中，水从细胞中流出，使细胞脱水。像盐腌制咸肉或咸鱼，糖浸果脯或蜜饯等均是这一方法在食品保存中的应用。
（四）辐射杀菌
有四种类型的辐射作用: 紫外光、电离辐射、某种条件下的强可见光、微波等，可用作控制微生物的生长和保存食品。
(五)过滤除菌，控制液体中微生物的群体可以通过将微生物从液体中移走而不是杀死的方法来实现。
二、化学控制方法
化学控制方法主要是指利用各种化学药剂控制微生物生长的方法。
抗微生物的化学试剂
物理状态不同：
液态的、气态的和固态的
杀菌效果和对人体或动物体影响不同：
消毒剂、防腐剂、化学治疗剂
（一）消毒剂和防腐剂
消毒剂是指那些可抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂。主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和周围环境中的微生物。
防腐剂是指那些可以抑制微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学试剂。可用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料、药品的防腐作用
(二)化学治疗剂
化学治疗剂是指那些能够特异性地作用于某些微生物并具有选择性的化学药剂，它们与非特异性的化学药剂相比对人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微生物引起的疾病。
1、抗代谢药物
是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似，并可干扰正常代谢活动的化学物质。
最常用的是磺胺类药物
2、抗生素
定义：抗生素是一类由微生物或其它生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或干扰它种生物（包括病原菌、病毒、癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。
三、灭菌在工业生产中的应用
（一）培养基的灭菌
（二）发酵设备及管道和附属设备的灭菌
（三）空气除菌
无菌操作室及无菌操作技术
（一）无菌操作室的设计要求
1.标准接种室设计要求：
（1）接种室6~8平方米，缓冲间2~3平方米，高度2~2.2米
（2）使用推拉门，室内结构要有利于清洁和消毒处理
（3）接种室和缓冲间要安装紫外灯及日光灯各一盏
二）无菌操作室（或接种箱）的消毒（1）薰蒸法（2）照射法（3）喷雾法
四、微生物的转接种技术
接种和分离工具（1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
